PLoS ONE: Generation og Karakterisering af cisplatin-Resistant ikke-småcellet lungekræft cellelinier Visning en Stem-Ligesom Underskrift

Abstrakt

Introduktion

Iboende og erhvervet cisplatin modstand mindsker effektiviteten af ​​dette middel i forvaltning af ikke-småcellet lungekræft (NSCLC). Forståelse af de molekylære mekanismer bag denne proces kan resultere i udvikling af nye midler til forøgelse af følsomheden af ​​cisplatin.

Metoder

En isogene model af cisplatin resistens blev genereret i et panel af NSCLC cellelinier (A549, SKMES-1, MOR, H460). Over en periode på tolv måneder, blev cisplatin resistente (CisR) cellelinjer afledt fra originale, aldersmatchede forælder celler (PT) og efterfølgende karakteriseret. Proliferation (MTT) og klonogene overlevelse assays (krystal violet) blev gennemført mellem PT og CisR celler. Cellulære respons på cisplatin-induceret apoptose og cellecyklusfordeling blev undersøgt ved FACS-analyse. Et panel af cancer stamceller og pluripotente markører blev undersøgt ud over de EMT proteiner, c-Met og β-catenin. Cisplatin-DNA adduktdannelse, DNA beskadigelse (γH2AX) og cellulær platin optagelse (ICP-MS) blev også vurderet.

Resultater Salg

Karakterisering undersøgelser viste en nedsat proliferativ kapacitet af lunge tumorceller som reaktion for cisplatin, øget resistens over for cisplatin-induceret celledød, akkumulering af resistente celler i G0 /G1-fasen af ​​cellecyklussen og forbedret klonogene overlevelse evne. Desuden resistente celler udviste en formodet stilk-lignende signatur med forøget ekspression af CD133 + /CD44 + celler og forøget ALDH aktivitet i forhold til deres tilsvarende parentale celler. De stamcelle markører, NANOG, okt-4 og SOX-2, var signifikant opreguleret som var de EMT markører, c-Met og β-catenin. Mens resistente underlinjer demonstreret nedsat optagelse af cisplatin i respons på behandling, reducerede cisplatin-GpG DNA adduktdannelse og faldt betydeligt blev observeret γH2AX foci i forhold til forældrenes cellelinjer.

Konklusion

Vores resultater identificeret cisplatin resistente subpopulationer af NSCLC celler med en formodet stilk-lignende signatur, der giver en yderligere forståelse af de cellulære begivenheder forbundet med cisplatin modstand fænotype i lungekræft

Henvisning:. Barr MP, Gray SG, Hoffmann AC, Hilger RA , Thomale J, O’Flaherty JD, et al. (2013) Generation og Karakterisering af cisplatin-Resistant ikke-småcellet lungekræft cellelinier Visning en Stem-Ligesom signatur. PLoS ONE 8 (1): e54193. doi: 10,1371 /journal.pone.0054193

Redaktør: Pan-Chyr Yang, National Taiwan University Hospital, Taiwan

Modtaget: Februar 7, 2012; Accepteret: December 10, 2012; Udgivet: januar 17, 2013