PLoS ONE: Serum karendotelvækstfaktor (VEGF-C) som en diagnostisk og prognostiske Marker i patienter med kræft i æggestokkene

Abstrakte

VEGF-C betragtes som en af ​​de mest effektive faktorer i reguleringen lymfangiogenese. Formålet med denne undersøgelse var at bedre forstå den rolle VEGF-C i progressionen af ​​ovariecancer og at vurdere dets diagnostisk og prognostisk betydning. I alt 109 patienter med ovariecancer, 76 patienter med benigne æggestokkene sygdomme og 50 raske kontroller blev rekrutteret i denne undersøgelse. Serumniveauer af VEGF-C blev bestemt ved ELISA-metoden. Resultaterne viste, at serumniveauer af VEGF-C var signifikant højere hos patienter med ovariecancer end dem med godartede ovarie sygdomme og raske kontroller (

P

0,01). Serumniveau af VEGF-C var korreleret med FIGO stadium lymfeknudemetastase, tumor resectability, og overlevelse af patienterne (

P

0,05). De områder af Receiver Operating kurver af VEGF-C var højere end CA125 i forskellige screening grupper. Analyse under anvendelse af Kaplan-Meier-metoden viste, at patienter med højt VEGF-C havde betydeligt kortere samlet overlevelsestid end dem med lav VEGF-C (

P

0,0001). I en multivariat analyse sammen med kliniske prognostiske parametre, blev serum VEGF-C identificeret som en selvstændig negativ prognostisk variabel for samlet overlevelse. Disse resultater viste, at serum VEGF-C kan være en klinisk anvendelig indikator for diagnostisk og prognostisk evaluering i æggestokkene kræftpatienter

Henvisning:. Cheng D, Liang B, Li Y (2013) Serum Vaskulær endotel vækstfaktor (VEGF C) som en diagnostisk og prognostiske Marker i patienter med kræft i æggestokkene. PLoS ONE 8 (2): e55309. doi: 10,1371 /journal.pone.0055309

Redaktør: Goli Samimi, Kinghorn Cancer Center, Garvan Institute of Medical Research, Australien

Modtaget: 15 oktober, 2012; Accepteret: December 20, 2012; Publiceret: 1 februar 2013

Copyright: © 2013 Cheng et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af en bevilling fra Liaoning Nature Science Fund (201.102.257). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Ovariekarcinom er en af ​​de mest almindelige kræftformer hos kvinder og den hyppigste årsag til død alle gynækologiske tumorer. På trods af nylige fremskridt, har prognosen for en kvinde diagnosticeret med fremskreden fase æggestokkræft ændret sig lidt i løbet af de sidste tredive år med en overlevelse på kun 30% på fem år [1], [2]. Den relativt asymptomatisk natur tidligt ovariecancer, den hurtige progression af kemoresistent sygdom, og den høje sats for fornyet har tjent æggestokkræft ry for at være en “lydløs dræber” [3]. Tumor invasion og metastase er de kritiske trin i fastlæggelsen af ​​aggressive fænotype af menneskelige kræftformer og de vigtigste årsager til kræftdødsfald. Selvom kræft i æggestokkene kan spredes på mange forskellige måder, formidling til regionale lymfeknuder via afferente lymfekar er et vigtigt skridt i æggestokkræft metastase og en væsentlig prognostisk faktor [4].

vaskulær endotel vækstfaktor (VEGF) genfamilie, der koder for fem polypeptid-vækstfaktorer, VEGF-A, -B, -C, -D, og ​​placenta vækstfaktor (PLGF), er særlig vigtig på grund af dens angiogene og lymfangiogene egenskaber, der fremmer væksten og metastaser af neoplasmer . VEGF-C betragtes som den mest effektive faktor i reguleringen lymfangiogenese [5], og det har også vist sig at direkte øge invasivitet af ovariecancerceller in vitro [6]. Til dato er høj ekspression af VEGF-C findes i brystcancer, prostatacancer, gastrisk cancer, coloncancer, og lungekræft, og er forbundet med lymfangiogenese, lymfeknudemetastase, og prognose [5], [7] – [10 ].

i udviklingen af ​​kræft i æggestokkene, prædiktive faktorer kan bruges til at få indsigt i respons på en bestemt terapi, og prognostiske faktorer kan være nyttige i at træffe beslutninger vedrørende patienter, der skal modtage adjuverende behandling. Men den diagnostiske og prognostiske værdi af serum VEGF-C i ovariecancer er ukendt. Formålet med denne undersøgelse var at bedre forstå betydningen af ​​VEGF-C i progression og metastase af kræft i æggestokkene, og at vurdere dens prognostisk betydning.

Materialer og metoder

Patienter

undersøgelsen omfattede 109 konsekutive æggestokkene kræftpatienter (alder: 61,5 ± 10,2 år), som blev indsamlet før operation fra Institut for Gynækologi, No. 202 Hospital mellem juli 1999 og sep 2001. Kliniske karakteristika af patienterne var givet i tabel 1. Alle patienter blev kirurgisk iscenesat i overensstemmelse med International Federation of Gynækologi og Obstetrik (Figo) kriterier. Patienter, som gennemgik præoperativ kemoterapi og strålebehandling blev udelukket. Desuden prøver af 76 aldersmatchede patienter (alder: 54,1 ± 13,5 år) blev analyseret med godartede læsioner. Af de godartede læsioner, 23 blev klassificeret som mucinous cystadenomas, 7 som godartede æggestokkene teratomer, 11 som æggestokkene dermoid cyster, 3 som sclerosant tumor, 8 som serøse cystadenomas, 16 som fibrom, og 8 som corpus luteum cyste. I alt 50 raske kontrolpersoner (alder: 58,6 ± 12,3 år) havde ikke tidligere æggestokkene patologi eller anden systemisk sygdom. Patienter med kræft i æggestokkene blev overvåget for overlevelse for en gennemsnitlig varighed på 49 måneder (interval: 1-108 måneder). Opfølgning oplysninger var tilgængelige for 106 æggestokkene kræftpatienter.

Skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle deltagere, og undersøgelsen blev godkendt af China Medical University Ethics Committee [2009] No.48.

Prøvetagning

Serumprøver fra alle patienter blev indsamlet presurgically, før påbegyndelse af behandlingen, og opbevaret ved -80 ° C indtil vurdering af VEGF-C niveauer. Serum VEGF-C blev bestemt med sandwich-enzymimmunassay-teknik (Quantikine, R derfor blev parametriske analyser anvendt. Den ikke-parametrisk Mann-Whitney sum rank U test og Kruskal-Wallis (

x

2) test blev anvendt til sammenligning af variablerne i grupper. Foreninger mellem VEGF-C og klinisk-patologiske variabler (histologi tumor fase, tumor kvalitet, residual tumor størrelse, lymfeknude metastaser, patienternes overlevelse, og resectablity af tumorer) blev vurderet ved chi-square test. Følsomheden og specificiteten af ​​VEGF-C blev bestemt ved Receiver Operating karakteristiske (ROC) kurver, og arealerne under kurven blev beregnet [11]. Overlevelsestiden blev målt fra tidspunktet for diagnosen til datoen for død af kræft i æggestokkene eller datoen for sidste opfølgning. Brug af medianen af ​​VEGF-C niveau som en cut-off, blev prognostiske virkning af VEGF-C evalueret af Kaplan-Meier-metoden og log-rank test. Desuden blev effekten af ​​serum VEGF-C-niveau på patientens samlede overlevelse vurderes, og beregnet af både univariate og multivariate Cox proportionel risiko regressions modeller. En

P

værdi. 0,05 blev betragtet som signifikant

Resultater

Niveauerne af VEGF-C og CA125 i sera fra patienter med ovariecancer og benigne æggestokkene sygdomme, samt hos raske kontroller blev præsenteret i tabel 2. Serumkoncentrationer af VEGF-C og CA125 var signifikant højere hos patienter med ovariecancer end i benigne æggestokkene sygdomme og raske kontroller (

P

0,01) . Der var ingen forskelle mellem godartede æggestokkene sygdomme og raske kontrolpersoner for serumniveauer af VEGF-C og CA125 (

P Salg 0,05).

Tabel 3 præsenterede niveauerne af VEGF C og CA125 i sera fra patienter med ovariecancer i forhold til klinik-patologiske variabler. Serum niveauer af VEGF-C viste betydelig korrelation med FIGO stadie, og var det højeste i IV undergruppe (

P

= 0,040). Hos patienter med lymfeknudemetastaser blev serumniveauer af VEGF-C steg i forhold til patienter uden lymfeknudemetastaser (

P

= 0,010). Desuden serum niveauer af VEGF-C øget hos patienter, der døde af kræft i løbet af observationsperioden (

P

= 0,017). Lignende observation for VEGF-C blev lavet i æggestokkene kræftpatienter med Nonresectable tumorer sammenlignet med dem med resekterbare dem (

P

= 0,013).

Som vist i figur 1 (a) , areal under receiver koerselskurve (AUROC) analyse vurderer serum VEGF-C som et diagnostisk værktøj til at diskriminere ovariecancer fra godartede æggestokkene sygdomme og raske kontrolpersoner var 0,826 (95% CI, 0,773-0,879) i forhold til 0.760 (95% CI, 0,697 -0,822) til CA125. Derudover figur 1 (b) viste, at AUROC af VEGF-C for at differentiere ovariecancer fra sundhedskontrol var 0,862 (95% CI, 0,794 til 0,931), hvilket var højere end 0,853 (95% CI, 0,773-0,933) af CA125. Figur 1 (c) fremlagde, at den omtrentlige AUROC for kræft i æggestokkene versus godartede æggestokkene sygdomme var 0,802 (95% CI, 0,736-0,868) og 0,681 (95% CI, 0,604-0,758) til VEGF-C og CA125 hhv. AUROC af VEGF-C var større end CA125 i forskellige screening grupper.

(a-b) ROC analyse omfattede patienter med benigne æggestokkene sygdomme og raske kontroller som en negativ gruppe og patienter med ovariecancer som en positiv gruppe. (C-d) æggestokkene kræftpatienter

vs

raske kontrolpersoner; (E-f) æggestokkene kræftpatienter

vs

godartede æggestokkene sygdomme. AUROC:. Areal under modtager-drift kurve

Analyse ved hjælp af Kaplan-Meier-metoden viste, at patienter med højt niveau af VEGF-C (≥10200 pg /ml) havde signifikant kortere samlet overlevelse end dem med lav niveau af VEGF-C ( 10200 pg /ml), som vist i figur 2 (

P

0,0001). Kurven viste, at høje VEGF-C er signifikant associeret med en øget risiko for død. For at evaluere faktorer, som påvirkede samlet overlevelse blev de kliniske fem faktorer og VEGF-C-niveau i tabel 4 anførte inkluderet i analysen. Univariate analyse afslørede, at tumor fase (III og IV) (

P

0,0001), lymfeknudemetastase (

P

0,001), og høje niveauer af VEGF-C (

P

= 0,001) var signifikant associeret med overlevelsen af ​​patienter med kræft i æggestokkene. Af disse tumor fase (III og IV) (

P

= 0,006), lymfeknudemetastase (

P

= 0,021), og høje niveauer af VEGF-C (

P

= 0,01) forblev signifikant på multivariate analyse. Blandt de undersøgte faktorer, VEGF-C-niveau var en uafhængig prædiktor for dårlig patient overlevelse.

Diskussion

metastatisk spredning af tumorceller er ansvarlig for størstedelen af ​​kræft dødsfald. Lymphangiogenese og vedvarende angiogenese er vigtige skridt i tumor progression. Svarende til angiogenese, kan en tumor fremkalde sit eget netværk af lymfekarrene, der forbinder med de omkringliggende lymfekar. Til dato, kliniske og patologiske resultater viser, at metastase af tumorceller ved lymfekarrene er den mest almindelige vej for indledende udbredelse i mange carcinomer. Lymfangiogenese blev rapporteret at spille en rolle i ovariecancer progression både klinisk og i forsøgsmodeller [12], [13].

Som medlem af VEGF-familien, er VEGF-C først demonstreret at inducere lymfangiogenese og fremme metastase i dyreforsøg, og udtrykkes også i en række humane voksne væv, herunder hjerte, placenta, muskel, ovarie, og tyndtarmen [14], [15]. Tidligere undersøgelser har vist, at VEGF-C /VEGFR3 signalsystem betragtes som den mest effektive vej i reguleringen lymfangiogenese. VEGF-C udskilt af tumorceller specifikt kan handle på VEGFR-3 på overfladen af ​​lymfatiske endotelceller og dermed aktivere signalsystemet for tumor lymfangiogenese. Klinisk-patologisk korrelationer har vist, at der er en stærk korrelation mellem VEGF-C /VEGFR3 signalering og lymfeknude metastaser i forskellige menneskelige kræftformer [16], [17]. Nakazato T,

et al

. rapporteret, at VEGF-C-ekspression i oral pladecellekarcinom udløser lymfangiogenese, hvilket kan resultere i en høj risiko for cervikal lymfeknudemetastase [18]. Schietroma C

et al

, viste, at VEGF-C positiv lymfatiske densitet øges omkring malignt melanom og associeret med tumorceller invasion af lymfeknuderne [19]. Nylige undersøgelser identificeret VEGF-C som en prognostiske faktorer for dårlig prognose i gastrisk adenocarcinom [20], cholangiocarcinom [21], brystkræft [22], og lungekræft [23].

Neoplastisk angiogenese og lymfangiogenese er afgørende for væksten af ​​tumorvæv i både primære og metastatiske steder. Dette indebærer, at detektion af angiogene og lymfangiogene faktorer kan indikere tilstedeværelsen af ​​malign tumor på et tidligt stadium. Data, der fokuserer på lymfangiogenese i kræft i æggestokkene er sparsomme. Men Sinn BV,

et al

, viste, at VEGF-C mRNA er forbundet med aggressiv tumor adfærd i ovariecancer [24]. Selv blev observeret en stigning i VEGF-C mRNA, forholdet mellem serum VEGF-C niveauer og tumor adfærd er endnu ikke blevet bestemt ved en kvantitativ metode in vivo. I vores undersøgelse analyserede vi serum VEGF-C-niveauer i et stort antal ovariecancer prøver ved anvendelse af ELISA-metoden og fokusere på forskellige undertyper, serøs-papillær adenocarcinom, mucinøs adenocarcinom, endometroid tumor, klar celle ovarietumor og andre, som afviger væsentligt i en række genetiske, biologiske, patologiske og kliniske funktioner. Resultaterne viste, at niveauerne af VEGF-C var forhøjet hos patienter med ovariecancer sammenlignet med benigne ovarie sygdomme og raske kontroller. Derfor, for yderligere at evaluere den kliniske værdi af VEGF-C, vi bestemt og sammenlignet den diagnostiske anvendelighed af VEGF-C og CA125 i forskellige screening grupper. Serum VEGF-C niveauer skelnes æggestokkene kræftpatienter fra normale individer og /eller godartede patienter sygdom i æggestokkene meget pålideligt. Serum VEGF-C var en betydeligt bedre indikator for kræft i æggestokkene end CA125 i dette undersøgte population.

Niveauerne af VEGF-C i sera fra 109 patienter med ovariecancer, blev vurderet i forhold til klinisk-patologiske træk af tumor såsom FIGO stadium, sortering, tumorplacering, lymfeknudemetastase, tumor resectability, og overlevelse af patienterne. Derudover serum VEGF-C steg signifikant med FIOGO stadium lymfeknudemetastase, overlevelse af patienter, og tumor resectablility. Vores resultater er i overensstemmelse med resultaterne af Huang KJ,

et al

[25], der afslørede signifikant forskel af VEGF-C i lymfeknude metastaser. Som beskrevet ovenfor, antyder, at de forhøjede niveauer af VEGF-C kan afspejle den rolle af dette protein som en stimulator af lymphangiogenese og tumorcellemetastase i ovariecancer progression.

Endelig overlevelse analyse af de ovariecancerpatienter blev evalueret i denne undersøgelse baseret på niveauerne af VEGF-C. En tidligere undersøgelse har vist den potentielle anvendelighed af VEGF-C som en prognostisk markør hos brystkræftpatienter [26]. I vores undersøgelse, overlevelsesraten for patienter med højt VEGF-C-niveau var væsentligt lavere end de patienter med lav VEGF-C-niveau (

P

0,0001). Notatet havde præoperative niveauer af CA125 i disse patienter ikke korrelerer med en dårligt resultat (data ikke vist). Udover de allerede etablerede prognostisk indikator, såsom FIGO stadium og lymfeknudemetastaser, blev serum VEGF-C uafhængigt associeret med prognosen hos alle patienter med ovariecancer. Således kan serum VEGF-C identificere patienter tidlige fase som er af sygdom dødsfald. Dette kan meget vel påvirke behandlingen beslutninger.

Vores resultater antydede, at VEGF-C kan være involveret i udviklingen af ​​kræft i æggestokkene, og dette høje VEGF-C i sera kan være relateret til lymfangiogenese af tumoren samt som invasionen af ​​lymfekar i kræft i æggestokkene. Som en noninvasiv markering, VEGF-C har potentiale til klinisk fremskynde diagnosticering af ovariecancer og for at hjælpe ved påvisning af lymfeknudemetastase hos kvinder, for hvem CA125 er ikke anvendelig. Samlet set kan tilsætning af VEGF-C til diagnostisk værktøj i tilfælde med mistanke om udbredt ovariecancer bidrage til nøjagtigheden af ​​diagnosen, besparende intensiv endoskopisk søgen efter formidles foci. Det kunne også bruges til opfølgningen af ​​de patienter, og forudsige udfaldet af patienterne.

Vores fund har flere begrænsninger. Første, validering af den prædiktive betydning af VEGF-C kræver store undersøgelser af homogene populationer. Det er usandsynligt, at klinisk-patologiske undergrupper af passende størrelse kan samles i en enkelt institution. Sekund, VEGF-C ikke specifik for ovariecancer og de er impliceret i både tumor- og inflammationsinduceret lymfangiogenese. For det tredje, hvad angår evnen af ​​VEGF-C for at skelne mellem tidlig ovariecancer og godartede sygdomme, mindre almindelige histologiske typer, og tilfælde, hvor CA125 er lav, har vi brug rekruttere flere kliniske tilfælde og foretage en analyse af forskellen i dybden. Endelig er den optimale metode til evaluering af serum VEGF-C er endnu ikke standardiseret, og de “normale” niveauer er ukendt. er behov for yderligere valideringer i store undersøgelser for bedre at undersøge de kliniske implikationer af serum VEGF-C-niveau og at afgøre, om serum VEGF-C kan give flere nyttige oplysninger om tilstedeværelsen af ​​tidlige fase ovariecancer, fjernmetastaser, og prognostisk værdi af kræft i æggestokkene .