PLoS ONE: lymfangiogene Markers og deres indvirkning på Nodal Metastase og overlevelse i ikke-småcellet lungekræft – En struktureret gennemgang med metaanalyse

Abstrakt

Baggrund

I ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), nodal metastaser er en negativ prognostisk faktor. Adskillige medierende faktorer er blevet stiltiende i udviklingen af ​​nodal metastaser og undersøgt for forudsigende og prognostiske egenskaber i NSCLC. Men undersøgelsens resultater afviger. I denne strukturerede gennemgang og meta-analyse udforske vi den offentliggjorte litteratur om almindeligt anerkendte veje for molekylær regulering af lymfatisk metastaser i NSCLC.

Metoder

En struktureret PubMed søgning blev foretaget for papirer rapportering på udtryk af kendte markører for lymhangiogenesis i NSCLC patienter. Papers af tilstrækkelig kvalitet, der præsenterer overlevelse og /eller korrelationsdata blev inkluderet.

Resultater

Høje niveauer af vaskulær endotel vækstfaktor C (VEGF-C, HR 1,57 95% CI 1,34-1,84) og høj lymfatiske vaskulær densitet (LVD, HR 1,84 95% CI 1,18-2,87) var væsentlige prognostiske markører for ringe overlevelse og høj ekspression af VEGF-C, vaskulær endotelvækstfaktor-receptor 3 (VEGFR3) og LVD blev forbundet med lymfeknudemetastaser i NSCLC.

Konklusion

lymfangiogene markører er prognosticators for overlevelse og korrelerer med lymfeknude metastaser i NSCLC. Deres præcise rolle og kliniske implikationer bør yderligere belyst

Henvisning:. Kilvaer TK, Paulsen E-E, Hald SM, Wilsgaard T, Bremnes RM, Busund L-T, et al. (2015) lymfangiogene Markers og deres indvirkning på Nodal Metastase og overlevelse i ikke-småcellet lungekræft – En struktureret gennemgang med metaanalyse. PLoS ONE 10 (8): e0132481. doi: 10,1371 /journal.pone.0132481

Redaktør: Xin-Yuan Guan, The University of Hong Kong, KINA

Modtaget: April 2, 2015; Accepteret: 15 Juni 2015; Udgivet: 25 August, 2015

Copyright: © 2015 Kilvaer et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Da denne artikel udgør en meta-analyse, alle data er tilgængelige via allerede offentliggjort, og citerede artikler

finansiering:.. forfatterne har ingen støtte eller finansiering til at rapportere

Konkurrerende interesser: forfatterne har erklæret, at der ikke eksisterer konkurrerende interesser.

Introduktion

Lungekræft skønnes at have den næsthøjeste forekomst af alle kræfttilfælde i amerikanske kvinder og mænd [1]. Med en dystre prognose, og over 163 000 forventede dødsfald i 2014, lungekræft er den hyppigste dødsårsag blandt kræft [1]. Lungekræft er iscenesat i henhold til det system anbefalet af amerikanske Blandede Cancer (AJCC) og Union Internationale Contre le Cancer (UICC), der fra 2010 er i sin 7

th edition [2,3]. Systemet er opbygget omkring tumorstørrelse og lokalisering (T), omfanget af lymfeknudeinvolvering (N) og tilstedeværelse af fjernmetastaser (M) [3]. Kort sagt, fase I omfatter små lokaliserede tumorer, mens trin II-IIIA repræsenterer større tumorer med eller uden nodal metastase [3]. Den femårige-overlevelse for fase IA, IB, IIA, IIB og IIIA lungekræft er 65-81%, 54-72%, 46-59%, 46-47% og 33-38% henholdsvis [4-6] . Stage III B og IV lungekræft betragtes ikke til operation og har en afgrundsdyb prognose [4-6]. Ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) repræsenterer . 80% af alle tilfælde lungekræft [7]

Nodal metastase udgør et stort skift i NSCLC biologi, fra et lokaliseret til en invasiv fænotype. Patienter med nodal metastaser har et mere fremskredet stadium og en dårligere prognose sammenlignet med patienter uden kirtelinvolvering og samme tumorstørrelse [3]. Endvidere prognosen for patienter opereret radikalt for trin I NSCLC varierer meget, med 20-35% af patienter, der udvikler tilbagevendende sygdom, ofte i lokaliserede lymfeknuder [4-6,8]. Vaskulære endotelvækstfaktorer (VEGF) -C og -D, og ​​deres tilsvarende receptor vaskulær endotel vækstfaktor receptor 3 (VEGFR3, også kendt som Flt4), der af mange betragtes som de vigtigste aktører i udviklingen af ​​tumorassocierede lymfekar [9] . Disse virker ved at rekruttere endotelceller (ECS) og andre stromale celler til at udvikle og vedligeholde en rå lymfatisk netværk i tumoren mikro-miljø [9,10]. I tumormodeller af NSCLC, tilstedeværelsen af ​​VEGF-C og VEGFR3 fører til proliferation, invasionsevne og nodal metastaser [11]. Der er også dokumentation for, at tumor afledt VEGF-C inducerer udviklingen af ​​lymfatisk vaskulatur i premetastatic lymfeknuder dermed forberede dem til ankomst og hosting af kræftceller [12,13]. Inhiberingen af ​​VEGFR3 i en xenograft model af NSCLC viste, at ophævelsen af ​​lymfangiogenese kunne forhindre lymfe metastase [14]. Interessant, anti-VEGFR3 behandling skulle indledes før udviklingen af ​​lymfatisk vaskulatur for dens virkning at finde sted, og det gjorde ikke ophæve lymfekar selvsupplering [14].

lymfatisk fartøj densitet (LVD) repræsenterer tæthed af lymfekar i tumoren mikro-miljø. For mange kræftformer LSD er en etableret markør for negativ prognose, men ingen reel enighed om evalueringen findes [15-18]. er blevet foreslået en forbindelse mellem tumor VEGF-C-ekspression og LVD i skildvagtslymfekirtel [19]. I NSCLC, udtryk for VEGF-C [20-28], VEGF-D [21,22,29] og VEGFR3 [30] samt lymfekar densitet (LVD) [21,23,28,31-33] blevet sammenholdt med nodal metastase og knyttet til patientens overlevelse. Interessant, andre undersøgelser undlader at vise disse relationer.

Heri præsenterer vi en struktureret gennemgang og meta-analyse af lymphangiogenese og dets forhold til lymfeknude metastaser og overlevelse i NSCLC med vægt på VEGF-C, VEGF-D, VEGFR3 og LVD.

Materialer og metoder

Søg strategi og studere udvælgelse

Den elektroniske database MEDLINE blev søgt efter studier rapporteret op til en dato grænse SEP 22 2014 med nogen nedre dato grænse anvendt. Søgestrengen bruges til lymfangiogenese var ((lymfe fartøj tæthed) OR (LVD) OR (lymfe micro fartøj tæthed) OR (LMVD) OR (D2-40) OR (VEGFR3) OR (FLT4) OR (VEGF-C) OR ( CD34)) OG ((ikke-småcellet lungekræft) OR (ikke lille lunge celle kræft) OR (ikke-lille lunge celle kræft) OR (NSCLC) OR (adenocarcinom i lungerne) OR (lunge adenocarcinom) OR (planocellulært lungecarcinom) OR (lunge pladecellecarcinom) OR (lunge SCC) OR (stor-celle-carcinoma i lungen) OR (lunge stor celle carcinom) OR (lunge LCC)) OG (Humans [Mesh] og engelsk [ ,,,0],Lang]).

De søgninger var begrænset til menneskelige arter og engelsk. Publikationer udvalgt til fuld læsning blev undersøgt for at fuldføre søgninger

Inklusionskriterier for meta-analyser var som følger:. (1) måling af VEGF-C, VEGF-D eller VEGFR3 i primær NSCLC væv ved hjælp af immunhistokemi ( IHC) eller enzymbundet immunsorbentassay (ELISA) /revers transkription-polymerasekædereaktion (RT-PCR) eller et mål for LSD; (2) at give overlevelse oplysninger i form af HR med 95% CI eller numre med høj /lav udtryk og overlevelseskurverne eller korrelation med lymfatisk metastase og tilstrækkelige data til at beregne RR; (3) opfølgning på over to år; (4) kun den seneste ELLER mest hensigtsmæssig offentliggørelse blev anvendt i tilfælde af samme forfatter rapportering om samme population. To korrekturlæsere (T. K og T. D) uafhængigt bestemt studiet berettigelse af publikationer udvalgt til fuld læsning, med uenighed løst ved konsensus.

Data udvinding og kvalitetsvurdering

De støtteberettigede studier var vurderet af to uafhængige korrekturlæsere (T. K og T. D). De data, der hentes fra hver undersøgelse omfattede forfatter (e), testmetode, cut-off og data om overlevelse og /eller lymfe metastaser. I tilfælde af manglende data forfatteren af ​​den primære undersøgelse blev kontaktet ved hjælp af den e-mail-adresse, der leveres i den originale publikation blev manglende data ikke er leveret af forfatterne udvundet fra de summariske statistikker, hvor det er muligt.

For at vurdere den samlede kvaliteten af ​​undersøgelser indgår i metaanalysen, disse blev scoret efter en modificeret kvalitet skala for biologiske prognostiske faktorer for lungekræft udviklet af Stål et al. for den europæiske Lung Cancer arbejdsgruppe [34]. Kvaliteten skala inkorporerer fire dimensioner vurdering metode 1) Videnskabelig design (5 spørgsmål); 2) Laboratorium metodologi (7 spørgsmål); 3) Generaliserbarhed (6 spørgsmål); 4) Resultater analyse (4 spørgsmål). Alle spørgsmål blev scoret med et ordenstal skala (værdier: 2, 1, 0)., Med resultater, givet som procentdele af opnåelige punkter inden for hver kategori [34]

statistiske analyser

Alle analyser blev gennemført i R-studie-version 0.98.1087 hjælp R-kernel 3.1.1.

for metaanalyser af markører i forhold til overlevelse endpoints, univariate hazard ratio (HR) med tilsvarende 95% konfidensintervaller (CI ) blev kombineret for at give de aggregerede effekt skøn. For de tilfælde, hvor disse værdier ikke blev rapporteret, eller leveret fra forfatteren (e) på anmodning blev dataene ekstrapoleret fra tilgængelige numeriske data og overlevelse kurver i henhold til metoder beskrevet af Parmar et. al [35]. For de tilfælde, hvor overlevelseskurver blev brugt, blev disse først digitaliseret hjælp Engauge digitizer [36]. Til analysen af ​​overlevelseskurver konstant censur under opfølgningen af ​​overlevende blev antaget. En 3-måneders interval mellem censurering beregninger blev anset for tilstrækkelig. For papirer med samlet overlevelse som endepunkt censurering blev antaget at starte på tidspunktet for minimum opfølgning. Til papir baseret på sygdomsspecifikke overlevelse censurering blev antaget til at starte på patientens inklusion. Maksimal opfølgning blev sat til forskellen mellem minimum opfølgning og datoen for sidste opfølgning. For papirer hvor datoen for den sidste opfølgning var ikke givet disse datoer blev ekstrapoleret fra overlevelseskurverne.

For metaanalyser af markører i forhold til nodal metastase, blev data hentes i form af 2×2 tabeller, hvorfra effekt skøn blev beregnet.

Aggregering af data blev udført ved hjælp af R-pakken “Metafor” [37]. En vis grad af heterogenitet var forventet og på grund af dette blev en tilfældige effekter model, der anvendes til at estimere HRs og tilsvarende 95% kreditinstitutter. Samlet heterogenitet blev undersøgt ved hjælp af Q, tau

2, I

2 og H

2 statistik [38]. At udforske heterogenitet indført ved hver undersøgelse inkluderet i metaanalyser, en funktion udelade en artikel ad gangen (leave1out i “metafor” pakke) blev anvendt. Undergruppe-analyser, ifølge blev udført for markører, hvor de blev afgivet tilstrækkelige oplysninger scenen og histologi, (adenokarcinom eller planocellulært karcinom).

Egger test blev anvendt til at evaluere publikationsbias [39]. Contour forbedret tragt plot er blevet brugt til at hjælpe med at fortolke, og yderligere udforske publikationsbias i tilfælde af tragten asymmetri [40]. Trim og fyld metode blev anvendt til at visualisere og for at justere for manglende undersøgelser i tilfælde af publikationsbias [41].

Resultater

Undersøgelse udvælgelse og karakteristika

Fig 1 opsummerer søgestrategi og inklusion processer. Tre hundrede-og-fyrre-syv studier blev identificeret i den indledende søgning med yderligere otte studier identificeret fra læsning bibliografier. Efter indledende screening blev 42 studier udvalgt til hele anmeldelsen [20-33,42-70]. De udvalgte til fuld gennemgang og efterfølgende indgår i meta-analyser artikler er opsummeret i tabel 1. Som forventet flere papirer rapporteret på mere end én lymfangiogene markør

Forkortelser:. VEGF, vaskulær endotel vækstfaktor; VEGFR, vaskulær endotelvækstfaktor receptor; LVD, lymfe vaskulær tæthed.

Tredive studier rapporteret overlevelsesdata for VEGF-C (23), VEGF-D (4), VEGFR3 (9) og LVD (13) [23, 24,28,29,31,32,42-51,54-58,61-66,68-70]. Af disse 17, fire, fem og otte undersøgelser omfattede tilstrækkelig overlevelsesdata og blev inkluderet i de aggregerede overlevelse-analyser af VEGF-C [24,29,31,43,44,47,48,50,54-56,58, 61,62,65,69,70] VEGF-D [29,44,56,70], VEGFR3 [43,44,55,56,70] og LVD [23,28,49,51,54,57, 63,66] henholdsvis rapportering om alt 2185, 567, 825 og 849 patienter.

Tredive studier rapporterede korrelationer mellem nodal metastase og VEGF-C (16), VEGF-D (4), VEGFR3 ( 5) eller LVD (14) [20-33,45,49-52,54-64,66,67]. Af disse 16, tre, tre og seks inkluderet tilstrækkelige data i form af 2×2 tabeller, som skal indgå i de aggregerede analyser af VEGF-C [20-24,27,30,33,50,55,58,61-64, 66], VEGF-D [21,22,30], VEGFR3 [30,55,64] og LVD [21,23,33,51,54,57 henholdsvis], rapportering om alt 1889, 507, 556 og 677 patienter.

af de 30 undersøgelser, som indgår i analyserne, 29 brugte IHC for markør evaluering, mens en undersøgelse brugte RT-PCR. Procentdelen af ​​patienter med positive markører og cut-offs, der anvendes til markør evaluering varierede udstrakt mellem studier (tabel 1) og markører. Til evalueringen af ​​IHC, nogle undersøgelser anvendes en ligefrem procentdelen af ​​positive celler, medens andre undersøgelser anvendte et komplekst score (CS), der består af flere træk, herunder, men ikke begrænset til, procentdelen af ​​positive celler og farvningsintensitet. For LVD cut-offs varierede fra ≥6 til ≥38 fartøjer pr høj effekt felt.

Ingen af ​​forfatterne bedt om supplerende data reagerede på anmodningen.

Kvalitetsvurdering

Pointene fra vurderingen (QA) kvalitet er givet i tabel 1 for de enkelte undersøgelser og sammenfattet i tabel 2 for de samlede score for hver markør. Den overordnede kvalitet score (QS) af papirer rapportering overlevelse tendens til at være overlegen i forhold til papirer rapportering korrelationer med LNM. Denne forskel var størst for dimensionen “resultater analyse”, og sandsynligvis på grund af det faktum, at kun én rapportering papir foreninger med LNM udforsket deres resultater i multivariable modeller.

Maximal score for en given kategori er 1.

Meta-analyse

resultaterne af meta-analyser er opsummeret i figurerne 2 og 3 og tabel 3, mens de enkelte univariate timer, beregnede eller som rapporteret, er angivet i tabel 1.

Værdier for ukorrigeret, leave1out (test foretaget uden den ene undersøgelse indføre den mest heterogenitet) og justeres (test udført med inddragelse af undersøgelser antages mangler i tilfælde af tragt asymmetri).

Forkortelser: VEGF, vaskulær endotelvækstfaktor; VEGFR, vaskulær endotelvækstfaktor receptor; LVD, lymfatisk vaskulær densitet; N, antal:. HR, hazard ratio

Skov afbildninger af lymfe knude metastaser meta-analyser for; A) VEGF-C, B) VEGF-D, C) VEGFR3, D) LVD, Funnel plots, der viser forholdet mellem den observerede RR og standardafvigelsen i lymfe knude metastaser meta-analyser for E) VEGF-C, F) LVD Forkortelser: VEGF, vaskulær endotelvækstfaktor; VEGFR, vaskulær endotelvækstfaktor receptor; LVD, lymfatisk vaskulær densitet; N, nummer, RR, relativ risiko

VEGF-C:. Den overordnede HR for overlevelse hos patienter, der udtrykker høj tumor celle VEGF-C blev 1,57 (95% CI: 1,34-1,84) tværs 18 studier ved hjælp af en tilfældige effekter model og med 2107 patienter (fig 2A, tabel 3). Når du bruger trim og fyld metode til at justere for manglende undersøgelser HR var 1,46 (95% CI: 1.23-1.73, tabel 3). Undergruppe analyser rapportering om VEGF-C og overlevelse i 4 studier af adenocarinomas (n = 317) og 5 undersøgelser af fase I NSCLC (n = 542) viste timers 1,45 (95% CI: 1.04-2.03) og 1,56 (95% CI : 1,09-2,24), (fig 2A)

den overordnede RR for foreningen mellem VEGF-C og nodal metastaser var 1,66 (1,28-2,15) tværs 15 undersøgelser med anvendelse af en tilfældig effekt model og inklusive 1889 patienter. (fig 3A, tabel 3). Når du bruger trim og fyld metode til at justere for eventuelle manglende undersøgelser RR var 1,26 (0.91-1.73)

VEGF-D:. I denne metaanalyse VEGD-D blev hverken fundet at være forbundet med overlevelse eller nodal metastaser i NSCLC patienter

VEGFR3:. Den overordnede HR for overlevelse hos patienter, der udtrykker høj tumorceller VEGFR3 var 1,48 (95% CI: 0,77-2,86) på 5 undersøgelser med anvendelse af en tilfældig effekt model og inklusive 747 patienter ( fig 2C, tabel 3). Når du bruger trim og fyld metode til at justere for manglende undersøgelser HR var 1,66 (95% CI: 0.88-3.15, tabel 3). En anden tilgang, og udelade den ene undersøgelse indføre den mest heterogenitet, afslørede en samlet HR for overlevelse på 1,98 (95% CI: 1,46-2,68, tabel 3).

Den overordnede RR for association mellem VEGFR3 og nodal metastaser var 1,71 (95% CI: 1,34-2,18) på tværs af 3 studier og med 556 patienter (fig 3C, tabel 3). Når du bruger trim og fyld metode til at justere for eventuelle manglende undersøgelser RR var 1,56 (95% CI: 1,27-1,92).

LSD: Det overordnede HR for overlevelse hos patienter, der udtrykker høje niveauer af LSD i tumor var 1,84 (95% CI: 1,18-2,87) på 8 undersøgelser under anvendelse af en tilfældig effekt model og inklusive 849 patienter (fig 2D, tabel 3). Trim og fyld metode ikke foreslå eventuelle manglende undersøgelser og et justeret HR blev derfor ikke beregnet

Den overordnede RR for foreningen mellem LVD og nodal metastaser var 2,24 (95% CI: 1,13-4,56). Tværs 6 undersøgelser og herunder 667 patienter (fig 3D, tabel 3). Trim og fyld metode ikke foreslå eventuelle manglende undersøgelser og en justeret RR blev derfor ikke beregnet

Offentliggørelse skævhed

Egger test for overlevelse gav p-værdier som følger:. VEGF-C 0.400, VEGF-D 0,146, VEGFR3 0,020, VEGF-C i adenokarcinomer 0,073, VEGF-C i trin i patienter 0,892 og LVD 0,006. Dette tyder på en betydelig publikationsbias i undersøgelser rapporterer om VEGFR3 og LVD og i undergruppe-analyser af VEGF-C. Konturen forbedret Funnel plot for VEGFR3 (Fig 2E) tyder på, at de manglende undersøgelser kan være i et område med høj statistisk signifikans, men på grund af det lave antal undersøgelser inkluderet, Tragt plot skal fortolkes med omhu. Konturen forbedret Funnel plot for LVD (fig 2F) tyder på, at de manglende artikler er dem med lav standardafvigelse af effekten estimat

Egger test for nodal metastase gav p-værdier som følger:. VEGF-C 0.001, VEGF-D0.169, VEGFR3 0,375 og LVD 0,004. Dette tyder på en betydelig publikationsbias i undersøgelserne rapportering om VEGF-C og LVD. Konturen forbedret Funnel plot af VEGF-C (fig 3E) angiver en stærk positiv publikationsbias. Konturen forbedret Funnel plot af LSD (fig 3F) angiver manglende større undersøgelser og en eventuel positiv publikationsbias.

Statistiske overvejelser

Resultatet af de aggregerede analyser blev opnået ved hjælp af resultaterne rapporteret i univariate analyser kun. Nogle oplysninger kan potentielt blive tabt fra undersøgelser rapporterer kun multivariate resultater med utilstrækkelige data til at rekonstruere den univariate analyse. Multivariate data gælder kun i deres egen multivariat system. Herunder multivariate data i den aggregerede analyse tilvejebringer forøget antal patienter på bekostning af øget heterogenitet. Dette kan tolereres, hvis alle inkluderede studier er tilstrækkeligt bredt og omfatter den samme eller tilnærmelsesvis det samme, variable i deres multivariate modeller. I denne meta-analyse af antallet af patienter i de inkluderede studier varierede fra 48, til 335 og de variabler i forskellige multivariate modeller varierede (data ikke vist). Således gør medtagelse af data fra multivariate analyser i metaanalysen en tvivlsom venture.

Heterogenitet er vanskeligt at undgå, når der udføres meta-analyser baseret på markør-data, da der ikke findes nogen konsensus om, hvordan sådanne undersøgelser bør være gennemført. Blandt de inkluderede studier (tabel 1), alle undtagen én var retrospektiv og alle undtagen en brugt IHC at detektere proteinmarkørerne. Desuden adskiller de sig i høj grad med hensyn til udvalgte antistoffer, valg af cut-offs for de forskellige markører og i andelen af ​​positive tilfælde. Den europæiske Lung Cancer arbejdsgruppe har foreslået en kvalitet skala for biologiske prognostiske faktorer for lungekræft, men få undersøgelser overholde denne skala [34]. Vi udnyttet denne skala til at bedømme de inkluderede studier (tabel 2). Blandet model tilgange (data ikke vist) udnytte histologi, scene, metode, procentdel af positiver tilfælde, cut-offs eller kvalitetsresultater som statiske modifikatorer blev forsøgt, men ingen af ​​disse har bidraget til den samlede model design og dermed blev afvist.

den nuværende meta-analyse var begrænset til artikler publiceret i det engelske sprog. Dette kunne indføre en positiv selektionsbias, da der er en tendens til positive undersøgelser der skal offentliggøres på engelsk, mens negative studier oftere offentliggøres i forfatterne modersmål [71]. Faktisk test i de aktuelle metaanalyser foreslog betydelig publikationsbias til undersøgelser rapporterer overlevelse baseret på VEGFR3 og LVD og LNM baseret på VEGF-C og LVD. Baseret på denne resultaterne af denne meta-analyse har fortolkes omhyggeligt og skal bekræftes i større forsøg.

Indhentning individuelle patientdata til metaanalyse ville teoretisk set bidrage til at definere den rolle, lymfangiogene markører ved at justere for de samme konfoundere før data aggregering på tværs af alle omfattede undersøgelser [72]. Men dette synes ikke at være muligt, som alle forfattere var foranlediget af e-mail for yderligere oplysninger, men ingen af ​​dem svarede.

Diskussion

Resumé af meta-analyser

Dette er, så vidt vi ved, den mest omfattende struktureret gennemgang med meta-analyse af VEGF-C, VEGF-D og LVD i NSCLC. En meta-analyse har tidligere rapporteret om VEGF-C og VEGFR3 og deres tilknytning til overlevelse i NSCLC [73]. Zhan et al. offentliggjort de aggregerede resultater af 8 undersøgelser rapporterer om VEGF-C og 4 undersøgelser angiveligt rapportering på VEGFR3 (Forfatterne anses Ftt1 at repræsentere VEGFR3 -Flt1 er i virkeligheden lig med VEGFR1, mens Flt4 er lig med VEGFR3) i 2009. De fandt den aggregerede resultaterne af undersøgelserne rapportering om VEGF-C og VEGFR3 at være ikke-signifikant i NSCLC [73]. Endvidere Wang et al. revideret de aggregerede resultater af 10 undersøgelser rapportering om LSD og overlevelse i NSCLC patienter i 2012. De omfattede multivariable justerede resultater og derudover en undersøgelse rapportering VEGFR3 i tumor celle cytoplasma [16]. Siden 2009 flere undersøgelser af VEGF-C, har VEGF-D, VEGFR3 og LVD blevet offentliggjort. Denne aktuelle metaanalyse korrelerer VEGF-C, VEGFR3 og høje niveauer af LSD med nodal metastaser i NSCLC patienter og identificerer høj VEGF-C (HR 1,57 95% CI: 1,34-1,84) og høje niveauer af LSD (HR 1,84 95% CI : 1,18-2,87) som væsentlige prognostiske markører for dårlig overlevelse

Den VEGF-C /D /R3-aksen i forhold til overlevelse og lymfe metastaser i NSCLC

VEGF-C, VEGF. D og deres tilsvarende receptor VEGFR3 er velkendte og stærke lymfangiogene markører [9,10,74]. En bred kortlægning af VEGF-C /VEGFR3 akse i lungeadenocarcinom tumorer, cellelinier og dyremodeller Su. et al. fundet høj ekspression af både VEGF-C og VEGFR3 at være korreleret med nodal metastase hvorimod udtryk var lav for tidlige fase sygdom [11]. Endvidere NSCLC cellelinjer over-ekspression af VEGF-C /VEGFR3 akse viste øget migration, og, når den indføres i xenograftmodeller, oftere dannede lungemetastaser, sammenlignet med NSCLC cellelinier hvor VEGF-C /VEGFR3 signalering atter ophævet [11]. Han et al. undersøgt vekselvirkningen mellem lungekræft cellelinien LNM35, som udtrykker høje niveauer af VEGF-C og lymfatiske endotelceller (LEC). De fandt VEGF-C for at inducere lymfekar destabilisering og udvidelse af indsamling lymfekar, hvilket yderligere fører til passage af tumor klynger til skildvagtslymfekirtel [14]. I pladecellecarcinom i huden, Hirakawa et al. viste, at VEGF-C over-udtrykkende tumorer fastholdt deres lymfangiogene profil efter ankomsten i skildvagtslymfekirtel [13]. Med udgangspunkt i dette, Liersch et al. fundet melanoma xenotransplantater overudtrykker VEGF-C at indlede lymfevaskularisering i skildvagtslymfekirtel før kunne påvises tilstedeværelsen af ​​metastatiske celler [12]. Disse sidstnævnte resultater understøttes af en undersøgelse af menneskelige kirurgiske eksemplar (oral planocellulært karcinom) viser et øget antal højendotelvenoler og lymfekar uden at afsløre metastatiske celler [19]. Men i en nylig undersøgelse Nwogu et al. undersøgte forekomsten af ​​nodal mikro-metastaser i pStage I og II NSCLC-patienter ved anvendelse af traditionel H & E, IHC og RT-PCR på resektion lymfeknuder. De fandt, at 35/40, 33/40 og 16/40, henholdsvis var N0, hvilket indikerer, at konventionelle H & E og IHC måske ikke tilstrækkeligt følsom til at påvise metastatiske celler. De viste også en stærk sammenhæng mellem tilstedeværelsen af ​​nodal mikro-metastaser og ekspression af VEGF-A, VEGF-C, VEGF-D og VEGFR3 i lymfeknuderne [75]. Niki et al. isolerede totalt RNA fra 60 kirurgisk resektion lunge adenocarcinomer hvoraf 27 havde lymfeknudemetastaser og fundet kun svage korrelationer mellem lymfeknudemetastaser og VEGF-C. Imidlertid blev et højt forhold VEGF-A, -B eller -C til VEGF-D er forbundet med lymfeknudemetastaser og forfatterne foreslog, at VEGF-D kan have en regulerende rolle i tumor lymfangiogenese [60]. Det er klart, er RNA udtryk ikke nødvendigvis til protein udtryk og det kan hævdes, at en stor andel af VEGF-A, B eller C RNA til VEGF-D-RNA blot repræsenterer overekspression af disse molekyler i stedet for VEGF-D har et regulerende rolle. Resultaterne af denne meta-analyse indikerer, at VEGF-C er en prognostisk faktor for lymfeknudemetastaser (HR 1,66 95% CI: 1,28-2,15) og overlevelse (HR 1,57 95% CI: 1,34-1,84) i NSCLC-patienter, og yderligere , at høj ekspression af VEGFR3 er en prognostisk faktor for lymfeknudemetastaser (HR 1,71 95% CI: 1,34-2,18)

LVD i relation til overlevelse og lymfatiske metastaser i NSCLC

LVD beskriver densitet af lymfekar i tumoren mikro miljø [76]. I lymphovascular invasion (LVI) er en etableret negativ prognostisk faktor i NSCLC beskriver tilstedeværelsen af ​​kræftceller i lymphovascular rum. LVI blev for nylig revideret af Mollberg et al. for trin I NSCLC [15]. Der er uenighed om de kliniske implikationer af LSD i NSCLC. Som i dag, findes der ingen konsensus for evaluering af LSD. Denne resultater i LVD blive evalueret ved hjælp af flere antistoffer, herunder D2-40, podoplanin, og VEGFR3 og af flere teknikker, herunder den mest positive high-powered felt (hot-spot), den invasive tumor foran, tumor center og kombinationer af disse. Vores systematiske tilgang identificeret 12 studier rapporterer overlevelse og 14 studier rapporterer associationer til LNM i NSCLC patienter. De varierede i metodiske tilgang med nogle evaluere tilstedeværelsen af ​​LSD i hot-spots og nogle i tilfældige områder, enten i den centrale tumor, i den invasive tumor foran studier, en blanding af forskellige områder eller placering ikke givet. Dette førte til en betydelig forskel i cut-offs, der anvendes til høj /lav tæller fartøj (opsummeret i tabel 1). Desværre antallet af forsøg med den samme metode var for lille til at berettige undergruppe analyser. Ikke desto mindre er vores metaanalyse identificeret høje LVD-niveauer, som en markør for dårlig prognose (HR 1,84 95% CI 1,18-2,87) og LNM (HR 2,24 95% CIT 1,13-4,46) i NSCLC patienter. Interessant, Sun et al. fundet peritumoral LVD at være knyttet til overlevelse, mens intratumoral LSD ikke var, hvilket tyder på, at dette er af interesse for fremtidige undersøgelser [66]. Dette har en intuitiv klang, som det synes logisk at tumorcellemigration til lymfeknuder kun kan forekomme i funktionelle lymfekar meste fundet i tumoren periferi og ikke i intratumorale lymfekar, der har tendens til at blive sammenklappet og ikke-funktionel. Der er imidlertid bevis for, at tumorceller kan anvende den sidstnævnte fremgangsmåde, når ind i lymfesystemet [76]. Renyi-Vamos et al. stratificerede patienter baseret på lav og høj angiogen aktivitet i tumorer, og fandt peritumoral LVD at forværres betydeligt prognosen for dem i den høje angiogene gruppe [63]. I oral pladecarcinom blev LVD i sentinelle lymfeknuder forhøjet uanset tilstedeværelsen af ​​metastatiske cancerceller, og korreleret til tumor VEGF-C-ekspression, hvilket antyder et samspil mellem tumor og lymfeknude før ankomsten af ​​cancerceller [19]. I en nylig meta-analyse, herunder 1044 brystkræftpatienter blev LVD korreleret til LNM, men ikke til andre kendte brystkræft træk [77]. Resultaterne af denne meta-analyse er sammenfaldende med den offentliggjorte litteratur af andre kræft enheder og foreslår LVD som prognostisk markør for overlevelse og LNM i NSCLC patienter.

Målretning lymfe metastaser i behandlingen af ​​NSCLC

med tilgængeligheden af ​​små molekyler hæmmere og antistoffer, der potentielt kan målrette tumor lymfangiogenese forekommer det hensigtsmæssigt, at denne behandling bør tilbydes patienter, til hvem det kan vise sig gavnligt. Udfordringen bliver at vælge de rigtige patienter. Som påpeget i xenograft model fra He et al. timing synes at være af betydning. I deres model, blev der observeret nogen fordel af anti-VEGFR3 antistoffer, når de indgives efter udviklingen af ​​lymfangiogene net [14]. Åbenbart, resultater fra murine modeller bør nøje vurderes, før anvendt på faktiske menneskelige patienter, men dårlig timing synes at være en mulig forklaring på en del af de moderate eller mangler virkninger konstateret efter en række anti-angiogene og også anti-lymfangiogene tilgange [78 ]. Interessant, Tamura et al. har undersøgt serum VEGF-C niveauer af NSCLC-patienter med og uden LNM [67]. De fandt høje niveauer af VEGF-C at være forbundet med LNM med positive og negative prædiktive værdier på 70 og 77.3 henholdsvis og at tilføjelsen af ​​serum VEGF-A, serum matrixmetalloproteinase 9 eller CT-images yderligere forbedret de diagnostiske egenskaber af testen [25,67,79]. Disse resultater blev støttet af resultaterne af Daly et al. i 2014 [80].

Resultaterne af denne meta-analyse viser, at målrette lymfangiogenese kunne vise sig gavnlig for udvalgte undergrupper af NSCLC patienter. Med timing er afgørende, teoretisk, kunne den bedste udnyttelse af lymfangiogene hæmmere være i adjuverende og for patienter med lav kvalitet tumorer i hvem lymfe node metastaser endnu at udvikle sig. Det er klart, skal brugen af ​​ethvert lægemiddel i adjuverende overvejes nøje som en andel af patienter er blevet helbredt for deres kræftsygdom, og vil ikke drage fordel af yderligere behandling. Undersøgelserne forbinder serumniveauer af VEGF-C til nodal metastase er særligt interessante.