PLoS ONE: PTEN som prognostisk og prædiktiv Marker i Postoperativ Strålebehandling for pladecellekræft af chefen og Neck

Abstrakt

Baggrund

Tumor suppressor PTEN er kendt for at styre en række forskellige processer relateret til celle overlevelse, proliferation og vækst. PTEN udtryk betragtes som en prognostisk faktor i nogle menneskelige neoplasmer som bryst-, prostata-, og kræft i skjoldbruskkirtlen.

Metodologi /vigtigste resultater

I denne undersøgelse analyserede vi indflydelse PTEN udtryk på resultatet af et randomiseret klinisk forsøg med konventionel versus 7-dage om ugen postoperativ radioterapi for planocellulært carcinom i hoved og hals. Patienterne med kræft i mundhulen, oropharynx og larynx blev randomiseret til at modtage 63 Gy i brøkdele af 1,8 Gy givet 5 dage om ugen (CF) eller 7 dage om ugen (p-CAIR). Ud af 279 patienter, der deltog i undersøgelsen, 147 paraffinblokke var tilgængelige for en immunhistokemisk vurdering af PTEN. For at evaluere den prognostiske værdi af PTEN udtryk og effekten af ​​fraktionering i forhold til PTEN, blev analyseret data på resultatet af en randomiseret klinisk forsøg. Tumorer med en høj intensitet af PTEN farvning havde en betydelig gevinst i loco-regional kontrol (LRC) fra p-CAIR (5-års LRC 92,7% vs. 70,8%, for p-CAIR vs CF, p = 0,016, RR = 0,26). Derimod havde tumorer med lav intensitet af PTEN ikke vinde fra p-CAIR (5-års LRC 56,2% vs. 47,2%, p = 0,49, RR = 0,94). Intensiteten af ​​PTEN stærkt påvirket LRC i en hel gruppe af 147 patienter (5-års LRC 80,9% vs. 52,3% for høj vs. lav PTEN, p = 0,0007, RR = 0,32). I multivariat Cox-analyse, herunder hals knude involvering, EGFR, nm23, Ki-67, p53, cyklin D1, tumor websted og marginer, PTEN forblev en selvstændig indikator for LRC (RR = 2,8 p = 0,004).

konklusioner /betydning

Disse resultater tyder på, at PTEN kan tjene som en potent prognostisk og prædiktiv markør i postoperativ strålebehandling for højrisiko-planocellulært carcinom i hoved og hals

Henvisning:. Snietura M, Jaworska M, Młynarczyk-Liszka J, Goraj-Zajac A, Piglowski W, Lange D, et al. (2012) PTEN som prognostisk og prædiktiv Marker i Postoperativ Strålebehandling for pladecellekræft i hoved og hals. PLoS ONE 7 (3): e33396. doi: 10,1371 /journal.pone.0033396

Redaktør: Torbjørn Ramqvist, Karolinska Institutet, Sverige

Modtaget: September 16, 2011; Accepteret: 14 februar 2012; Udgivet: 7 marts 2012

Copyright: © 2012 Snietura et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne forskning blev støttet af forskningsbevilling MN 402 108 134 leveret af polske Ministeriet for Videnskab og videregående Education Funder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet.

Konkurrerende interesser: forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Tumor suppressor PTEN (phosphatase og tensin homolog slettet på kromosom 10) er en dual-specifik phosphatase, der fungerer som en negativ regulator. af PI3K-AKT-mTOR pathway, således at styre en række forskellige processer relateret til celleoverlevelse, proliferation og vækst. PTEN udfører en afgørende rolle i silencing af signaltransduktion fra vækst membran faktorreceptorer (EGFR, HER-2, IGFR) gennem AKT signaleringskaskade [1], [2].

Somatic PTEN mutationer og deletioner eller epigenetisk inaktivering er almindelige i flere forskellige tumortyper, herunder bryst-, endometrium, og skjoldbruskkirtel, men også tumorer af centralnervesystemet, prostata, lunge, melanom, leukæmi og lymfom [3] – [11]. Tab af PTEN kan føre til vævsspecifikke virkninger, herunder hurtige eller langsomme tumorer eller ingen tumorer. I mange neoplasmer PTEN sletning samarbejder med andre genetiske vekslen at forbedre tumorigenese og kan bestemme aggressiv klinisk opførsel af tumor (f.eks anaplastisk thyroidea karcinomer eller grad IV invasiv astrocytomer) [12].

Fordi AKT-vejen dikterer flere nedstrøms processer, herunder inhibering af apoptose, tumor-celleproliferation [13], og DNA-reparation [14], og er også kendt for at være forbundet med radioresistance mekanismer, såsom iboende radioresistance og hypoxi [15], inaktivering af PTEN kan påvirke effektiviteten af anticancer-terapi.

Disse faktorer danner grundlag for en øget interesse i PTEN og andre elementer af AKT vej som de potentielle prognostiske og prædiktive markører i kombineret modalitet behandling, samt de mål for nye lægemidler [16 ].

Mens de molekylære funktioner PTEN i cellen er relativt veletablerede, er der kun få kliniske studier, der ville løse sin prognostisk og prædiktiv værdi i strålebehandling for kræft i hoved og hals. Vi har for nylig publiceret resultaterne af en undersøgelse i molekylære prædiktorer for effekten af ​​accelererede (7 dage om ugen) postoperativ strålebehandling. Det var baseret på en analyse af loco-regional kontrol satser opnået i en p-CAIR (postoperativ kontinuerlig accelereret bestråling) forsøg i hoved og hals [17] i forhold til ekspression af fem molekylære markører (EGFR, Ki-67, s-53 , nm23, og cyklin D) [18] og tilstedeværelsen af ​​HPV-infektion [19].

Metoder

Målsætninger

formålet med denne undersøgelse er at vurdere rolle PTEN som prognostisk og prædiktiv faktor i postoperativ stråleterapi for cancer i hoved og hals. Derudover har vi også undersøge forholdet mellem ekspressionen af ​​PTEN og markører tidligere undersøgt i denne kræfttype.

Klinisk baggrund af undersøgelsen

p-CAIR forsøg blev udført mellem 2001 og 2004 , og rekrutteret 279 patienter med høj risiko planocellulært kræft i strubehovedet (158 patienter) eller kræft i mundhulen /oropharynx (121 patienter). Kliniske kendetegn for hele gruppen af ​​279 patienter, en detaljeret præsentation af skalaen risikovurdering, behandling beskrivelse og det kliniske resultat er blevet præsenteret andetsteds [17]. Patienterne blev randomiseret til at modtage 63 Gy i brøkdele af 1,8 Gy, givet enten 5 dage om ugen (140 patienter: p-CF, postoperativ konventionel fraktionering) eller 7 dage om ugen (139 patienter: p-CAIR).

for nylig præsenterede vi analyse af immunhistokemisk vurderede udtryk for fem molekylære markører (EGFR, nm23, Ki-67, p53 og cyklin D1) [18] og Real-Time PCR-vurderet tilstedeværelsen af ​​HPV-infektion [19] i forhold til resultatet af forsøget. I forbindelse med PTEN vurdering, var det muligt at opnå materiale fra 147 ud af 279 patienter, som oprindeligt blev indskrevet. De opfølgende data er blevet opdateret i nærværende undersøgelse og viser status af patienterne fra januar 2010 (median follow-up tid: 87 måneder).

Vi bemærker, at opdateringen ikke påvirker den kvalitative resultatet af analysen, fordi nye loco-regional gentagelser ikke er blevet registreret siden sidste offentliggørelse.

Deltagere

tabel 1 viser kliniske karakteristika af 147 patienter inkluderet i analysen. De generelle kendetegn ved den analyseres i nærværende undersøgelse undergruppe afveg ikke væsentligt fra populationen af ​​279 patienter [17].

De fleste personer, der deltager i begge arme af undersøgelsen var mænd ( -90%). En sådan udbredelse køn er repræsentativ for en population af HNSCC i Polen og er forbundet med rygevaner og alkoholforbrug.

Det er vigtigt, at risikofaktorer for tilbagefald var jævnt fordelt mellem de forsøg arme. Den faktiske gennemsnitlige samlede strålebehandling tid blandt 131 patienter var 48,4 dage (SD = 6,3) i CF vs. 35,6 (SD = 6,8) i p-CAIR. Fire patienter i p-CF og fire i p-CAIR modtog totale strålingsdoser lavere end planlagt på grund af forværrede generelle præstation før eller under strålebehandling. Fire patienter i p-CF og tre i p-CAIR modtog totale doser højere end i protokollen, på grund af lokale /nodal tumor progression under behandlingen eller behandlingsplanlægning. En patient i p-CAIR arm døde før strålebehandling blev startet. De øvrige 131 patienter fik 63 Gy i 1,8 Gy brøkdele. Ingen af ​​patienterne modtog kemoterapi. Analysen, som vist, blev udført på en intention-to-treat basis.

Analysen af ​​PTEN udtryk

PTEN udtryk mønster blev undersøgt immunhistokemisk i formalin-fikseret, paraffin-indlejret tumor prøver fra alle patienter indrulleret.

det monoklonale, kanin, anti-human PTEN-antistof, klon 138G6, dannet mod de sidste 100 C-terminale aminosyrer af proteinet, blev anvendt i alle analyser (Cell Signaling Technology, Denver ). PTEN særlige ved dette antistof blev bekræftet ved anvendelse Western blotting og immunhistokemi teknikker i flere cellelinier med kendt PTEN status. Immunfarvning blev udført ifølge standard retningslinier: fire-mikrometer snit blev skåret, anbragt på objektglas, deparaffiniseret, og rehydreret i xylen og i en gradueret række af ethanol. Epitopgenfinding blev udført i 20 minutter ved 98 ° C i Tris-buffer /EDTA 10 mmol /l, pH 9,0. Endogen peroxidaseaktivitet blev inaktiveret ved 3% opløsning af H

2O

2 i 5 minutter. Dernæst blev primært antistof påført på objektglassene (1:100 fortynding i Background Reduktion Antibody Diluent, Dako, Danmark) og inkuberet natten over ved 4 ° C. Endelig er en blanding af polymer konjugeret med peberrodsperoxidase og affinitetsoprensede gede anti-kanin Fab’-antistoffragmenter og DAB kromogen blev anvendt til at visualisere reaktionen (EnVision + Dako, Danmark). Efter modfarvning i hæmatoxylin blev prøverne dækket med Aquamount (Dako, Danmark) monteringsmedium.

farvningsintensitet blev evalueret af en patolog, der var blindet for den kliniske oplysninger vedrørende patienter. Scoring blev udført ifølge en relativ semi-kvantificering fremgangsmåde oprindeligt beskrevet af Perren [20] og udbredt i mange nylige undersøgelser vedrørende hoved- og halskræft [21], melanom [22], bryst [3], [23], ovarie- [ ,,,0],24], og colorektale [25] cancere. Repræsentative områder af tumor blev udvalgt og scorede under oprindelige forstørrelse × 200. Objektglas blev klassificeret i to grupper, afhængigt af farvningsintensitet af tumorceller i forhold til PTEN ekspression i tilstødende normalt udseende epitel eller stroma, som også tjente som en intern, positiv kontrol. Tumorer viser ingen farvning eller med farvningsintensitet lavere end i tilsvarende normale væv blev klassificeret som LAV PTEN (fig. 1B), mens dem med forøget eller lig ekspression blev anset for at være høj PTEN (fig. 1A).

En serie af PTEN udtryk i tumorvæv: A – høj, B – lav. Synlig positiv farvning af den omgivende matrix i begge prøver. Original forstørrelse:. 100 ×

En serie af histologiske præparater med kendt PTEN status tjente som positiv kontrol. Yderligere tumor sektioner, behandles som beskrevet før, men uden primært antistof program, viste ingen farvning (negativ kontrol).

Etik

Etisk Komité Maria Skłodowska-Curie Memorial Cancer Center og Institut for Oncology, Gliwice Branch godkendt specifikt denne undersøgelse i henhold til de nationale bestemmelser. Et skriftligt, informeret samtykke blev opnået for alle deltagere i undersøgelsen.

Statistiske metoder

Loco-regional fiasko blev defineret som en gentagelse af kræft på den primære tumor, i halsen eller supraclavicular noder og fjernmetastaser som gentagelse andre steder. Overlevelseskurverne er afbildet under anvendelse af Kaplan-Meier-metoden, og sammenlignet ved anvendelse af Cox f testen. Under hensyntagen til den sonderende Formålet med denne forskning og det relativt lille antal patienter, blev Cox f test anses for at være mere egnet til afprøvning forskellene mellem to grupper, end det var mere almindeligt anvendt log-rank test, der er designet til anvendelse i større undersøgelser. For yderligere at udforske den prognostiske betydning af variable af betydning, blev udført en univariate og multivariat Cox proportional hazard regressionsanalyse. Kun de variabler, der optrådte statistisk signifikant i univariat analyse blev inkluderet i multivariate model. Modellen blev optimeret ved hjælp af en baglæns trinvis regression.

Resultater

Den prognostiske værdi af PTEN udtryk

Lav PTEN udtryk blev påvist i 88/147 tumorer (59,9%). Blandt 74 patienter med larynx cancer, 46 (62,2%) havde en lav ekspression af PTEN forhold til 42/73 (57,3%) patienter med kræft i mundhulen /oropharynx. Hverken T fase (p = 0,10), eller N scenen på diagnose (p = 0,86) var forbundet med PTEN ekspression, som vurderet af U-Mann Whitney testen. PTEN udtryk blev dog væsentligt påvirket af køn af patienterne. Lav PTEN udtryk blev påvist i 4/15 (26,7%) kvinder, sammenlignet med 84/132 (63,6%) mænd (p = 0,006, U-Mann Whitney test).

Loco-regional tumor kontrol var meget påvirket af PTEN udtryk: 5-år var LRC 52,3% hos patienter med lavt PTEN ekspression, sammenlignet med 80,9% hos patienter med høj PTEN ekspression (p = 0,0007, figur 2A.). Den prognostiske betydning af PTEN var tydelig både for lokal styring (5-års LC 63,9% vs. 84,8% for lav vs høj PTEN, p = 0,01) og for regionale (nodal) kontrol (5-års NC 74.6% vs. 87,9 % for lav vs høj PTEN, p = 0,05).

Loco-regional kontrol (A), fjernmetastaser overlevelse (B), og frihed fra sekundær cancer (C) ifølge PTEN udtryk i 147 patienter med høj risiko HNSCC behandlet i p-CAIR retssag.

Fem-års metastaser overlevelse var 81,4% hos patienter med lavt PTEN udtryk, vs. 84,3% hos patienter med høj PTEN udtryk ; forskellen syntes ikke signifikant (p = 0,49, Fig. 2B). Desuden blev den akkumulerede sats på metachronous tumorer ikke signifikant påvirket af PTEN udtryk (p = 0,15, Fig. 2C).

Den prædiktive værdi af PTEN udtryk

Da p-CAIR forsøg designet at sammenligne loco-regional tumor kontrol i accelereret vs. konventionel postoperativ strålebehandling, var det muligt at vurdere den prædiktive potentiale PTEN udtryk i forhold til fraktionering. Det kliniske resultat i en delmængde af 147 patienter viste repræsentant for udfaldet observeret i alle 279 patienter: 5-års loco-regional tumor kontrol var 57,6% i CF, sammenlignet med 70,6% i p-CAIR; forskellen var ikke statistisk signifikant (fig. 3A, p = 0,19).

lokalregional kontrol (LRC), ifølge fraktionering i undergruppe af 147 patienter fra p-CAIR forsøg anvendes i den foreliggende undersøgelse ( A), LRC ifølge fraktionering og ekspression af PTEN i undergruppe af 147 patienter fra p-CAIR forsøg anvendt i den foreliggende undersøgelse:. HIGH PTEN ekspression (B), LAV PTEN ekspression (C)

i en undergruppe af 88 patienter med lav PTEN ekspression, var 5-års LRC 47,2% i CF, sammenlignet med 56,2% i p-CAIR (fig. 3C, p = 0,19). I en undergruppe på 59 patienter med forhøjet PTEN ekspression, var 5-års LRC 70,8% i CF, sammenlignet med 92,7% i p-CAIR (fig. 3B, p = 0,016). Således blev lav PTEN Udtryk med relation til ikke blot at ugunstige LRC, men også til manglende forbedring i LRC fra accelereret fraktionering.

PTEN versus andre variabler og markører

udtryk for PTEN korreleret hverken med HPV-infektion, eller med ekspression af nogen af ​​fem tidligere undersøgte markører (EGFR, nm23, Ki-67, p53, cyclin D1), som angivet ved p . 0.05 i alle udført U-Mann Whitney test

A multivariate model designet til at vurdere en uafhængig prognostisk betydning af variabler af potentiel betydning for LRC oprindeligt indarbejdet flere faktorer, herunder udtryk for PTEN, EGFR, nm23, Ki-67, s-53, og cyklin D1; kliniske variabler som alder, køn, performance status, tumor websted; og klassiske patologiske risikofaktorer, såsom hals knude involvering, margener, og tumor klasse. HPV-infektion blev ikke indarbejdet i modellen, fordi kun ni patienter syntes at være HPV-positive i denne gruppe, og alle var lokalt styret (ingen ucensurerede data i HPV-positive gruppe) [19].

Efter vi elimineret ikke-signifikante og forstyrrende variabler fra modellen, kun fire variable viste sig at være betydeligt og uafhængigt relateret til LRC: PTEN udtryk (RR = 2,84, p = 0,004), hals knude involvering (RR = 2,05, p = 0,035), EGFR udtryk (RR = 1,91, p = 0,033) og nm23 udtryk (RR = 1,88, p = 0,041, tabel 2).

diskussion

PTEN som prognostisk markør

Adskillige kliniske og patologiske faktorer er blevet identificeret til at prognosticere risiko for tilbagefald efter operation for lokalt fremskreden HNSCC [26], [27]. Disse faktorer anvendes til at vælge kandidater til postoperativ strålebehandling og optimere strålingsdosis. For nylig baseret på resultater af store randomiserede kliniske forsøg [28], [29], er patienter med høj risiko for tilbagefald i betragtning til postoperativ radiochemotherapy. De “traditionelle” risikofaktorer såsom positive kirurgiske margener, invasion af mere end en hals knude, extracapsular spredning af nodal sygdom, og mundhule /svælg primær tumor websted, undtagen T1N0 blev blandt kriterierne for en p-CAIR retssag [udvælgelse ,,,0],17].

Nylige fremskridt inden immunkemi og molekylærbiologi har lettet identifikation af nye markører, der hjælper til prognosticere risikoen for tilbagefald. Mindst to af dem (HPV-infektion og EGFR) er gradvist mere anerkendt i en rutinemæssig klinisk praksis [30], [31]. Resultaterne af den foreliggende undersøgelse tyder på, at PTEN kan blive en anden markør af stor klinisk betydning.

I vores undersøgelse gik vi videre og testet en multivariat model, herunder andre potentielle markører (tabel 2). PTEN syntes at have en stærkere prognostisk værdi end nogen af ​​de andre variable i betragtning, herunder hals node engagement og EGFR. Kun én af de variabler, der anvendes i en “traditionel” evaluering af risikofaktorer fortsat betydelig, når de konfronteres med nye markører. Vi kunne ikke sammenligne den prognostiske værdi af PTEN og HPV-infektion i den foreliggende undersøgelse, fordi manglen på ucensureret data i HPV-positive gruppe hinder for en sådan analyse. Ikke desto mindre er manglende sammenhæng mellem PTEN udtryk og HPV-infektion indikerer, at disse to variable er uafhængige.

Analysen, som vises, se vores nyligt offentliggjorte resultater på prognostiske og prædiktive værdi af fem molekylære markører (EGFR, Ki-67, P53, nm23, og cyclin D) [18], og tilstedeværelsen af ​​HPV-infektion [19]. Vi havde foreslået en prognostisk indeks for tilbagefald efter postoperativ strålebehandling, der indarbejdet tre faktorer største betydning: udtryk for EGFR, udtryk for nm23, og invasion af halsen knuder [18]. Resultaterne af denne analyse og de nye data om HPV-infektion [19], [30] få os til at foreslå en ny, forbedret score, som ville inkorporere fem risikofaktorer for fremmest betydning for udfaldet af postoperativ strålebehandling for HNSCC:

fravær af HPV-infektion i tumor

lav PTEN udtryk

hals knude involvering

høj EGFR

høj nm23 udtryk

Figur 4 illustrerer LRC i p-CAIR forsøg, i forhold til antallet af sådanne definerede risikofaktorer. Fordi ikke alle patienter, der indgik i den foreliggende undersøgelse havde etableret HPV-status, kun data fra 123 patienter med kendt status for alle fem markører blev anvendt til at plotte grafen. Ingen af ​​patienterne havde nul risikofaktorer i den analyserede gruppe, mest fordi forekomsten af ​​HPV-infektion var lav (6,9%) i denne gruppe. Vi forventer, at igangværende forskning i molekylære markører i kræft udført af andre forskere vil bidrage til at validere og forbedre denne prognostisk score

Loco-regional kontrol i forhold til antallet af følgende risikofaktorer:. Fravær af HPV-infektion i tumor , lav PTEN udtryk, hals knude engagement, høj EGFR, og høj nm23 udtryk. Analysen var begrænset til 123 patienter fra p-CAIR forsøg med kendte HPV-status og kendt status for de øvrige 4 markører.

PTEN som en prædiktiv markør

Adskillige kliniske undersøgelser viste potentialet af molekylære profiler til at forudsige gavn af accelereret strålebehandling [31] -. [33], herunder vores tidligere rapport om molekylære markører i p-CAIR forsøg [18]

resultaterne af den foreliggende undersøgelse viser, at ekspressionen af ​​PTEN kan være nyttig til at forudsige ydelsen fra accelereret strålebehandling:. patienter med høj PTEN ekspression har et gunstigt resultat efter accelereret postoperativ strålebehandling, sammenlignet med patienter behandlet med konventionel fraktionering og til dem med lav PTEN ekspression (fig 3B , C)

Den kliniske betydning af dette fund er begrænset af nuværende evidensbaseret recept praksis, der ville favorisere postoperativ radiochemotherapy løbet postoperativ strålebehandling alene i høj risiko HNSCC [27] – [29].. Men de nye data om molekylære markører og HPV-infektion rejser flere spørgsmål end faktiske behov for kemo- og stråleterapi i patienter, der ville sandsynligvis, har positive resultat efter postoperativ strålebehandling alene. Vi håber, at fremtidige kliniske forsøg og forskning på molekylære markører yderligere vil løse dette vigtige problem.

Den biologiske baggrund af den foreliggende undersøgelse

En mulig rolle PTEN tab i patogenesen af ​​HNSCC har været beskrevet af Califano [34] i sin trinvis model af carcinogenese. Senere blev et helt spektrum af funktionelle og strukturelle dysfunktioner i PTEN i HNSCC demonstreret, herunder mutationer, tab af heterozygocity (LOH), og epigenetisk inaktivering [35] – [38]. De fleste af disse lidelser føre til en nedsættelse eller tab af protein udtryk, og dermed give begrundelsen for defekte PTEN detektion ved immunhistokemi.

For nylig har en ny model for PTEN rolle i udviklingen af ​​kræft blevet foreslået og verificeret in vivo . Ifølge denne model, subtile reduktion (20%) i dosis af PTEN, ændret biologi kræft og ekspressionen profiler af gener involveret i en cancercelleproliferation [39], [40].

På grund af den forskelligartet ekspression af PTEN i normale væv og individuelle tumorer, samt den afgørende rolle subtile variationer af PTEN koncentration for cancerfænotypen udvikling [12], er der behov for en mere sofistikeret immunhistokemi scoringsmetode. En strategi, foreslået af Perren og kolleger [20], til at anvende normale væv eller stroma som en fælles reference giver en cut-off point for normal /dysfunktionel PTEN sikrer sag til sag sammenlignelige resultater og blev gennemført i vores undersøgelse. Samme metode blev brugt af Lee og medarbejdere [21], der undersøgte PTEN udtryk i patienter med tungen kræft og viste, at tab af PTEN er forbundet med kortere samlet overlevelse og event-overlevelsestid. Desuden PTEN status forblev en selvstændig indikator for dårligt resultat sammenlignet med tumor scene og nodal status. Ligeledes har betydning PTEN udtryk som en markør for positivt resultat i kombinerede modaliteter omfatter bestråling blevet rapporteret for mange andre kræftformer, herunder astrocytomer [41], livmoderhalskræft [4], [42] og brystkræft [20], prostata [7 ], [8] og kolorektal cancer [43].

Flere tvetydige resultater er blevet vist ved Tsutsui [23] og Perez-Tonorio [3] i forbindelse med brystkræft. De påviste, at prognosen tydeligere afhang kombinerede status PTEN /P53 og PTEN /S-fasen -fraktion.

Derimod Pattje og kolleger [44] viste for nylig, at der er en øget risiko for locoregional fiasko efter postoperativ strålebehandling hos patienter med hoved og hals pladecellekræft udtrykker PTEN. Som proof of concept, viste forfatterne en formindsket radiosensitivitet i en human embryonal nyre-cellelinie (HEK293) med et overudtrykt PTEN gen. Trods de overfladiske ligheder med de foreliggende undersøgelser, herunder tumorsteder, behandlingsmodalitet eller HPV-infektion frekvens, der er mange væsentlige forskelle i forsøgsgruppen og design, mellem vores tilgang og den ovennævnte forskning. Den foreliggende undersøgelse blev udført i et prospektivt indstilling klinisk forsøg, der sikrer nøje definerede kriterier patientrekruttering, ensartethed af doser, og fraktionering blandt patienterne. Også køn personer, der deltager i begge arme af forsøget var stærkt skæv mod mænd (-90%) og korreleret med tobaksrygning, i modsætning til den citerede papir, hvor begge køn blev fordelt ligeligt.

En anden metode immunhistokemi scoring er en anden væsentlig forskel, som kunne bidrage til en modstridende resultat. Pattje og kolleger brugte en mindre populær, absolut metode til semi-kvantificering [44], [45], hvor enhver positiv farvning over baggrund blev betragtet som positive. Dette faktum er af afgørende betydning i lyset af de nye beviser, der viser, at selv et lille fald af PTEN aktivitet kan ændre biologi tumor og at fuldstændig tab af funktionalitet kan føre til den modsatte effekt, så en subtil variation [40] i dets aktivitet. Den metode implementeres af Pattje kan forårsage, at kun sager med fuldstændigt tab af protein-ekspression er klassificeret som PTEN-dysfunktionel. I den foreliggende undersøgelse blev en relativ semi-kvantificering anvendte metode; således, tumorer med nedsat PTEN ekspression i forhold til normalt væv blev betragtet som PTEN-dysfunktionel. En sådan fremgangsmåde synes at være i overensstemmelse med nye koncepter for PTEN funktion. Det er også værd at bemærke, at den relative semi-kvantificering kan være vanskeligt at gennemføre i tilfælde af vævet matrix anvendes i Pattje undersøgelse, på grund af de sparsomme indhold af normalt væv i TMA kerner.

Et interessant koncept, nemlig “PTEN paradigme” eller “obligat haplo-insufficiens” indført for nylig, kan give en ekstra forklaring på disse modstridende resultater. Ifølge denne teori, PTEN cellulære funktioner er tæt bundet til P53 status. I tilfælde af fuldstændig PTEN tab, funktionelt p53 dirigerer cellen til akut cellulær ældning. Således heterozygot tab af PTEN er mere tumorigen end fuldstændigt tab af PTEN i forbindelse med vildtype p53. Dette mønster ændrer i fastsættelsen af ​​muteret p53 celler, der ikke er i stand til at aktivere P53 ikke undergår PTEN tab-induceret cellulære aldring [46]. Som et resultat, fuldstændig tab af PTEN samarbejder synergistisk med delvist eller fuldstændigt tab af p53 [47]. Sandsynligvis på grund af det store forbrug af tobak og lav andel af HPV-positive tilfælde (som er gensidigt udelukkende til p53-mutationer), en prævalens af p53 mutationer i de undersøgte patientgrupper var høj (75,4%, hvilket bekræftes af immunhistokemi) [18]. I overensstemmelse med PTEN paradigme, kan forventes synergistiske virkninger i et tilfælde af PTEN /P53-defekte patienter, hvilket fører til den gunstige prognose i PTEN-positive individer.

Som konklusion resultaterne af den foreliggende undersøgelse og andre undersøgelser viser, at den kliniske anvendelighed af PTEN som prognostiske eller forprogrammeret markør for strålebehandling er endnu ikke håndfast defineret. Derfor er der et klart behov for ny forskning, der yderligere vil løse disse interessante spørgsmål med henvisning til kombineret behandlingsmodaliteter.