PLoS ONE: Nuclear Factor-Kappa B Inhibition kan øge apoptose af differentierede Thyroid Cancer celler induceret af 131I

Abstrakt

Målsætning

For at vurdere ændringer i nuklear faktor-kappa B (NF-KB) under radioaktivt jod 131 (

131I) terapi og om NF-KB-hæmning kunne øge

131I-induceret apoptose i differentieret kræft i skjoldbruskkirtlen (DTC) celler på en synergistisk måde.

Metoder

Tre humane DTC cellelinier blev anvendt. NF-KB-inhibering blev opnået ved anvendelse af en NF-KB inhibitor (Bay 11-7082) eller ved p65 siRNA transfektion. Methyl-thiazolyl-tetrazolium-assayet blev udført til vurdering cellernes levedygtighed. DNA-bindende assay, luciferase reporter assay, og Western blot blev vedtaget at bestemme funktion og udtryk ændringer af NF-KB. Derefter NF-KB regulerede anti-apoptotiske faktorer XIAP, cIAP1, og Bd-XL blev målt. Apoptose blev analyseret ved Western blot for caspase 3 og PARP, og ved flowcytometri samt. En iodid optagelse assay blev udført for at bestemme, om NF-KB-hæmning kan påvirke radioaktivt iodid optagelse.

Resultater

methyl-thiazolyl-tetrazolium assay viste signifikant fald af levedygtige celler ved kombinationsbehandling end ved mono-terapi. DNA-bindingsassay og luciferase reporter assay viste forbedrede NF-KB-funktion og reportergenassays aktiviteter på grund af

131I, men signifikant undertrykkelse blev opnået ved NF-KB-inhibering. Western blot viste sig

131I kunne øge nukleare NF-KB-koncentration, mens NF-KB-inhibering reduceret NF-KB-koncentration. Western blot viste også signifikant opregulering af XIAP, cIAP1, og Bd-XL efter

131I terapi. Og hæmning af NF-KB i væsentlig grad kan nedregulere disse faktorer. Endelig blev synergi induceret af kombineret behandling vises af betydelige forbedringer af spaltet caspase 3 og PARP fra Western blot, og Annexin V positiv farvning fra flowcytometri. Den jod optagelse assay viste ikke signifikante ændringer, når NF-KB blev hæmmet.

Konklusion

Vi viste, at

131I kunne fremkalde NF-KB-aktivering, hvilket ville dæmpe

131I virkningsfuldhed i DTC celler. NF-KB-hæmning af Bay 11-7082 eller ved p65 siRNA transfektion var effektive til at undertrykke NF-KB reguleret antiapoptotiske forandringer og i kombineret regimen apoptose blev opnået synergistisk

Henvisning:. Meng Z, Lou S, Tan J, Xu K, Jia Q, Zheng W (2012) Nuclear Factor-Kappa B Inhibition kan øge apoptose af differentierede Thyroid Cancer celler induceret af

131I. PLoS ONE 7 (3): e33597. doi: 10,1371 /journal.pone.0033597

Redaktør: Antimo Migliaccio, II Università di Napoli, Italien

Modtaget: 7. oktober, 2011; Accepteret: 12. februar 2012; Udgivet: 16 marts, 2012