PLoS ONE: PRR11 Er prognostisk markør og potentielle Oncogene i patienter med gastrisk Cancer

abstrakt

PRR11 er en potentiel kandidat onkogen, der har været impliceret i patogenesen af ​​lungekræft, men rollen som PRR11 i gastrisk kræft er endnu uklart. I den foreliggende undersøgelse undersøgte vi rolle PRR11 i gastrisk cancer ved at vurdere dets ekspression status i prøver fra en kohorte af 216 patienter med gastrisk cancer. PRR11 viste sig at være overudtrykt i 107 (49,5%) patienter ved immunhistokemi af væv microarrays genereret med patientprøver. Endvidere blev PRR11 overekspression fundet at korrelere signifikant med clinicopathologic funktioner såsom tumorinvasion, tumor differentiering og sygdomsstadie. Survival analyse af kohorten afslørede, at PRR11 er en uafhængig prognostisk faktor for mavecancerpatienter. PRR11 blev stabilt stumme i en gastrisk carcinom cellelinje under anvendelse af et shRNA tilgang, og behandlede celler viste nedsat cellulær proliferation og kolonidannelse in vitro og cellevækst in vivo, companied ved nedsat ekspression af CTHRC1 og forøget ekspression af LXN, proteiner involveret i tumorprogression. Evaluering af humane gastriske cancer prøver viste, at PRR11 ekspression også blevet forbundet med forøget CTHRC1 og faldt LXN ekspression. Disse data indikerer, at PRR11 kan bredt aktiveres i human gastrisk kræft og er i overensstemmelse med den hypotese, at PRR11 fungerer som et onkogen i udviklingen og progressionen af ​​mavekræft

Henvisning:. Song Z, Liu W, Xiao Y Zhang M, Luo Y 1, Yuan W, et al. (2015) PRR11 Er prognostisk markør og Potentiel Oncogene i patienter med gastrisk kræft. PLoS ONE 10 (8): e0128943. doi: 10,1371 /journal.pone.0128943

Redaktør: keping Xie, The University of Texas MD Anderson Cancer Center, UNITED STATES

Modtaget: Januar 13, 2015; Accepteret: May 1, 2015; Udgivet: 7 August, 2015

Copyright: © 2015 Song et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden for papir og dens støtte Information filer

finansiering:.. forfatterne har ingen støtte eller finansiering til at rapportere

konkurrerende interesser:. forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

mavekræft (GC) er den fjerde mest almindelige malignitet på verdensplan med en anslået forekomst af en million nye tilfælde i 2008, tegner sig for 8% af nye kræfttilfælde. Dødeligheden i forbindelse med GC er også overvældende, med 0,73 millioner dødsfald tegner sig for 10% af de samlede kræftrelaterede dødsfald anslået for 2008. Notatet, ca. 70% af nye GC tilfælde og GC-relaterede dødsfald sker i udviklingslande [1] . Selv om der har været vigtige medicinske fremskridt i diagnose og behandling af GC i de seneste årtier, denne sygdom er fortsat den næsthyppigste årsag til cancer-relaterede dødsfald i verden delvis skyldes, at det er almindeligt påvises i patienter med sent stadie sygdom, ophævelse succesfulde helbredende kirurgi for mange patienter [1, 2].

Mens forekomsten af ​​GC satser er faldet betydeligt i Nordamerika og i de fleste Nord- og Vesteuropa, er sygdommen stadig udbredt i Østeuropa , Rusland, Central- og Sydamerika, og Østasien [3]. I øjeblikket er der flere nye vævsbaseret prognostiske og terapeutiske markører for mavekræft. Disse omfatter human epidermal vækstfaktor receptor-2 (HER2) [4, 5], vaskulær endotelvækstfaktor receptor 2 (VEGFR-2) [6], excision reparation cross-komplementering gruppe 1 (ERCC1) [7], B-celle lymfom-2 (Bcl-2) og Ki-67 [8]. Men de fleste af disse markører er ikke rutinemæssigt blev anvendt i klinisk praksis, fordi de ikke præcist og effektivt forudsige udfaldet eller terapeutisk effektivitet. Der er i øjeblikket en stor klinisk behov for nye molekylære markører, der kan forbedre påvisning, diagnosticering og prognosticering af mavekræft og eliminerer behovet for dyre og ineffektive endoskopiske screeningsmetoder. I 2013 blev der prolin-rige protein 11 (PRR11) identificerede som en ny gen og funktionelt karakteriseret af Ji Ying et al. der opdagede, at PRR11 har en vigtig rolle i både cellecyklusprogression og tumorigenese. Dette protein, grundet dens oncogene rolle, er blevet anført som et potentielt hidtil ukendt mål i diagnosticering og behandling af human lungecancer. Gennem regulering vigtige gener involveret i cellecyklus og tumorigenese, PRR11 deltager i initiering og progression af lungekræft [9] og epitelial-til-mesenkymale overgang i brystkræft [10].

Men på nuværende tidspunkt, viden om den rolle, som PRR11 i mavekræft er ikke tidligere blevet rapporteret. I denne undersøgelse, vi vurderet PRR11 udtryk status i en kohorte af 216 patienter med GC og analyseret forholdet mellem PRR11 udtryk og klinisk-patologiske parametre for at afgøre, om PRR11 kan forudsige GC patient prognose. Desuden nedregulering af PRR11 i multiple gastriske carcinoma cellelinier inhiberede cellulær proliferation rater, kræft cellemigration i celle kolonidannelse, og tumorvækst in vivo eksperiment. Disse resultater er vigtige, fordi de er i overensstemmelse med tidligere hypoteser, PRR11 kan være en vigtig onkogen faktor i en række forskellige kræft.

Metoder

Kohorte udvælgelse og væv erhvervelse

kohorte bestod af 216 patienter med GC, der fik kirurgiske resektioner ved Changhai Hospital i Shanghai, Folkerepublikken Kina, fra 2001 til 2005. Patienternes opfølgning blev modtaget i kliniske rapporter indtil marts 2010, og hver patienterne blev bekræftet at have tilstrækkelig mængde GC butik til konstruktion af et væv microarray (TMA) Blandt patienten indsamlede oplysninger var karakteristika, herunder alder, køn, tumorstørrelse, T stadium, N stadium M fase, og tumor differentiering (tabel 1). Alle vævsprøver blev opnået efter patienter skal skriftligt informeret samtykke. Det eksperimentelle design blev godkendt af Changhai Hospital Board Institutional Review forud for undersøgelsen.

TMA og Immunhistokemi og Scoring

Tissue mikroarrays blev konstrueret på en måde, der tidligere [11]. Kort fortalt H HPA023923, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), anti-LXN (Latexin) (1: 100; GT39981-16; Sigma-Aldrich); anti-CTHRC1 (1: 100; 11165-1G12; Sigma-Aldrich). En IHC farvning S-P-kit (KIT-9710; MAIXIN Biologi Corporation, Fuzhou, Kina) blev anvendt til at visualisere antistofbinding på dias. Kontrastfarvning udførtes med hematoxylin. IHC-farvning af PRR11, LXN, og CTHRC1 i disse prøver blev vurderet ved anvendelse af et Olympus CX31 mikroskop (Olympus, Center Valley, PA). Tumorer, der demonstrerede 10% farvning for PRR11 blev betragtet som havende positive udtryk status

cellelinjer og dyrkningsbetingelser

Proteinekspression blev opdaget ved hjælp af de fem GC cellelinier SGC7901, MKN45, MKN28, HGC27, og MGC803, der blev købt fra Cell Bank, Chinese Academy of Sciences. GC cellelinjer blev opretholdt i Dulbeccos modificerede Eagles medium (DMEM) (Hi-klon) plus 10% FBS ved 37 ° C med 5% CO2.

Knockdown af PRR11 ved lentiviral vektor-loaded shRNA i GC-celler

Pakning af lentiviral partikel blev udført på følgende måde. Kort beskrevet lentivirus ekspressionsplasmid indeholdende små interfererende RNA (5′-ACGCAGGCCUUAAGGAGAATT-3 ‘) målretning PRR11 blev konstrueret ved GENECHEM Corporation (Shanghai, Kina) og anvendt til infektion af GC-celler i nærvær af 6 ug /ml polybren. Inficerede gastriske kræftceller blev udvalgt til at bruge puromycin, og knockdown af PRR11 blev bekræftet ved immunoblotting cellelysaterne med anti-PRR11 antistof.

Celleproliferationsassay og kolonidannelse assay

Celler med stably- transficerede PRR11-shRNA (PRR11-KO) eller tom vektor (kontrol) blev podet i plader med 96 brønde ved en densitet på 5.000 celler pr. CCK8 assays (Dojindo Kumamoto, Japan) blev udført som et mål for spredning, der blev beregnet som forholdet mellem absorbansen ved 48h sammenlignet med den ved 24 h.

kolonidannelse assays blev udført på en tilsvarende måde. PRR11-KO og kontrolceller blev podet i plader med 6 brønde i tre eksemplarer ved en densitet på 500 celler pr. To uger efter inkubation blev kolonierne fikseret med methanol /acetone (1: 1), farvet med krystalviolet og talt. Kolonier med mindre end 50 celler pr blev anset negativt for kolonidannelse.

Western blot

Samlet protein blev fremstillet af lysater af SGC7901, MKN45, MKN28, HGC27, og MGC28 gastrisk karcinom cellelinjer . Western blots blev udført på standard måde under anvendelse af et gede-polyklonalt antistof mod humant PRR11 (fortynding 1: 1000), LXN (fortynding 1: 1000), CTHRC1 (fortynding 1: 1000) og en peberrodsperoxidase-konjugeret anti-ged IgG-antistof fortyndet 1: 10000 som det sekundære antistof. Ekspression af ß-actin blev vurderet til at normalisere målingerne af proteinekspression. Proteinerne blev visualiseret ved anvendelse af Amersham forøget kemiluminescens ifølge producentens instruktioner med Billede J software.

Real-Time Quantitative Revers transkription (QRT) -PCR Assay

Real-time kvantitativ PCR-reaktion blev udført under anvendelse SYBR1 Premix Ex TaqTM kit (Takara, Kyoto, Japan) ifølge producentens instruktioner og konventionelle PCR-assays blev udført som tidligere beskrevet [12]. GAPDH blev anvendt som en intern standard. PCR cyklus protokol anvendt følgende parametre: 95 grader i 1 minut, 40 cykler af 15 sekunder ved 95 grader og 31 sekunder ved 60 grader. Den fold-ekspression blev beregnet ved anvendelse af ACt metoden. Reaktioner og analyse blev udført ved anvendelse af ABI PRISM 7300 PCR og detektionssystem (Applied Biosystems, Carlsbad, CA). De anvendte primere er som følger: PRR11: fremad: 5’CGT ATC TGC CAC CGA GAA CTT-3 ‘, omvendt: 5’GAG ATG GTC TTC AGT GCT TCC T-3′; GAPDH: fremad: 5’-TGA CTT CAA CAG CGA CAC CCA-3 ‘, omvendt:. 5’CAC CCT GTT GCT GTA GCC AAA-3

Dyremodeller

Subkutan tumor xenograft modeller blev udført for at vurdere in vivo-funktionen ændring af PRR11-knockdown i SGC-7901-cellelinje. PRR11-KO SGC-7901 celler og kontroller (1 × 106 celler i 0,1 ml PBS) blev injiceret subkutant i venstre flanke af 4 uger gamle Balb /c nøgne mus (Animal center af Anden Military Medical University) ( n = 5). Tumor diameter blev målt hver tredje dag. To uger efter implantation blev alle dyr aflivet. Tumorerne blev opsamlet og tumorvolumen (mm3) blev beregnet som V = 0,52 (længde x bredde x dybde). Denne dyreforsøg blev godkendt af Animal Ethics Committee af Anden Military Medical University.

Statistisk analyse

Statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS 13.0 software (SPSS, Chicago, IL, USA). Forholdet mellem ekspressionen af ​​PRR11 og klinisk-patologiske karakteristika blev evalueret under anvendelse chi square distributioner. GC patienter blev stratificeret efter udtrykket status PRR11, LXN, og CTHRC1, og overlevelse analyse blev udført ved hjælp af Kaplan-Meier kurver. Univariate og multivariate analyser var baseret på en Cox proportional hazard regressionsmodel. De variabler, der viser signifikans (p 0,05) ved univariat analyse blev vedtaget, når multivariat Cox proportionel risiko analyse blev udført. Kvantitative variabler blev analyseret under anvendelse af t-test. Eksperimentelle data blev præsenteret som gennemsnittet af hver betingelse ± S.D. og p 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.

Resultater

PRR11 udtryk status korrelerer med vigtige klinisk-patologiske karakteristika af mavekræft

udtryk for PRR11 blev vurderet ved immunhistokemi i en kohorte af 216 patienter med gastrisk karcinom. Lav intensitet cytoplasmatisk PRR11 immunofarvning var synlige i de normale epithelceller (fig 1A). Høj intensitet PRR11 immunfarvning blev observeret specifikt i gastriske cancerceller, og farvningsintensitet var variabel mellem patienter (Fig 1B og 1C). Af disse tumorprøver, 107 ud af 216 (49,5%) positiv PRR11 udtryk og 109 sager viste PRR11 negativ udtryk (figur 1C). Western blotting og RT-PCR-assay bekræftede yderligere, at PRR11 protein og mRNA blev forøget i tumorprøver sammenlignes med den i de noncancerous væv (Fig 1D og 1E). Komplimentere disse resultater blev et relativt højt niveau af PRR11 proteinekspression niveau også påvist i fem GC cellelinjer, herunder MKN45, MKN28, SGC7901, HGC27, og MGC803 (S1 Fig).

(A, A1) Normal maveslimhinden viste svag farvning af PRR11; (B, B1) Positive farvning af PRR11 i gastrisk cancer; (C, C1) negativ farvning af PRR11 i gastrisk cancer. A1, B1, C1 er udvidelsen af ​​væv fra A, B, C, hhv. Oprindelig forstørrelse af A, B, C: 40 ×; Original forstørrelse på A1, B1, C1: 200 ×. (D) Western blotting afslørede forøget ekspression af PRR11 i tumorprøver (T) sammenlignes med den i noncancerous væv (N); (E) mRNA-niveauer af PRR11 i mavecancer væv (T) og normale væv (N).

PRR11 udtryk korreleret signifikant med antallet af klinisk-patologiske parametre såsom T stadium, graden af ​​tumor differentiering, og TNM fase (tabel 1). PRR11 ekspression blev ikke fundet at være forbundet med alder, køn, tumorstørrelse og N stadium. Disse resultater viser, at høje PRR11 proteinekspression er forbundet med en aggressiv fænotype af mavekræft.

PRR11 tumor ekspression er associeret med nedsat overlevelse i gastrisk kræftpatienter Salg

Blandt de 216 undersøgte patienter, 122 døde under opfølgningsperioden med en median samlet overlevelsestid på 51,5 måneder. Den gennemsnitlige overlevelsestid for patienter med negativ PRR11 proteinekspression var 74,5 måneder, mens den gennemsnitlige overlevelsestid for patienter med positiv PRR11 proteinekspression blev 46,4 måneder (Fig 2A).

(A) Overlevelse var signifikant længere hos patienter med tumor mangler udtryk for PRR11 (OS, 76,6 måneder) versus dem med positive PRR11 udtryk status (OS, 46,6 måneder; P 0,001). (B) En undergruppe analyse af fase I II patienter viste, at patienter med en positiv PRR11 udtryk status var forbundet med en kortere overlevelse varighed end patienter uden PRR11 udtryk (58.5mon vs. 97.9mon;

P

0,001). (C) En undergruppe analyse af fase III IV patienter viste, at positiv PRR11 overekspression var forbundet med en kortere samlet overlevelse end patienter uden PRR11 udtryk. (34.3mon vs. 51.3mon;

P

= 0,036)

univariat COX regression analyserne viste, at tumorstørrelse, tumor stadium, lymfeknuder positivitet, TNM stadie, tumor differentiering og PRR11 ekspression signifikant blev korreleret med en nedsat samlet overlevelse (tabel 2). Multivariat analyse bekræftede, at tumorstørrelse, tumor differentiering og PRR11 udtryk var uafhængig prognostisk indikator for den samlede overlevelse mavecancerpatienter (HR = 0,663; 95% CI: 0,406-0,961 for tumorstørrelse, HR = 0,545; 95% CI: 0,372-0,798 for PRR11, HR = 0,548; 95% CI: 0,376-0,801 for tumor differentiering)

Patienterne blev delt i to grupper, dem med TNM fase i /II og dem stadie III /IV, og. virkningen af ​​PRR11 status på overlevelse varighed blev vurderet. Denne undergruppe analyse viste, at resultaterne af patienter med PRR11 overekspression var værre end dem uden PRR11 overekspression enten i trin I /II (Fig 2B) eller i stadie III /IV (Fig 2C).

PRR11 udtryk er associeret med forøget cellulær proliferation og celle kolonidannelse in vitro og tumorvækst in vivo i SGC7901 gastriske carcinomceller

PRR11 blev stabilt stumme i en SGC-7901 cellelinie ved anvendelse lentiviral vektor-loaded PRR11 shRNA. Knockdown af PRR11 (PRR11-KO) blev bekræftet via Western blot-analyse, og virkningen af ​​PRR11-KO på cellulær proliferation og kolonidannelse blev evalueret. Betydelig udtømning af PRR11 i de transficerede celler blev observeret (Fig 3A), og nedregulering af PRR11 var forbundet med et dramatisk fald i både celleproliferation (Fig 3B) og celle kolonidannelse (Fig 3C) i denne cellelinie. Overraskende, PRR11 nedregulering fører til retarderet vækst af gastriske cancercellelinier in vivo (Fig 3D)

(A) Western blot-analyse af PRR11 ekspression ved 48 timer efter transfektion af PRR11-shRNA i SGC7901 celler; (B, C) Silencing af PRR11 inhiberer celleproliferation (B) og kolonidannende evne in vitro (C). (D) Silencing of PRR11 inhiberede tumor vokse in vivo. * P 0,05, ** P 0,01, ** P 0,01 betragtet som statistisk signifikant sammenlignet med kontrol

Knockdown af PRR11 resulterer i nedregulering af CTHRC1 og opregulering af LXN

Vi udførte Western blot-analyse for at undersøge, om ekspression af CTHRC1 og LXN blev ændret i PRR11-KO SGC-7901 gastrisk kræftceller. Resultaterne viste, at CTHRC1 blev nedreguleret og LXN blev opreguleret i PRR11-KO-celler sammenlignet med kontroller (Fig 4A). Yderligere co-ekspression analyse blev udført i GC tumorprøver under anvendelse af immunhistokemi (figur 4B). De IHC data bekræftede, at CTHRC1 udtryk var positivt associeret med PRR11 udtryk (r = 0,299, p 0,001). Og LXN udtryk var negativt associeret med PRR11 udtryk (r = -0,188, p = 0,005) i GC væv (Fig 4C)

(A) Western blot analyse, der viser, at CTHRC1 nedreguleres og LXN er opreguleret i PRR11-KO SGC07901 celler. (B) Ekspression af PRR11, CTHRC1 og LXN i patienternes-afledte gastrisk carcinom vævsprøver. (C) Korrelation analyse af PRR11, CTHRC1 og LXN udtryk. Disse resultater blev fortolket som at vise, at CTHRC1 udtryk er positivt associeret med PRR11 udtryk (r = 0,299, p 0,001). Og at LXN udtryk er negativt forbundet med PRR11 udtryk (r = -0,188, p = 0,005) i GC væv

diskussion

PRR11 er et relativt nyt protein molekylære der kan spille en rolle i kræft patogenese, og der er i øjeblikket kun få artikler, der beskriver PRR11 i lungekræft [13]. Mens PRR11 var efter sigende opreguleret i lungekræft, de mulige mekanismer til dette øgede udtryk er ikke blevet rapporteret, og desuden meget arbejde er nødvendigt at vurdere den kliniske betydning af PRR11. I et forsøg på at undersøge dette spørgsmål, blev den aktuelle undersøgelse udført for at karakterisere PRR11 ekspression i gastrisk karcinom sammen med nogen tilknytning til clinicopathologic karakteristika.

Vores undersøgelse viste, at både PRR11 mRNA og protein er opreguleret i GC væv sammenlignet med normal slimhinde; en konstatering, der understøtter ideen om en pro-onkogen rolle PRR11 i gastrisk karcinom. Desuden blev positivt udtryk for PRR11 signifikant associeret med en aggressiv caner fænotype, herunder tumorer med øgede mængder af invasion, øget tumor dedifferentiation og fremskreden sygdom stadie. Derudover har vi etableret en gastrisk carcinom cellelinie, hvori PRR11 stabilt slået ned. Denne cellelinie demonstrerer formindsket cellulær proliferation og væsentligt nedsat kolonidannelse i vores assays. Tilsammen disse resultater tyder på, at PRR11 proteinekspression kan spille en afgørende rolle i udviklingen og progressionen af ​​GC kræft.

TNM kræft iscenesættelse er alment accepteret klassifikationssystem i vejledende kræftbehandling og forudsige prognose. Ikke overraskende, patienter i vores undersøgelse med resektioner på et tidligere tidspunkt havde en længere overlevelse interval end dem med senere stadie sygdommen. For nylig har biologiske markører toppede interesse klinikere som en måde at vurdere /forudsige terapeutisk effektivitet og patientresultater. Nogle eksempler på sådanne markører, der i øjeblikket er i brug, er HER2, mTOR, og ANXA1 [14-16]. Vores undersøgelse understøtter en potentiel prognostisk rolle for måling PRR11 i gastrisk karcinom som Kaplan-Meier-analyser viste, at positiv ekspressionsniveauet af PRR11 var forbundet med dårlig prognose i både tidlige TNM stadie (TNM I /II) og i slutningen af ​​TNM stadie (TNM III /IV). Yderligere multivariate analyser viste, at PRR11 overekspression var en uafhængig overlevelse prædiktor for GC patienter efter resektion af primære tumorer. Dette er den første rapport, at PRR11 udtryk er forbundet med dårlig postoperative resultat i GC patienter.

De mulige mekanismer bag PRR11-fremme carcinogenese er ikke blevet undersøgt til bunds. Den tidligere undersøgelse af PRR11 blev gennemført og fortolket i fastsættelsen af ​​lungekræft og viste, at PRR11-knockdown dysreguleret udtryk for multiple vigtigt gen i kritiske veje såsom cellecyklus, tumorgenese og metastase (f.eks CCNA1, RRM1, MAP4K4 og EPB41L3) [ ,,,0],9].

I en proprietær microarray analyse (S1 og S2 Tables) [17], fandt vi, at to nye kandidatgener (CTHRC1 og LXN) bemærkelsesværdigt blev ændret efter PRR11-banker ned. CTHRC1 blev først rapporteret som en ny sekretorisk protein i beskadigede og syge arterier, og det menes, at CTHRC1 kan virke til at inhibere kollagen-ekspression og fremmer cellemigration, som begge er væsentlige funktioner for en invasiv cancer [18]. Yderligere undersøgelser viste, at CTHRC1 protein udtrykkes kraftigt i metastatiske læsioner sammenlignet med nonnmetastatisk tumorer, og inhibering af CTHRC1 ekspression resulterer i nedsat cellemigration in vitro [19]. For nylig blev det vist thatCTHRC1 proteinekspression er tæt forbundet med udviklingen af ​​leverkræft [20, 21], pancreascancer [22], gastrisk cancer [23], og kolorektal cancer [24]. LXN er et relativt nyt gen, som er blevet rapporteret at blive nedreguleret i human GC. Canonically er LXN menes at udvise tumor suppressor-lignende funktioner [25]. Det har også rapporteret, at LXN har tumor undertrykkende egenskaber i malignt melanom [26] og hepatocellulært carcinom [27]. Vi viste også, at overekspression af CTHRC1 var positivt korreleret med tumorinvasion, regional lymfeknude-metastase, sygdomsprogression, og patienternes udfald (S2 Fig), mens LXN overekspression negativt var forbundet med lymfeknudemetastaser, tumor differentiering og sygdomsstadie (S3 tabel), hvilket indikerer onkogen rolle CTHRC1 og undertrykkende rolle LXN i GC. Interessant, vores undersøgelse viste, at lukke munden PRR11 forårsagede nedsat udtryk for CTHRC1 og forøget ekspression af LXN, hvilket indikerer en cross-talk mellem PRR11 og CTHRC1 og LXN. Desuden var der en signifikant sammenhæng mellem PRR11 udtryk og CTHRC1 og LXN udtryk i GC prøver. Disse resultater antydede, at PRR11 kunne fremme kræft progression gennem interaktion med CTHRC1 og LXN. Det er imidlertid nødvendigt, den nøjagtige mekanisme skal undersøges nærmere.

Som konklusion er PRR11 ofte udtrykkes i human GC, og dens udtryk er forbundet med dårlig overlevelse GC patienter. Yderligere in vitro og in vivo undersøgelser viste, at knockdown af PRR11 inhiberer GC-celleproliferation, kolonidannende evne, og tumorvækst i et gastrisk carcinom cellelinie. Efterfølgende korrelationsanalyse viste, at PRR11 udtryk også er positivt korreleret med CTHRC1 udtryk og negativt korreleret med LNX udtryk, der giver de antydninger af en mulig mekanisme for onkogene funktion PRR11. Den aktuelle undersøgelse giver grundlaget for den fremtidige undersøgelse af disse nye prognostiske markører, som kan vise sig at være nyttige mål i påvisning, screening og behandling af GC patienter.

Støtte Information

S1 Fig. Ekspression af PRR11 protein i gastrisk cancer cellelinjer afsløret ved Western blot analyse

doi:. 10,1371 /journal.pone.0128943.s001

(PPTX)

S2 Fig.

Kaplan-Meier kurver for overlevelse varigheder hos patienter med mavekræft efter ekspression af CTHRC1 og LXN (A) Patienter med CTHRC1 overekspression havde en kortere overlevelse varighed end dem uden CTHRC1 udtryk (53 måneder vs. 69 måneder; P = 0,019). (B) Ingen væsentlig forskel på den samlede overlevelse mellem patienter med LXN udtryk og dem uden LXN udtryk (68 måneder vs 55 måneder P = 0,093)

doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s002

(. PPTX)

S1 Table. Down-regulerede gener i PRR11-KO celler sammenlignet med WT celler i QBC939 celler

doi:. 10,1371 /journal.pone.0128943.s003

(DOCX)

S2 Table. Opreguleret gener i PRR11-KO celler sammenlignet med WT celler i QBC939 celler

doi:. 10,1371 /journal.pone.0128943.s004

(DOCX)

S3 Table. Sammenhæng mellem CTHRC1 og LXN udtryk og klinisk-patologiske parametre for mavekræft

doi: 10,1371 /journal.pone.0128943.s005

(DOC)

Tak

Vi takker Dr. Ying Chen, Changhai Hospital, Shanghai, Kina, der venligt give mavekræft prøver.