PLoS ONE: Manglende associering mellem cytotoksiske T-lymfocyt antigen 4 (CTLA-4) -1722T /C (rs733618) Polymorfi og Cancer Risk: Fra en case-kontrol undersøgelse til en meta-analyse

Abstrakt

Baggrund

Sammenhængen mellem cytotoksisk T-lymfocyt antigen 4 (

CTLA-4

) gen -1722T /C polymorfi (rs733618) og kræft har været bredt vurderet, og en endelig konklusion er fortsat undvigende. Vi udførte først et hospital baseret case-kontrol undersøgelse for at måle denne sammenslutning af kræft i spiserøret med

CTLA-4

-1722T /C polymorfi i Han kinesiske befolkning, og derefter foretaget en meta-analyse for at få en omfattende evaluering for dette problem.

Metodologi /vigtigste resultater

dette case-control undersøgelse omfattede 629 esophageal planocellulært carcinom (ESCC) tilfælde og 686 alder og køn godt matchede kræft-fri kontrol. PCR-LDR (polymerasekædereaktion-ligase påvisningsreaktioner) metode blev anvendt til at identificere genotyper. Meta-analyse blev udført af STATA (v12.0) software. Dette case-control undersøgelse viste ingen signifikant forskel i genotype og allel fordelinger af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi mellem esophageal kræfttilfælde og kontrolpersoner, i overensstemmelse med resultaterne af den videre metaanalyse i alle genetiske modeller. Bevis for stor heterogenitet blev observeret blandt alle berettigede studier i det recessive model. Yderligere undergruppe analyser af etnicitet, kræft type og systemet, registreres null foreninger i denne meta-analyse.

Konklusion

Dette case-control studie og den videre metaanalyse, undladt at identificere foreningen mellem

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og kræftrisiko

Henvisning:. Tang W, Qiu H, Jiang H, Sun B, Wang L, Yin J, et al. (2014) Manglende associering mellem cytotoksiske T-lymfocyt antigen 4 (

CTLA-4

) -1722T /C (rs733618) Polymorfi og Cancer Risk: Fra en case-kontrol undersøgelse til en meta-analyse. PLoS ONE 9 (4): e94039. doi: 10,1371 /journal.pone.0094039

Redaktør: Junwen Wang, The University of Hong Kong, Hongkong

Modtaget: November 8, 2013; Accepteret: 11. marts 2014 Udgivet: April 7, 2014

Copyright: © 2014 Tang et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne undersøgelse blev støttet af Jiangsu Universitet Klinisk medicin videnskabelige og teknologiske udvikling fond (JLY20120004), National Natural Science Foundation of China (81.370.001, 81.101.889, 81.000.028), Jiangsu-provinsen Natural Science Foundation (BK2010333, BK2011481), Social Development Foundation Zhenjiang (SH2010017), Changzhou unge talenter og videnskab-Højteknologifonden of Health Bureau (QN201102) og Affiliated Folkets Hospital i Jiangsu University fond (Y200913). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Det anslås, at cirka 12,7 mio flere kræfttilfælde og 7,6 millioner kræftdødsfald har fundet sted i 2008 på verdensplan, med mere end halvdelen af ​​tilfældene og omkring to tredjedele af dødsfaldene i udviklingslandene [1]. Beviserne er stigende, at kræft er en kompleks sygdom skyldes interaktioner mellem flere genetiske baggrunde og miljømæssige faktorer [2], [3]. For sent, en række undersøgelser viser, at genetiske varianter af de gener, der regulerer aktiveringen og proliferationen af ​​T-lymfocytter og natur killer (NK) celler kan påvirke kræftrisikoen [4], [5]. I det sidste årti, enkeltdoser-polymorfier (SNP) blevet omfattende undersøgt, og mange studier har undersøgt den hypotese, at genetiske varianter af de immune gener kan være relevante for risikoen for en række forskellige cancere [6], [7].

cytotoksisk T-lymfocyt antigen 4 (CTLA-4), også kaldet CD152, er et medlem af immunoglobulin-superfamilien. CTLA-4 udtrykkes primært på aktiverede T-celler, fungerer som en vigtig begrænsende regulator af T-celleproliferation og aktivering, og inducerer Fas-uafhængig apoptose af aktiverede T-celler til yderligere inhibere immunfunktion af T-celle [6], [8 ]. Blokering CTLA-4-funktion og øge T-celleaktivering, blev adskillige forskellige typer af maligne neoplasmer i tumor-transplanterede mus hæmmede eller helbredes, og ejes langvarig antitumor immunitet [9]. Det foreslår, at CTLA-4 spiller en vigtig rolle i carcinogenese.

CTLA-4

genet er lokaliseret på kromosom 2q33, og er sammensat af fire exoner, som koder flere funktionelle domæner af CTLA-4-protein og besidder adskillige vitale SNP’er, såsom + 49A /G (rs231775), -318C /T (rs5742909), CT60G /A (rs3087243), -1661A /G (rs4553808), og -1722T /C (rs733618) SNPs, osv [6], [10].

En meta -analyse viste, at

CTLA-4

+ 49A /G polymorfi kan være en risikofaktor for kræft, mens -318C /T og + 6230G /a (CT60) polymorfier var mangel på association med kræft [4]. For sent, Geng og kolleger rapporterede en meta-analyse med et negativt resultat på sammenhængen mellem

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og kræftrisiko [11]. Koblingsuligevægt (LD) plot af

CTLA-4

(involverer rs733618, rs4553808, rs5742909, rs231775 og rs3087243) blev genereret ved hjælp Haploview 4.2 program, og resultaterne tyder på, at -1661A /G (rs4553808) og -318C /T (rs5742909) er i høj LD; de andre er i lav LD [11].

CTLA-4

-1722T /C polymorfi er ikke undersøgt i kræft i spiserøret. For yderligere at undersøge dette potentiale forhold, besluttede vi at vurdere sammenslutning af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi med kræft i spiserøret risiko på et hospital baseret case-kontrol undersøgelse, og derefter udførte en omfattende meta-analyse udlede en mere præcis resultat.

Materialer og metoder

emner

Denne hospital-baseret case-kontrol undersøgelse omfattede 629 sporadisk esophageal planocellulært karcinom (ESCC) tilfælde, og 686 kræft -fri fag fortløbende rekrutterer fra Affiliated Folkets Hospital i Jiangsu Universitet og Tilknyttede Hospital i Jiangsu University (Zhenjiang City, Jiangsu-provinsen, Kina), mellem oktober 2008 og december 2010. alle rekrutteret emner var lokale beboere i Han kinesiske befolkning, og alle ESCC forsøgspersoner blev diagnosticeret ved kirurgisk resektion og patologisk undersøgelse. De ESCC patienter, som havde en historie af personlig ondartet tumor eller autoimmun sygdom, eller havde gennemgået strålebehandling eller kemoterapi, blev udelukket. Etnicitet, køn og gennemsnitsalder (± 5 år) af kontrollerne var godt matches til esophageal kræfttilfælde. De kontrolpersoner blev udvalgt fra de to hospitaler til helbredelse af fraktur. Ved rekruttering, var dette hospital baseret case-kontrol undersøgelse godkendt af den etiske komité i Jiangsu University (Zhenjiang, Kina). Information af alle fag blev indsamlet fra et struktureret spørgeskema, som blev administreret af to erfarne forskning læger. Oplysningerne om demografiske data (fx alder, køn) og relaterede risikofaktorer (såsom tobak brug og alkoholforbrug) er angivet i tabel 1. Hvert emne underskrevet skriftligt informeret samtykke og doneret 2-ml prøve af perifert blod.

DNA ekstraktion, SNP markering, og genotypebestemmelse

Blodprøver blev opsamlet med ethylendiamin tetra-eddikesyre (EDTA) antikoagulerende vakuumbeholderrør (BD Franklin Lakes NJ, USA). Genomisk DNA blev ekstraheret fra lymfocytter ved hjælp af QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Berlin, Tyskland) og DNA-prøver blev frosset ved -80 ° C. Genotypebestemmelse af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi blev udført ved hjælp af reaktionen-ligase afsløring reaktioner polymerase chain (PCR-LDR) metoden [12]. Shanghai Biowing Applied Biotechnology Company yder teknisk support til genotypning. Et hundrede og tres prøver blev tilfældigt udvalgt og gensidigt testet med direkte sekventering til kvalitetskontrol, og reproducerbarheden var 100%. Primerne ifølge direkte sekventering anvendes til

CTLA-4

-1722T /C genotypebestemmelse blev som følger: F: 5’GCAATAACAACCTAATGGGCAC 3 ‘; R:. 5 ‘ACTTCCACAGGCTGAACCACT 3’ (figur S1)

Statistisk analyse

Chi-square test (

χ

2) blev udført for at måle forskellene i fordelingerne af genotyper, demografiske karakteristika og udvalgte variabler mellem esophageal kræfttilfælde og kontroller. Genotypefrekvenser af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi blandt kontrollerne blev testet for Hardy-Weinberg ligevægt (HWE) ved hjælp af en internet-baseret lommeregner (https://ihg.gsf.de/cgi-bin /hw/hwa1.pl). Foreningerne mellem

CTLA-4

-1722T /C locus og risikoen for ESCC blev analyseret ved ubetinget logistisk regression for rå yderste periferi og justeret yderste periferi, når det var hensigtsmæssigt. Statistiske analyser blev gennemført i SAS 9.1.3 software (SAS Institute, Cary, NC). En

P

. 0,05 (to-halet) blev defineret som kriterium for statistisk signifikans

Meta analyse

rapporteres Metaanalysen på grundlag af den Foretrukne Reporting Produkter til Meta-analyser (PRISMA) retningslinje (Tjekliste S1) [13].

Embase, PubMed, og CBM (kinesisk Biomedical Disc), samt CNKI (Kina Infrastructure Videnscenter) database blev ransaget op til 1 august 2013 for publikationer undersøger sammenslutning af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi med kræftrisiko. De kombination vilkår var “kræft” eller “tumor” eller “karcinom” eller “neoplasma” og “cytotoksisk T-lymfocyt antigen 4” eller “

CTLA-4

‘eller’ CD152«, der er knyttet til ‘mutation’ eller “variant” eller “SNP” eller “polymorfi”. Desuden blev sproget publikation begrænset til engelsk og kinesisk, og alle undersøgelser på mennesker blev identificeret. Søgeresultaterne blev suppleret ved at kontrollere alle referencer, der er anført i disse undersøgelser og offentliggjorte anmeldelser. Inkluderede studier var kvalificeret, hvis de mødte de store omfattede kriterier: (1) udformet som en retrospektiv eller indlejret case-kontrol undersøgelse, (2) evalueret

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og kræftrisiko, ( 3) give genotype tællinger af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi mellem kræfttilfælde og kontroller og (4) kontrol genotype distributioner overensstemmelse med HWE. De store udelukkede kriterier var: (1) ikke case-control studier, (2) anmeldelse publikationer og (3) overlappende data. Information blev omhyggeligt og selvstændigt udvundet af tre korrekturlæsere (W. Tang, H. Qiu, og H. Jiang). I tilfælde af modstridende evalueringer blev forskelle løses ved yderligere diskussion blandt alle forfattere. Følgende data blev ekstraheret:. Første forfatter, udgivelsesår, kræft type, land, etnicitet, antal tilfælde og kontroller, genotype metode, allel og genotype frekvens, og HWE i kontrollen

I denne meta-analyse den rå odds ratio (OR) med de tilsvarende konfidensinterval 95% (95% CI) blev anvendt til at vurdere styrken af ​​sammenhængen mellem

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og kræftrisiko. Z-test og

P

-værdi (to-halet) blev anvendt til måling betydningen af ​​den poolede OR, og statistisk signifikans blev defineret som

P

0,05 (to-halet ). Heterogenitet blandt undersøgelser blev evalueret ved en Chi-square-baserede I

2 test, jeg

2 25% angivet lav heterogenitet 25% ≤I

2≤50% angivet moderat heterogenitet og jeg

2 50% angivet stor heterogenitet [14]. Hvis jeg

2 50% eller

P

0,10, de poolede yderste periferi blev beregnet ved den tilfældige effekter model (DerSimonian-Laird metoden), ellers faste effekter model blev implementeret (den Mantel-Haenszel-metode). Subgruppeanalyser blev gennemført for at måle etnicitet-specifikke, kræft typespecifikke og system-specifikke effekter efter etnicitet, kræft type (hvis nogen kræft typen evalueret af mindre end tre individuelle undersøgelser, blev det samlet i “andre kræftformer”) og systemet. Tragten plot og Egger test blev udført for at måle publikationsbias, som blev evalueret ved visuel inspektion af en asymmetrisk plot. For heterogenitet, tragt plot og Egger test, var statistisk signifikans behandlet på

P

0,1. I denne meta-analyse blev alle statistiske analyser udført af STATA software (version 12.0).

Resultater

Baseline karakteristika

De demografi og risikofaktorer i alle fag præsenteres i tabel 1. resultaterne viste, at sager og kontroller var fuldt matches af alder og køn. Der var imidlertid signifikant forskel på at drikke status og rygning mellem patienter og kontrolpersoner (

P

0,001). Den primære informationer om

CTLA-4

-1722T /C polymorfi var viste i tabel 2. I dette SNP, genotypebestemmelse succesrate var 96,43% i alle prøver. Mindre allel frekvens (MAF) af kontrol i vores undersøgelse, svarede til databasen over kinesisk for denne SNP (tabel 2). De genotypiske frekvenser for

CTLA-4

-1722T /C polymorfi blandt kontroller blev brugt til vurderet afvigelse fra HWE, og resultatet var i HWE (

P

= 0,284) (Tabel 2) .

Single-locus analyse

i det enkelt locus analyser genotypefrekvenserne af

CTLA-4

-1722T /C var 16,53% (CC), 49.10% (TC) og 34,37% (TT) hos patienterne, og 17,50% (CC), 47,79% (TC) og 34,70% (TT) i kontrollerne, og forskellen var ingen statistisk signifikant (

P

= 0,862) (tabel 3). I dette case-kontrol undersøgelse viste logistiske regressionsanalyser, at

CTLA-4

-1722T /C SNP var ikke forbundet med risiko for ESCC. Rygning og alkoholforbrug er to stærke miljømæssige faktorer, vi undersøgte foreningen i en stratificeret analyse af disse to faktorer og resultaterne var null forening (tabel 4).

Støtteberettigede artikler til meta -analyse

Den indledende søgning gav alt 345 potentielt relevante publikationer. Efter anvendelse ekstra filtre, 12 case-kontrol studier i 11 publikationer og vores undersøgelse var berettiget til inklusion. Den detaljerede proces med at udvælge og undtagen varer er præsenteret i figur 1.

Undersøgelse egenskaber

Der var to grupper i en artikel udført af Hadinia et al. [15], behandlede vi dem separat. I alt 12 separate undersøgelser plus vores case-kontrol undersøgelse med i alt 3420 kræfttilfælde og 3675 kontroller blev inkluderet i denne meta-analyse. Blandt de 13 case-kontrol studier, tre undersøgte brystkræft [16] – [18], tre undersøgte mavekræft [15], [19], [20], og de andre studier undersøgte livmoderhalskræft, lungekræft, kræft i spiserøret, kolorektal cancer, og kræft oral [6], [15], [21] – [24]. Som for motiver i disse studier, 8 var asiater [6], [17] – [21], [24] og 5 var kaukasere [15], [16] [22], [23]. Karakteristik af hver omfattede undersøgelsen er præsenteret i tabel 5. Den detaljerede fordeling af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og allel blandt cases og kontroller er præsenteret i tabel 6.

meta-analyseresultater

efter at kombinere alle kvalificerede undersøgelser blev i alt 3420 kræfttilfælde og 3675 kontroller fra 13 støtteberettigede case-control studier inkluderet for meta-analyse af sammenhængen mellem CTLA-4 -1722T /C polymorfi og kræftrisiko. Der var null sammenslutning af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi med overordnet kræftrisiko i alle genetiske modeller (tabel 7, tabel 8, tabel 9, figur 2, og figur 3). I en stratificeret analyse ved ethnicity, blev lignende resultater observeret i både asiatere og kaukasere (tabel 7). I en stratificeret analyse ved cancer type, der var en nedsat risiko for mavecancer i to genetiske modeller: CC vs. TC + TT (OR, 0,36; 95% CI, 0,19-0,66;

P

= 0,001) og CC vs TT (OR, 0,45; 95% CI, 0,23-0,86;

P

= 0,016) (tabel 8). I en stratificeret analyse af systemet, blev null forening også observeret (Tabel 9).

Vejviser

Tests for offentliggørelse bias, følsomhedsanalyser, og heterogenitet

i denne meta-analyse blev potentielle publikationsbias detekteret ved Begg s Funnel plot og Egger test (figur 4), og formen af ​​tragten var symmetri i hver genetisk model. Det foreslås, at der ikke var nogen offentliggørelse bias for den samlede kræft i denne meta-analyse (C vs. T: Begg test

P

= 0,855, Egger test

P

= 0,675; CC vs TT : Begg test

P

= 0.350, Egger test

P

= 0,709; TC vs TT: Begg test

P

= 0,583, Egger test

P

= 0,702; CC + TC vs TT: Begg test

P

= 0,161, Egger test

P

= 0,576; CC vs TT + TC: Begg test

P

= 0,533, Egger test

P

= 0,845).

blev udført for at opdage indflydelsen af ​​hver enkelt datasæt på poolede OR, med hver undersøgelse datasæt sæt droppet Følsomhedsanalyser på et tidspunkt. Resultaterne har ikke ændre sig, når en individuel undersøgelse blev udeladt, hvilket tyder stabiliteten af ​​vores resultater (figur 5) (data ikke vist).

Store heterogene blandt studier blev identificeret i den recessive model og homozygot model. Siden tumor oprindelse, etnicitet og systemet kan påvirke resultaterne fra meta-analyser, vi udført undergruppe analyser og resultaterne blev præsenteret i tabel 7, tabel 8 og tabel 9. Resultaterne viste, at brystkræft, fordøjelsessystemet kræft og asiatiske befolkning undergruppe kan bidrage til større heterogenitet. Som vist i tabel 7, heterogenitet var signifikant i den recessive model. Yderligere analyse blev udført af Galbraith radial plot i recessive model (figur 6), og resultatet viste en outlier kunne bidrage til de vigtigste kilder til heterogenitet. Fra skoven plottet i recessive model (figur 2), kan man identificere, at en case-kontrol undersøgelse foretaget af Erfani et al. [16] bidrager den vigtigste heterogenitet.

Diskussion

for sent, har flere undersøgelser undersøgt sammenhængen mellem

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og flere kræftformer, er en afgørende svar mangler. I denne undersøgelse, en case-kontrol undersøgelse i Han kinesiske befolkning, sammen med en meta-analyse af den samlede kræft, forsøgt at udlede en omfattende evaluering, og resultaterne var ikke-betydning. Så vidt vi ved, er dette den første case-kontrol undersøgelse undersøger sammenhængen mellem

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og kræft i spiserøret risiko.

Kræft og autoimmune sygdomme er både multifaktorielle lidelser, der skyldes komplekse vekselvirkninger mellem genetiske baggrunde og miljømæssige faktorer.

CTLA-4

-1722T /C polymorfi (T → C) vil reducere en transkriptionsfaktor bindingssted for nuklear faktor 1 og svække udtryk for celleoverfladen CTLA-4 [11], [25], som kan spille en vigtig rolle i cancer og autoimmune sygdomme modtagelighed. Flere metaanalyser viser, at

CTLA-4

-1722T /C polymorfi kan være en risikofaktor for systemisk lupus erythematosus modtagelighed [26] – [29]. Men sammenhængen mellem dette locus og kræftrisiko var overbevisende. Med en stigende interesse for sammenslutningerne af genetiske polymorfier og kræft, har flere undersøgelser undersøgt hypotesen om, at

CTLA-4

-1722T /C polymorfi er relevant for risikoen for en række kræftformer; Men resultaterne er undvigende. I betragtning af at de fleste almindelige SNPs normalt gør lav penetrans kræft modtagelighed, denne undersøgelse omfatter 13 case-kontrol studier med relativt store stikprøvestørrelser for at opnå en præcis vurdering mellem

CTLA-4

-1722T /C genetisk variation og kræft risiko. Et enkelt studie har rapporteret positivt signal af

CTLA-4

-1722T /C polymorfi med kræft [18]; den anden individuelle undersøgelse har rapporteret negativt signal [20]; Men som påvist i vores overordnede genetiske modelresultater blandt 7098 forsøgspersoner, der var ikke-betydning, selv i forskellige befolkningsgrupper og andet system. I en stratificeret analyse af kræft type, den beskyttende effekt tillagt ved recessive model og homozygot model var mærkbart indlysende i mavekræft undergruppe. I betragtning af kun tre case-kontrol undersøgelser blev gennemført i mavekræft undergruppe og disse undersøgelser var små stikprøvestørrelser, der kunne begrænse magt til at bekræfte en reel indflydelse eller generere et svinget vurdering. Alle resultater bør fortolkes med meget forsigtighed. Det er også muligt, at den potentielle funktion af denne polymorfi fortyndes eller dækket af andre genetiske baggrund eller miljøfaktorer, og disse vigtige faktorer bør ikke ignoreres. I betragtning af kun 13 case-kontrol studier blev rekrutteret i denne metaanalyse, og de fleste af disse undersøgelser var små stikprøvestørrelser, i fremtiden, yderligere undersøgelser med store stikprøvestørrelser skal udføres for at bekræfte eller afkræfte disse resultater.

Nogle fortjeneste aktuelle undersøgelse bør være tilstrækkelig overvejelse. Først, det er til dato den første case-kontrol undersøgelse afsløre sammenslutningen af ​​

CTLA-4

gen -1722T /C polymorfi med kræft i spiserøret. For det andet, resultaterne af vores case-kontrol undersøgelse i overensstemmelse med den efterfølgende meta-analyse. For det tredje, i vores case-kontrol undersøgelse, kontrol genotype distributioner var i overensstemmelse med HWE viste vores resultater var mindre tilbøjelige til at selektionsbias, form af tragten plot indikerede, at der var nogen offentliggørelse skævhed i aktuelle metaanalyse. For det fjerde blev observeret relativt lav heterogenitet mellem publikationer til

CTLA-4

-1722T /C polymorfi.

Desuden bør nogle begrænsninger i aktuelle undersøgelse anerkendes ved fortolkningen vores resultater. Først i denne case-kontrol undersøgelse, alle tilfælde og kontroller blev rekrutteret fra to hospitaler og måske ikke fuldt ud repræsentere de generelle kinesiske befolkningsgrupper. For det andet, alle inkluderede studier for metaanalyse case-kontrol var fra asiater og kaukasere; således, kan vores resultater kun være egnet til disse to populationer. Tredje kun publicerede studier blev rekrutteret i denne metaanalyse, måske publikationsbias har uundgåeligt opstået. For det fjerde på grund af manglen på ensartede baggrundsdata for rekrutterede undersøgelser, data blev ikke yderligere stratificeret af andre faktorer (såsom alder, køn, rygning, alkoholforbrug og andre livsstilsfaktorer). Femte, i denne undersøgelse har vi fokuseret på kun -1722T /C polymorfi i

CTLA-4

, og ikke overveje andre modtagelighed gener eller polymorfier. For lav penetrans kræft modtagelighed gen effekter fra SNP, bør disse vigtige genetiske og miljømæssige faktorer være tilstrækkeligt overvejes.

Sammenfattende denne case-kontrol undersøgelse sammen med en meta-analyse, har undladt at bekræfte sammenhængen mellem

CTLA-4

-1722T /C polymorfi og kræftrisiko, også på tværs af forskellige etniske undergrupper og forskellige systemer. I fremtiden yderligere undersøgelser med store stikprøvestørrelser og detaljerede gen-miljø-data, bør gennemføres for at bekræfte eller afkræfte disse resultater.

Støtte Information

Figur S1.

Direkte sekventering analyser for genotyper af CTLA-4 -1722T /C SNP (De tre diagrammer repræsenterer tre genotyper)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0094039.s001

(TIF)

Tjekliste S1.

PRISMA checkliste, tjekliste af emner at omfatte når du anmelder en systematisk gennemgang eller metaanalyse (diagnostisk gennemgang bestående af kohortestudier)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0094039.s002

(DOCX)