kvinder vil have en første reaktion på primær terapi, vil de fleste i sidste ende opleve en gentagelse ved brug af forløbet af kemoterapi sygdom. Sensibilisatorer og øget kemoterapeutiske midler til tumorer er afgørende. Evaluering af mitokondrie membranpotentialet SKOV 3-celler blev podet i 6 brønds plader og behandlet med peptidsyntese hvorefter det blev cellerne behandlet med doxorubicin i yderligere 24 timer.
Rhodamin 123 er blot et kationisk farvestof, som lokaliseres i mitokondrier af levedygtige celler. Cellerne blev høstet, resuspenderet i medium indeholdende propidiumiodid og undersøges ved flowcytometri. Dataene blev opnået over en BD FACSort bevægelse cytometer anvende Cell Quest-software og analyseret. Ti tusinde celler blev analyseret for hver test. SKOV 3 eller A2780 celler blev behandlet med TM og anticancerlægemidler alene og i kombination under de nævnte betingelser. Cellerne blev lyseret, protein koncentrationen af lysaterne kvantificeret, proteiner adskilt af NuPAGE systemet, og immunblottet som beskrevet tidligere.
SKOV 3 celler blev behandlet med TM og podet i 6 brønds plader i 24 timer, hvorefter cellerne blev yderligere behandlet med doxorubicin i yderligere 5. 5 timer, og analysen gennemføres som beskrevet tidligere. Efter behandling blev cellerne inkuberet med carboxy H2DCFDA i 30 minutter ved 37 C med fem minutter CO2. Carboxy H2DCFDA vil være den acetylerede form af et formindsket fluorescein slags, der er celle gennemtrængelig og bliver fluorescerende i nærvær af cellulære oxidanter. Celler blev opsamlet og resuspenderet i phosphatpufret saltopløsning belastning før bliver vurderet ved flowcytometri. For at vurdere, om TM kunne bevidstgøre ovariecancerceller mod doxorubicin terapi blev SRB analyse.
Platinum tolerante SKOV 3 ovariecancerceller blev behandlet med TM i 24 timer, hvorefter cellerne blev behandlet med doxorubicin i yderligere 24 timer. Celler behandlet kun med doxorubicin ved alle koncentrationer undersøgte nedsat celleproliferation med 29% som sammenlignet med ubehandlede kontroller. Celler udelukkende behandlet med TM reducerede cellelevedygtigheden med fem minutter. Pre behandling med TM efterfulgt af behandling med doxorubicin afsløret større sensibilisering med levedygtighed begrænset af 42. 1000, 62. 04-10 og 79. 10 procent. At bekræfte TM medieret overfølsomhed af ovariecancerceller til doxorubicin, blev smykker følsomme og smertefulde A2780-celler behandlet som beskrevet ovenfor med den undtagelse, at TM blev anvendt i en koncentration på 7. 5 uM.
Behandling med TM alene udløst uge eller to reducerede alt levedygtighed mens doxorubicin alene anvendt effekter i en dosisafhængig måde. TM /doxorubicin blanding afsløret betydelig sensibilisering af A2780 celler med mulighed hæmmes af 74. 8%, 87. Fem minutter eller 97. Hænderne ned den. Vi udførte bevægelse cytometri af lægemiddelbehandlede celler til at bestemme en potentielt tab af mitochondriemembranpotential, en irreversibel arrangement i hele processen af apoptose. Cellerne behandlet med TM alene blot udviste minimal ændring af m og holdes hovedsagelig praktisk, som vist i figur 1c. Ligeledes langt størstedelen af celler behandlet med doxorubicin alene holdes meste fornuftigt med 8.
Et stort antal celler er død og en mere 13. 95,000-100,000 byder på en beskadiget m. I modsætning hertil behandling med TM, efterfulgt af yderligere behandling med doxorubicin forøgede population af døde celler til 15. 2% og også øget befolkning celler med et afbrudt m til 26. 8%.
Leave a Reply
Du skal være logget ind for at skrive en kommentar.