PLoS ONE: HLA klasse I Expression og dens Ændring af Præoperativ Hyperthermo-kemostråleterapi i patienter med endetarmskræft

Abstrakt

Målsætning

Styrkelse immunologiske responser, herunder human leukocyt antigen (HLA) klasse I-ekspression på tumorceller og anerkendelse og eliminering af tumorceller ved tumor-specifikke cytotoksiske T-lymfocyt (CTL ), betragtes et nyt koncept for strålebehandling. Den foreliggende undersøgelse undersøgte patienter, som gennemgik præoperativ hyperthermo-kemostråleterapi (HCRT) for lokalt fremskreden endetarmskræft at vurdere sammenhængen mellem HLA klasse I-ekspression og klinisk resultat.

Materialer og metoder

Seventy-otte patienter med lokalt fremskreden rektal adenocarcinom, som fik præoperativ HCRT blev inkluderet. Den mediane alder af patienterne var 64 år (spændvidde, 33-85 år) og 4, 18, og 56 patienter havde klinisk fase I, II og III sygdom, hhv. Formalin-fikserede og paraffin-indlejrede væv udskåret før og efter HCRT blev underkastet immunhistokemisk analyse med et anti-HLA klasse I-A, B, C-antistof. HLA klasse I-ekspression gradueret efter tumor celle positivitet.

Resultater

I præ-HCRT, at antallet af prøver er kategoriseret som Grade 0 og 1 var 19 (24%) og 58 (74 %), henholdsvis. Kun 1 patient (1%) viste Grade 2 ekspression. 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), og 12 (15%) post-HCRT prøver, blev imidlertid klassificeret som Grade 0, 1, 2, og 3, henholdsvis. Der var en signifikant stigning i HLA klasse I-ekspression i post-HCRT prøver (p 0,01). Men hverken præ- eller post-HCRT HLA klasse I-ekspression påvirkede samlet overlevelse og fjernmetastaser overlevelse i klinisk fase III-patienter. Univariate analyse afslørede, at Post-HCRT HLA klasse I-ekspression viste en signifikant negativ sammenhæng med LC (p 0,05). Ikke desto mindre viste multivariat analyse, at der ikke var nogen sammenhæng mellem HLA klasse I-ekspression og klinisk resultat.

Konklusion

HCRT øget HLA klasse I-ekspression i rektal kræftpatienter. Men multivariat analyse har undladt at vise en sammenhæng mellem niveauet af HLA klasse I udtryk og prognose

Henvisning:. Sato H, Suzuki Y, Ide M, Katoh T, Noda S-e, Ando K, et al. (2014) HLA klasse I Expression og dens Ændring af Præoperativ Hyperthermo-kemostråleterapi i patienter med endetarmskræft. PLoS ONE 9 (9): e108122. doi: 10,1371 /journal.pone.0108122

Redaktør: Torbjörn Ramqvist, Karolinska Institutet, Sverige

Modtaget: Marts 27, 2014 Accepteret: August 20, 2014; Udgivet: 26 September, 2014

Copyright: © 2014 Sato et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed:. Det forfattere bekræfter, at alle data, der ligger til grund resultaterne er fuldt tilgængelige uden restriktioner. Data er tilgængelige fra Gunma University Graduate School of Medicine Institutional Data Access /etiske komité for forskere, der opfylder kriterierne for adgang til fortrolige data

Finansiering:.. Forfatterne har ingen støtte eller finansiering til at rapportere

konkurrerende interesser:. forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

akkumulerende beviser understøtter vigtigheden af ​​cellemedieret immunitet til styring tumorvækst og eliminere fjernmetastaser [1] . Human leukocyt antigen (HLA) klasse I-molekyler og tumor antigenspecifikke cytotoksiske T-lymfocytter (CTL) spiller afgørende roller i disse responser. HLA klasse I molekyler udtrykt af tumorceller til stede tumorafledte antigener til CTL, som derefter dræber målcellerne [2]. Mange undersøgelser rapporterer en signifikant sammenhæng mellem klinisk prognose og ekspressionen af ​​HLA klasse I ved esophageal, ikke-småcellet lunge, hoved og hals planocellulært, og blære kræft [3] – [8]. Desuden ser de fleste af disse rapporter konkluderer, at patienter med lav HLA-klasse I-udtrykkende cancere har dårligere prognose end dem med høje-udtrykkende cancere.

Strålebehandling er en vigtig form for anti-cancer terapi, og anvendes til at behandle mange typer af cancer, uanset klinisk fase. Det er almindeligt accepteret, at bestråling fremkalder celledød via apoptose og /eller nekrose ved at (enten direkte eller indirekte) DNA. De seneste undersøgelser tyder, at strålingsinduceret immunogene celledød er et begreb forskellig fra den mere “traditionelle” strålingsinduceret celledød [9] – [11]. Konceptet bag strålingsinduceret immunogene celledød er baseret på induktionen af ​​anti-tumor immune CTL-responser af strålebehandling med modifikation af de immunogene epitoper på tumor HLA klasse I molekyler. Strålebehandling øger ekspressionen af ​​HLA klasse I molekyler ved humane melanomceller og ved nyre og subkutane celler i HLA-A2 transgen mus [12]. Derimod Speetjens et al. rapporterede, at bestråling ikke virkning HLA klasse I-ekspression ved rektal cancerceller [13]. Imidlertid har få rapporter undersøgt sammenhængen mellem radioterapi og HLA-ekspression på tumorceller i et klinisk miljø [12], [14], [15]. Desuden til vores bedste viden, har ingen undersøgelser undersøgte ændringer i HLA klasse I-ekspression ved tumorceller i den samme patient før og efter strålebehandling.

Vi har tidligere behandlet rektal cancer patienter med præoperativ hyperthermo-kemo-stråleterapi (HCRT ) i flere år og rapporteret de kliniske resultater [16], [17]. Her, vi opnåede prøver fra de samme patienter at undersøge (i) HLA klasse I-ekspression på rektale cancerceller, (ii) ændringer i HLA klasse I-ekspression induceret af HCRT, og (iii) forholdet mellem HLA klasse I-ekspression og prognose.

Materialer og metoder

Etik erklæring

Alle patienter skal have deres skriftligt informeret samtykke til at deltage i denne undersøgelse. Denne undersøgelse blev godkendt af institutionelle gennemgang bestyrelse Gunma University Graduate School of Medicine, Gunma, Japan (IRB autorisationsnummer er 1051). Anonymitet af patienterne blev bevaret.

Patienter og prøver

Seventy-otte patienter med lokalt fremskreden rektal adenokarcinom, der var fortløbende behandlet med HCRT efterfulgt af kirurgi ved Gunma Universitetshospital mellem 2003 og 2011, blev indrulleret i studiet. Før og efter HCRT prøver var tilgængelige for alle patienter.

Kendetegnene for patientens og tumorer er opsummeret i tabel 1. Medianalderen af ​​patienterne i starten af ​​HCRT var 64 år (spændvidde, 33-85 år). Middelværdien og median opfølgning perioder var 45 og 40 måneder (interval, 3-103 måneder), hhv. For diagnostisk oparbejdning, undergik alle patienter computertomografi (CT) af maven og brystkassen for at lette iscenesættelse af regionale og fjerne metastaser. T fase blev bestemt ved CT og magnetisk resonans billeddannelse (MRI), især T2-vægtede billeder, ifølge TNM Classification of maligne tumorer (UICC, 7. udgave). Samlet set blev der 4, 18 og 56 patienter klassificeret med fase I, II og III sygdom, hhv. Prøver fra de 56 patienter med stadium III sygdom blev yderligere undersøgt for at bestemme sammenhængen mellem HLA klasse I udtryk og prognose.

Vævsprøver blev fjernet endoskopisk fra rektal tumorer før HCRT og derefter kirurgisk efter HCRT (median , 10 uger: gennemsnitlig, 12 uger, range, 1-54 uger). Udskårne væv blev derefter fikseret i 10% formalin i 24 timer og indlejres i paraffin. HLA klasse I-ekspression blev undersøgt ved immunhistokemi.

Behandlinger

Alle 78 patienter undergik præoperativ HCRT, som tidligere rapporteret [16]. Kort fortalt strålebehandling ved ekstern bestråling (røntgenstråler; 10 MV) blev leveret ved hjælp af en anteroposteriore eller tre- eller fire-field box teknik. Den kliniske target volumen (CTV) omfattede den primære tumor og hele mesorectal væv. Den totale dosis stråling var 40-54 Gy (median, 50 Gy), med daglige fraktioner af 2 Gy. Fireoghalvfjerds patienter fik også 5-fluorouracil (5-FU) og levofolinat, tre modtog UFT og leucovorin, og én modtog Capecitabine.

hypertermibehandling blev udført på en ugentlig basis (2-6 sessioner (median, 5 sessioner) hver varer 30 min) ved hjælp af kapacitiv varmeanlæg og en radiofrekvens på 8 MHz (Thermotron-RF 8, Yamamoto Vinita Co. Ltd., Japan).

Kirurgi (hovedsagelig total mesorectal excision) blev udført på 1-54 uger (median, 10 uger) efter afslutningen af ​​HCRT. Femoghalvfjerds patienter (96%) blev opereret inden for 17 uger. Flere patienter, som viste en fuldstændig klinisk respons på HCRT nægtede kirurgi; derfor, kirurgi blev udført i kun 3 patienter (4%) af patienterne efter mere end 34 uger.

Immunfarvning for HLA klasse I

Formalin-fikserede og paraffin-indlejrede prøver blev anvendt til immunhistokemisk analyse. Vævssnit blev deparaffineret og underkastet antigen-genvinding med epitopgenfinding opløsning (Target Retrieval Solution, citrat pH 6, Dako, Glostrup, Danmark) ved 121 ° C i 20 min. Endogen peroxidaseaktivitet blev blokeret af Dako REAL (Dako). Et primært antistof mod HLA klasse IA, B, C tung kæde, EMR8-5 (Hokudo, Sapporo, Japan), som ikke anerkender HLA klasse I tung kæde-β2-mikroglobulin-peptid-kompleks, blev fortyndet (1:70 ) i Antibody Diluent Solution med Background Reduktion komponenter (Dako) og inkuberet med vævssnit ved 4 ° C natten [18]. Snittene blev derefter inkuberet med en Histofine Simple Stain MAX-PO kit (Nichirei, Tokyo, Japan) i 30 min. Endelig blev snittene behandlet med 3, 30-diaminobenzidin (DAB, Dako) i 1 min, og modfarvet med hæmatoxylin. Enheder af normal lymfeknude tjente som positive kontroller. Den isotype matchet irrelevant immunglobulin (negativ kontrol Mouse IgG1, Dako) blev anvendt som den negative kontrol

To forfattere (HS og MI, både blinde til de kliniske og patologiske data) vurderede HLA klasse I positivitet i en semi. -quantitative måde. Farvning blev klassificeret som følger: Grade 0, 10% farvede celler; Grade 2, 10-50% farvede celler; Grad 3, 50-90% farvede celler; Grad 4, 90% farvede celler. Forholdet mellem HLA klasse I-ekspression og klinisk prognose blev vurderet ved at dividere de post-HCRT prøver i to grupper, som tidligere beskrevet [6], [13], [19]: kvaliteter 0-1 og kvaliteter 2-3. Forholdet mellem HLA klasse I-ekspression og klinisk prognose blev ikke undersøgt i pre-HCRT prøver, fordi kun én patient viste Grade 2-3 udtryk før HCRT.

Statistisk analyse

Overlevelse blev målt i dage, startende fra dag 1 af HCRT til dødstidspunktet eller endelig opfølgning. Univariate analyse af den aktuarmæssige samlede overlevelse (OS), den lokale styring sats (LC), og fjernmetastaser overlevelse sats (DMFS) for hver klinisk-patologisk faktor blev analyseret ved hjælp af Kaplan-Meier-metoden, og forskelle mellem overlevelseskurverne var analyseret under anvendelse af log-rank test. Multivariat analyser bruger Cox ‘proportionale farer model blev udført for at undersøge sammenhængen mellem prognose og flere klinisk-patologiske variabler. Forskelle i HLA klasse I-ekspression mellem præ- og post-HCRT prøver blev undersøgt under anvendelse af Wilcoxon-test. Forskelle blev betragtet signifikant ved P 0,05. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS software version 21 (SPSS Japan Inc., Tokyo, Japan).

Resultater

HLA klasse I-ekspression

Figur 1 viser HLA klasse I-ekspression ved rektal tumorceller. Antallet af præ-HCRT prøver kategoriseret som grad 0, 1, 2, og 3, var 19 (24%), 58 (74%), 1 (1%), og 0 (0%), henholdsvis. Antallet af post-HCRT prøver kategoriseret som grad 0, 1, 2, og 3 var 6 (8%), 27 (35%), 7 (9%), og 12 (15%), henholdsvis. Tyve-seks patienter (33%) viste en patologisk komplet respons (PCR) post-HCRT. Tabel 2 viser, at HLA klasse I-ekspression forbundet med patientens alder ( . 60

vs

≤60), men ikke med andre nogen anden tumor egenskaber eller sygdom fase

Repræsentative billeder, der viser HLA. klasse I-ekspression ved rektal cancerceller. A, Grade 0 ekspression. B, Grade 1-ekspression. C, Grade 2 udtryk. D, Grad 3 udtryk. Forstørrelse, × 200.

Ændringer i HLA klasse I-ekspression induceret af HCRT

Samlet set 26 patienter opnåede pCR efter HCRT. Ændringer i HLA klasse I-ekspression blev vurderet i tumorprøver fra de resterende 52 patienter. Af disse 26 (50%) viste øget HLA klasse I-ekspression, 3 (6%) viste reduceret ekspression og 23 (44%) viste ingen ændring. Stigningen i HLA klasse I-ekspression efter HCRT var signifikant (p 0,01) (Figur 2). Af de 26 patienter, der opnåede PCR, 5 (19%) viste Grad 0 ekspression pre-HCRT og 21 (81%) viste Grade 1-ekspression. Der var ingen signifikant korrelation mellem Grade af HLA klasse I-ekspression pre-HCRT og PCR.

kvaliteter af HLA klasse I-ekspression i prøver fra den samme patient. A, før HCRT prøve; Grade 0. B, post-HCRT prøven; Grade 3. Forstørrelse, × 200. C, HLA klasse I-ekspression i præ- og post-HCRT prøver. Prædiktiv værdi blev testet ved hjælp af Wilcoxon-test.

Sammenhæng mellem HLA klasse I udtryk og prognose

5 år OS, LC, og DMFS for alle 78 patienter med Grade 0 -1 post-HCRT HLA klasse i-ekspression var 76%, 94% og 76%, henholdsvis, mens fem år OS, LC, og DMFS af patienter med Grade 2-3 post-HCRT HLA klasse i-ekspression var 79%, 74%, og 79% (tabel 3). Der var ingen signifikant korrelation mellem de tre outcome parametre og Grade af HLA klasse I-ekspression. Den pCR fremkaldt af HCRT viste en signifikant sammenhæng med god LC (p 0,05).

Næste, vi yderligere undersøgt prøver fra 56 patienter med stadium III sygdom til at bestemme sammenhængen mellem HLA klasse I-ekspression og prognose. Den 5-årige OS, LC, og DMFS for fase III patienter med Grade 0-1 post-HCRT HLA klasse I-ekspression var 70%, 100%, og 70%, henholdsvis, og 5-års OS, LC, og DMFS for patienter med grad 2-3 post-HCRT HLA klasse i-ekspression var 92%, 77% og 85%, henholdsvis (figur 3). Post-HCRT HLA klasse I-ekspression viste en signifikant negativ sammenhæng med LC (p 0,05). Men viste, at ingen af ​​de variable korreleret med klinisk prognose (tabel 4).

De kliniske resultater af 56 patienter med stadium III sygdom multivariat analyse. (A; samlet overlevelse, B; lokal kontrol, og C, fjernmetastaser overlevelse). Lav HLA klasse I-ekspression: grader 0 og 1; høj udtryk: kvaliteter 2 og 3.

Vi næste undersøgte undersøgt, om stigningen i HLA klasse I-ekspression induceret af HCRT forbedret det kliniske resultat for fase III patienter. Den 5-årige OS og DMFS for “øget” gruppe og “konstant eller faldt” gruppe var 77% og 78% (p = 0,97) og 71% og 78% (p = 0,66), hhv. Der var ingen signifikant sammenhæng mellem ændringer i HLA klasse I-ekspression og OS og DMFS. På den anden side, 5-års LC for “øget” gruppen og “konstant eller faldt” gruppe var 82% og 100% (p = 0,04). LC af “øget” HLA klasse I udtrykket gruppe var betydeligt værre end “konstant eller faldt” udtryk gruppe

Diskussion

De vigtigste resultater af den foreliggende undersøgelse var som følger.: (i) 19 (24%) og 58 (74%) af tumor vævsprøver fra patienter med rektal adenocarcinom viste Grad 0 ( 10%) eller Grad 1 (10-50%) ekspression af HLA klasse i henholdsvis; (Ii) præoperativ HCRT ført til en betydelig stigning i HLA klasse I udtryk; og (iii) multivariat analyse viste ingen signifikant positiv association mellem HLA klasse I-ekspression og overlevelse.

Speetjens et al. undersøgte ekspressionen af ​​HLA klasse I molekyler i rektal cancer [13]. De inddelt HLA klasse I-ekspression som følger: fraværende (ingen ekspression), negative (0-50% positive celler), og positive (51-100% positive celler). De rapporterede, at 9,7%, 32% og 58% af enhederne blev kategoriseret som fraværende, negativ eller positiv, henholdsvis når farvet for HLA klasse I antigen ved anvendelse af anti-HLA antistof, HCA2, men at 2,1%, 21%, og 77% var til stede, negativ eller positiv, når det blev farvet for HLA klasse i-antigen ved anvendelse af anti-HLA antistof, HC10. Kun en patient i den foreliggende undersøgelse viste 50% HLA klasse I positivitet. Denne uoverensstemmelse kan til dels forklares ved tre faktorer. Først, den primære monoklonale anti-HLA klasse I-antistoffer var forskellige. De brugte HCA2 (som reagerer med HLA-A (ikke HLA-A24), HLA-B73, og HLA-C molekyler samt HLA-E, HLA-F og HLA-G-antigener), og HC10 (som reagerer med HLA -B og HLA-C molekyler og HLA-A10, -A28, -A29, -A30, -A31, -A32 og -A33 tunge kæder) som de primære antistoffer. Men vi brugte EMR8-5, som reagerer med HLA-A * 2402, A * 0101, A * 1101, A * 0201, A * 0207, B * 0702, B * 0801, B * 1501, B * 3501, B * 4001, B * 4002, B * 4006, B * 4403, Cw * 0102, Cw * 0801, Cw * 1202, og Cw * 1502 som det primære antistof [18]. For det andet, semi-kvantitativ vurdering er ikke den mest præcise måde at evaluere HLA klasse I-ekspression. Endelig kan forskellene forklares ved “kræft immunoediting begreb” foreslået af Dunn, som beskriver tumor ændring proces bestod af tre sekventielle faser (elimination, ligevægt og flygte) at kunne accepteres af immunsystemet [20]. I dette koncept, havde det udviklende tumorcellen blevet elimineret ved immunsystemet, før de bliver klinisk synlig (eliminering), men en sjælden tumorcelle blev ikke dræbt af immunrespons, og dermed disse tumorceller emerge at forårsage klinisk synlig sygdom (ligevægt og flygte). Derfor fremskreden cancer har tendens til lav antigene tilstand. Også sammenlignet med Speetjens undersøgelse, den nuværende undersøgelse omfattede flere patienter med lokalt fremskreden rektal adenocarcinom (72% af patienterne havde stadie III sygdom). Således har vi måske fundet lavere niveauer af HLA klasse I-ekspression. Ifølge “kræft immunoediting koncept”, HLA klasse I-ekspression på tumorceller falder med fremrykkende scene

Kun få rapporter har undersøgt stråling-inducerede ændringer i HLA klasse I-ekspression på forskellige kliniske faser.; dog er det blevet påvist,

i

vitro

[12], [14], [15], [21]. Speetjens et al., Fandt også ingen signifikante forskelle i HLA klasse I-ekspression i tumorprøver fra patienter behandlet med eller uden bestråling [13]. Derimod fandt vi, at HLA klasse I-ekspression i rektale cancerceller steg efter HCRT og denne uoverensstemmelse kan skyldes strålingsdosis, intervallet mellem strålebehandling og kirurgi, eller til de forskellige analysemetoder anvendes. Speetjens et al., Behandlet en gruppe af patienter med 25 Gy pr fem fraktioner inden for 10 dage kirurgi og derefter sammenlignet HLA-ekspression i tumorceller fra bestrålede og ikke-bestrålede patienter. Derimod vi behandlede patienter med 50 Gy per 25 fraktioner inden for 5 uger efter kirurgi, og medianen intervallet mellem strålebehandling og kirurgi var 10 uger. Vi derefter sammenlignet HLA klasse I udtryk på tumorceller fra før og efter HCRT prøver fra de samme patienter. REITs et al. rapporterede, at bestråling førte til en dosisafhængig stigning i niveauerne af intracellulære peptider afledt af eksisterende proteiner og øget proteinsyntese via mTOR aktivering. Dette resulterede i en stigning i MHC klasse I-ekspression. Men den optimale dosis /fraktion og intervallet mellem bestråling og evaluering for det højeste niveau af HLA klasse I-ekspression i den kliniske fase er ukendt.

På den anden side, ændringer i HLA klasse I-ekspression måske gennem induceret af andre end stråling, f.eks, kemoterapi og /eller hypertermi faktorer. Gamerio et al. rapporterede, at hypertermi førte til en betydelig stigning i større histokompatibilitetskompleks (MHC) klasse I-protein-ekspression på overfladen af ​​murine colon adenocarcinom celler, der udtrykte human CEA [22]. Desuden Ohtsukasa et al. rapporteret, at anti-cancer medicin (f.eks 5-FU, SN-38, og CDDP) inducerede en markant stigning i MHC klasse I-ekspression ved menneskelig kolon cancer cellelinier celler (COLO 201)

i

vitro

[23]. Desuden de også rapporteret, at anti-cancer medicin induceret MHC klasse I-ekspression i murine kolon tumorceller,

i

vivo

. De troede, at denne ændring kan induceres ved kemoterapi-induceret produktion af endogene proteiner og /eller til øget transport af akkumuleret materiale til cellemembranen.

Disse resultater antyder, at den forøgede HLA klasse I-ekspression observeret i foreliggende undersøgelse blev udvidet efter en kombination af strålebehandling, kemoterapi og hypertermi. Yderligere undersøgelser er nødvendige for at forstå mekanismerne bag stigninger i HLA klasse I-ekspression induceret af forskellige behandlinger; men dette er den første rapport, der viser, at præ-HCRT øger HLA klasse I-ekspression i et klinisk miljø. Dette resultat antyder, at kombinationen strålebehandling med HLA klasse I-medieret immunterapi kan forstærke svage anti-tumor immunrespons, der skyldes tab af HLA klasse I-ekspression, hvilket er en stor mekanisme, ved hvilken tumorceller undslippe immunosurveillance.

Vi forventede at patienter bærer tumorer med høj HLA klasse I-ekspression ville have en gunstig klinisk prognose; men når vi udførte univariat analyse, fandt vi ingen signifikant positiv sammenhæng mellem HLA klasse I-ekspression og OS eller DMFS i fase III-patienter. Desuden viste LC en signifikant negativ sammenhæng med post-HCRT HLA klasse I-ekspression i fase III-patienter. I modsætning til resultaterne præsenteret heri, rapporterer de fleste tidligere undersøgelser, at patienter med tumorer udviser høj HLA klasse I-ekspression havde en bedre prognose [3] – [8]. Derudover, når vi undersøgte sammenhængen mellem HCRT-inducerede ændringer i HLA klasse I-ekspression og OS, LC, og DMFS, fandt vi, at LC viste en signifikant negativ korrelation med øget HLA klasse I-ekspression. Der er flere årsager til disse afvigelser, som følger: (i) kirurgiske faktorer kan have en stærkere indvirkning på klinisk prognose end pre-HCRT-induceret HLA klasse I udtryk og dets immunologiske effekt; (Ii) de immunologiske faktorer, der påvirker klinisk prognose er ganske komplekse (virkningen af ​​HLA klasse I-ekspression ikke var stærk nok til at påvirke den kliniske prognose); og (iii) antallet af fase III-patienter (56) var utilstrækkelig til at muliggøre en meningsfuld vurdering af klinisk prognose. . Derfor er yderligere undersøgelser nødvendige for at fastslå den forbindelse mellem HLA klasse I-ekspression og prognose i rektale kræftpatienter

Som konklusion den foreliggende undersøgelse, at HCRT kan øge HLA klasse I ekspression ved rektale cancerceller; imidlertid havde multivariat analyse ikke viser en forbindelse mellem HLA klasse I-ekspression og prognose.