PLoS ONE: polymorf Variation af gener i det fibrinolytiske system og risikoen for kræft i æggestokkene

Abstrakt

Introduktion

Ætiologien for kræft i æggestokkene er stort set ukendt. En hypotese er, at den ineffektive fjernelse af blodpropper og fibrin produkter, der deponeres i nærheden af ​​ovariet ved retrograd menstruation kan være forbundet med en øget risiko for ovariecancer. Flere et-polymorfismer i gener, som omfatter det fibrinolytiske system har vist sig at have funktionelle virkninger på hastigheden for blodprop nedbrydning. Disse blev anset for at være kandidatgener i nærværende undersøgelse.

Sigt

Vi studerede genotype fordelinger af 12 funktionelle SNP’er af fire gener (TPA, uPA PAI1 og TAFI) blandt 775 æggestokkene kræfttilfælde og 889 kontroller.

Resultater

Ingen signifikante associationer blev set mellem nogen af ​​de ti SNP’er og risikoen for kræft i æggestokkene som helhed eller i nogen histologisk undergruppe.

diskussion

Kimcellelinje kendte funktionelle varianter af gener i det fibrinolytiske system er ikke forbundet med risiko for kræft i æggestokkene

Henvisning:. Bentov Y, Brown TJ, Akbari MR, Royer R, Risch H, Rosen B, et al. (2009) Polymorf Variation af gener i det fibrinolytiske system og risikoen for kræft i æggestokkene. PLoS ONE 4 (6): e5918. doi: 10,1371 /journal.pone.0005918

Redaktør: Sudhansu Kumar Dey, Cincinnati Children Research Foundation, USA

Modtaget: Marts 17, 2009; Accepteret: 19 maj 2009; Udgivet 15. juni, 2009

Copyright: © 2009 Bentov et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Bentov Y Brown TJ, Shaw PA, Murphy KJ, Casper RF; Sammenslutningen af ​​et PAI-1 genmutation og ovariecancer. Mount Sinai Hospital /University Health Network, Institut for Obstetrik og Gynækologi Research Fund. Marts 2007. https://www.mountsinai.on.ca/care/womens-and-infants-health-program/womens-and-infants-program-at-mount-sinai-hospital. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Selvom årsagen til ovariecancer er ukendt, forskellige risikofaktorer synes at være relateret til reproduktion, prævention og inflammation. Paritet, ammende, piller og aflukning af æggelederne er alle beskyttende. I modsætning hertil endometriose og talkum er blandt de få kendte risikofaktorer. I det hele taget disse observationer antyder, at faktorer, som nedsætter antallet af ægløsningscyklusser er beskyttende og faktorer, der øger lokal inflammation kan være kræftfremkaldende.

Endometriose er forbundet med en signifikant øget risiko for ovariecancer [1], [ ,,,0],2]. Forekomsten af ​​endometriose hos patienter med epitelial ovariecancer, er 36% for klart cellecarcinom og 19% for endometrioide ovariecarcinom. I en undersøgelse blev ovariecancer findes i 5-10% af æggestokkene endometrioselæsionerne [3]. Det menes, at retrograd menstruation er nødvendigt for udviklingen af ​​endometriose [4]. Sterilisation og orale præventionsmidler forhindre (eller reducere) retrograd menstruation og begge er forbundet med en reduktion i risikoen for ovarie cancser [5] – [8]

Trods den høje forekomst af retrograd menstruation i op til 90. % kvinder [9], [10], forekomsten af ​​endometriose skønnes at være i området fra 7-10% af kvinder i den fødedygtige alder. En spekulativ forklaring på denne uoverensstemmelse er, at en intakt fibrinolytiske proces rydder blodpropper og endometrie celler fra bækken strukturer. Vi hypotese, at kvinder med et defekt fibrinolyse systemet ikke kan fjerne blodpropper effeciently og, som følge heraf, dette øger den tid, endometriske celler i menstruation blodpropper forbliver i kontakt med bækken strukturer. Disse celler kan eventuelt implantere på peritoneale eller ovarie overflade [11]. Hvis denne hypotese er korrekt, kan der være en sammenhæng mellem defekt fibrinolyse og risikoen for ovariecancer.

fibrinolytiske system omfatter en familie af proteiner, der omfatter to plasminogenaktivatorer (urokinase-plasminogenaktivator (uPA) og vævstype-plasminogenaktivator (tPA)), den zymogen plasminogen, den aktive form plasmin, og inhibitor proteiner, såsom plasminogenaktivator inhibitor type 1 (PAI1) og thrombin-aktiveret fibrinolyseinhibitor (TAFI).

tPA er den primære formidler af lokal intravaskulær fibrinolyse. Genetiske faktorer spiller en rolle i variationen af ​​endotel t-PA frigivelse [12]. C.-7351C T variant (rs2020918) inden for enhancer region af t-PA genet er stærkt korreleret med endotel t-PA frigivelseshastigheder. Denne SNP er forbundet med en øget risiko for myokardieinfarkt [13].

Forhøjede niveauer af uPA fremmer tumor celle-spredning og metastase og er forbundet med relativt dårlig prognose [14]. En funktionel polymorfisme af

uPA

genet er blevet beskrevet. Dette er en substitution af C til T i nukleotidsekvensen af ​​exon 6 koder kringle domæne resulterer i Pro til Leu udskiftning ved kodon 141 (rs2227564).

PAI1 er en serinproteaseinhibitor, der binder til begge plasminogenaktivatorer , t-PA og u-PA, som danner et stabilt kompleks, der er fjernet fra kredsløbet ved hepatiske celler [15]. Høje niveauer af PAI1 er et almindeligt fund i ovariecancer [16]. PAI1 over-ekspression er også forbundet med ringe overlevelse i patienter med ovariecancer [17] – [19]. Endvidere er det blevet foreslået, at PAI1 niveauer er vigtige i prognosen af ​​brystkræft og livmoderhalskræft [20] – [22]. I cancer transplantationsmodeller, er tumorvækst, invasion, og angiogenese formindskes i PAI1- manglende mus [23], [24]. Flere et-polymorfier (SNP’er) i PAI1 genet er blevet forbundet med en betydelig stigning i PAI1 proteinekspression [25].

Thrombin-aktiveret fibrinolyseinhibitor (TAFI) er en potent inhibitor af fibrinolyse, der fjerner carboxyterminale lysin rester fra delvist nedbrudt fibrin og fald plasminogen bindende [26].

In vivo

dyreforsøg viser, at hæmning af TAFI aktivitet ved carboxypeptidase øger trombolyse [27]. Cirkulerende niveauer af TAFI er stærkt styret af seks polymorfe variationer i promotoren og 3’UTR region af TAFI genet [28].

Vi foreslår, at funktionelle varianter i disse gener kan være relateret til æggestokkene kræftrisiko. Formålet med den foreliggende undersøgelse var at bestemme, om nogen af ​​kendte funktionelle polymorfier af disse fire gener af det fibrinolytiske system er forbundet med en øget risiko for invasiv ovariecancer.

Materialer og metoder Salg

Study Befolkning

sager blev konstateret gennem Ontario Cancerregisteret. Alle kvinder nyligt diagnosticeret med invasiv epitelial ovariecancer i Ontario, Canada, fra januar 1995 til december 1999 var støtteberettigede. Af 1694 potentielt berettigede tilfælde, 1016 kvinder indvilliget og forudsat blodprøver til DNA-test. Der var 775 kvinder, for hvem både en DNA-prøve og tilstrækkelig klinisk information var tilgængelige, og disse er genstand for den aktuelle undersøgelse. Patienterne blev kategoriseret i fire etniske grupper kaukasisk; Fransk canadisk, østasiatiske og indiske (tabel 1).

Et tusinde treogtres kontroller blev udvalgt fra raske kvinder, der deltog en screening klinik for godt-kvinder på kvindernes College Hospital, Toronto, mellem 1996 og 2001. af de kvinder, der er blevet kontaktet for at deltage i denne undersøgelse, ca. 80% enige, og forudsat en blodprøve og afsluttet en risikofaktor spørgeskema. Alle forsøgspersoner forudsat informeret samtykke til gentest. Controls ikke var blevet diagnosticeret med kræft. Undersøgelse forsøgspersoner blev bedt om at give oplysninger om deres etniske oprindelse, herunder oplysninger om fødested af deres fire bedsteforældre. 889 af disse sunde kvinder, der var fra de fire etniske grupper af sager blev indskrevet i denne undersøgelse.

Vi analyserede DNA-prøver fra 1664 forsøgspersoner 775 sager med ovariecancer og 889 kontroller. Patienter, der bærer en BRCA1 eller BRCA2 mutation blev udelukket. Tabel 1 indeholder demografiske oplysninger om de sager og kontroller.

genotype Varianter

Hver DNA-prøve blev kontrolleret for i alt 12 SNPs i de fire kandidatgener. Alle disse 12 varianter blev vist at påvirke ekspression eller funktion af deres forbundne gen eller protein [13], [25], [28]. Disse varianter omfatter rs2020918 (C.-7351C T) fra tPA-gen; rs2227564 (Pro141Leu) fra uPA genet; rs1799889, rs2227631, rs2227674 og rs6465787 fra PAI1 gen; og rs1926447 (Thr347Ile), rs3581491, rs2146881, rs3742264 (Ala169Thr), rs1087 og rs34813434 fra TAFI gen.

IPLEX kemi på en MALDI-TOF MassARRAY systemet (Sequenom Inc., San Diego, CA, USA) var anvendes til genotypebestemmelse de 12 SNPs i otte reaktioner. Procedurerne blev udført i overensstemmelse med producentens standardprotokol [29].

Statistiske metoder

Afvigelser af genotypefrekvenser i kontrollerne fra dem, der forventes under Hardy Weinberg ligevægt (HWE) blev vurderet ved χ

2 tests (1 frihedsgrad). Alle case-kontrol sammenligninger blev justeret for alder og etnicitet, hjælp multivariat logistisk regression og de justerede P-værdier og odds ratio (OR) blev rapporteret. Betragtning af antallet af sammenligninger i denne undersøgelse, en p-værdi på 0,01 blev anvendt som kriterium for statistisk signifikans. Foreninger mellem kræft i æggestokkene og SNP genotyper blev målt i undersøgelsen koncernen som helhed og derefter i undergrupper defineret ved histologisk type, alder ved diagnose og slægtsforskning. Slægtshistorie blev defineret som en eller flere første- eller anden grad slægtninge med brystkræft under alder 50 eller kræft i æggestokkene.

Resultater

Twelve SNPs, der repræsenterer fire gener blev undersøgt i 775 æggestokkræft tilfælde og 889 kontroller. To SNP’er i TAF1 (rs1087 og rs34813434) blev udelukket på grund af takster under 90%. Satserne call for de øvrige 10 SNPs var alle på over 95% og alle var i Hardy-Weinberg ligevægt blandt kontroller. De genotyper for disse ti SNP’er er vist i tabel 2.

For ingen af ​​de 10 undersøgte SNPs var fordelingen af ​​genotyper signifikant forskellig mellem de tilfælde og kontroller (tabel 2). Underafdeling af sager på grundlag af alder ved diagnose eller histologisk type, gav ikke nogen signifikant sammenhæng (data ikke vist).

Diskussion

Vi hypotese, at en arvelig defekt i fibrinolytiske vej kunne føre til en øget varighed af eksponering af ovarierne til blodpropper indeholdende epitelceller oprindelse fra mullerian tarmkanalen deponeret af retrograd menstruation, og derved øge risikoen for kræft i æggestokkene. Denne hypotese var baseret på den kendte beskyttende effekt af aflukning af æggelederne og oral antikonception mod kræft i æggestokkene, der forhindrer eller reducerer retrograd menstruation. Desuden har tidligere forskning vist en forøget aktivitet af inhibitorer af det fibrinolytiske system i patienter med ovariecancer. Trods det store antal prøver og SNP’er undersøgte resultaterne af den foreliggende undersøgelse var negative. De æggestokkene kræftformer, der er blevet stærkest forbundet med endometriose er de klare-celle og endometriod undertyper. Især i ingen af ​​disse subgoups var en forening fundet

Øget udtryk for flere fibrinolytiske modulatorer har været forbundet med øget risiko for kræft udvikling og dårlig prognose [14] -. [24]. Specifikt blev PAI1 vist sig at fremme tumorvækst på en dosisafhængig og scene-afhængig måde [30]. Desuden blev SNP rs1799889 i promotoren af ​​PAI1 genet vist ved 37 separate undersøgelser til udgør en væsentlig allel dosisafhængig sammenhæng mellem 4G allel og øget PAI1 proteinniveauet in vivo. De 4G /4G homozygote har de højeste niveauer af cirkulerende PAI1 [26].

Sternlicht et al [25] opdaget en sammenhæng mellem PAI1 niveauer og samlet overlevelse af brystkræft i en undersøgelse af 2.539 sager og 1.832 kontroller. Imidlertid blev PAI1 4G /5G SNP ikke forbundet med brystkræft incidens, kliniske resultat eller PAI1 udtryk. Disse forfattere konkluderede, at cancerassocierede signaler er vigtigere end kimcellelinje genetisk variabilitet ved bestemmelse af ekspressionen af ​​PAI1 hos brystkræftpatienter. I vores undersøgelse, at 4G /4G, 4G /5G og 5G /5G genotypiske distributioner var ens i de tilfælde og kontroller.

Vi inkluderede alle SNP’er af gener af det fibrinolytiske system, der blev fundet at være forbundet med en ændring i enten den koncentration af proteinet eller dets funktion.

Vi kunne ikke påvise nogen signifikant sammenhæng mellem fibrinolyse gen polymorfier og forekomsten af ​​kræft i æggestokkene i enhver histologisk undertype. Hvis den fibrinolytiske vej er involveret i kræft i æggestokkene, er risikoen ikke ud til at være påvirket af funktionelle polymorfier i de centrale gener. Men i betragtning af de tidligere studier, som rapporterer en mulig rolle for disse enzymer i initiering eller progression af kræft, kan det være, at variation i ekspressionen af ​​proteinerne i det fibrinolytiske system forbliver relevant for æggestokkene carcinogenese.