HCdc14A i den unikke kræftceller Blev Set langs side P53 status af Traces

Utroligt, opdagede vi, at Cdc14A protein er under ikke-presset tilstand en velafbalanceret protein uden påviselig protein omsætning inden for 4 gang. Vi næste undersøgte tiden program til udfældning ofhCdc14A protein efter proteasomhæmning med MG132. Inhiberingen af ​​proteasomaktivitet af MG132 resulterer hurtigt i aflejring og stabilisering ofp53, idet p53-proteinet normalt nedbrydes hurtigt i en proteasom-afhængig måde. Derfor, selvom hCdc14A dramatisk indsamler næste proteasomhæmning, vores resultater anbefaler ikke, at hCdc14A proteinis hurtigt omdanne ovre i en proteasom-afhængig manner.Lenalidomide

Siden MG132 inkubation resulterede i induktion af p53 før induktion af hCdc14A, overvejede vi, at måske p53 var medierer manifestationdc1 af hC4A. Det blev konstateret, at hCdc14A grader steget til nøjagtigt samme omfang efter MG132 kur i begge cellelinier. Derudover blev hCdc14A proteinmængder betydeligt steg også i p53 mutant cellelinien HT29. Faktisk MG132 steget betydeligt hCdc14A udseende uanset p53 stående i hver celle undersøgte linier. Deltage i cellecyklus regulation.Thus foruden tumor suppressor p53 er for nylig vist sig at binde til og dephosphoryleret ved hCdc14A phosphatase, kan dysregulering af hCdc14A spiller sandsynligvis Arole i carcinogenese. Imidlertid regelmæssighed mutationer fundet i hcdc14A genet i tumorcellelinier er forholdsvis lav. Anvender to forskellige monoklonale anti-hCdc14A antistoffer vi her til stede, at hCdc14A phosphatase differentielt udtrykkes i humane cancercellelinjer.

I melanom og neuroblastomcellelinier hCdc14A ekspression blev observeret at blive overraskende lav eller ikke påviselig mens dens udseende varierede betydeligt mellem forskellige cellelinjer fra andre typer kræft. Når proteinet ekspression af hCdc14A i de unikke cancercellelinier blev sat sammen p53 status sporene, blev en stærk slagside mod høje hCdc14A sigt observeret i vild type, men ikke mutant p53-udtrykkende celler. Den stærke fejl for lav ekspression af hCdc14A i cancerceller med vildtype p53 status sammenlignet med cancerceller med mutant p53 indikerer for os, at der sikkert er en solid udvælgelsesproces mod celler, der udtrykker høje mængder af hCdc14A i forbindelse med funktionelt p53. Det er sandsynligt, at høj hCdc14A sætning kan aktivere p53 i sidste ende forårsager cellecyklus arrest eller apoptosis.We har tidligere afsløret, at hCdc14A og hCdc14B kan dephosphorylere ser315 hjemmeside p53 in vitro. Her demonstrerer vi bevis den samme rolle med hensyn hCdc14A indephosphorylaing den ser315 hjemmeside p53 in vivo. Disse r315 hjemmeside p53 kan phosphoryleres af Cdk2 Cdk1 /cyclinA og /cyklin B in vitro og ved aurora kinase Ain væv.

For at binding af p53 til ikke-gentagne centrosomer som er afgørende i reguleringen af ​​centrosom dobbeltarbejde mønster ser315 site af p53 er-blevet påvist at være afgørende. Cdc14 fejl kan reddes af lige så hCdc14A og hCdc14B i gærceller, hvilket indikerer, at de er funktionelle homologe. Men, mens hCdc14A lokaliserer til centrosomer den hCdc14B fosfatase lokaliserer at nukleoler anbefale, at de to fosfataser kan have forskellige sæt af substrater, og derfor kan tjene unikke egenskaber i celler.Varens sammenslutning af hCdc14A til centrosomer og det faktum, at den kan kommunikere med og dephosphoryiere p53 både in vitro og in vivo tyder på, at hCdc14A sandsynligvis kan styre p53 function.AGI-5198

Desuden er det sat ved sin centrosomal lokalisering tæt på dit antal andre cellecykluskinaser og deres substrater sådanne som Cdk1, Cdk2, PLK1, aurora kinaser og BRCA1. Resultaterne demonstrerer, at hCdc14A er i en sofistikeret hjælp Cdk1 og cyklin B under interfase men ikke under mitose tyder på, at hCdc14A kan garantere, at oplevelsen af ​​Cdk1 /cyclin T-komplekset undertrykkes af hCdc14A under INTERFASE men ikke under mitose.