PLoS ONE: Fremstilling af anti-tumor Nanopartikel og dens Hæmning til peritoneal Formidling af tyktarmskræft

Abstrakt

Baggrund

5-fluorouracil (5-FU) er en af ​​de mest klassiske kemoterapi narkotika. Nanopartikel lægemiddeltilførselsvehikler tilbyde overlegenhed over mål effekt forbedring og bekæmpelse af bivirkninger. Der vides kun lidt dog som den specifikke effekt af nanopartikel på peritoneal udbredelse af tyktarmskræft. Formålet med denne undersøgelse er at forberede en NPS (nanopartikler) lastet med 5-FU og undersøge karakteristisk for nationale parlamenter og den rolle, det i peritoneal metastase knuder dannelse af menneskelig tyktarmskræft.

Metode /vigtigste resultater

Udarbejdet NPS (nanopartikler) læsset med 5-FU (5-fluorouracil) af PEG-PLGA med metoden til dobbelt emulsion. Derefter evaluere egenskaberne ved NPS ved scanningselektronmikroskopi, analysere fordeling partikeldiameteren og bestemme belastningseffektivitet. Detektere frigivelse træk NP’er in vitro og in vivo. Nøgne mus med peritoneale metastaser blev behandlet med 5-FU-opløsning eller 5-FU-NPs gennem bughulen. Tæl knuder på bughinden og mesenteriet og syn på størrelse med dem. Vi fik nationale parlamenter med gennemsnitlig diameter på 310 nm. In vitro viser frigivelse test NP kan frigive equably i 5 dage med frigivelseshastighed på 99,2%. In vivo kan NP’er gruppe holde højere plasmakoncentration af 5-FU længere end det i opløsning gruppe. Antallet af peritoneal formidling knude under 1 mm i 5-FU-sol gruppe (17,3 ± 3,5) og 5-FU-NP-gruppen (15,2 ± 3,2) er mindre end kontrolgruppen (27,2 ± 4,7) (P 0,05). Det samlede antal knuder i 5-FU-NP-gruppen (28,7 ± 4,2) er væsentligt mindre end i 5-FU-sol gruppe (37.7 ± 6.3) (P 0,05).

Konklusioner /Betydning

De nye anti-tumor nanopartikler fyldt med 5-FU ved PEG-PLGA kan frigive vedligeholde 5 dage og har hæmmende virkning til peritoneal formidling af tyktarmskræft i mus

Henvisning:. Tang Q, Wang Y Huang R, Du Q, Wang G, Chen Y, et al. (2014) Fremstilling af anti-tumor Nanopartikel og dens Hæmning til peritoneal Formidling af tyktarmskræft. PLoS ONE 9 (6): e98455. doi: 10,1371 /journal.pone.0098455

Redaktør: Vipul Bansal, RMIT University, Australien

Modtaget: Januar 19, 2014 Accepteret: Maj 4, 2014 Udgivet: 4 Jun 2014

Copyright: © 2014 Tang et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af “Wu Jie-ping” Medicine Foundation of China, (nr 04.102.303) og den særlige Foundation of Harbin Teknisk Innovation for talentfulde person (nr 2006RFQXS075) og Science fond for Distinguished Young Scholars af Heilongjiang-provinsen i Kina under Grant No. JC04-02. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Tyktarmskræft er den tredje hyppigste årsag til cancer-relaterede dødsfald på verdensplan. Peritoneal metastase af kolorektal cancer er fælles med forekomst på ca. 13%, hvilket blev rapporteret i undersøgelse om stor prøve tidligere [1] .Peritoneal metastase forekom hos 7% af patienterne med kolorektal cancer i den indledende behandling og i 4% ~19% patienter efter radikal kirurgi [2] .Den prognosen for tarmkræft peritoneal metastaser er dårlig, hvis median overlevelse er kun 5~9 måneder [3] .De nuværende systemiske kemoterapi baseret på 5-FU for tarmkræft har ikke opnået tilfredsstillende resultater, især i behandling af peritoneal formidling [4]. Et af problemerne med denne type terapi er den begrænsede afgivelse af systemisk administrerede lægemidler til den peritoneale [5]. Direkte intraperitoneal administration kan forårsage 5-FU absorberes i blodcirkulationen hurtigt resultere i utilstrækkelig dosis ankommer til lokal nodule i bughulen. Det er nødvendigt at udvikle nye strategier for behandling af peritoneal udbredelse i kolorektal cancer at opnå bedre resultater. Nanopartikel, som en ny bærer til antitumorlægemidler, er betalt en meget opmærksom på ved det medicinske område i begyndelsen 1978 indtil nu [6]. I de senere år har undersøgelser af polymer nanopartikel gjort en enorm fremgang i kraft af biokompatibilitet og bionedbrydelighed af polymere nanopartikler [7]. De polymere kugler kan beskytte lægemidlet fra ugunstige eksterne forhold og kontrollere dens udgivelse [8]. Sammenlignet med mikrokugler NPS har deres egen overlegenhed over mål effekt forbedring og bekæmpelse af bivirkninger [9] – [10]. Neovessels i tumor er mere gennemtrængelige for nanopartikler under 400-600 nm at passere, hvilket ikke blot kan forbedre target funktion, men også kan mindske bivirkningerne af antitumorlægemidler [11]. Mens har intraperitoneal indgivelse af nanopartikel antitumormidler til behandling af colorektal cancer peritoneal formidling ikke undersøgt grundigt. I lyset af dette, vi forberedte 5-FU nanopartikler med en ny teknik for det første og demonstrerede anti-tumor nanopartikler kan hæmme dannelsen af ​​peritoneal formidling af kolorektal cancer.

Materialer og metoder

Etik Statement

Alle dyreforsøg blev godkendt af Institutional Animal Care og brug Udvalg og etiske komité i Harbin Medical University og i overensstemmelse med retningslinjerne i dyreforsøg center i Harbin Medical University.

Forberedelse af 5-FU /PEG-PLGA nanopartikler

til at begynde med, er PLGA-PEG tilføjet i 80 ml dichlormethan. 4 ml 10% (vægt /vægt) NaOH-opløsning indeholdende 5-FU injiceres langsomt i blandingen under høj forskydning emulgering (Fa25 emulgator, Fluko, USA), let transparent emulsion blev således opnået. Dryppede dem i 160 ml 5-FU mættet opløsning indeholdende 5% (vægt /volumen) af PVA under en kraftig omrøring (Fa25 emulgator, Fluko, USA) i 5 minutter for at opnå den dobbelte emulsion (w /o /w) . Afdampning af opløsningsmiddel blev udført under vakuum med en roterende fordamper (RE-85A roterende fordamper, Henan Yuxin Instrument Corporation). Nationale parlamenter genvindes ved hjælp af centrifugering ved 12000 rpm, og senere vasket med 5-FU mættet, vandig opløsning og destilleret vand, som alle blev frysetørret omsider.

Evaluer kvaliteten af ​​nationale parlamenter

Vurdere morfologi karakteristisk for nationale parlamenter.

1 mg nationale parlamenter er spredt i 1 ml vand. NPS suspensioner blev droppet på dias og sprøjtede guld på, når det er tørt. Morfologien af ​​NPS undersøges ved scanningelektronmikroskopi (JSM-6700F, JEOL, og Japan).

Analyse af partikelstørrelse.

Partikelstørrelsesfordeling bestemmes ved laser størrelse analysator (LS -13.320 laser størrelse analysator, BeckmanCoulter, USA). Hvert produkt er analyseret for 30 gange efter suspenderet i destilleret vand.

Bestemmelse af indkapslingseffektiviteten.

5-FU belastningseffektivitet bestemmes ved termogravimetrisk analyse (STA409 termisk analysator, Tyskland). En vis mængde af tørre NP’er blev opvarmet ved opvarmningshastighed på 10 ° C /min under nitrogenatmosfære.

Evaluering in vitro OPHÆVELSESTEGN NPS Salg

50 mg 5-FU NP’er var dispergeret i 10 ml PBS (pH = 7,4). Denne opløsning tilsættes til en dialysepose, som blev sat i 90 ml PBS (pH = 7,4), forseglet og omrørt (-75 r /min) ved 37 ° C. En prøve på 10 ml blev opsamlet på bestemte tidsintervaller fra det ydre PBS og supplere lige store mængder af frisk PBS.

Evaluering af In Vivo Frigivelse Character af nationale parlamenter ved HPLC

Kunming mus blev købt fra Shanghai Laboratory Animal center (Shanghai, Kina). Mus, der blev huset under identiske betingelser fik fri adgang til en standard diæt og ledningsvand og udsat for en 12-timers lys: 12 timers mørke-cyklus. 90 Kunming mus er opdelt i 2 grupper tilfældigt. 5-FU-NP’er gruppe (n = 45) er forsøgsgruppen, mens kontrasten gruppe er 5-FU-opløsning gruppe, som begge er opdelt henholdsvis i 9 hold med 5 mus ved randomiseret fremgangsmåde. Behandle musene ved hjælp af intra-abdominalt med en dosis på 40 mg /kg. For at lindre lidelse, blev mus udført med inhalation anæstesi ved ethylether før det bliver blod. Blodet og sat i hepariniseret centrifugerør i 5 minutter ved 3000 omdrejninger fra øjenhuler tilsvarende på 0.083,0.167,0.333,0.5,1.0,1.5,2.0,3.0,4.0 timer. Tag Supernatantvæsken 200 pi i EP rør ind med 25 pi intern kontrol (50 ug /ml 5-Bru opløsning) og 800 pi eddikesyre ether præcist tilsat præcist, blandet ensartethed under turbulent omrøring i 1 min, og centrifugeret i 5 min ( 5000 rpm). Filter supernatanten væske ved mikropore film (0. 45 um), og derefter tørre det af kvælstof gas og opløse den ved mobil fase 100 pi. I sidste ende, er prøven injiceres i HPLC, så vi kan beregne plasmakoncentrationen af ​​5-FU.

Cell kultur

Den menneskelige kolon kræftceller HCT116 køb fra “center Den celle ressourcer af Shanghai Institute of life science, Chinese Academy of Sciences “, som blev opretholdt i 1640-medium, der var suppleret med 10% føtalt bovint serum, 100 U /ml penicillin G og 100 lg /ml streptomycin ved 37 ° C i en fugtig inkubator indeholdende 5 % CO2.

Cellelevedygtighed assay

Cellelevedygtighed blev bestemt under anvendelse af et 3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2.5-diphe-145 nyltetrazolium (MTT) assay som tidligere beskrevet [12].

kolonidannelse assay

HCT116-celler blev podet i 3,5 cm skåle (1000 celler /skål) og dyrket i 2 uger for at tillade kolonidannelse. 5-FU og 5-FU-NP’er blev tilsat i skåle separat. Kolonierne blev fikseret i methanol, farvet med 0,1% krystalviolet og talt.

Evaluering af 5-FU-NPS Virkninger på peritoneal udbredelse i musemodel

BALB /c-nu nøgne mus ( alderen 4 uger) blev købt fra Shanghai Laboratory Animal center (Shanghai, Kina). Alle eksperimenter dyr blev godkendt af Institutional Animal Care og brug Udvalg Harbin Medical University. Nøgne mus blev huset i SPF under identiske betingelser og tilladt fri adgang til en standard diæt og ledningsvand og udsat for en 12-timers lys: 12 timers mørke-cyklus. HCT116 celler (5 x 10

5 /mus) /ml saltvand blev injiceret i peritonealhulen af ​​4 uger gamle (Balbc- nu /nu) mus. Fem mus blev tildelt hver gruppe. 5-FU-sol og 5-FU-NP’er blev administreret i bughulen ved MTD på 40 mg /kg legemsvægt ugentligt fra dag 7. Mus blev aflivet på dag 28 efter bedøvet med ethyletherfor lindre lidelser. Antallet af peritoneale knuder blev talt henholdsvis ifølge diameter under 1,0 mm eller mere end 3,0 mm ved mikroskopi og data er vist fra et repræsentativt experiments.Tumor volumen blev beregnet baseret på formlen V = π × L × S × S /6 (L, den lange akse. S, den korte akse)

Cell cyklus og apoptose analyse med flowcytometri

Se supplerende metoder i File S1

Resultater

Analyser morfologien, partikelstørrelsesfordeling, og indkapsling af effektiviteten af ​​5-FU-NP

Da SEM foto gaver (figur 1A) morfologien af ​​NP’er afslører en sfærisk eller elliptisk struktur med glat overflade og ikke vedhængende med hinanden. SEM foto af nationale parlamenter i 10000 og 48000 forstærkning blev vist i Figure.S1 i File S1. Partikelstørrelse demonstreres i partikelstørrelse bestemmelse, med den gennemsnitlige diameter på 310 nm er godt fordelt (figur 1B). De oprindelige parametre for laser-size-analyse for nationale parlamenter optaget i Figure.S2 i File S1. Indkapsling effektivitet nationale parlamenter er (15,38 ± 0,56)% påvist fra 5 prøver.

(a) SEM-scanning viste NPS med kugleform og glat overflade. (B) nanopartikler størrelse blev analyseret ved laser-størrelse analysator. Resultaterne viste gennemsnitlig diameter på nationale parlamenter er omkring 310 nm. Fordeling af nanopartikler var intervallet fra 255 nm til 469 nm og 70% var mindre end 385 nm. P. 0,05

In vitro Frigivelse af 5-FU fra nationale parlamenter

Resultatet af in vitro-frigivelse af 5-FU fra nationale parlamenter er vist i (Figure.2). 5-FU kan frigive opretholde i 5 dage med akkumulerende release beløb op til 99,2% .Linear anfald af Q for at frigive tid (t) får release funktion:. Q = 20,9037 + 0,80953 * t

5-FU-NP farmakokinetik in vivo

i denne forskning, retentionstiden for 5-FU er 4,6 min, som er vist i kromatogram (figur 3A, 3B, 3C). Standardkurve ligninger af Y (toparealerne for 5-FU og intern standard) og C er Y = 0.06266C + 0,01752 (R = 0,99687) (n = 5), den laveste påviselige grænse er 0,05 ug /ml, præcision RSD på lav, mediale og høj koncentration er 9,05%, 4,73%, 2,97% henholdsvis og inddrivelse sats er 87,43%, 102,91%, 108,64% hhv.

Kromatogram blev vist i (a) for blank plasma, (b ) for plasma med 5-FU og 5-Bru, og (c) for prøve i plasma med 5-FU og 5-Bru. (5-Bru som endo-parameter). C-T-kurve viste, at den gennemsnitlige opholdstid for (d) 5-FU-NP’er er 0,490 længere end (e) 5-FU-opløsning (0,271 h). Og koncentrationen ikke kan identificeres 2 h senere for 5-FU løsning gruppe.

Figure.3 illustrerer strømmen af ​​CT i plasma efter musene er blevet administreret i maven (figur 3D, 3E) . Arealet af CT-kurve (AUC0~t), når musene administreres, og den gennemsnitlige opholdstid (MRT0~t) beregnes ved anvendelse af farmakokinetikken statistisk software DAS2.0, og derefter fortsætte på T-test med SPSS10.0 software (tabel 1).

5-FU-nationale parlamenter undertrykker væksten af ​​kolorektal cancer celler

for at undersøge, hvordan 5-FU-nationale parlamenter påvirke spredning af tyktarmskræft celler, vi udført MTT og klone dannelse assays i HCT116-celler. MTT resultater viste, at antallet af levedygtige celler i 5-FU-NP var signifikant færre end negative kontrolceller efter 24 timer, 48 timer, 72 timer, 96 timer, som også færre end 5-FU-sol gruppe ved 48 h, 72 h, 96 h (figur 4A). Som forventet, 5-FU-NP’er inhiberede væksthastigheden af ​​celler, sammenlignet med kontrolgruppen. Celler blev derefter dyrket i 14 dage til at udføre klon dannelse assay. Som resultaterne viste, at 5-FU-sol og 5-FU-NP’er både kan reducere koloni numre sammenlignet med kontrolgruppen. Længere mere, 5-FU-NP’er resulterede i et fald på over 35% i koloni numre sammenlignet med 5-FU-sol gruppe (figur 4B). Celle cyklus blev blokeret ved både 5-FU-opløsning og 5-FU-NP’er sammenlignet med kontrolgruppen (figur S3 i File S1). Desuden blev apoptose analyse assay også udført for at erklære, hvordan 5-FU-NP sker på evne for tyktarmskræft celle. (Figur S4 i File S1) Den flowcytometri Resultaterne viste, at 5-FU-sol og 5-FU-NP’er kan fremme apoptose af coloncancerceller sammenligne med mock eller PEG-PLGA. Som resultaterne viste, at 5-FU-NP’er kan forstærke effekten af ​​5-FU på cellecyklus eller apoptose delvis sammenlignet med 5-FU-sol, men virkningerne var ikke signifikant.

(a) HCT116 celle linje blev tilsat med 5-FU-NP eller 5-FU-sol eller PEG-PLGA eller mock og udsættes for en celle-levedygtighed assay i 24 timer, 48 timer, 72 timer og 96 timer. (B) En klon dannelse blev udført i mock, PEG-PLGA, 5-FU-sol og 5-FU-NPS grupper. * P 0,05, i forhold til kontrol. ** P 0,05, versus 5-FU-sol. (C) Repræsentative billeder efter tilsætning med PEG-PLGA, 5-FU-sol og 5-FU-NPs og mock.

hæmmende virkning af 5-FU-NP på peritoneal udbredelse dannelse af kolorektal cancer in vivo

virkningen af ​​5-FU-NPs på peritoneal udbredelse bedømtes. Makroskopisk dessemination med synlige tumorknuder var til stede i bughulen (Figure.5B). Alle musene blev aflivet på dag 14, og antallet af tumorknuder i mesenteriet blev talt (Table.2). Det gennemsnitlige antal metastatiske knuder mindre end 1 mm i 5-FU-sol-gruppen (17,4 ± 3,6) og 5-FU-NP-gruppen (15,2 ± 3,2) er mindre sammenligning med kontrolgruppen (27,2 ± 9,7) (P 0,05) . Det samlede antal knuder i 5-FU-NP-gruppen (28,7 ± 5,5) er væsentligt mindre end i 5-FU-sol gruppe (37,6 ± 5,4) (P 0,05) .De tilfælde af peritoneal formidling var 100% i alle grupper . Forekomsten af ​​levermetastaser i 5-FU-NP-gruppen (33,3%) er lavere end kontrolgruppen (100%) (p 0,05). (Figure.5A) Salg

(a) Metastatisk knuder i bughulen blev talt ifølge diameter under 1 mm, 1~3 mm eller mere end 3 mm. (B) Synlige tumorknuder var til stede i bughulen i repræsentative billeder af nøgne mus blev aflivet 4 uger efter i.p. injektion med HCT116 celler.

Diskussion

Peritoneal udbredelse er alvorligt problem for fremskreden tyktarmskræft patient på grund af sin dårlig prognose og manglen på effektiv behandling [13]. 5-FU, en af ​​de mest klassiske anti-tumor lægemidler, som kan hæmmer DNA-syntesen behandling af tumorcelle, er meget udbredt i fordøjelsessystemet cancer [14] – [15]. Imidlertid dosisafhængig toksicitet begrænset den fælles indgivelse ved venøs injektion og mindre dosering ankommer til peritoneale knuder gennem systemisk cirkulation resultere i dårlig behandlingsvirkning til peritoneal metastase af tyktarmskræft [16] – [17]. Derfor er det afgørende at finde den hidtil ukendte strategi til peritoneal metastase af tyktarmskræft. I den foreliggende undersøgelse, har vi udarbejdet en anti-tumor-NP belastning med 5-FU kan bidrage til helbredelse af peritoneal udbredelse af tyktarmskræft.

5-FU-NP’er blev fremstillet ved høj forskydning emulgering i stedet for ultralyds emulgering, som udvidede emulgerende energi, så opnåede NP’er med diameter på 310 nm (Figure1A). Vores tidligere undersøgelser viste, at vi kan opnå NP’er i forskellig størrelse ved at justere indre volumen vandfase og dispersionen tid [18]. Sammenlignet med anvendelse af ultralyd emulgering rapporteret før, det forenkler processen med forsøget og overvinder begrænsningen af ​​den relative lave output på grund af anstrengelse af den ultrasoniske emulgering [19]. Endvidere er partikelstørrelsen af ​​mikrosfære reduceres effektivt og godt fordelt. Undersøgt fra partikelstørrelsesfordelingen, diameter 70% nanopartikel er mindre end 385 nm med fordelingen området fra 255 nm til 469 nm (Figure1B). Vi forsøger at erstatte PLA med PLGA (50:50) og kæden af ​​PEG fra 5000 til 2000, som bidrager til skabe godt fordelt 5-FU-NP’er hvis indkapslende effektivitet var 15,4%. For at PEG-PLGA med gunstige Histocompatibility og bionedbrydelighed, er de generelt i de medicinske og biologiske luftfartsselskaber [20] – [21]. Denne forskning viser, at denne 5-FU-nationale parlamenter kan holde frigive opretholde omkring 5 dage langsomt og jævnt in vitro som simulerede menneskelige krop miljø inde i bughulen (figur 2).

For at erklære in vivo frigive karakter af denne hidtil ukendte 5-FU-NP, farmakokinetiske eksperimenter blev praktiseret in vivo. Lægemidlerne indkapslet af NP, en ny type medicinsk bærer, sædvanligvis taget i af lever og milt første, som indeholder rigelige endotheliale system [22] – [23]. Ifølge undersøgelsen i mus, fandt vi, at der findes en slags disharmonisk kammermodel mellem forskellige individuelle data og blod lægemiddel niveau. 5-FU-NP viser to compartment model in vivo sammenligning med kontrolgruppen præsentere et rum model, hvilket resulterer i anvendelsen af ​​statistiske øjeblik. Den gennemsnitlige opholdstid (MRT (0-t)) 5-FU-NP gruppe er 0.490 timer (P 0,01), hvilket naturligvis længere end kontrolgruppen (0,271 h) (figur 3D, 3E). Det er vist, at 5-FU-koncentration ikke kan identificeres i 2 h til kontrolgruppen, som viser almindelig 5-FU blev nedbrudt in vivo kort tid. Området i CT (AUC (0-t)) er 4,372 mg /L • h Cmax er 17.06 pg /ml i 5-FU-nationale parlamenter gruppen sammenlignet med kontrolgruppen er 67.77 pg /ml, som kan skyldes forrang indtag . i målvæv for lægemidler, indlæst af nanopartikler (tabel 1)

Anti-tumor NP kan hæmme tumor metastase i bughulen er angivet i mange undersøgelser [24] – [25]. Det er dog ikke klart, hvordan behandlingseffekten af ​​anti-tumor nanopartikler for tyktarmskræft peritoneal formidling. MTT undersøgelser bekræftede vores hypotese om, at 5-FU nanopartikler terapeutiske midler er mere effektive end normalt 5-FU-opløsning, især efter 48 timer (Figure4A). De samme resultater blev viste i klon formation assay (figur 4B) .På den anden side funktionen af ​​5-FU virkning på apoptose eller cellecyklus blev hverken styrket ved 5-FU-NP’er sammenlignet med 5-FU-NP, der var bevist i apoptose og cellecyklus-analyse ved flowcytometri metoder (figur. S3, S4 i File S1). Som vist i figur 4C, 5-FU-sol og 5-FU-NP’er førte til ændrede morfologiske karakteristika sammenlignes med mock, som identificeres af en spredt fordeling af celler i kultur og en spindle- eller stjernelignende morfologi af cellerne ( Figure4C). Denne ændring af morfologiske kendetegn, kan resultere ud fra 5-FU-NP’er effekt på epitel-mesenkymale overgang funktion i cancerceller [26], som bør være undersøgelse i fremtiden. På den anden side, for at påvise in vivo-effektivitet af 5-FU-NPS terapeutika til peritoneal formidling, vi udviklet en peritoneal metastasemodel at efterligne den menneskelige tilstand. Antallet af knuder blev evalueret efter diameter og delt i 3 grupper. Resultaterne illustrerer, at 5-FU-NP’er har evnen til at inhibere knudedannelse overlegen i forhold til både positive kontrolgruppe og negativ kontrolgruppe (figur 5A, 5B).

Det kan konkluderes, at opnå en bedre prognose for patienter med intraperitoneale metastaser, etablering af effektiv strategi behandling er afgørende. I denne undersøgelse har vi med succes fremstilles anti-tumor nanopartikler fyldt med 5-FU, som påviste hæmning effekter i coloncancercellelinie og peritoneale dataudsendelser i nøgne musemodel. Derfor kan det være en hidtil ukendt anti-tumor forberedelse til peritoneale metastaser med dybe perspektiver i klinisk anvendelse. Det har stadig undersøges yderligere for detalje mekanisme i fremtiden.

Støtte Information

File S1.

en. Supplerende resultater. Fig.S1 SEM scanninger af 5-FU-NP’er. Fig.S2 5-FU NP’er størrelsesanalyse. Fig.S3 Cell cyklus blokeret af 5-FU-NP’er. Fig.S4 Apoptose fremmes af 5-FU-NP’er. 2. Supplerende metoder. Laser størrelse analyse af Particle. Flowcytometri og cellecyklus-analyse. Flowcytometri apoptose analyse med PI og annexin V farvning

doi: 10,1371 /journal.pone.0098455.s001

(DOC)