VEGF-sekretion blev forhøjet med cisplatin ved cisplati

Den øgede optag af 2 NBDG kan være som følge af opregulering af Glut 1-ekspression. For at undersøge dette, vi undersøgte dernæst immunfluorescensfarvning af Glut 1-proteinet. I forbindelse med kontrol klumpformet af Ishikawa celler blev farvningen observeret hovedsageligt i regioner, der var ved siden af ​​nøglen, men farvningen var mindre i kanten af ​​sfæroider. Men, efter behandlingen med doxorubicin, blev stærk farvning ses kun i kernen. Tilsvarende kontrol celle aggregater af RL95 2 celler bekræftede robust farvning af Glut 1 på kanten og centralt område men farvningen blev betalt efter doxorubicin terapi. Doxorubicin nedsat plasma membranassocieret Glut 1 i KLE sfæroider. Mærkeligt, uanset cisplatin faldende optag af 2 NBDG ved, misfarvning af Glut 1 blev ikke væsentligt ændret i RL95 2 aggregater og KLE celleklynger. Således blev konsekvenserne for ekspansion af doxorubicin og cisplatin ikke åbenlyst forbundet med skift af glukose kcalorie brændende og som er blevet bekræftet af mønstret for optagelse af to NBDG og udtryk for Glut 1. Endvidere mængden af ​​glukosemetabolismen var ikke umiddelbart fra ekspression af Glut 1. Vi valgte superoxiddismutase 1 som et surrogat markør for antioxidant proteiner, til at undersøge den defensive rolle af disse antioxidant proteiner under medicin dækning i 3D og 2D cellekulturer. Alle cellelinjer dyrket i 3D cellestrukturer udtrykte høje niveauer af SOD 1 og dens udtryk blev bevaret efter oplevelsen af ​​cisplatin og doxorubicin. RL95 2 cellelinjer og cellemonolag af Ishikawa sænkede SOD 1-ekspression efterbehandling med begge lægemidler. Graden af ​​SOD 1 ekspression i mobile monolag af KLE ændrede sig ikke. Voksende tumorigen handling er ofte forbundet med øget frigivelse af VEGF. Dernæst vi spørgsmålstegn ved, om doxorubicin og cisplatin forhindrer sekretion af VEGF. Celler fra 3D cellekulturer generelt set frigivet mindre VEGF end cellemonolag. Sfæroider af Ishikawa og celleaggregater af RL95 2 celler ændrede ikke VEGF-sekretion efter doxorubicin behandling men det var betydeligt sænket i celle-monolag af disse cellelinier. Doxorubicin, paradoksalt nok, forbedret VEGF frigivelse fra cellegrupper, men ikke celle monolag af KLE celler. VEGF-sekretion blev også øget af cisplatin fra sfæroider af Ishikawa-celler, men det reducerede udskillelse fra monolag. Cisplatin havde ingen påviselige virkninger på VEGF udledning fra RL95 2 eller KLE celler. Vores virkninger foreslåede doxorubicin og cisplatin entydigt ændret sekretion af VEGF på en måde, der var afhængig af cancercellelinie og var også cellekultur teknik afhængige. Opregulering af p Akt kan øge tumorprogression og medierer resistens over for lægemidler. Kraftfuld farvning af p Akt blev opdaget ved cellemembranen i kontrollen af ​​Ishikawa sfæroider og RL95 2 celleaggregater. Doxorubicin rettet sfæroider viste mindre g Akt forbundet membranfarvning men forbedret diffus farvning i cytoplasmaet. Lignende resultater blev bemærket i doxorubicin adresseret RL95 2 celle aggregater. Cisplatin frembragte ikke ændringer. På den anden side, celleklynger af KLE celler udviste ringe farvning af p Akt. Western blotting viste, at sfæroider af Ishikawa-celler udtrykte p Akt, som ikke blev ændret af anticancerlægemidler. Cellemonolag af Ishikawa-celler havde minimal ekspression af p Akt og doxorubicin let forbedret p Akt ekspression.