PLoS ONE: First-In-Class Lille Molecule ONC201 inducerer DR5 og celledød i tumor, men ikke normale celler til at levere en bred terapeutisk indeks som en anti-kræft Agent

Abstrakt

Vi har tidligere identificeret ONC201 (TIC10 ) som et første-in-class oralt aktiv lille molekyle med robust antitumoraktivitet, der er i kliniske forsøg i fremskredne kræftformer. Her har vi yderligere at undersøge de sikkerhedsmæssige egenskaber ved ONC201 i prækliniske modeller, der afslører en fremragende sikkerhedsprofil ved doser, der overskrider effektive doser ved 10-fold. In vitro-undersøgelser indikerede en markant anderledes dosis-respons-forhold, når man sammenligner tumor og normale celler, hvor maksimale virkninger er meget stærkere i tumorceller end i normale celler. I yderligere støtte af et bredt terapeutisk indeks, undersøgelse af tumor og normal celle responser under identiske betingelser viste store apoptotiske effekter i tumorceller og beskedne anti-proliferative virkninger i normale celler, der var ikke-apoptotiske og reversibel. Sondering den underliggende mekanisme af apoptose indikerede, at ONC201 ikke inducerer DR5 i normale celler under betingelser, der inducerer DR5 i tumorceller; DR5 er en pro-apoptotisk TRAIL receptor tidligere bundet til anti-tumor mekanisme ONC201. GLP toksikologiske undersøgelser i Sprague-Dawley rotter og beagle hunde på terapeutiske og overdrevne doser viste ingen dosisbegrænsende toksiciteter. Observationer i begge arter ved de højeste doser var milde og reversible ved doser over 10 gange den forventede terapeutiske dosis. Den ikke medfører observeret skadelig begivenhed niveau (NOAEL) var ≥42 mg /kg i hunde og ≥125 mg /kg i rotter, som begge svarer til en human dosis på ca. 1,25 g antager standard allometrisk skalering. Disse resultater gav begrundelsen for 125 mg startdosis dosis eskalering kliniske forsøg, der begyndte i 2015 i patienter med fremskreden kræft

Henvisning:. Allen JE, Crowder R, El-Deiry WS (2015) First-In -Class Small Molecule ONC201 inducerer DR5 og celledød i tumor, men ikke normale celler til at levere en bred terapeutisk indeks som anticancermiddel. PLoS ONE 10 (11): e0143082. doi: 10,1371 /journal.pone.0143082

Redaktør: Shi-Yong Sun, Emory University, UNITED STATES

Modtaget: August 12, 2015; Accepteret: 30 oktober 2015; Udgivet: November 18, 2015

Copyright: © 2015 Allen et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden papiret

Finansiering:. WS El-Deiry er en American Cancer Society Research professor. Dette arbejde blev støttet af Oncoceutics og en Pennsylvania Department of Health tilskud til Oncoceutics

Konkurrerende interesser:. Joshua Allen er en medarbejder og aktionær i Oncoceutics, Inc., og Wafik El-Deiry er en oplagrer Oncoceutics, Inc. Dette ændrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikker om datadeling og materialer.

Introduktion

ONC201, også kendt som TIC10, er et lille molekyle, der er i kliniske fase II forsøg i udvalgte avancerede kræftindikationer. I prækliniske undersøgelser ONC201 besidder en kræft mutation-agnostisk virkningsprofil, der ikke påvirkes af fælles onkogene mutationer, der driver sygdomsprogression og terapeutisk modstand. Vi har tidligere rapporteret identifikationen af ​​ONC201 som en ny first-in-class oralt aktiv lille molekyle med anti-cancer aktivitet baseret på dets evne til at fremkalde den pro-apoptotiske TRAIL vej [1]. TRAIL pathway er en kritisk effektormekanisme i immunovervågning af kræft, der er i stand til at eliminere tumorceller via apoptose uden at skade normale værtsceller [2]. Immunceller opregulerer TRAIL på celleoverfladen, som binder til de pro-apoptotiske receptorer, DR4 og DR5, som udtrykkes på overfladen af ​​tumorceller i sidste ende at udløse den ydre eller indre celledød pathway i en celle-type, afhængig måde [3 ].

på trods af deres oprindelige motivation, mange målrettede behandlinger har vist sig at være betydeligt giftigt og kemoterapi fortsat hjørnestenen i medicinsk indgreb i onkologi for de fleste indikationer. Kemoterapeutiske midler eller targeted midler forårsager en masse alvorlige bivirkninger, der er invaliderende og dosisbegrænsende, såsom nefrotoksicitet, hepatotoksicitet, perifer neuropati, træthed, kvalme, anæmi, hud toksiciteter, GI toksiciteter, lunge toksiciteter, kardiotoksicitet, leukoencephalopati, trombocytopeni og neutropeni blandt andre [4]. Således er der er et uopfyldt behov for behandlinger med færre bivirkninger i onkologi [5], som er særlig udtalt for kræft patientpopulation, der er uforholdsmæssigt ældre, svagelige, lider irreversible terapi toksiciteter og /eller vil have gavn af kronisk terapi, der er kompliceret med de tilgængelige behandlingsmuligheder [6].

Vores indledende rapport [1] viste, at ONC201 ikke signifikant inducerer apoptose i normale humane fibroblaster ved doser, der udløser udtalt celledød i humane cancerceller. Desuden flere effektstudier udnyttet doser på op til 100 mg /kg i mus uden forekomst af ONC201 dødelighed, grove eller histologiske morfologiske ændringer, eller vægttab. Immunohistokemiske analyser af normale væv i ONC201-behandlede mus viste, at TRAIL, som induceres af ONC201 som en del af dens mekanisme, opreguleres på proteinniveauet i hjernen, nyre og milt fra normale mus uden tilsyneladende toksicitet som bestemt ved histologi og TUNEL-farvning. Disse observationer tyder på, at ONC201 er til stede ved farmakologisk aktive niveauer i disse normale væv uden at forårsage tilsyneladende toksicitet ved de administrerede doser.

Siden vores første rapport om ONC201, en række undersøgelser er blevet gennemført for at validere den prækliniske profil ONC201 og lette kliniske oversættelse af denne unikke lægemiddelkandidat i fremskredne kræftformer. Her rapporterer vi prækliniske undersøgelser, der bekræfter evne ONC201 at skelne tumor fra normale celler i cytotoksicitet og validere bevarelsen af ​​denne sikkerhedsforanstaltning i andre arter i GLP toksikologiske undersøgelser. Vores resultater fremhæve et bredt terapeutisk indeks for ONC201 der kan bestemmes ved forskelle i dens virkninger på celledød receptor signalering mellem tumor og normale celler.

Materialer og metoder

Cell kultur og reagenser

Cellelinjer blev fremskaffet fra ATCC og dyrket i ATCC-anbefalede medier i en fugtig inkubator ved 5% CO

2 og 37 ° C. ONC201 dihydrochlorid blev opnået fra Oncoceutics som tidligere beskrevet [7]. Den frie base forberedelse af forbindelsen kan fås fra NCI DTP.

Cell cyklus analyse

For cellecyklus-analyse blev celler trypsiniseret på de angivne tidspunkter og fikseret i 80% ethanol ved 4 ° C i mindst 30 minutter. Fikserede celler blev derefter farvet med propidiumiodid i nærvær af RNase og analyseret på en Epics Elite flowcytometer (Beckman Coulter). Cellelevedygtighed blev vurderet ved anvendelse celle TiterGlo (Promega) i 96-brønds plader ved anvendelse af fabrikantens protokol.

Flowcytometrianalyse

I overfladen TRAIL eksperimenter, adhærente celler blev høstet ved kort trypsinisering, fikseret i 4% paraformaldehyd i PBS i 20 minutter, inkuberet med et anti-TRAIL-antistof (Abcam, ab2435) ved 1: 250 overnight, vasket og inkuberet med anti-kanin AlexaFluor 488 (Invitrogen) i 30 min, og analyseret. Celler blev gated på forward og sidespredning at fjerne snavs og døde celler fra analysen. Surface TRAIL data udtrykkes som median fluorescensintensitet i forhold til den af ​​kontrolprøver medmindre det er anført andet. Surface DR5 blev analyseret på samme måde anvendelse af et antistof fra IMGENEX og en lignende protokol.

Dyreforsøg

GLP toksikologiske undersøgelser blev udført på Calvert Laboratories i overensstemmelse med de amerikanske FDA GLP regler i kraft på det tidspunkt af forsøgets gennemførelse (god laboratoriepraksis Regulations, afsnit 21 Code of Federal Regulations Part 58. Alle procedurer blev udført under en protokol, der blev godkendt af Calvert IACUC. Sprague Dawley rotter (ca. 10 uger gamle) blev opnået fra Harlan Sprague Dawley. Beagle hunde (ca. 5-6 måneder) blev opnået fra Marshall bioressourcer (North Rose, NY). ONC201 dihydrochlorid blev formuleret i phosphatbufret saltvand. Dosering præparater blev opbevaret ved stuetemperatur efter tilberedningen og udnyttes inden for 4 timer efter afslutningen af ​​forberedelse .

Dyr blev doseret en gang på dag 1 via oral sonde. Dødelighed /sygelighed observationer blev registreret to gange dagligt og mindst en gang om dagen for planlagt eutanasi. Kliniske iagttagelser blev evalueret før dosis administration og cirka en time efter dosering på dosering dage og en gang dagligt på non-doseringsdage. Funktionel Observational Batteri blev observeret ved påbegyndelse af behandling og på dag 1 mellem 1 og 2 timer efter dosering. Legemsvægte blev registreret før dosering på dag 1 og på dag 2, 7, 14 og 18. fødevarer forbruget blev registreret dagligt. Blev optaget elektrokardiogrammer for alle dyr før behandlingsstart og på dag 1 mellem 2 og 4 timer efter dosering. Blodtrykket blev opnået fra alle dyr før behandlingsstart og på dag 1 mellem 2 og 4 timer efter dosering. Blod til evaluering af hæmatologi, koagulation og klinisk kemi og urin for urinanalyse blev opsamlet før dosering og på dag 3 eller 19. Blod til toksikokinetiske evaluering blev opsamlet fra alle dyr på udvalgte tidspunkter på dag 1. Alle dyr blev aflivet på dag 3 eller Dag 19. udvalgte væv blev høstet ved obduktion, valgte organer vejet, og udvalgte væv evalueret mikroskopisk.

Resultater

ONC201 ikke inducerer celledød i normale celler ved effektive doser

Vi analyseret virkningerne af ONC201 på normal human fibroblast proliferation i cellekultur efter en 72 timers inkubation. Sammenligning dosis-respons-forhold mellem tumorvæv og normalt cellelinier afslørede en lignende vendepunkt i cellelevedygtighedsassays på ~ 5 pM som efterfølgende mættet i alle testede cellelinier. Interessant, virkningerne af ONC201 mættet ved meget højere størrelser i tumorceller end normale celler (Fig 1A), dvs. der var kun lidt eller ingen toksicitet i de normale celler, mens tumorcellerne syntes at helt mister levedygtighed ved de højere doser. Denne observation er i skarp kontrast til den positive kontrol, doxorubicin, som resulterede i massiv celledød af både tumor og normale celler. De uensartede reaktioner på ONC201 mellem tumor og normale celler indikerer en bred terapeutisk indeks for ONC201 in vitro.

(A) Cell levedygtighed assays efter ONC201 behandling ved angivne koncentrationer i 72 timer (n = 3). Doxorubicin (Doxo) blev anvendt ved 1 pg /ml som en positiv kontrol i normale fibroblaster. (B) Cellecyklusanalyse af tumorceller og normale celler efter behandling med ONC201 (5 uM) eller doxorubicin (Doxo, 1 pg /ml) i 72 timer (n = 3). (C) Cellelevedygtighed assay i MRC5-celler efter en 72 timers behandling med ONC201 (5 uM) eller DMSO og det indikerede restitutionsperiode i fuldstændig stoffri medier efter denne behandling (n = 3). Tidspunkter er givet som tid efter fjernelse på ONC201 efter 72 timer behandling. (D) Cellelevedygtighed af tumorceller og normale celler efter behandling med ONC201 (5 uM, n = 3) i 72 timer.

For at konstatere, om beskeden reduktion i cellelevedygtighed observeret i normale celler var associeret med en reduktion i proliferation eller en stigning i celledød, undersøgte vi cellecyklussen profiler af normale celler. Vi fandt, at ONC201 behandling ikke forvoldte nogen mærkbare niveauer af celledød i normale celler, der er steget i HCT116 tumorceller under samme betingelser (figur 1B). Igen i modsætning til ONC201, doxorubicin behandling generelt resulterede i celledød eller S-fasen i normale celler.

Med den observation, at ONC201 lidt reducerer proliferation i normale celler, Derefter bestemte vi, om dette var en reversibel fænomen. Vi fandt, at fjernelse ONC201 ved afslutningen af ​​en 72 timers inkubationsperiode resulterer i en tidsafhængig fuldstændig helbredelse, der er tydelig ved 24 timer senere (Fig 1C). Vi undersøgte den mulighed, at forskellen mellem tumor og normale celler simpelthen kan være en funktion af proliferationshastighed. Undersøgelsen af ​​dette forhold viste ingen indlysende korrelation mellem evnen af ​​ONC201 at reducere cellernes levedygtighed og fordoblingen hastigheden af ​​cellelinjen (figur 1D), som er historisk korreleret med kemoterapi brug.

ONC201 inducerer TRAIL og DR5 i tumor men ikke normale celler

for at give en molekylær forklaring på den præferentielle drab på tumor, men ikke normale celler ved ONC201 undersøgte vi effekten af ​​ONC201 på normal celle produktion af TRAIL og DR5, der er opreguleret i respons på ONC201 i tumorceller [1]. Vi fandt, at ONC201 er i stand til at opregulere overflade TRAIL i tumorceller og normale celler, omend i mindre omfang i normale celler (fig 2A). Interessant nok blev DR5 induktion minimalt ændret i normale fibroblaster i modsætning til tumorceller, der øgede produktion af død receptoren som respons på ONC201 (Fig 2A).

(A) Overflade TRAIL og DR5 ekspression i HCT116 (tumor) og HFF (normal) celler efter behandling med ONC201 (5 uM, 72 timer, n = 3). IgG blev inkluderet som en isotype negativ kontrol. Doxorubicin (Doxo) er vist som en positiv kontrol (1 ug /ml). (B) Overflade TRAIL og DR5 i normale fibroblaster efter behandling med ONC201 (5 uM) eller doxorubicin (1 ug /ml, 72 timer, n = 3). Værdier (y-aksen) er udtrykt som gennemsnitlig fluorescensintensitet.

I modsætning ONC201, doxorubicin boostet overflade TRAIL samt DR5 proteiner på lignende størrelser i tumor og normale celler, formentlig gennem p53, der regulerer både disse gener [8, 9], hvilket viser ingen mærkbar forskellen aktivitet, som er indikativ for dens snævre terapeutiske indeks. Undersøgelse af virkningerne af ONC201 og doxorubicin på overfladen TRAIL og DR5 i andre normale fibroblaster bekræftet disse observationer (Fig 2B). Disse undersøgelser kan forklare, hvorfor ONC201 generelt ikke inducere celledød i normale fibroblaster, der kan være forbundet med den selektive apoptotiske aktivitet TRAIL samt den generelle mangel på DR5 induktion i normale celler.

GLP toksikologiske undersøgelser i ONC201-behandlede Sprague Dawley

for at bekræfte sikkerhedsprofilen for ONC201 og muliggøre klinisk afprøvning, GLP toksikologiske undersøgelser blev gennemført i mandlige og kvindelige Sprague Dawley rotter med orale enkeltdoser på ONC201. Rotter modtog 0, 12,5, 125, eller 225 mg /kg ONC201 ved oral sondeernæring, som repræsenterer en human ækvivalent af 0, 125 mg, 1,25 g og 2,25 g, (tabel 1). Den lavdosis rotte kohorte af 12,5 mg /kg svarer til ~ 25 mg /kg hos mus, der har demonstreret virkningsfuldhed i prækliniske modeller [1]. Der hvor der ikke dødelighed eller dosisbegrænsende toksiciteter i disse undersøgelser. Der var ingen laboratorium eller kliniske tegn på toksicitet bemærkes enkeltdoser op til 125 mg /kg af ONC201 i rotter. Ved en dosis på 225 mg /kg var der tilfælde af nedsat aktivitet og unormal gangart og holdning i rotter, der løses inden for en dag. Et fald i vægtforøgelse og fødeindtagelse blev bemærket på dag 7 for de 225 mg /kg i mandlige, men ikke hunrotter.

Der var ingen væsentlige ændringer i blod- eller urinprøver. Hæmatologiske parametre analyseret inkluderet røde blodlegemer og morfologi, hvide blodlegemer, mener corpuscular hæmoglobin, betyde korpuskulær hæmoglobinkoncentration, mener korpuskulært volumen, hæmatokrit, hæmoglobin, og retikulocyttal. Total og differentialtælling af hvide blodlegemer, herunder neutrofiler, basofile, eosinofile, monocytter, lymfocytter og store ufarvede celler. Koagulationsparametre analyserede inkluderet aktiveret delvis thromboplastintid og protrombintid. Serum klinisk kemi inkluderet alaninaminotransferase, albumin, albumin /globulin-forhold, alkalisk phosphatase, aspartat aminotransferase, calcium, chlorid, cholesterol, creatinin, globulin, glucose, phosphor, kalium, natrium, total bilirubin, total protein, trigerclyrerides, og urea. Urinanalyse parametre analyseret inkluderet vægtfylde, pH, protein, glucose, keton, urobilinogen, nitrit, udseende /farve, bilirubin, blod, leukocytter, og mikroskopisk undersøgelse af dannede elementer.

Der var også nogen væsentlige brutto orgel fund tilskrives behandlingen. ONC201-relateret minimal-til-mild submukøse ødemer og /eller blandet celle inflammation blev observeret i den ikke-glandulære mave hos rotter behandlet med 225 mg /kg til to dage efter behandling, men var fuldt erstattes.

Den orale administration af ONC201 på 12,5 og 125 mg /kg inducerede ikke nogen biologisk relevante virkninger på respirationsfrekvens, tidalvolumen eller minutvolumen i bevidste hanrotter. En marginal til moderat forbigående fald i respirationsfrekvens og minutvolumen blev observeret efter oral indgivelse af ONC201 ved 225 mg /kg, der var reversibel inden for 1 time efter administration og er fuld dækning inden for 2 timer efter administration.

Baseret på resultaterne af denne undersøgelse, NOAEL efter oral administration af ONC201 ved enkeltdoser på 12,5, 125 eller 225 mg /kg til Sprague-Dawley-rotter betragtes som 125 mg /kg, hvilket svarer til en dosis på ~ 1,25 g hos mennesker under forudsætning af standard allometrisk skalering.

GLP toksikologiske undersøgelser i ONC201-behandlede beagle hunde

Som en anden art, blev GLP toksikologiske undersøgelser gennemført i mandlige og kvindelige beagle hunde med orale enkeltdoser på ONC201 parallelt til rotteundersøgelser. Beaglehunde modtog en enkelt dosis på 0, 4,2, 42 eller 120 mg /kg ved oral gavage, som repræsenterer en human ækvivalent af 0, 125 mg, 1,25 g, og 3,57 g. Den lavdosis hund kohorte af 4,2 mg /kg svarer til ~ 25 mg /kg hos mus, der har demonstreret virkningsfuldhed i prækliniske modeller [1]. Der hvor der ikke dødelighed eller dosisbegrænsende toksiciteter i disse undersøgelser. Ingen kliniske tegn på toksicitet blev noteret efter en enkelt dosis på 4,2 mg /kg ONC201. Kliniske fund inkluderet nedsat aktivitet, opkastning, opkast, savlen, og /eller bløde, løse eller mukøse afføring, og ændringer i fækal udskillelse ved højere doser, der fandt sted kun på dagen for lægemiddeladministration. Der var ingen endelige ONC201-relaterede effekter på gruppe betyder kropsvægt eller vægtøgning. De 120 mg /kg dosis i hunhunde havde statistisk signifikant nedsat gruppe betyde fødevareforbruget i forhold til køretøjet kontrolgruppen på dag 14, 15 og 18.

Ingen klare ONC201-relaterede histologiske ændringer blev noteret i dag 3 eller Dag 19 obduktion. Der var ingen ONC201 virkninger på EKG rytme eller morfologi hos hunde, betyder hjertefrekvens, arterielt blodtryk, hæmatologi, koagulation eller klinisk-kemiske parametre eller erythrocyt morfologi, urinanalyse, obduktion eller organvægt. Baseret på resultaterne af denne undersøgelse, NOAEL efter oral administration af ONC201 ved enkeltdoser på 4,2, 42 eller 120 mg /kg til Beagle-hunde anses for at være mindst 42 mg /kg, hvilket svarer til en dosis på ~ 1,25 g i mennesker antager standard allometrisk skalering.

diskussion

ONC201 er et first-in-class lille molekyle målrettet anticancer forbindelsen under udvikling af Oncoceutics til behandling af fremskreden kræft. ONC201 er et stabilt, oralt aktiv, blod-hjerne-forbindelse barrieren gennemtrængelig der har påvist p53-uafhængig anticanceraktivitet som monoagent og en kombination i flere prækliniske modeller, der omfatter glioblastom, brystcancer, coloncancer, lungecancer, lymfom, og andre tumorer [1, 10, 11]. Den omfattende prækliniske studier præsenteret her bekræfter evne ONC201 at udøve sin anti-tumor effekt uden at skade normale celler, som er en vigtig og unik egenskab ved ONC201 som en potentiel ny kræftbehandling.

ONC201 besidder spændende forskelle, når sammenligning af dosisresponskurver fra tumor versus normale celler, der adskiller sig fra andre behandlinger. Den samlede reduktion i cellelevedygtighed er ~ 80% i tumorcellelinier i modsætning til ~ 20% i normale cellelinier afspejler et bredt terapeutisk indeks. Interessant, både tumor og normale celle dosisresponskurver har samme vendepunktet (~ 5 uM) og er mættelig. Men reaktionen i cancerceller er cytotoksisk og irreversibel mens den for normale celler er mildt antiproliferativ og reversibel. Denne unikke dosis-respons-forhold antyder, at ONC201 kan indgribe et molekylært target (s), som er /er særligt relevant for cancerceller. Den mest proksimale molekylære bindende mål på ONC201 forbliver et aktivt område af undersøgelsen.

ONC201 forårsager en forbigående hæmning af proliferation i normale celler, som er reversibel ved fjernelse stof i modsætning til kemoterapi, der inducerer celledød. Mens ONC201 inducerer TRAIL i både normale celler og tumorceller, er DR5 induktion kun observeret i tumorceller. Denne nøgle observation tyder på, at normale celler ikke kan undergå en cytotoksisk reaktion på ONC201 som de er naturligt TRAIL-resistente [12], og ikke øger DR5 udtryk som tumorceller gør. Den kemoterapi doxorubicin inducerer også TRAIL DR5, formentlig gennem p53 [3, 8, 9], men dette sker i både tumor og normale celler og kan forklare den celledød observeret i normale celler efter doxorubicin eksponering. Mekanismen for ONC201-induceret DR5 synes at være transkriptionelle baseret på tidligere undersøgelser i humane coloncancer-celler, men den molekylære mekanisme af denne induktion er et område af aktuelle undersøgelse. Manglende DR5 induktion kan være knyttet til et fravær af CHOP opregulering [13] eller Foxo3a aktivering at begge har været impliceret i mekanismen for ONC201 [1, 14] og er begge transkriptionelle regulatorer af det humane DR5-genet [13, 15]. Endvidere kan manglen på DR5 induktion med normale celler være særligt vigtigt for beskyttelse mod cytotoksicitet som en nylig rapport har konstateret, at DR5 kan inducere apoptose i en TRAIL-uafhængig i nogle sammenhænge [16]. En begrænsning af disse in vitro-undersøgelser er den uensartede tropisme af cellelinier, der blev evalueret, men disse observationer er konsistente på tværs af forskellige typer væv repræsenteret ved cellelinjer i denne undersøgelse med maligne eller normale celler.

sikkerhed profil ONC201 i GLP sikkerhedsundersøgelser er i overensstemmelse med den foretrukne cytotoksicitet ONC201 i tumor i normale celler in vitro. Bivirkninger forbundet med overdrevne doser af ONC201 er generelt milde og reversible. De eneste resultater, der blev observeret i både rotter og hunde i GLP toksikologiske undersøgelser forekom ved høje doser og omfattede nedsat aktivitet, nedsat fødeindtag (vægttab kun set hos rotter), og savlen. NOAEL doser for både evaluerede arter var mindst 10 gange over den terapeutiske dosis af ONC201 i tidligere prækliniske studier. Således in vitro og in vivo profiler af ONC201 indikerer et bredt terapeutisk indeks, der er ualmindeligt fleste kræftmedicin og indebærer, at ONC201 er velegnet til at tjene som en kronisk terapi, og som et veltolereret lægemiddel. Dette understøttes yderligere af en mangel på synlige genotoksicitet i ONC201-behandlede celler [10], ONC201 viser også en manglende modstand, som sandsynligvis en konsekvens af skarpe dosisresponskurver i tumorceller, som forvirrer udviklingen af ​​lægemiddelresistens og virkning hos over for fælles mekanismer for modstand såsom PgP overekspression, kræft stamceller, og genetiske afvigelser [14, 17].

Baseret på resultaterne af GLP toksikologiske undersøgelser, startdosis for første-in-mand klinisk forsøg blev beregnet til 125 mg, hvilket er 1/10

th den laveste NOAEL i overensstemmelse med regulatoriske vejledninger. Den kliniske indføres ONC201 i en dosis på 125 mg er lovende, eftersom ONC201 har vist antitumoraktivitet i musemodeller ved denne dosis, og at a eksisterer 10-fold sikkerhed vindue over denne dosis. Skulle sikkerhedsfunktioner og den bekvemme orale tidsplan for ONC201 oversætte til klinikken, kan en række kliniske i onkologi være til rådighed for ONC201, som ikke kan løses ved nuværende behandlinger baseret på deres uudholdelige toksiciteter, genotoksicitet-induceret sekundær malignitet, og /eller hurtig induktion af resistens.

Tak

WS El-Deiry er en American Cancer Society Research Professor.