PLoS ONE: Samtidig Binding af Anti-Cancer IgM monoklonalt antistof PAT-SM6 til lav density lipoprotein og GRP78

Abstrakt

tumor-afledte monoklonalt IgM-antistof PAT-SM6 specifikt dræber maligne celler ved en apoptotisk mekanisme knyttet til den overdrevne optagelse af plasma lipider. Mekanismen postuleres at ske via den multi-point vedhæftning af PAT-SM6 til den udfoldede protein responsregulatorprotein GRP78, placeret på overfladen af ​​tumorceller, der er koblet til samtidig binding af plasma low density lipoprotein (LDL). Vi fremstillet og karakteriseret LDL og oxideret LDL ved hjælp af sedimentering hastighed og små-vinkel røntgenspredning (SAXS) analyse. Enzymmaerket (ELISA) teknikker angivet tilsyneladende dissociationskonstanter på ca. 20 nM for binding af LDL eller oxideret LDL til Pat-SM6. ELISA-forsøg viste cross konkurrence med LDL inhibering PAT-SM6 binding til immobiliseret GRP78, mens den i den omvendte eksperiment, GRP78 inhiberede PAT-SM6 binding til immobiliseret LDL. I modsætning til resultaterne af ELISA-forsøg, sedimentation velocity forsøg indikerede relativt svage interaktioner mellem LDL og PAT-SM6, tyder immunoabsorbance til mikrotiterpladen drives af en aviditet-baserede bindende mekanisme. Betydningen af ​​aviditet og multipoint binding af antigener til PAT-SM6 blev yderligere undersøgt ved anvendelse antigenovertrukne polystyrenkugler. Absorption af GRP78 eller LDL til polystyrenmikrosfærer ført til en stigning i inhibering af PAT-SM6 binding til mikrotiterplader coatet med GRP78 eller LDL, hhv. Disse resultater understøtter den hypotese, at den biologiske virkning af PAT-SM6 i tumorcelle apoptose afhænger af multivalente karakter PAT-SM6 og evnen til at interagere simultant med LDL og multiple grp78 molekyler grupperet på tumorcelleoverfladen.

Henvisning: Rosenes Z, Mok YF, Yang S, Griffin MDW, Mulhern TD, Hatters DM, et al. (2013) samtidig binding af Anti-Cancer IgM monoklonalt antistof PAT-SM6 til lav density lipoprotein og GRP78. PLoS ONE 8 (4): e61239. doi: 10,1371 /journal.pone.0061239

Redaktør: Gunnar F. Kaufmann, The Scripps Research Institute og Sorrento Therapeutics, Inc., USA

Modtaget: Januar 3, 2013; Accepteret: 6 marts 2013; Udgivet: 19 april, 2013