PLoS ONE: patobiologiske Konsekvenser af mucin (MUC) Udtryk i resultatet af Lille tarmkræft

Abstrakte

Muciner har været forbundet med overlevelse i forskellige kræftpatienter, men der har ikke været nogen undersøgelser af muciner i tyndtarmen karcinom (SBC). I denne undersøgelse undersøgte vi forholdet mellem mucin udtryk og clinicopathologic faktorer i 60 SBC tilfælde, hvor udtryk profiler af MUC1, MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC6 og MUC16 i cancer og normale væv blev undersøgt ved immunhistokemi. MUC1, MUC5AC og MUC16 ekspression blev forøget i SBC læsioner sammenlignet med det normale epitel, og ekspression af disse muciner vedrørte clinicopathologic faktorer, som følger: MUC1 [tumor placering (p = 0,019), dybde (p = 0,017) og hærdelighed ( p = 0,007)], MUC5AC [tumorplacering (p = 0,063) og lymfeknudemetastaser (p = 0,059)], og MUC16 [venøs invasion (p = 0,016) og hærdelighed (p = 0,016)]. Analyse af 58 tilfælde med overlevelsesdata afslørede fem faktorer i forbindelse med en dårlig prognose: dårligt differentieret eller neuroendokrine histologisk type (p 0,001), lymfatisk invasion (p = 0,026), venøs invasion (p lt 0,001) og helbredende resektion (p 0,001), i tillæg til ekspression af MUC1 (p = 0,042), MUC5AC (p = 0,007) og MUC16 (p 0,001). I efterfølgende multivariat analyse med hærdelighed som covariat, lymfeknudemetastase, venøs invasion, og MUC5AC og /eller MUC16 ekspression blev signifikant relateret til prognosen. Multivariat analyse i helbredende tilfælde (n = 45) viste, at SBC med MUC5AC og /eller MUC16 udtryk havde en signifikant uafhængig høj risiko risiko efter justering for effekterne af venøs invasion (hazard ratio: 5,6, 95% konfidensinterval: 1,8 til 17) . Afslutningsvis viser undersøgelsen, at en MUC5AC-positive og /eller MUC16-positive status er nyttig som en indikator for en dårligt resultat hos patienter med SBC

Henvisning:. Shibahara H, Higashi M, Koriyama C, Yokoyama S, Kitazono I, Kurumiya Y, et al. (2014) patobiologiske Konsekvenser af mucin (MUC) Udtryk i resultatet af Lille tarmkræft. PLoS ONE 9 (4): e86111. doi: 10,1371 /journal.pone.0086111

Redaktør: Motoyuki Otsuka, The University of Tokyo, Japan

Modtaget: Juli 24, 2013; Accepteret: December 4, 2013; Udgivet: April 10, 2014

Copyright: © 2014 Shibahara et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne undersøgelse blev delvist understøttet af forskningsfonden Prinsesse Takamatsu Cancer (11-24319) til S. Yonezawa; Tilskud-i-Aid for Videnskabelig Forskning (B) 23.390.085 til S. Yonezawa; Videnskabelig Forskning (C) 24.590.447 til M. Higashi; og Unge Forskere (B) 24.701.008 til S. Yokoyama fra Ministeriet for uddannelse, videnskab, sport, kultur og teknologi, Japan; af Kodama Mindefond, Japan (S. Yokoyama M. Higashi); og ved USPHS give CA78590 fra National Institutes of Health til S. K. Batra. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Små tarm karcinom (SBC) er en sjælden malignitet, i modsætning til kolorektal carcinom. Et kirurgisk tilgang anvendes hovedsagelig til behandling af SBC [1] – [6], men mange patienter har en dårligt resultat efter kurativ resektion. Lymfeknudemetastase [1] – [3], fjernmetastase [6], primær tumor status [2], [6] og tumor differentiering [1] er blevet rapporteret som prognostiske faktorer i SBC

Muciner. højmolekylære glycoproteiner, hvor kerneproteinerne modificeres ved O-glycosid-bundne oligosaccharider [7]. Atten centrale menneskelige muciner (MUC1-MUC8, MUC12, MUC13, MUC15-17 og MUC19-21) er blevet identificeret. Den første klonede mucin, MUC1, er en vigtig menneskelig tumorantigen, ranking sekund efter WT1 [8]. Brug af immunhistokemi (IHC), har vi vist, at MUC1 og /eller MUC4 ekspression er relateret til en dårligere prognose, hvorimod MUC2 ekspression er forbundet med en bedre prognose i forskellige humane tumorer [7], [9]. Afvigende udtryk for MUC3, MUC4, MUC5AC og MUC6 er blevet beskrevet i pancreas intraepitelialneoplasi [10], [11], og vi for nylig rapporteret, at MUC16 er en kandidat som en dårlig prognostisk faktor i cholangiocarcinoma [12].

til dato har kun to artikler diskuteret muciner i SBC [13], [14] og den kliniske betydning af mucin udtryk i SBC er ukendt. Derfor er formålet med denne undersøgelse var at undersøge, om ekspressionen af ​​muciner (MUC1, MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC6 og MUC16) har prognostisk betydning for patienter med SBC hjælp prøver opnået fra kirurgiske afdelinger på flere hospitaler.

Materialer og metoder

Patienter og vævsprøver

Mellem 1973 og 2011 blev 60 resektion eksemplarer af SBC indsamlet fra Toyota Kosei Hospital, Chutoen General Medical center, Chita Kommunehospitalet, Anjo Kosei Hospital, Toyohashi Kommunehospital, japansk Røde Kors Nagoya Daiichi Hospital, Kasugai Kommunehospital, Handa Kommunehospitalet, og Kagoshima-shi lægeforening Hospital. Cancere i ampulla Vateri eller mulig metastatisk cancer blev udelukket fra undersøgelsen. Patienterne var 28 mænd og 32 kvinder med en aldersgruppe på 34 til 90 (betyde 65) år. Tumor placeringer var duodenum (24 tilfælde), jejunum (20), ileum (14), og ikke specificeret (2). Denne undersøgelse blev gennemført i overensstemmelse med de vejledende principper i erklæringen fra Helsinki. Informeret, blev skriftligt samtykke opnået fra 6 patienter, og blev godkendt af den etiske komité i Kagoshima-shi Medical Association Hospital (KMAH 2011-02-02). For de øvrige patienter uden informeret samtykke, Institutional Review Board of Toyota Kosei Hospital (22-ST04), de etiske komitéer i Toyohashi Kommunehospital (43-2011), japansk Røde Kors Nagoya Daiichi Hospital (26-2013), Kasugai Kommunehospital (157-2013), Chutoen General Medical center, Chita Kommunehospitalet og Handa By Hospital, og hospitalet direktør for Anjo Kosei Hospital gav os deres godkendelser til at bruge de resektion prøver (Ingen angivet antal i de sidste fire sygehuse), under streng betingelse for beskyttelse af privatlivets fred i forhold til personlige oplysninger om patienterne.

de kirurgiske procedurer var delvis resektion af tyndtarmen (31 tilfælde), pancreaticoduodenectomy (8), subtotal mave-bevarelse pancreaticoduodenectomy (7), pylorus- konservering pancreaticoduodenectomy (4), iliocaekal resektion (6), højre hemicolectomy (3), og tumor resektion (1). Pancreaticoduodenectomies i 19 tilfælde blev udført for at garantere en sikker kirurgisk margen og tilstrækkelig lymfeknudedissektion fordi tumorerne i duodenum blev placeret nær ampulla Vateri. Vi bekræftede, at alle resekterede prøver var små tarm carcinomer hjælp makroskopiske og mikroskopiske patologiske fund. Lymfeknude dissektion blev udført i 55 tilfælde, ikke udføres i 3 tilfælde, og denne information var ukendt i 2 tilfælde. Fyrre-seks sager undergik helbredende resektion, 11 sager modtaget ikke-helbredende resektion grund af fjernmetastaser fundet i operationen, og detaljerne var ukendt i 3 sager. Blandt de 60 patienter, 23 døde af primær sygdom og én døde af metachronous primær fremskreden mavekræft med carcinomatøs bughindebetændelse. Samlet overlevelse blev analyseret i 58 patienter, men var ukendt i to patienter.

Immunhistokemi

Alle prøver blev fikseret i formalin, indlejret i paraffin og skåret i 4-um tykke sektioner for IHC, i Ud over hematoxylin og eosin (HE) -farvning. MUC1 blev detekteret ved monoklonalt antistof (MAb) DF3 (muse IgG, Toray-Fuji Bionics, Tokyo, Japan), MUC2 af MAb Ccp58 (Novocastra), MUC3 af MAb mMUC3-1 (genereret af K. Rousseau og DM Swallow), MUC4 af MAb 8G7 (genereret af SK Batra), MUC5AC af MAb CLH2 (Novocastra), MUC6 af MAb CLH5 (Novocastra), og MUC16 af MAb OC125 (Acris Antistoffer GmbH). IHC blev udført ved immunperoxidase-metoden, som følger. Antigen genfinding blev udført under anvendelse CC1 antigen hentning buffer (pH 8,5, EDTA 100 ° C 30 min, Ventana Medical Systems, Tucson, AZ, USA). Snittene blev inkuberet med et primært antistof (DF3 fortyndet 1:50, 37 ° C, 32 min; Ccp58 fortyndet 1:200, 37 ° C, 24 min; 8G7 fortyndet 1:3000, 37 ° C, 32 min; CLH2 fortyndet 1:100, 37 ° C, 24 min; CLH5 fortyndet 1:100, 37 ° C, 24 min; OC125 fortyndet 1: 100, 37 ° C, 24 min) i phosphatbufret saltvand, pH 7,4 (PBS) med 1% bovint serumalbumin og farves på en Benchmark XT automatiseret slide farvningsværktøjet anvendelse af et diaminobenzidin detektion kit (Ultraview DAB, Ventana Medical Systems).

i MUC3 farvning blev snittene behandlet ved 100 ° C i 10 minutter i 0,01 M citratpuffer ved pH 6,0 og derefter reduceret med 0,01 M dithiothreitol i 0,1 M Tris /HCl-buffer (pH 8,0) i 30 minutter ved stuetemperatur og alkyleret med 0,025 M iodacetamid i 0,1 M Tris /HCl-buffer (pH 8,0) i 30 minutter [ ,,,0],10], [15]. De blev derefter inkuberet med mMUC3-1 ved 4 ° C i 16 timer og farvet ved avidin-biotin kompleks metode. Reaktionsprodukter ikke til stede under hybridom dyrkningsmediet, normal mus serum eller PBS blev anvendt i stedet for de primære antistoffer.

Scoring af farvningsresultaterne

Tre blindede efterforskere (SHMH og SY) evalueret de IHC farvning data uafhængigt. Når evalueringen afveg blandt de tre, blev en endelig beslutning foretaget af konsensus. Resultaterne blev evalueret baseret på procentdelen af ​​positivt farvede carcinomceller. Vi evaluerede farvning af cytoplasmaet og cellemembranen, og carcinomaceller blev anset for at være positiv, når mindst en af ​​disse komponenter var positiv. En tumor blev betragtet positiv, hvis mere end 5% af carcinomaceller blev farvet ifølge vores tidligere undersøgelser under anvendelse af 5% cutoff for mucin ekspression [16] – [21].

Statistisk analyse

forekomsten af ​​ekspressionen af ​​hver mucin blev sammenlignet mellem kræft læsioner og normal epitel ved hjælp af en chi-square test. Foreninger mellem mucin udtryk profiler og clinicopathologic faktorer blev også undersøgt ved chi-square test. For overlevelse analyse blev en log-rank test, der anvendes til at vælge muciner, der var signifikant relateret til prognose. En Cox proportional hazard analyse blev anvendt til at estimere hazard ratio (timer) og tilsvarende konfidensinterval 95% (CIS) i justering for virkningerne af andre clinicopathologic faktorer. Alle rapporterede p-værdier er tosidede og p. 0,05 blev anset for at være betydelige

Resultater

Expression profiler af mucin antigener

I den normale epitel af tyndtarmen ingen af ​​de 60 tilfælde viste ekspression af MUC1 (0%, 0/60) eller MUC16 (0%, 0/60), men nogle udtrykte MUC2 (58,3%, 35/60), MUC3 (73,3%, 44/60 ), MUC4 (51,7%, 31/60), MUC5AC (15%, 9/60) og MUC6 (11,7%, 7/60) (figur 1, tabel S1). MUC6 blev også udtrykt i tolvfingertarmen Brunner kirtler i de fleste tilfælde. MUC2, MUC3 og MUC4 viste højere ekspression i ileum (p = 0,035), jejunum (p = 0,011), og ileum (p = 0,002), sammenlignet med andre steder (figur 1, tabel S1).

MUC1, MUC5AC og MUC16 viste forøget udtryk; MUC4 og MUC6 viste lige udtryk; og MUC2 og MUC3 viste nedsat udtryk i SBC forhold til normal epitel

Udtrykket satser i kræft læsioner (mere end 5% af carcinomceller farvet) var MUC1, 51,7% (31/60).; MUC2, 26,7% (16/60); MUC3, 55% (33/60); MUC4, 51,7% (31/60); MUC5AC, 33,3% (20/60); MUC6, 10% (6/60) og MUC16, 8,3% (5/60) (Figur 1).

Ændringer af MUC udtryk fra normal epitel til karcinomer

I forhold til det normale epitel , MUC1 (p 0,001), MUC5AC (p = 0,019) og MUC16 (p = 0,022) udtryk blev øget betydeligt i SBC; MUC4 og MUC6 udtryk viste lige udtryk; og MUC2 (p 0,001) og MUC3 (p = 0,036) ekspression blev signifikant reduceret i SBC

Repræsentative mucin ekspressionsmønstre i normalt epitel og cancer væv er vist i figur 2. Blandt muciner med forøget ekspression i. SBC, MUC1 (figur 2A og 2B) viste apikale og cytoplasmatisk ekspression i carcinomceller, men ikke i normalt epitel; MUC5AC (figurerne 2C og 2D) viste cytoplasmatisk ekspression i carcinomceller, men ikke i normalt epitel; og MUC16 (fig 2E og 2F) viste apikale ekspression i carcinomceller, men ikke i normalt epitel. For muciner med lige ekspression i SBC og normalt væv, MUC4 (fig 2G og 2H) og MUC6 (fig 2I og 2J) viste begge cytoplasmatisk ekspression i carcinomceller og normal epitel (mellemværker). Blandt muciner med reduceret ekspression i SBC, MUC2 (figurerne 2K og 2L) viste supranukleær ekspression i normalt epitel, men ikke i carcinomceller; og MUC3 (fig 2M og 2N) viste apikale ekspression i normalt epitel, men ikke i carcinomceller.

muciner med forøget ekspression i SBC, viste MUC1 apikale og cytoplasmatisk ekspression i cancerceller, men ikke i den normale epitel (A og B); MUC5AC viste cytoplasmatisk ekspression i cancerceller, men ikke i normalt epitel (C og D); og MUC16 viste apikale ekspression i cancerceller, men ikke i normalt epitel (E og F). I muciner med lige ekspression i SBC, viste MUC4 cytoplasmatisk ekspression i normalt epitel og cancerceller (G og H); og MUC6 viste cytoplasmatisk udtryk i normal epitel (mellemværker) og kræftceller (I og J). I muciner med reduceret ekspression i SBC’er viste MUC2 cytoplasmatisk ekspression i normalt epitel, men ikke i cancerceller (K ​​og L); og MUC3 viste apikale udtryk i normal epitel, men ikke i kræftceller (M og N).

Forholdet mellem MUC udtryk i kræftceller og clinicopathologic funktioner

Forholdet mellem mucin udtryk og clinicopathologic funktioner er opsummeret i tabel S2. MUC1 ekspression var relateret til tumor placering (høj til oral side, p = 0,019), invasion dybde (højere for dybere end PSS (pT3), p = 0,017), venøs invasion (høj til positiv venøs invasion, p = 0,038), og hærdelighed (høj til ikke-kurativ resektion, p = 0,007). MUC2 ekspression var relateret til tumor placering (høj til anal side, p = 0,034), negativ lymfatisk invasion (p = 0,041) og histologisk type (høj til mucinous carcinoma, p = 0,005). MUC4 ekspression var relateret til tumor placering (høj til anal side, p = 0,012). MUC5AC ekspression blev marginalt relateret til tumor placering (p = 0,063) og lymfeknudemetastaser (p = 0,059). MUC6 ekspression var relateret til lymfeknudemetastaser (høj til positiv lymfeknudemetastase, p = 0,021). MUC16 ekspression var relateret til venøs invasion (høj til positiv venøs invasion, p = 0,016) og hærdelighed (høj til ikke-kurativ resektion, p = 0,016).

Forholdet af klinisk-patologiske faktorer eller mucinekspression med overlevelse periode

oplysninger om overlevelse blev hentet for 58 tilfælde. Den samlede 5-års overlevelse og median overlevelse periode var 49,7% og 1,9 år (95% CI: 1.3-3.3), henholdsvis (data ikke vist). En log-rank test viste, at histologisk type (dårligt differentieret eller neuroendokrine) (p 0,001), positiv lymfeknude metastaser (p 0,001), positiv lymfatisk invasion (p = 0,026), positiv venøs invasion (p 0,001), og ikke-helbredende resektion (p 0,001) var signifikant relateret til en dårligere prognose (tabel S3). Ekspression af MUC1 (p = 0,042), MUC5AC (p = 0,007) og MUC16 (p 0,001) blev også signifikant relateret til en dårligere prognose (figur 3, tabel S3). Der var ingen sammenhæng mellem udtryk for andre muciner (MUC2, MUC3, MUC4, og MUC6) og overlevelse.

Udtrykket af MUC1 (A), MUC5AC (B) og MUC16 (C) var dårligere end patienter uden ekspression af MUC1 (p = 0,042), MUC5AC (p = 0,007) og MUC16 (p 0,001), henholdsvis. Overlevelsesdata blev beregnet ved hjælp af Kaplan-Meier-metoden.

Multivariat analyse af prognostiske faktorer

Ovenstående analyse identificerede MUC1, MUC5AC og MUC16 som kandidat prognostiske faktorer i SBC, i tillæg til fem clinicopathologic faktorer: histologisk typen, lymfeknude metastase, lymfe invasion, venøs invasion og helbredende resektion. Da prøvestørrelse (n = 58) var for lille til at estimere risikoen fare ved anvendelse af disse clinicopathologic faktorer som kovariater i samme model og colinearitets- blandt disse fem faktorer er sandsynligt, blev hærdelighed valgt som kovariat (tabel 1). SBC tilfælde med MUC5AC eller MUC16 udtryk viste signifikant dårligere prognoser. MUC16 havde den højeste HR (HR: 10, 95% CI: 2,8 til 39)., Men der var kun fem MUC16-positive tilfælde

Siden MUC1, MUC5AC og MUC16 viste forøget udtryk i SBC læsioner og var relateret til en dårligere prognose, blev effekten af ​​disse muciner i kombination også undersøgt. SBC sager med MUC5AC og /eller MUC16 udtryk havde en signifikant dårligere prognose (HR: 3,6, 95% CI: 1,5-8,8) (tabel 1). Denne forening forblev efter justering for effekten af ​​venøs invasion (HR: 4,5, 95% CI: 1,8 til 11), men aftog efter justering for lymfeknude metastaser (HR: 2,4, 95% CI: 0,9-6,2) (data ikke vist ).

for kliniske anvendelser, yderligere analyser blev udført i en undergruppe af 45 patienter behandlet med helbredende resektion. Et tilfælde uden udfald data blev udelukket fra i alt 46 patienter behandlet med kurativ resektion (tabel S2). I de 45 sager, MUC5AC og /eller MUC16 udtryk var en betydelig uafhængig høj risiko risiko efter justering for effekten af ​​venøs invasion som kovariat (model 1 i tabel 2, HR: 5,6, 95% CI: 1,8 til 17), men ikke for effekten af ​​lymfeknudemetastase som kovariat (Model 2 i tabel 2, HR: 2,7, 95% CI: 0,9-8,8) (tabel 2). Udtrykket profiler af MUC2 og MUC3 blev også overvejet, da disse muciner var faldet udtryk i kræft læsioner. Der var ingen signifikant ændring i hazarden risikoen med MUC2 eller MUC3 udtryk, selv om der var ingen dødsfald i MUC5AC-negative, MUC16-negative og MUC3-positive tilfælde (tabel 2).

Diskussion

Der har været to tidligere analyser af mucin udtryk i SBC væv i 30 tilfælde af Zang et al. [13], og i 23 tilfælde af Lee et al. [14] I nærværende undersøgelse af 60 sager, fandt vi, at øget ekspression af MUC1, MUC5AC og MUC16 i SBC’er var relateret til dårlige prognostiske faktorer såsom dybere invasion, venøs invasion, lymfeknude metastaser, og de tilfælde, hvor kun ikke-helbredende resektion var muligt. For muciner med lige udtryk i SBC læsioner og normalt væv, blev MUC4 udtryk ikke relateret til nogen prognostiske faktorer, men MUC6 var relateret til lymfeknude metastaser. Blandt muciner med nedsat udtryk i SBC, MUC2 udtryk var relateret til negativ lymfatisk invasion (en gunstig prognostisk faktor), mens MUC3 ikke var forbundet med nogen clinicopathologic faktorer.

Analyse af mucin udtryk i 58 patienter med oplysninger om overlevelse viste, at øget ekspression af MUC1, MUC5AC og MUC16 i SBC var signifikant relateret til en dårligere prognose. Derfor blev MUC1, MUC5AC og MUC16 identificeret som mulige prognostiske faktorer og underkastet multivariat overlevelsesanalyse. MUC1 overudtrykkes og afvigende glycosyleret i de fleste kræftformer, og elevation af MUC1 niveau spiller en vigtig rolle i tumorinvasion og metastase [7], [9]. En log-rank test i de 58 patienter viste, at MUC1 udtryk var relateret til dårlig overlevelse. Men i multivariat analyse, MUC1 var ikke relateret til prognose. Således sammenlignet med mange andre menneskelige neoplasmer [7], [9], MUC1 udtryk synes at være af ringe betydning i SBC. I modsætning til MUC1, viste multivariat analyse, at MUC5AC eller MUC16 udtryk var signifikant relateret til en dårligere prognose i SBC. Dette forhold ikke tidligere er blevet undersøgt. MUC5AC eller MUC16 udtryk var signifikant relateret til dårlig overlevelse hos patienter med SBC, og i 45 patienter, som gennemgik helbredende resektion, sager med MUC5AC og /eller MUC16 udtryk havde en signifikant højere risiko risikofaktor.

Overekspression af MUC5AC har blevet associeret med dårlig prognose af lungecancer, cholangiocarcinom og pancreascancer [22] – [24]. Men indtil dato den molekylære mekanisme for dens funktion er stadig uklar. Knockdown undersøgelser viste, at MUC5AC overekspression i tumorceller er forbundet med forøget vækst, adhæsion, invasion af tumorceller og forøget metastatisk tendens [25] – [27]. Endvidere er det forbundet med lavere infiltration af B-celler og neutrofiler ved metastatiske steder [26]. Og, Inaguma et al., Iagttaget, at GLI1-opreguleret MUC5AC letter migration og invasion af bugspytkirtelkræftceller gennem dæmpningen af ​​E-cadherin-medieret intercellulær adhæsion [28]. Således ved at undertrykke immunforsvaret infiltration og forbedre adhæsion og invasion af tumorceller, kan MUC5AC være impliceret i dårlig prognose af patienterne med SBC.

MUC16 overudtrykkes også ved mange maligniteter, herunder ovarie-, pancreas- og brystcancer [29 ] – [31] og dets overekspression er associeret med dårlig prognose. MUC16 er også kendt som en potentiel biomarkør for følgende ovariecancer efter forskellige behandlinger. Lakshmanan et al. har for nylig etableret den funktionelle rolle MUC16 i spredning af brystkræft celler [31]. Haridas et al. har også vist, at den øgede ekspression af MUC16 i progression af pancreascancer [30]. Ligeledes i den foreliggende undersøgelse har vi observeret overekspression af MUC16 i 5 af 60 SBC væv (8,3%) sammenlignet med normal tyndtarm (0%). Antallet af MUC16 positive tilfælde er lille, men den MUC16 ekspression blev signifikant relateret til dårlig prognose af patienterne med SBC.

MUC4 og MUC6 vist samme ekspression i SBC og normalt væv. MUC4 udtryk er en dårlig prognostisk faktor i forskellige humane neoplasmer [7], [9], men vi fandt ingen korrelation mellem ekspression af MUC4 og overlevelse hos patienter med SBC. Således sammenlignet med neoplasmer af andre organer, MUC4 udtryk er af ringe betydning i SBC’er, på samme måde som MUC1. MUC6 er en nyttig markør for klassificering af pancreatobiliary neoplasmer [32], [33]. I SBC’er dog MUC6 udtryk ikke havde nogen indvirkning på overlevelse, selv om det var relateret til lymfeknude metastaser.

Expression profiler af MUC2 og MUC3 blev også overvejet, da disse muciner viste reduceret ekspression i SBC. Vores tidligere undersøgelser viste, at MUC2 ekspression er relateret til en god prognose i neoplasmer i bugspytkirtlen, galdegang og mave [7], [9]. MUC3 ekspression er associeret med en dårlig prognose i gastrisk cancer [34]; Men lidt er i øjeblikket vides om den funktionelle rolle MUC3 i kræft patologi [7]. I den foreliggende undersøgelse var der ingen signifikant ændring i hazard risici med MUC2 eller MUC3 ekspression. Det er vigtigt at bemærke, at der var ingen dødsfald i SBC patienter med MUC5AC-negativ, MUC16-negative og MUC3-positivt udtryk profil.

Som konklusion, at resultaterne af denne undersøgelse viser, at en MUC5AC-positive og /eller MUC16-positive mucin udtryk mønster er en nyttig markør til at forudsige et dårligt resultat hos patienter med SBC. Dette mønster adskiller sig fra de ekspressionsmønstre involverer MUC1, MUC2 eller MUC4 der er relateret til en dårlig prognose i neoplasmer i andre organer.

Støtte oplysninger

tabel S1.

MUC udtryk i den normale epitel

doi:. 10,1371 /journal.pone.0086111.s001

(XLS)

tabel S2.

Forholdet udtryk for MUC1, MUC2, MUC3, MUC4, MUC5AC, MUC6 og MUC16 og klinisk-patologiske træk af tyndtarmen carcinom (n = 60)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0086111.s002

(XLS)

tabel S3.

overlevelse hos patienter med tyndtarmen karcinom ved Log-Rank test (n = 58)

doi:. 10.1371 /journal.pone.0086111.s003

(XLS)

Tak

forfatterne takker Dr. Dallas M. Swallow og Dr. Suzanne Crawley (Galton Laboratory, University College London, London, UK) for at levere anti-MUC3 antistof og for værdifulde diskussioner. Vi takker også Mr. Y. Atsuchi, Ms C. Baba, Mr. S. Matuo, Ms Y. Nishimura og Ms. S. Yoshimura for deres tekniske bistand, og Ms. Y. Tokura for hendes hjælp med etik undersøgelsen i den institutionelle review board.