PLoS ONE: TRPV2 formidler Adrenomedullin Stimulering af prostata og urothelial Cancer Cell Adhæsion, migration og Invasion

Abstrakt

Adrenomedullin (AM) er en 52-aminosyre peptid oprindeligt isoleret fra humant fæokromocytom. AM udtrykkes i en række forskellige maligne væv og cancercellelinjer og blev vist at være en mitogen faktor stand til at stimulere væksten af ​​adskillige cancer celletyper. Desuden AM er en overlevelsesfaktor for visse cancerceller. Nogle data tyder på, at AM kan være involveret i udviklingen af ​​kræft metastase via angiogenese og celle migration og invasion kontrol. Den forbigående Receptor Potential kanal TRPV2 vides at fremme i prostatacancer cellevandring og invasiv fænotype og er korreleret med scenen og kvalitet af blærecancer. I dette arbejde viser vi, at AM inducerer prostata og urotelial kræftcelle migration og invasion gennem TRPV2 translokation til plasmamembranen og den efterfølgende stigning i hvilende calcium niveau

Henvisning:. Oulidi A, Bokhobza A, Gkika D, Vanden Abeele F, Lehen’kyi V, Ouafik L, et al. (2013) TRPV2 formidler Adrenomedullin Stimulering af prostata og urothelial Cancer Cell Adhæsion, migration og invasion. PLoS ONE 8 (5): e64885. doi: 10,1371 /journal.pone.0064885

Redaktør: Natasha Kyprianou, University of Kentucky College of Medicine, USA

Modtaget: Januar 21, 2013; Accepteret: 19. april, 2013; Udgivet: 31. maj 2013 |

Copyright: © 2013 Oulidi et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af tilskud fra Institut National de la santé et de la Recherche Medicale (INSERM), Ligue nationale Contre le Cancer, Region Nord Pas de Calais og Université Catholique de Lille. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Adrenomedullin (AM) er et 52 aminosyrer langt peptid oprindeligt isoleret fra et humant fæokromocytom [1], der bærer multifaktorielle regulerende egenskaber spænder fra inducere vasodilatation til modulering cellulær vækst [2]. Funktionerne af AM medieres via specifikke receptorer omfattende calcitonin receptor-like receptor (CLR) og en receptor aktivitet-modificerende protein (rampe); når co-udtrykkes med RAMP2 eller RAMP3, CLR fungerer som en specifik AM receptor [3]. AM og dens receptorer er stærkt udtrykt i forskellige cancercellelinier og i kræft i bugspytkirtlen, lunge, nyre, bryst, ovarie og prostata. En række undersøgelser har impliceret (udskilt endogent eller exogent indgivet) i tumorvækst, progression og metastase via virkninger på angiogenese, celleproliferation, apoptose og migration AM [4] – [6]. Men molekylære mekanismer bag disse virkninger af AM på kræft cellevækst og metastase forblive selvmodsigende og dårligt forstået.

Cell migration spiller en central rolle i cancer invasion og metastase. Mange af komponenterne i cellulære migration maskineri er reguleret af den intracellulære calcium (Ca

2+) koncentration [7]. En væsentlig del af den intracellulære Ca

2+ signalet genereres af transmembrane indstrømning af ekstracellulært Ca

2+ primært forekommer gennem kationiske kanaler med særprægede Ca

2+ selektivitet. I ikke-overgearet celler, er Ca

2+ post fra ionkanaler, der aktiveres ved forskellige kemiske og fysiske stimuli. Nogle af disse Ca

2 + entry kanaler er medlemmer af “transient receptor potential” (TRP) familie af kationiske kanaler [8]. Der er rapporteret TRP kanaler at være involveret i carcinogenese [9] – [11], og blandt dem TRPV2 kanal, har vist sig at være specifikt impliceret i progressionen af ​​prostata og blære kræft til mere aggressiv fænotype. Faktisk har de seneste undersøgelser fra vores laboratorium vist viser, at TRPV2 udtrykkes i de mere aggressive prostatacancerceller og stimulerer migration og invasive fænotype af disse celler [12], [13]. Interessant er TRPV2 udtryk i blæren også vist sig at korrelere med den lønklasse og stadium af kræft [14], men intet er kendt om dens potentielle rolle i blærekræft cellemigration /invasion.

I det nuværende arbejde undersøgte vi inddragelse af TRPV2 i virkningen af ​​AM på flertrinsprocessen for invasion i to meget invasive cellelinier: PCa (prostatakræft) celler PC-3 den og UC (urothelial Carcinoma) -celler T24 /83. Vore data viser, at AM kan øge adhæsion, migrering og invasion gennem Focal Adhesion Kinase (FAK) og integrin β1 aktivering og stimulering af TRPV2 translokation til plasmamembranen. Således er vores resultater giver ny indsigt i den rolle, AM og TRPV2 i prostata og blære maligniteter.

Materialer og metoder

Cell Culture

Den humane PCa cellelinie PC 3 blev opnået fra ATCC og holdt i kultur i RPMI 1640 (Life Technologies) suppleret med 10% FCS og 5 mM L-glutamin (Sigma). Den urotelial cancercellelinie T24 /83 blev opnået fra ECACC og holdt i kultur i McCoys 5A Glutamax® (Life Technologies) suppleret med 10% FCS.

Reverse Transcription-PCR

Samlet mRNA blev isoleret fra celler som tidligere beskrevet [12]. DNA amplifikationsbetingelser omfattede et indledende denatureringstrin med 7 min ved 95 ° C; 35 cykler af 30 sekunder ved 95 ° C, 30 sekunder ved 60 ° C, og 30 sekunder ved 72 ° C; og endelig 7 minutter ved 72 ° C. Primere sekvenser og størrelser af fragmenterne var for RAMP2: fremadrettet 5′-CTCAGCCTCTTCCCACCAC-3 ‘, revers 5′-TTCCAGCAAAATTGGACAGC-3′, 84 bp; for RAMP3 5’-ATCTCGGTGCAGTTGGTGA-3 ‘og 5’AAGGTGGACGTCTGGAAGTG-3′, 77 bp; for CLR 5’-CATGGACAAATTATACCCAGTGT-3 ‘og 5′-TCCAATTATGGTCAGGTAAAACAA3′, 86 bp; for Actin 5’-CAGAGCAAGAGAGGCATCCT-3 ‘og 5′-GTTGAAGGTCTCAAACATGATC-3’, 209 bp.

Små interfererende RNA transfektion

PC-3 og T24 /83 celler blev transficeret med 50 nM lille interfererende RNA (siRNA) mod TRPV2 (siTRPV2 sekvens: 5′-UAAGAGUCAACCUCAACUAdT-3 ‘, syntetiseret af Eurogentec). hjælp HiPerFect transfektionsreagens (Qiagen) ved at følge producentens instruktioner

celleadhæsionsassay

celler blev høstet og podet ved 3 * 10

4 og 1,5 * 10

4 celler /brønd for PC3 og T24 /83 henholdsvis i basalt medium suppleret eller ikke med på fibronectin AM (200 nM) (10 ug /ml) pre-coated 96-brønds plader. Efter 45 min inkubation ved 37 ° C blev klæbet celler fikseret 15 minutter i methanol-bad og farvet med Hoechst (5 mg /ml i PBS), fotografierne blev taget på et Leica DMIRE2 mikroskop (× 5), og celler talt under anvendelse af NIH Image analyse software (ImageJ).

Cell migration og invasion assay

Cell migration og invasion blev bestemt ved Transwell assay. Kort beskrevet blev celler podet på toppen af ​​Transwell cellekultur indsætter med 8 um porestørrelse (Falcon) med en densitet på 60.000 per brønd til PC-3 og 30.000 for T24 /83 (24-brønds format) i serumfrit dyrkningsmedium. Efter 1 time molekylet af interesse blev tilsat på begge sider af Transwell filter. For invasionen assayet blev det øvre rum overtrukket med 50 ug Matrigel (BD Biosciences) for at danne en matrix barriere. Det nedre rum fyldtes med medium indeholdende 10% FCS som kemoattraktant. Efter 8 timer for migration assay og 24 timer for invasion, blev ikke-migrerende celler fjernes fra toppen filter ved skrabning, mens celler, der var migreret gennem filterporerne til den nedre flade af indsatserne blev fikseret i 4% paraformaldehyd i PBS og farvet med Hoechst (5 mg /ml i PBS) og talt under anvendelse af et Leica DMIRB mikroskop (× 200).

Ca

2 + Målinger under anvendelse Fura-02:00

Før fluorescensmålinger blev cellerne trypsineret og udpladet på glas glider. Mediet blev erstattet hver 48 timer. Celler blev anvendt 3 dage efter trypsinisering. Dyrkningsmediet blev erstattet af en HBSS opløsning indeholdende 142 mmol /l NaCl, 5,6 mmol /l KCI, 1 mmol /L MgCI2, 2 mmol /l CaCl2, 0,34 mmol /l Na2HPO4, 0,44 mmol /l KH2PO4, 10 mmol /l HEPES og 5,6 mmol /l glucose. Osmolariteten og pH-værdien af ​​denne opløsning blev justeret til 310 mOsm /l og 7,4 hhv. Dye loading blev opnået ved at overføre cellerne til en standard HBSS indeholdende 1 mmol /l Fura-2 acetoxymethylester (Calbiochem) indlæst (45 min) i 40 minutter ved 37 ° C. Efterfølgende blev cellerne vasket tre gange med samme farvestof-fri opløsning. Dækglasset blev derefter overført til en perfusion kammer på en Olympus IX70 mikroskop udstyret til fluorescens. Fluorescens var alternativt exciteret ved 340 og 380 nm med en monokromator og blev fanget efter filtrering gennem et langpasfilter (510 nm) af en MicroMax 5 MHz CCD-kamera (Princeton Instruments, Evry, Frankrig). Køb og analyse blev udført med Metafluor 7.7.4.0 software (Universal Imaging Corp., West Chester, PA). Koncentrationen intracellulært calcium stammer fra forholdet mellem fluorescensintensiteter for hver af de excitationsbølgelængder (F340 /F380), og fra ligningen af ​​Grynkiewicz. Cellerne blev kontinuerligt perfunderet med HBSS opløsning via en hel-kammer perfusionssystem og kemikalier blev tilsat via perfusionssystemet. Strømningshastigheden af ​​hele kammeret perfusion systemet blev sat til 1 ml /min og kammeret volumen var 500 pi. Alle optagelser blev foretaget ved 37 ° C.

Biotinylering og vestligt blotting

Forsøgene blev udført som tidligere [15] beskrevet. Anvendte antistoffer var kanin-polyklonalt anti-VRL-1 (for TRPV2, 1/200, Santa Cruz), anti-FAK (1/500, Abcam), anti-FAK fosfor Y397 (1/1000, Abcam), anti-integrin beta 1 phospho T788 + T789 (1/1000, Abcam), og anti-integrin beta 1 (1/200, Santa Cruz), og monoklonale muse-anti-beta-actin (1/2000, Sigma-Aldrich).

Dataanalyse

Resultaterne blev udtrykt som gennemsnit ± SE. Plots blev fremstillet under anvendelse Excel. Hvert eksperiment blev gentaget mindst 3 gange. n angiver antallet af celler pr eksperiment. N angiver antallet af eksperimenter udført. Den Tyrkiet-Kramer test blev anvendt til statistisk sammenligning blandt midler og forskelle, og P . 0,05 blev betragtet som signifikant

Resultater

Adrenomedullin Øger PC-3 og T24 /83 Cell Adhæsion, migration og invasion

Vi først kontrolleret ved RT-PCR af ekspressionen af ​​AM-receptorer i prostata og urothelial cancercellelinier PC3 og T24 /83. Som vist i figur 1A, PC-3 udtrykker de to AM receptorer, CLR /RAMP2 og CLR /RAMP3, hvorimod T24 /83 kun udtrykker CLR /RAMP3.

(A) RT-PCR eksperiment viser RAMP2, RAMP3 og CLR ekspression i PC-3 og T24 /83-celler. (B) PC-3 (venstre panel) og T24 /83 (højre panel) celleadhæsion blev undersøgt ved podning 3 * 10

4 og 1,5 * 10

4 celler henholdsvis pr brønd i 96-brønds plader præ- overtrukket med fibronectin og inkuberet i 45 minutter med eller uden AM (200 nM) (N = 3, * P 0,05 sammenlignet med kontrolceller). β1 integrin phosphorylering blev undersøgt ved western-blotting på totale proteiner ekstraheret fra PC-3 og T24 /83 celler podet på fibronectin belagte plader og behandlet med eller uden AM. (C) PC-3 og T24 /83 cellemigration blev studeret ved Transwell assay efter 8 timer af behandlingen (N = 3, * P 0,05 sammenlignet med kontrolceller). FAK phosphorylering blev undersøgt ved western-blotting på totale proteiner ekstraheret fra PC-3 og T24 /83-celler behandlet med eller uden AM. (D) For invasion assay transwell membran blev præ-coatet med 50 ug Matrigel, og PC-3 og T24 /83-celler blev Lad at invadere i 24 h (n = 3, * P 0,05 sammenlignet med kontrolceller).

Så undersøgte vi cellens vedhæftning til en væsentlig del af den basale membran, den fibronektin. Tilsætning af 200 nM AM øgede både PC-3 og T24 /83-celler med 26% og 34% (fig. 1B). En af de store molekylære spillere modificerende celle-substrat-adhæsion er integrin-superfamilien af ​​receptorer, der består af heterodimerer af a- og p- underenheder genkender forskellige ekstracellulære matrix (ECM) proteiner. Interessant β1-integrin er den mest udbredte subunit udtrykt i PCA-celler og er i stand til at danne heterodimerer binder til fibronectin [16], mens øget β1-integrin ekspression korrelerer med mere invasive og metastatiske blærekræft [17]. Aktivering af β1-integrin fører til dets phosphorylering, som kan undersøges ved western blotting. Vi testede derfor, om AM kunne aktivere β1-integrin ved at studere dens fosforylering på Thr-788-789 med et phospho-specifikt antistof. Vi observerede, at AM behandling steg markant niveauet af den phosphorylerede β1-integrin uden at påvirke ekspressionen af ​​det totale protein formen (Fig 1B, nedre panel).

Ændring af adhæsion kan fremme migration og invasion:. To vigtige malignitet-associerede fænotyper. Så undersøgte vi virkningen af ​​AM-behandling på disse fænotyper ved hjælp transwell assays. Tilsætning af 200 nM AM øget migration af PC-3 med 45% og T24 /83-celler med 40% (fig. 1C). Adskillige undersøgelser viste, at ved indgreb med komponenter af ECM, integriner grupperet fører til aktivering af fokal adhæsionkinase (FAK) ved autophosphorylering ved Tyr397. Aktiveringen af ​​FAK styrer celleform og motilitet [18]. Vi studerede således aktiviteten af ​​FAK ved western-blotting med et specifikt antistof mod phospho-Tyr397 FAK. Som vist i fig. 1C (nederste panel), har det phosphorylerede FAK er øget betydeligt ved AM behandling samlede FAK mens den samlede FAK udtryk forblev uændret.

Derudover har vi undersøgt effekten af ​​AM på invasionen potentiale af de to celle linjer ved transwell assay for hvilken transwell filteret blev overtrukket med Matrigel. AM behandling øget evne celleinvasion gennem Matrigel-coatede membran med 54% i PC-3 celler og med 61% i T24 /83 celler (Fig. 1D).

TRPV2 formidler Adrenomedullin Fremme af migration og invasion på PC-3 og T24 /83 Celler

da vi tidligere har vist, at TRPV2 var involveret i PCa celle migration og invasionsevne [12], [13] og da denne kanal også blev impliceret i blæren carcinogenese [ ,,,0],14], testede vi, om TRPV2 er impliceret i forøgelse af cellemigration og invasion af AM. Vi først kontrolleres TRPV2 udtryk i de to cellelinjer og downrerulation af siRNA. Western-blot-analyse med TRPV2-specifikt antistof har vist, at TRPV2 proteinet udtrykkes i PC3 og T24 /83 celler, og at protein ekspression kan effektivt inhiberes ved celler behandling med siRNA-TRPV2 (50 nM, 48 h, fig. 2A). Silencing af TRPV2 med siRNA-TRPV2 ikke kun faldet adhæsion af PC-3 og T24 /83-celler med 35% og 29%, men også afskaffet stimulerende virkninger på adhæsion af AM behandling (200 nM). AM tilsætning til cellerne behandlet med kontrol siRNA var i stand til at forbedre deres adhæsion til fibronectin med 29% for PC-3 og 25% for T24 /83-celler (fig. 2B).

(A) Western-blotting analyse af TRPV2 proteinniveauet i PC-3 og T24 /83 celler behandlet med enten siCTL eller siTRPV2 (50 nM, 48 h). Virkning af TRPV2 silencing (siTRPV2, 50 nM, 48 h) (B) på PC-3 og T24 /83 celleadhæsion til fibroncectin inkuberet eller ikke med AM (200 nM, 45 min) (N = 3, * P 0,05 sammenlignet med kontrol celler

# P 0,05 sammenlignet med kontrol celler behandlet med AM); (C) på PC-3 og T24 /83 cellemigrering undersøgt af transwell assay efter 8 timers inkubation med eller uden AM (N = 3 *, P 0,05 sammenlignet med kontrolceller;

# P 0,05 sammenlignet med kontrolceller behandlet med AM); (D) på PC-3 og T24 /83 celleinvasion gennem matrigel (AM 200 nM, 24 h) (N = 3. *, P 0,05 sammenlignet med kontrolceller;

# P 0,05 sammenlignet med kontrolceller behandlet med AM).

Vi næste undersøgt effekten af ​​knock ned af TRPV2 på celle migration ved Transwell assay. Nedregulering af TRPV2 ekspression faldt ikke kun PC-3 cell migration, men også T24 /83, med 55% og 60%. Som vist for vedhæftning, AM behandling på celler behandlet med siRNA-TRPV2 var ikke længere i stand til at fremme migration (Fig. 2C).

Endelig har vi undersøgt invasionen af ​​PC-3 og T24 /83 celler gennem Matrigelcoatede membran og som observeret for adhæsion og migration, siRNA-TRPV2 inducerede et fald i både PC-3 og T24 /83 invasion, med 52% og 67%. Tilsætning af AM kunne ikke øge invasionen af ​​PC-3 og T24 /83 celler behandlet af siTRPV2 (fig. 2D).

AM Fremkalde TRPV2 Translokation på plasmamembranen via en PI3K Pathway

i betragtning af TRPV2 involvering i AM effekt på celle migration, vi næste undersøgt af calcium imaging hvis AM kunne aktivere TRPV2. Akut anvendelse af AM til PC-3 og T24 /83 forårsagede ikke elevation af intracellulær Ca

2 + koncentration ([Ca

2 +]

i) på en kort tidsfrist (dvs. inden for få minutter ), som man kunne forvente fra forbedret TRPV2-medieret Ca

2+ indrejse (data ikke vist). Imidlertid forlænget 45 min lange behandling af de to cellelinjer med AM inducerede en forøgelse af basal [Ca

2+] i niveau (PC-3: fra kontrol-værdi på 100 nM til 140 nM i nærvær af AM; T24 /83:139 nM til 200 nM;. figur 3A). Den lyddæmpning af TRPV2 af siRNA (50 nM, 48 h) faldt den basale [Ca

2 +]

i (PC-3: 70 nM, T24 /83: til 86 nM) tyder på, at steady-state TRPV2-medieret Ca

2+ tilstrømning bidrager til den hvilende cytosol Ca

2+ koncentration. Endvidere TRPV2 silencing forhindrede også stigningen af ​​basal [Ca

2 +]

jeg som svar på AM behandling (fig. 3A), i overensstemmelse med den opfattelse, at langvarig inkubation af PC-3 og T24 /83-celler forårsager indirekte aktivering af TRPV2 af AM via signalvejen, der kræver en vis tid at have virkning.

(A) effekten af ​​AM (200 nM, 45 min) og TRPV2 lyddæmpning (siTRPV2, 50 nM, 48 h ) på basal cytosoliske calcium af PC-3 og T24-83 celler blev undersøgt ved calcium imaging. (N = 120 celler, N = 4, *, P 0,05 sammenlignet med kontrol celler

# P 0,05 sammenlignet med kontrol celler behandlet med AM). (B) TRPV2 tilstedeværelse på plasmamembranen blev undersøgt ved biotinylering på T24 /83 celler kontrollere eller enten behandlet med AM (200 nM, 45 min) eller AM og PI3K-inhibitor LY294.002 (10 uM, tilsat 5 min før AM). (C) Effekt af LY294.002 på PC-3 og T24 /83 cellemigration undersøgt af transwell assay efter 8 timers inkubation med eller uden AM (N = 3. *, P 0,05 sammenlignet med kontrol celler

# P 0,05 sammenlignet med kontrol celler;

# P. 0,05 sammenlignet med kontrol celler behandlet med AM)

det er kendt, at AM kan aktivere PI3K [19], og at aktivering PI3K kan fører til TRPV2 translokation til plasma membran [12]. Så vi næste undersøgt hvis tilstedeværelsen af ​​TRPV2 på plasmamembranen er afhængig af AM og på integriteten af ​​PI3K-signalvejen. For at gøre dette, blev T24 /83-celler behandlet med enten AM (200 nM for 45 min) eller AM plus PI3K inhibitor LY294.002 (10 uM, tilsat 5 minutter før AM), og plasmamembran lokalisering blev analyseret ved biotinylering. Som vist i figur 3B, AM øget TRPV2 tilstedeværelse ved membranen, og denne virkning kan inhiberes af LY294.002, hvilket antyder inddragelsen af ​​PI3K signalering i AM virkning på TRPV2.

Vi studerede derfor af Transwell assay, om LY294.002 kunne forringe PC-3 og T24 /83 celle migration. Vi vist, at LY294.002 (10 uM) forhindrede den stimulerende virkning af AM på både PC-3 og T24 /83 celler, mens den ikke ændrede den basale migrering af disse celler (fig. 3C). Desuden AM-induceret migration i tilstedeværelsen af ​​siTRPV2 blev ikke påvirket af LY294.002 programmet både i PC-3 og T24 /83 celler understøtter specificiteten af ​​PIK3 engagement i AM effekt på TRPV2 kanal.

diskussion

AM stimulerende aktivitet på tumorprogression er blevet vist på talrige cancere, herunder prostata, men ikke på blærecarcinom. Til dato har to mulige mekanismer, som AM understøtter tumorvækst blevet postuleret. Den første mulighed er, at AM fremmer tumorvækst ved at stimulere angiogenese [5], [6]. Den anden mulig mekanisme er, at AM direkte fremmer tumor spredning og overlevelse. En nylig rapport viste, at AM-antagonist hæmmede spredning og invasion af bugspytkirtelkræftceller udtrykker AM receptorer in vitro [20]; dog ingen effekt er nogensinde blevet beskrevet på prostatakræft cellemigration /invasion og ingen overhovedet på blærecarcinom.

I denne undersøgelse rapporterer vi for første gang, at UC cellelinien T24 /83 tillige afgive en AM-receptor (CLR /RAMP3), og at AM kan øge ikke blot PCA cellelinie PC-3, men også UC cellelinie T24 /83 invasive fænotype på samme måde, ved at stimulere celleadhæsion og migrering gennem β1-integrin og FAK aktivering hhv.

Calcium er en vigtig faktor i processen med migration [7]; undersøgelser fra vores laboratorium viser, at Transient Receptor Potential kanal TRPV2 udtrykkes i de metastatiske PCA cellelinjer, herunder PC-3 celler, og trpv2 transcript niveauer er 12 gange højere hos patienter med metastatisk cancer (fase M1) sammenlignet med primære solide tumorer ( stadier T2A og T2b). Basal aktivitet af denne kanal, samt induceret, fremmer PCa cellevandring og invasiv fænotype [12], [13]. Desuden er TRPV2 udtryk også steget i højere blærekræft fase [14]. Vi demonstrerer her at silencing af denne kanal også drastisk reducerer migration og invasion af UC-cellelinien T24 /83. Men det vigtigste resultat er, at TRPV2 modulerer AM stimulering af cellemotilitet og invasion, som vist ved fraværet af AM virkning på adhæsion, migrering og invasion når TRPV2 ekspression væltes. AM, ved at handle på TRPV2 translokation til plasmamembranen steg hvile calcium niveau af begge cellelinier, som bidrog til dens virkning på PC-3 og T24 /83 celle migration.

Disse data tyder på, at AM og TRPV2 korreleret udtryk kan bidrage til at skabe ideelle betingelser for metastatisk spredning i patienter med prostata eller blærecancer og kunne udgøre en potentiel prognostisk markør og et potentielt terapeutisk mål for at øge den forventede levetid for patienterne.