Abstrakt
Formål
At undersøge LMP10 udtryk og dens mulige indvirkning på det kliniske resultat i humant papillomvirus (HPV) positive og HPV-negative tonsillær og base af tungen pladecellekræft (TSCC og BOTSCC).
Baggrund
Resultatet er bedre i HPV-positive TSCC og BOTSCC sammenlignet med matchende HPV-negative tumorer, med omkring 80% vs. 40% 5-års sygdomsfri overlevelse (DFS ) med mindre aggressiv behandling end dagens kemostråleterapi. Da nuværende behandling resulterer ofte i skadelige bivirkninger, ville mindre intensiv terapi, med vedvarende patient overlevelse være et attraktivt alternativ. Men andre markører sammen med HPV-status er nødvendige for at vælge patienter og til dette formål LMP10 udtryk undersøges her parallelt med HPV status og kliniske resultat.
Materialer og metoder
Fra 385 patienter diagnosticeret mellem 2000 og 2007 på Karolinska Universitetshospital, 278 formalinfikseret paraffinindlejret TSCC og BOTSCC biopsier, med kendte HPV-DNA-status, blev testet for LMP10 nukleare og cytoplasmatisk udtryk (fraktion af positive celler og farvning intensitet). Dataene blev derefter korreleret til kliniske resultat.
Resultater
En fraværende /lav sammenlignet med et moderat /høj LMP10 nukleare brøkdel af positive celler var korreleret til et bedre 3-års DFS i HPV -positiv gruppe patienter (log-rank p = 0,005), men ikke i den HPV-negative gruppe. I HPV-negative gruppe patienter, i modsætning til den HPV-positive gruppe, moderat /høj LMP10 cytoplasmatiske fraktion og svag /moderat /høj LMP10 cytoplasmatiske intensitet korreleret til en bedre 3-års DFS (p = 0,003 og p = 0,001) og 3-års samlet overlevelse (p = 0,001 og 0,009).
Konklusion
LMP10 nukleare udtryk i HPV-positive gruppe og LMP10 cytoplasmatisk udtryk i HPV-negative gruppe patienter korreleret til bedre klinisk resultat
Henvisning:. Tertipis N, Haeggblom L, Nordfors C, Grün N, Näsman A, Vlastos A, et al. (2014) Korrelation af LMP10 Expression og Klinisk Outcome i humant papillomvirus (HPV) Positive og HPV-negativ Tonsillær og Base of Tongue Cancer. PLoS ONE 9 (4): e95624. doi: 10,1371 /journal.pone.0095624
Redaktør: Anthony WI. Lo, Den kinesiske University of Hong Kong, Hongkong
Modtaget: Februar 7, 2014 Accepteret: 27 Marts 2014; Udgivet: 21 April, 2014
Copyright: © 2014 Tertipis et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres
Finansiering:. Den svenske Cancer Foundation 120.417; Det svenske Medical Research Council K2011-56X-15282-07-06; Stockholm Cancer Foundation 121.043; Henning og Ida Perssons Foundation; Karolinska Institutet 2013fobi37387; Det Stockholms Läns Landsting 520.007; The King Gustaf V Jubilæumsfond; Cancer og Allergi Foundation. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet
Konkurrerende interesser:. Medforfatter Torbjörn Ramqvist er en PLoS ONE Editorial Board medlem. Dette ændrer ikke vores tilslutning til PLoS ONE Redaktionelle politikker og kriterier.
Introduktion
I 2007 Internationale Agentur for Kræftforskning (IARC) erkendte human papillomavirus (HPV) som en risikofaktor for svælg planocellulært karcinom (OPSCC) baseret på data fra andre og os [1], [2], [3], [4]. Desuden HPV-positive OPSCC, med tonsillær og base af tungen pladecellekræft (TSCC og BOTSCC) tegner sig for 80% af tilfældene, har en bedre prognose sammenlignet med de tilsvarende HPV-negative tumorer (80% vs. 40% -60 % 3-års sygdomsfri overlevelse (DFS) [1], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11], [12]. parallelt med en nylig stigning i forekomsten af HPV-positive OSCC i mange lande, helbredende behandling for hoved og hals pladecellekræft (HNSCC), herunder OPSCC, er blevet mere aggressiv med fx kemo-strålebehandling resulterer i mere alvorlige bivirkninger [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20], [21], [22], [23], [24] . Mindre aggressiv behandling ville sandsynligvis være tilstrækkeligt for de fleste patienter med HPV-positive TSCC og BOTSCC, hvor HPV er mest almindeligt forekommende, og hvor HPV har den største indflydelse på overlevelse [25]. Ikke desto mindre, før tilspidsende behandling, andre markører i kombination med HPV status ville være brug for at vælge patienter med HPV-positive TSCC og BOTSCC med en meget sandsynligt positivt svar på behandlingen [26], [27], [28], [29], [30], [31], [32] . Nylige undersøgelser har identificeret nogle markører, f.eks fraværende /lav HLA klasse I eller CD44 intensitet udtryk, eller høj CD8 + tumor infiltrerer lymfocyt (TIL) tæller i HPV-positive TSCC og BOTSCC, som alle vist sig at være gunstige prognostificering faktorer og angiver en 95-100% sandsynlighed for 5-års sygdom specifik overlevelse [26], [27], [28], [29], [30], [31], [32]. Desværre, de ovennævnte biomarkører kun anerkende en brøkdel af alle patienter med en god sandsynlighed for at reagerer godt på behandlingen og i at yderligere biomarkører til de ovenfor er nødvendige.
LMP10 (lavmolekylært protein 10) er en beta underenhed af 20S proteasomet, identificeret som en tredje IFN-g inducerbar enhed ved Nandi et al 2006 [33]. Sammen med LMP2 og LMP7, LMP10 opbygge såkaldte immunoproteasome handler på intensiveret immunrespons. Som en del af antigenet maskiner (APM), er LMP10 impliceret i vejen for peptid trimning under peptid præsentation af HLA-molekyler. Defekter i forskellige APM komponenter er blevet fundet i mange tumorer og har vist sammenhæng med kliniske resultat af patienterne [34], [35], [36], [37].
I denne undersøgelse har vi derfor undersøgt for LMP10 udtryk i HPV-positive og HPV-negative TSCC og BOTSCC, i 278 patienter diagnosticeret mellem 2000-2007 ved Karolinska Universitetshospital, og sammenhængen af LMP10 udtryk for overlevelse.
patienter, Materialer og metoder
Etik Statement
undersøgelsen blev udført i overensstemmelse med etiske tilladelser 2005 /431-31 /4, 2005 /1330-1332 og 2009 /1278-1231 /4 fra den regionale komité på Karolinska Institutet, Stockholm, Sverige. Skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle deltagere i undersøgelsen
Patienter og Biopsier
I løbet af 2000-2007, 385 patienter diagnosticeret med TSCC og BOTSCC (defineret som ICD-10 koder:. C09, C01 0,9 henholdsvis) ved Karolinska Universitetshospital, blev identificeret gennem den svenske Cancerregisteret. Af disse 278 patienter, med diagnostiske før behandlingen biopsier, tidligere er testet for HPV-DNA og med tilstrækkeligt materiale, blev inkluderet i denne undersøgelse [27]. De 258 patienter behandlet med helbredende hensigt blev derefter indeholdt i overlevelse analyse. Konventionel strålebehandling (RT) (2,0 Gy /dag i 6.5-7 uger, total dosis: 68 Gy) eller accelererede RT (1,1 + 2,0 Gy /dag i 4,5 uger, total dosis: 68 Gy) blev givet til 192/258 ( 74,4%) af patienterne, mens 66/258 (25,6%) patienter havde også induktion kemoterapi og samtidig RT. Interstitiel stråling (brachyterapi) blev også givet til nogle patienter (78 Gy helt). Patienter med nodal sygdom undergik hals dissektion 6-8 uger efter afsluttet RT. Patienterne blev fulgt hver 3. måned i de første 2 år, og hver 6. måned i løbet af 3. år, og deres overlevelsesdata blev indhentet fra patienternes journaler. Undersøgelsen blev udført i overensstemmelse med etiske tilladelser 2005 /431-31 /4, 2005 /1330-1332 og 2009 /1278-1231 /4 fra den regionale komité på Karolinska Institutet, Stockholm, Sverige.
HPV Analyse
HPV-DNA af 27 HPV-typer og p-globin blev analyseret ved en perle-baserede multiplex assay på en Magpix instrument (Luminex Corporation) som tidligere beskrevet [30].
Immunhistokemi
kort sagt, formalin fast paraffin indstøbt (FFPE) tumor biopsi slides (4 pm) blev de-paraffinized i xylen og rehydreret i ethanol af faldende koncentrationer. Bagefter blev de opvarmet i citratbuffer (pH 6,0) for antigen hentning. Uspecifikke sites blev blokeret med 1,5% hesteserum fortyndet i phosphatbufret saltvand (PBS). Paraffinsnit blev inkuberet natten over ved + 8 ° C med primært antistof, MECL-1 C-2 (anti-LMP10 antistof fra Santa Cruz Biotechnology), i et fugtigt kammer efterfulgt af sekundært antistof ansøgning og et standard ABC-HRP kit til påvisning af antigen . Chromogenet-3′-diaminobenzydine (DAB) blev anvendt til visualisering. Hæmatoxylin blev ansøgt om modfarvning efterfulgt af dehydrering i ethanol af stigende koncentrationer og xylen.
Evaluering af Immunhistokemi Farvning
LMP10 cytoplasmatisk og nuklear farvning, herunder negative og positive kontroller (figur 1), blev evalueret af to uafhængige forskere blindet for data og klinisk resultat, svarende til den beskrevet tidligere [32]. Fraktionen af maligne celler farvet for LMP10 i kernen og cytoplasmaet blev evalueret separat semikvantitativt i 4 kvaliteter af procentdele af farvede tumorceller: 0 (0%), 1 (1-25%), 2 (26-75% ) eller 3 (76-100%). Intensiteten af farvningen blev scoret separat og evalueret som fraværende, svag, moderat og stærk farvning. Intensiteten af farvningen blev defineret ved at sammenligne intensiteten af farvning i de maligne celler, med farvningen af interne kontroller (normal lymfevæv) per batch. I få tilfælde, hvor farvningen inden for samme prøve blev ikke engang, intensiteten af størstedelen af cellerne blev anvendt i analysen. Farvning og evaluering af HLA klasse I antigener blev udført på de samme tumorprøver i to tidligere undersøgelser som beskrevet andetsteds [27], [28]
(A):. Svag /moderat cytoplasmisk ekspression af LMP10; (B): Moderat /høj nukleare og fraværende cytoplasmatisk udtryk for LMP10; (C): Fraværende eller målbart LMP10 nukleare og cytoplasmatisk udtryk; (D): Moderat nukleare og cytoplasmatisk udtryk for LMP10. Forstørrelse 400X.
Statistisk analyse
Både patientkarakteristika og kategoriske data blev analyseret ved hjælp af Chi square-test eller for sammenligning af middelværdier, den studerende T-test. To-tailed p-værdier (5% signifikans niveau) blev rapporteret for alle analyser. Overlevelse blev målt i dage af diagnose, indtil en begivenhed fandt sted, eller indtil 3 år efter diagnosen, når patienter blev censureret. Død af enhver årsag (begivenhed) blev inkluderet i definitionen af samlet overlevelse (OS), mens kun sygdomstilbagefald (TSCC eller BOTSCC) blev anvendt til beregning af sygdomsfri overlevelse (DFS). Især blev død af patienter uden forudgående tilbagefald censureret på dag 0 ved beregning DFS. Kaplan-Meier estimator blev anvendt til DFS og OS, og forskelle i overlevelse af patienter blev testet under anvendelse af log-rank test. Den Cox proportionel risiko model blev anvendt til beregning af de justerede og ujusterede hazard ratio (timer). Alle beregninger og analyser blev udført ved hjælp af IBM Corp., SPSS Statistics, udgave 21.0.
Resultater
Patienter, Tumor Karakteristika og HPV
De kendetegn for 278 patienter, 195 (70%) med TSCC og 83 (30%) med BOTSCC og deres tumorer er vist i tabel 1. i alt 207/278 (74%) af tumorerne var HPV-positive. Patienter med HPV-positive tumorer var yngre (gennemsnit og median alder 60) end dem med HPV-negative tumorer (gennemsnit og median alder 64 og 62 år henholdsvis) (p 0,001) (tabel 1, og data ikke vist). I alt 258/278 (92,8%) patienter fik behandling med helbredende hensigt (tabel 1), 199/207 (96%) af dem med HPV-positive tumorer (median alder af 60 år), og 59/71 (83%) af dem med HPV-negative tumorer (median alder 62 år). Kun 258 patienter behandlet med helbredende hensigt blev inkluderet i analysen af 3-års DFS og OS.
LMP10 Expression og HPV i TSCC og BOTSCC
LMP10 nukleare og cytoplasmatisk udtryk var evalueret for alle 278 patienter, og er eksemplificeret i figur 1. LMP10 nuklear ekspression viste ingen signifikant forskel mellem TSCC og BOTSCC grupper, hverken med hensyn til den del af positive celler eller med intensiteten af farvning (p = 0,115 og p = 0,313 henholdsvis tabel 2). Men den del af LMP10 cytoplasmatiske positive celler var relativt højere i HPV-positive sammenlignet med HPV-negative (p = 0,033), mens der ikke var nogen signifikant forskel i LMP10 cytoplasmatisk intensitet farvning mellem grupperne (p = 0,211, tabel 2).
LMP10 kernefarvning og HPV status i Korrelation til Clinical Outcome
LMP10 nuklear ekspression blev evalueret både for den del af positive celler i kernen og for intensiteten af nuklear farvning, og blev korreleret til overlevelse 258 patienter behandlet med kurativ intention (vist som Kaplan-Meier kurver i figur 2 og 3 henholdsvis)
A og D:. DFS (A) og OS (D ) for TSCC og BOTSCC uanset HPV status af tumoren. B og E: DFS (B) og OS (E) af patienter med HPV-positive TSCC og BOTSCC. C og F:. DFS (C) og OS (F) af patienter med HPV-negative TSCC og BOTSCC
A og D: DFS (A) og OS (D) for TSCC og BOTSCC uanset af HPV status af tumoren. B og E: DFS (B) og OS (E) af patienter med HPV-positive TSCC og BOTSCC. C og F:. DFS (C) og OS (F) af patienter med HPV-negative TSCC og BOTSCC
En fraværende /lav (≤25%), sammenlignet med et moderat /høj ( 26-100%), del af LMP10 nukleare positive celler korrelerede til en bedre 3-års sygdomsfri overlevelse hos hele gruppen af patienter, og for patienter med HPV-positive tumorer, men ikke hos patienter med HPV-negative tumorer (log-rank test , p = 0,002, p = 0,005 og p = 0,688 henholdsvis) (figur 2 A-C). Der var dog ingen signifikant forskel i 3-års OS, når man sammenligner lignende parametre, for hele gruppen, HPV-positive og HPV-negative grupper (log-rank test, p = 0,115, p = 0,158 og 0,561 henholdsvis) ( Figur 2 D-F).
en fraværende, sammenlignet med svag /moderat /strong (nuværende), LMP10 farvning nukleare intensitet var korreleret med en bedre 3-års DFS for hele gruppen (p = 0,01) og HPV-positive gruppe (p = 0,037), men ikke for de HPV-negative (p = 0,473) (figur 3A-C). For 3-års OS blev dette kun observeret for hele gruppen af patienter (p = 0,014) (Figur 3 D).
Den mulige indflydelse LMP10 nukleare udtryk samt LMP10 nukleare intensitet farvning blev forfulgt separat for HPV-positive og HPV-negative grupper.
En multivariat Cox-regressionsanalyse blev udført for patienter med HPV-positive og HPV-negative tumorer særskilt, herunder den del af LMP10 nukleare positive celler eller LMP10 nukleare intensitet, alder og tumor stadium med hensyn til 3-års DFS og 3-års OS. For HPV-positive gruppe en fraværende /lav fraktion sammenlignet med et moderat /høj brøkdel af LMP10 positive celler var stadig en afgørende faktor for en bedre 3-års DFS (p = 0,027) (tabel 3), men ikke alder eller stadiet, (p = 0,079 og p = 0,744) (data ikke vist). Endvidere er ingen af disse parametre var determinanter af 3-års OS, bortset alder (p = 0,006, data ikke vist) (tabel 3). LMP10 nukleare intensitet farvning nåede ikke statistisk signifikans for enten 3-års DFS eller 3-års OS (tabel 3). Den tilsvarende analyse for HPV-negative gruppe foreslog, at nuklear LMP10 udtryk ikke havde nogen indvirkning på det kliniske resultat i denne gruppe (3-års DFS og 3-års OS) (tabel 3).
LMP10 cytoplasmatisk farvning og HPV status i Korrelation til Klinisk Outcome
LMP10 cytoplasmatisk udtryk blev vurderet både for den del af positive celler og intensiteten af farvning og blev korreleret til overlevelse for de 258 patienter behandlet med kurativ intention (vist som Kaplan-Meier kurver i figur 4 og 5 henholdsvis)
A og D:. DFS (A) og OS (D) for TSCC og BOTSCC uanset HPV status af tumoren. B og E: DFS (B) og OS (E) af patienter med HPV-positive TSCC og BOTSCC. C og F:. DFS (C) og OS (F) af patienter med HPV-negative TSCC og BOTSCC
A og D: DFS (A) og OS (D) for TSCC og BOTSCC uanset af HPV status af tumoren. B og E: DFS (B) og OS (E) af patienter med HPV-positive TSCC og BOTSCC. C og F:. DFS (C) og OS (F) af patienter med HPV-negative TSCC og BOTSCC
En moderat /høj i forhold til en fraværende /lav brøkdel af LMP10 cytoplasmatiske positive celler korreleret til en bedre 3-års DFS for patienter med HPV-negative tumorer men ikke for hele gruppen af patienter, og heller ikke for de patienter med HPV-positive tumorer, (log-rank test, p = 0,003, p = 0,488 og p = 0,086 henholdsvis (figur 4 A-C). for 3-års O’er tilsvarende korrelation var signifikant både for HPV-negative og hele gruppen, men ikke for HPV-positive gruppe (log-rank test, p = 0,001, p . 0,001 og p = 0,159, henholdsvis), (figur 4 D-F)
Svag /moderat /høj (til stede) LMP10 cytoplasmatisk intensitet farvning i forhold til fraværende LMP10 farvning blev korreleret til et bedre 3-årig DFS for patienter med HPV-negative tumorer men ikke for hele gruppen eller for patienter med HPV-positive tumorer (log-rank test p = 0,001, p = 0,219, og 0,368, henholdsvis) (figur 5 A-C). for 3 års O’er tilsvarende korrelation var signifikant både for HPV-negative og hele gruppen, men ikke for HPV-positive gruppe (log-rank test p = 0,009, p = 0,01 og p = 0,334, henholdsvis (figur 5 D -F).
den mulige indflydelse LMP10 cytoplasmatisk udtryk blev forfulgt separat for HPV-positive og HPV-negative grupper (tabel 3). For at en multivariat Cox-regressionsanalyse blev udført i patienter med HPV-positive og HPV-negative tumorer, herunder den del af LMP10 cytoplasmatiske positive celler, alder og fase, med hensyn til 3-års DFS og 3-års OS. En tilsvarende analyse blev udført for LMP10 cytoplasmatisk intensitet. For patienter med HPV-negative tumorer både en moderat /høj fraktion af LMP10 cytoplasmatiske positive celler, og tilstedeværelsen af LMP10 cytoplasmatisk farvning blev korreleret til en bedre 3-års DFS (p = 0,014 og p = 0,006, henholdsvis) (tabel 3 ). De tilsvarende tal for 3-års OS var p = 0,010 og p = 0,051 (Tabel 3). Alder og scene nåede ikke statistisk signifikans i analysen for patienter med HPV-negative tumorer (data ikke vist).
Den tilsvarende analyse for HPV-positive gruppe foreslog, at cytoplasmatisk LMP10 udtryk ikke havde nogen indvirkning på det kliniske resultat (3-års DFS og 3-års OS) (tabel 3).
LMP10 Expression, HLA klasse i Expression og HPV status i Korrelation til Klinisk Outcome
i de seneste undersøgelser, vi har vist, at fraværende eller lav HLA klasse i-ekspression korreleret til bedre overlevelse hos patienter med HPV-positive TSCC og BOTSCC, mens det modsatte var tilfældet for patienter med HPV-negative TSCC og BOTSCC [27], [28]. For at undersøge, om korrelationen af LMP10 udtryk forudsiger overlevelse uafhængig af HLA klasse I udtryk eller ej, to multivariat Cox-regressionsanalyser med hensyn til 3-års DFS blev udført, med HLA klasse I data fra Näsman et al [27].
i den første analyse blev HPV-positive TSCC og BOTSCC undersøgt og analysen omfattede den del af LMP10 nukleare positive celler, alder, scene og HLA klasse i-ekspression analyseres som intensiteten af HCA2-farvning. Som vist i tabel 4, både LMP10 og HCA2 intensitet var uafhængige prædiktorer for 3-års DFS.
I den anden analyse blev HPV-negative TSCC og BOTSCC studeret og analysen den del af LMP10 cytoplasmatiske positive celler, alder, fase og den del af HLA-klasse i-positive celler analyseret ved HCA2-farvning. Som vist i tabel 4, både den del af LMP10 og HCA2 positive celler var uafhængige prædiktorer for 3-års DFS.
Diskussion
Den foreliggende undersøgelse undersøgte LMP10 udtryk både i de nukleare og cytoplasmatiske rum i forhold til HPV-status og klinisk resultat i 195 TSCC og 83 BOTSCC sager. LMP10 nukleare og cytoplasmiske ekspression, herunder både den del af positive celler og intensiteten af farvning var ens i HPV-positive og HPV-negative tumorer, bortset fra den højere del af LMP10 cytoplasmatiske positive celler i HPV-positive gruppe.
Desuden en fraværende /lav fraktion af LMP10 positive celler i kernen, samt fraværende nukleare farvningsintensitet korreleret til en bedre 3-års DFS for patienter med HPV-positive tumorer, men ikke for dem med HPV-negative tumorer . Det omvendte blev fundet for cytoplasmatisk LMP10 farvning, hvor en moderat /høj fraktion af positive celler og svag /moderat /høj intensitet var korreleret til bedre 3-års DFS og OS i HPV-negative, men ikke i den HPV-positive gruppe.
årsagen til forskellen med hensyn til nukleare og cytoplasmatiske LMP10 farvning og overlevelse for de HPV-positive og HPV-negative grupper er ikke indlysende. I tidligere undersøgelser LMP10 cytoplasmatisk ekspression er blevet evalueret i blæren og øsofageal cancer til både den del af positive celler og intensiteten af farvning, men blev ikke vist at have nogen prognostisk virkning [34], [35], [37]. Men i disse undersøgelser var der ingen særskilt analyse af nukleare og cytoplasmatisk udtryk. I denne undersøgelse, vurdering og analyse af nuklear og cytoplasmatisk farvning supplerende oplysninger.
Så vidt vi ved er der ingen forudgående undersøgelser om LMP10 udtryk i forhold til overlevelse i HNSCC. Meissner
et al.
Påvist en sammenhæng med overlevelse i HNSCC for både LMP2 og LMP7 [38] og i en nylig undersøgelse blev udtryk for LMP7 også korreleret til overlevelse i spyt kræft [39]. Imidlertid blev tumorerne ikke analyseret for tilstedeværelsen af HPV i nogen af disse undersøgelser.
Det fund, at en lav nukleart LMP10 ekspression korreleret til en bedre 3-års sygdomsfri overlevelse hos HPV-positive gruppe, mens en tilsvarende høj cytoplasmatisk LMP10 udtryk korreleret til et bedre 3-års DFS i HPV-negative gruppe foreslår flere konsekvenser. Først og fremmest vores undersøgelse tyder på, at LMP10 kunne anvendes som prognostisk markør for patienter med enten HPV-positive eller HPV-negative tumorer. Vi har tidligere været i stand til at vise, at en biomarkør, i samme pathway, HLA klasse I-ekspression, kan anvendes i en differential måde at forudsige det kliniske resultat i HPV-positive og HPV-negative tumorer. , En fraværende /lav HLA klasse I-ekspression er således en positiv prognostisk faktor for patienter med HPV-positive tumorer, mens det modsatte er tilfældet for patienter med HPV-negativ tumorer, hvor en høj HLA klasse I-ekspression er en fordel [27]. Således kan både med hensyn til HLA klasse I og LMP10 ekspression i forhold til overlevelse, der var forskelle mellem HPV-positive og HPV-negative tumorer, selv om disse var mere udtalt for HLA klasse I. Navnlig, hvilket fremgår af den multivariate analyse i tabel 4, udtryk for LMP10 og HLA klasse i var uafhængige prædiktorer for overlevelse for både HPV-positive og HPV-negative tumorer. De underliggende mekanismer bag reguleringen af LMP10 og HLA klasse I-ekspression i disse tumorer bør således i det mindste delvis være adskilt.
Det vides ikke, om tilstedeværelsen af HPV kan påvirke LMP10 udtryk direkte, og selv om det er tilfældet, er mekanismen bag denne forordning ikke kendt. Det er blevet vist, at HPV E5 har potentiale til at nedregulere ekspressionen af HLA klasse I [40]. Hvorvidt E5 påvirker også ekspressionen af LMP10 har, så vidt vi ved, ikke blevet undersøgt. Det er blevet vist, at humane papillomavira har evnen til at regulere HLA klasse I tung kæde samt nogle af de antigen forarbejdningsmaskiner komponenter i det transkriptionelle niveau [41]. Men den transkriptionelle regulering af f.eks lmp2 promotoren viste sig at være afhængig af E7-proteinet af HPV 18 og lav risiko HPV 6b, men ikke af E7 af HPV16. Dette antyder, at der er en potentiel forskel i de cellulære virkninger forårsaget af E7-proteinet af HPV16 og HPV18. Bemærkelsesværdigt, at flertallet af TSCC og BOTSCC tilfælde er positive for HPV16. Om ekspression af LMP10 kan reguleres ved E7 har, så vidt vi ved, ikke blevet undersøgt. Bemærkelsesværdige, i den foreliggende undersøgelse den del af LMP10 cytoplasmatiske positive celler var højere i HPV-positive sammenlignet med HPV-negative gruppe. Der var imidlertid ingen signifikant forskel i LMP10 cytoplasmatisk intensitet farvning mellem grupperne. Dette indikerer muligheden for nogle, men ikke en stærk regulering af HPV i disse tumorceller.
Der er nogle begrænsninger i vores undersøgelse. Primært undersøgelsen er retrospektiv, men dette kan ikke påvirke resultaterne. Desuden var der færre HPV-negative sager, som er en direkte repræsentation af den høje HPV udbredelse i OSCC patienter fra Sverige i dag.
Som konklusion, denne undersøgelse viser, at LMP10 ekspression i TSCC og BOTSCC er korreleret til sygdomsfri overlevelse for både patienter med HPV-positive og HPV-negative tumorer og har potentialet til at blive anvendt i et klinisk miljø. Men da nuklear LMP10 udtryk forudsiger, overlevelse for patienter med HPV-positive tumorer, mens cytoplasmatisk LMP10 udtryk korrelerer til overlevelse for HPV-negative tumorer, ville LMP10 udtryk skal analyseres i forhold til tumor HPV-status.
Tak
Vi takker Caitrin Jane Crudden for omhyggeligt at læse manuskriptet.
Leave a Reply
Du skal være logget ind for at skrive en kommentar.