PLoS ONE: BRCA1: A Novel Prognostisk faktor i resektion Ikke-småcellet lungekræft

Abstrakt

Baggrund

Selvom den tidlige fase ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) betragtes som en potentielt helbredelig sygdom efter komplet resektion, patienterne har et bredt spektrum af overlevelse efter fase (IB, II, III A). Inden for hver fase, kan genekspressionsprofiler identificere patienter med en højere risiko for tilbagefald. Vi antager, at ændret mRNA ekspression i ni gener kunne bidrage til at forudsige sygdom resultat: excision reparation cross-komplementerende 1 (ERCC1), myeloid zink finger 1 (MZF1) og Twist1 (som regulerer N-cadherinekspression), ribonukleotidreduktase subunit M1 (RRM1 ), thioredoxin-1 (TRX1), tyrosyl-DNA phosphodiesterase (Tdp1), nuklear faktor af aktiverede T-celler (NFAT), BRCA1, og den humane homolog af gær knopskydning uhindret af benzimidazol (BubR1).

Metodologi og vigtigste resultater

Vi udførte realtid kvantitativ polymerasekædereaktion (RT-QPCR) i frosne lungekræft vævsprøver fra 126 tidligere havde modtaget kemoterapi NSCLC patienter, som havde gennemgået kirurgisk resektion og evalueret sammenhængen mellem genekspression niveauer og overlevelse. For validering, vi brugte paraffinindlejrede prøver fra 58 andre NSCLC patienter. En stærk inter-genet korrelation blev observeret mellem ekspressionsniveauer af alle generne undtagen NFAT. En Cox proportionel risiko model viste, at sammen med sygdom etape, BRCA1 mRNA-ekspression signifikant korreleret med total overlevelse (hazard ratio [HR], 1,98 [95% konfidensinterval (CI), 1,11-6]; P = 0,02). I den uafhængige kohorte af 58 patienter, også BRCA1 mRNA-ekspression signifikant korreleret med overlevelse (HR, 2,4 [95% CI, 1,01-5,92]; P = 0,04).

Konklusioner

Overekspression af BRCA1 mRNA blev stærkt forbundet med dårlig overlevelse i NSCLC patienter, og valideringen af ​​dette fund i en uafhængig datasæt yderligere styrket denne forening. Da BRCA1 mRNA-ekspression tidligere har været knyttet til differential følsomhed over for cisplatin og antimikrotubulusmidler lægemidler kan BRCA1 mRNA-ekspression give yderligere oplysninger til tilpasning adjuverende antimikrotubulær kemoterapi, især i fase IB, hvor rollen som adjuverende kemoterapi ikke er blevet klart påvist.

Henvisning: Rosell R, Skrzypski M, Jassem E, Taron M, Bartolucci R, Sanchez JJ, et al. (2007) BRCA1: A Novel Prognostisk faktor i resektion Ikke-småcellet lungekræft. PLoS ONE 2 (11): E1129. doi: 10,1371 /journal.pone.0001129

Academic Redaktør: William Pao, Memorial Sloan-Kettering Cancer Center, USA

Modtaget: Juni 20, 2007; Accepteret: August 1, 2007; Udgivet: November 7, 2007

Copyright: © 2007 Rosell et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Forskningen rapporteret her blev finansieret af den spanske Lung Cancer Group og det medicinske universitet i Gdansk. Det blev delvist finansieret af det spanske sundhedsministerium give FIS 05/1621. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

i 2006 i Europa, var der anslået 386,300 lungekræfttilfælde, med en væsentligt højere forekomst hos mænd end hos kvinder [1]. Blandt helt resektion ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) patienter, 40% af fase I, 66% af trin II og 75% af stadie IIIA patienter dør inden for fem år resektion [2], og fordelen ved adjuverende kemoterapi har ikke påvist i fase IB. I ANITA randomiserede forsøg, 5-års overlevelse for patienter med stadie IB sygdom var 62% i kemoterapi-gruppen og 64% i kontrolgruppen; tilsvarende satser var 52% og 39% for fase II-patienter og 42% og 26% for trin IIIA [3]. Udover sygdom fase, har flere undersøgelser undersøgt genekspressionsprofiler i NSCLC, identificere molekylære undertyper forbundet med patientens udfald [4], [5], [6], [7]. Genekspression signaturer, der spænder fra fem til 64 gener er blevet identificeret [6], [7], og cross-undersøgelse sammenligninger har afsløret væsentlige, om ufuldstændig, aftale mønstre forudsige udfaldet [4]. Endvidere evnen til at fortolke betydningen af ​​de enkelte gener i disse signaturer forbliver en udfordring [8]. Genekspressionen signaturer identificerede gener vedrører hovedsageligt cancermetastase [6], men beskrev ikke gener involveret i DNA-reparation veje.

Prækliniske studier har vist, at en mangel i et af de mere end 30 gener involveret i nukleotid excision reparation (NER) pathway giver markeret overfølsomhed over for cisplatin [9]. Hypoteser, der forhøjede niveauer af NER gener kunne være ikke blot prædiktive men også prognostiske markører, valgte vi at undersøge følgende gener, baseret på tidligere rapporter om deres prædiktiv værdi: excision reparation cross-komplementerende 1 (ERCC1) [10], BRCA1 [11 ], humane homolog af gær knopskydning uhæmmet af benzimidazol (BubR1) [12], [13], [14], myeloid zink finger 1 (MZF1) [15], [16], [17], ribonukleotidreduktase subunit M1 (RRM1 ) [18], [19], [20], thioredoxin-1 (TRX1) [21], [22], tyrosyl-DNA phosphodiesterase (Tdp1) [23], [24], [25]. Derudover undersøgte vi Twist [26], [27] og nuklear faktor af aktiverede T-celler (NFAT) [28], [29], der er involveret i invasionen-metastaser proces. (Yderligere oplysninger om de ni gener undersøgte kan findes i tekst S1.)

Ingen af ​​disse ni gener er blevet identificeret i genekspressionsprofiler forbundet med NSCLC patient resultat [4], [5], [6] , [7], med undtagelse af TRX1, som blev identificeret ved proteomisk analyse og forbundet med dårlig overlevelse [21]. For at belyse den prognostiske værdi af disse gener, har vi undersøgt deres udtryk af real-time kvantitativ revers transkriptase PCR (RT-PCR) i 126 helt resektion NSCLC patienter, som ikke fik adjuverende kemoterapi og korrelerede resultaterne med overlevelse.

Metoder

patienter

NSCLC prøver blev opnået fra 126 konsekutive patienter, som gennemgik helbredende pulmonal resektion ved det medicinske universitet i Gdansk (Gdansk, Polen) mellem 2000 og 2004, efter opnå godkendelse fra den institutionelle gennemgang bestyrelsen for medicinske universitet i Gdansk og patienternes underskrevet informeret samtykke. Patienterne var 98 mænd og 28 kvinder, med alderen ved diagnose spænder fra 37 til 77 år (median alder, 64 år). Halvfjerds-én patienter havde stadium I-sygdom, 33 fase II, og 22 trin IIIA. Tyve-syv patienter havde dårligt differentieret, 74 moderat differentieret, og 9 veldifferentieret NSCLC; de resterende 16 patienter var uspecificeret. Firs patienter var rygere, 39 tidligere rygere, og de resterende syv aldrig-rygere. Et hundrede og toogtyve patienter gennemgik formel pulmonal lobectomy eller mere, med systematisk ipsilaterale mediastinale lymfeknude dissektion; de fire resterende patienter gennemgik segmentectomy grund af dårlig pulmonal reserve. blev bestemt Stages efter patologisk vurdering af resektion prøver i henhold til det internationale system til Iscenesættelse Lung Cancer [30] (tabel S1). Ingen af ​​patienterne har modtaget adjuverende kemoterapi.

Vi valideret BRCA1 prognostisk værdi i 58 fase IB-IIB NSCLC patienter, der havde gennemgået kirurgisk resektion på Azienda Ospedaliera Santa Maria (Terni, Italien) i perioden fra februar 1997 til december 2003 , efter at have indhentet godkendelse fra den institutionelle gennemgang bestyrelse Azienda Ospedaliera Santa Maria og patienternes underskrevet informeret samtykke. Patient karakteristika er vist i tabel S1.

genanalyse

Tumor prøver fra de 126 patienter blev opnået under kirurgi som blokke af 1cm3 og snap-frosne i flydende nitrogen. Væv blev opbevaret i -80 ° C, indtil total RNA blev ekstraheret med AllPrep kits (Qiagen, Valencia, CA). Kun tumorprøver indeholdende mere end 60% af tumorvæv på mikroskopisk sektion, var egnede til videre forarbejdning. Koncentrationen af ​​RNA blev vurderet i Nano-drop ™ og kvaliteten af ​​opnåede RNA blev testet på agarosegel. Første-streng cDNA blev syntetiseret fra 1 pg totalt RNA ved anvendelse af High-Capacity cDNA Archive Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA). De ni gener undersøgte er vist i tabel 1. Kvantitativ RT-PCR-reaktioner af hvert gen blev udført i en ABI PRISM 7900 HT Sequence Detection System (Applied Biosystems).

Relativ genekspression værdier blev beregnet ved den ΔΔCt metoden under anvendelse af Sequence Detection System (SDS) 2.1 software (Applied Biosystems). Den ΔΔCt metode giver mængden af ​​mål-genet normaliseret til et endogent henvisning gen (ribosomale 18S RNA) og i forhold til en kalibrator prøve (reference for alle prøver. Kommercielt tilgængeligt Normal lunge og lever Humant RNA (Stratagene, La Jolla, CA) Primere for de ni gener er anført i tabel S2.

ERCC1, RRM1 og BRCA1 gen ekspression blev vurderet i formalinfikserede, paraffinindlejrede kirurgiske prøver fra de 58 patienter i valideringen kohorte. Brug af laser capture microdissection teknik ( Palm microLaser, Oberlensheim, Tyskland) sikres et minimum af 80% af tumorvæv. Efter standard vævsprøve afparaffinering hjælp xylen og alkoholer blev prøver lyseret i en tris-chlorid, EDTA, natriumdodecylsulfat (SDS) og proteinase K buffer. RNA blev derefter ekstraheret med phenol-chloroform-isoamylalkohol efterfulgt af udfældning med isopropanol i nærvær af glycogen og natriumacetat. RNA blev resuspenderet i DEPC vand (Ambion Inc., Austin TX, USA) og behandlet med DNase i (Ambion Inc.) til undgå DNA-kontaminering. cDNA blev syntetiseret under anvendelse af M-MLV retrotranscriptase enzym. Template cDNA sattes til Taqman Universal Master Mix (Applied Biosystems) i et 12,5-pi reaktion med specifikke primere og probe for hvert gen. Grunder og probesæt var identiske med dem, der anvendes i de frosne prøver; det endogene henvisning genet var β-actin. Kvantificering af genekspression blev udført under anvendelse af ABI Prism 7900HT Sequence Detection System (Applied Biosystems).

Statistiske analyser

Median værdier og intervaller, blev udledt for kvantitative variable og mRNA genekspression. Kvalitative variabler blev sammenfattet ved hjælp af absolutte frekvenser og procenter. Kruskal-Wallis-testen blev anvendt til at kontrollere for normalitet. Forskelle i median mRNA ekspressionsniveauer mellem histologiske typer blev vurderet af U-Mann Whitney testen. Spearmans rang-korrelationskoefficient (rho) blev anvendt til måling korrelationerne blandt genekspressionsniveauer. Vi gjorde en

a priori

beslutning om at klassificere mRNA gen-ekspression niveauer så høje eller lave, ved hjælp af minimale P-værdi metode modificeret af Lausen og Schumacher [31]. Bonferroni fremgangsmåde blev anvendt til korrektion af effekten af ​​multiple sammenligninger, og empiriske P-værdier for hvert gen blev bekræftet gennem 5000 permutation test. Når der ikke optimale skæringspunkt blev fundet, anvendte vi prøven medianen til analyse af tid til tilbagefald og overlevelse. Tid til tilbagefald og overlevelse blev beregnet ved anvendelse Kaplan-Meier-estimater og forskelle mellem kurverne blev testet under anvendelse af log-rank test. For at vælge en passende delmængde af gener for foreningen af ​​kliniske variable (histologi, scene og kvalitet), udførte vi en frem og tilbage Cox regressionsanalyse. For alle beregninger, de udførte tests var to-sidet, blev signifikans på 5%, og magten var 80%. Analyser blev udført ved hjælp af statistiske pakke for Social Sciences (SPSS) til Windows-version 14 (SPSS Inc., Chicago, IL) og S-Plus 6.1 til Windows.

Resultater

medianværdier af hvert gen for hele gruppen af ​​prøver er vist i tabel S3. Gene forstærkning lykkedes ikke i et mindretal af prøver for hver analyserede udskrift. Der var signifikante forskelle i ekspression baseret på histologi for alle gener undtagen NFAT, med højere niveauer observeret i pladecellecarcinomer end i adenocarcinomer (tabel 2). Der var ingen forskelle i genekspression efter fase (tabel S4). Der blev observeret en stærk korrelation mellem ekspressionsniveauer af forskellige gener, for eksempel mellem niveauer af TRX og RRM1 (rho = 0,52; P = 0,0003) og mellem ERCC1 og BRCA1 (rho = 0,62; P = 0,0001) (tabel 3)

med en median opfølgning på 29,7 måneder (interval, 1.7-65.9 måneder), samlet event-fri og median overlevelse er ikke blevet nået. Når event-fri og median overlevelse blev analyseret efter ekspressionsniveauer af de ni gener, TRX og BRCA1 viste signifikante forskelle. Begivenhed overlevelse i 21 patienter med lave TRX niveauer ikke er nået, mens det var 32 måneder (95% CI,) for de resterende 93 patienter med høje niveauer (P = 0,02). For 77 patienter med lave niveauer af BRCA1, har begivenhed overlevelse ikke nået, mens det var 22 måneder (95% CI, 14.9-29 måneder) for dem med høje niveauer (P = 0,04) (tabel S5, fig. 1 ). Event-fri overlevelseskurver ifølge ekspression af de andre syv gener er vist i figur S1. Median overlevelse i 24 patienter med lave TRX niveauer ikke er nået, mens det var 39 måneder for de resterende 101 patienter med høje niveauer (P = 0,03). For 83 patienter med lave niveauer af BRCA1, har median overlevelse ikke er nået, mens det var 29 måneder (95% CI, 22.2-35.7 måneder) for dem med høje niveauer (P = 0,04) (tabel 4, fig. 1). Median overlevelseskurver ifølge ekspression af de andre syv gener er vist i figur S2. Men når kun stadie jeg patienter blev undersøgt, event-overlevelse var signifikant forskellig i henhold til ekspressionsniveauer af MZF1 og BRCA1 (tabel S6, fig. S3), og median overlevelse var signifikant forskellig i henhold til ekspressionsniveauer af ERCC1, MZF1, Twist og BRCA1 (tabel S7, fig. S4).

event-fri (A, B) og median (C, D) overlevelse baseret på ekspression af TRX (A, C) og BRCA1 (B, D) .

Cox proportionel risiko model valgt patologisk stadie IIIA og BRCA1 udtryk som selvstændige prognostiske faktorer for overlevelse. Den hazard ratio (HR) var 7,91 (95% CI, 2,27-27,54; P = 0,001) til trin IIIA og 1,98 (95% CI, 1,11-6); P = 0,02) for BRCA1 ekspression (tabel S8).

Validering af BRCA1

Den mediane opfølgning af de 58 patienter i valideringen kohorten var 40 måneder. Ifølge Cox proportional hazards model, den højtstående repræsentant for patienter med høje niveauer af BRCA1 var 2,4 (95% CI, 1,01-5,92; P = 0,04). Der var ingen scene IIIA patienter i denne kohorte.

Diskussion

Gene udtryk underskrifter har vist sig at forudsige udfaldet i opereret fase I NSCLC [5], [6], men brugen af mikroarrays er begrænset på grund af behovet for frisk frosset væv. RT-QPCR involverer et lille antal gener tilbyder en praktisk alternativ, der giver mulighed for nøjagtig og reproducerbar kvantificering af resultaterne for RNA opnået fra små mængder af paraffinindlejrede prøver. Resultaterne af RT-QPCR udført på fem [7] og otte [32] gener korreleret med resultaterne af NSCLC [7] og lunge adenocarcinom [32] patienter. Vi har undersøgt ekspressionen af ​​ERCC1, BRCA1, BubR1, MZF1, RRM1, TRX1 og Tdp1, der er involveret i DNA-reparation veje, og Twist og NFAT, relateret til metastase-dannelse. I den flerdimensionale model blev kun BRCA1 og trin IIIA identificeret som uafhængige prognostiske variable. I en uafhængig validering kohorte af 58 trins IB-IIB NSCLC patienter blev BRCA1 bekræftet som det eneste uafhængige prognostiske markør.

Patienter, hvis tumorer havde høj BRCA1 udtryk havde signifikant dårligere overlevelse og bør være kandidater til adjuverende kemoterapi.

In vitro Salg undersøgelser har vist, at BRCA1 kan regulere forskellig sensitivitet til forskellige klasser af kemoterapimidler [33]. Fraværet af BRCA1 resultater i høj følsomhed over for cisplatin, hvorimod dets tilstedeværelse øger følsomheden over for antimikrotubulusmidler midler [33]. Derfor mener vi, at patienter med det højeste udtryk niveauer bør modtage antimikrotubulær, ikke-platinbaseret kemoterapi. Vi har foretaget en pilotundersøgelse af tilpassede adjuverende kemoterapi baseret på BRCA1 mRNA-niveauer i 88 helt opereret fase II-IIIA NSCLC patienter, hvor dem med de højeste ekspressionsniveauer modtaget adjuverende docetaxel og dem med lavere niveauer modtog cisplatin kemoterapi. Den foreløbige analyse viser, at begivenheden overlevelse er ens i begge grupper. Disse resultater støtter vores tidligere fund i fase II-III A patienter, der fik neoadjuverende gemcitabin /cisplatin, hvor dem med de højeste BRCA1 niveauer havde en dystre overlevelse på 12 måneder [11].

Ingen forskelle i ekspressionsniveauer af enhver af de ni gener blev observeret efter scenen eller tumorstørrelse ( 4 vs 4 cm). Men af ​​alle ni gener undersøgte, viste en tendens mod at påvirke overlevelse baseret på tumorstørrelse, kun BRCA1. I fase I NSCLC-patienter, er overlevelse blevet omvendt korreleret med tumorstørrelse [34]. I den foreliggende undersøgelse viste det univariate overlevelsesanalyse, at ud over BRCA1, ERCC1 og MZF1 væsentligt påvirket overlevelse i trin I (tabel S7, fig. S4). Disse resultater fremhæve den potentielle rolle ERCC1 og MZF1, som er stærkt korreleret med BRCA1, som stærke prognostiske markører i fase I NSCLC. Ikke uventet imidlertid i betragtning af den høje korrelation mellem ekspressionsniveauerne af disse tre gener (tabel 3), hvor alle tre gener blev kombineret, blev der ikke observeret yderligere forbedring i forhold til prognostiske værdi af BRCA1 alene.

Selvom mekanismer, hvorved nogle af de ni gener undersøgte påvirker patientens prognose er ikke særlig klar, overekspression af ERCC1 og RRM1 synes at være onkogen-drevet [35], [36], [37], [38], [39]. BRCA1 methylering og ophævelse af BRCA1 mRNA er blevet fundet i sporadiske brystkræft [40], men meget sjældent i NSCLC [41]. I nogle sporadiske brystkræft, kunne dårligt resultat forbundet med BRCA1 methylering og lave niveauer af ekspression forklares ved MYC amplifikation [42].

Andre undersøgelser, anvendelse af det monoklonale antistof 8F1 [43] har rapporteret, at tilstedeværelsen af ERCC1 protein er en prognostisk markør for overlevelse i begyndelsen NSCLC og en indikator for udfaldet på adjuverende cisplatin kemoterapi; men i en forudgående undersøgelse i gastrisk kræft [44], var det uklart, om den dårlige klinisk respons af patienter, hvis tumorer havde høj forbehandling mRNA niveauer af ERCC1 resulterede fra tumor celle modstand mod cisplatin kemoterapi, eller en mere aggressiv tumor biologi. Desuden er der i ERCC1-positive normale humane fibroblaster og celler fra patienter med arvelige mutationer i ERCC1, ERCC1 er ikke det vigtigste antigen genkendes af 8F1 antistoffet på immunfarvning [45]. Desuden i en anden undersøgelse, ERCC1 protein status korrelerede ikke med overlevelse i stadie IV NSCLC [46], mens der i et forsøg med skræddersyet cisplatin baseret på ERCC1 mRNA-ekspression, svarprocenten var 39% i kontrolgruppen og 50% i den tilpassede arm (P = 0,02) [47].

sammenfattende vores undersøgelse tyder på, at det første, er BRCA1 nært beslægtet med ERCC1, RRM1 og andre gener som MZF1, men skiller sig ud som den mest betydningsfulde prognostiske markør for tilbagefald . Vi hypotesen, at patienter med høje BRCA1 niveauer vil drage fordel af antimikrotubulær-baserede-men ikke cisplatin-baseret-kemoterapi. For det andet, høje niveauer af disse udskrifter giver en højere risiko for tilbagefald, i modsætning til, hvad der er blevet rapporteret af andre forskere, der fremhæver behovet for yderligere forskning på dette område for at belyse den prædiktive rolle disse NER-relaterede gener og korrekt tilpasse behandling (fig. S5). Selvom befolkningen i vores undersøgelse blev skæv til mandlige rygere med planocellulært karcinom, vores resultater berettiger yderligere undersøgelser for at bekræfte deres anvendelighed til andre histologiske delmængder af NSCLC, for at kaste yderligere lys over disse spørgsmål, planlægger vi at undersøge BRCA1, ERCC1 , MZF1 og RRM1 udtryk i 200 tumor prøver fra ANITA undersøgelse [3] og i 620 patienter inkluderet i den spanske Lung Cancer Group natch forsøg med neoadjuverende vs adjuverende kemoterapi vs kirurgi alene.

Støtte oplysninger

figur S1.

Begivenhed overlevelse efter ekspression af ERCC1 (A), MZF1 (B), Twist (C), RRM1 (D), Tdp1 (E), NFAT (F), og BubR1 (G)

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s001

(0,09 MB TIF)

Figur S2.

Median overlevelse baseret på ekspressionen af ​​ERCC1 (A), MZF1 (B), Twist (C), RRM1 (D), Tdp1 (E), NFAT (F), og BubR1 (G)

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s002

(0,09 MB TIF)

Figur S3.

hændelses-frie overlevelse kurver for fase I-patienter i henhold til genekspression niveauer af de ni gener undersøgt

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s003

(0,10 MB TIF)

Figur S4. Salg Median overlevelse kurver for fase I-patienter i henhold til genekspression niveauer af de ni gener undersøgt

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s004

(0,10 MB TIF)

Figur S5.

Modstridende fund fører til modsatte strategier for at tilpasse adjuverende kemoterapi. Olaussen et al (NEJM 2006; 355: 983-991) rapporterer, at manglen på ERCC1protein indebærer en større risiko for tilbagefald og en større følsomhed over for cisplatin kemoterapi. (Cisplatin følsomhed baseret på manglende ERCC1 ekspression er blevet påvist i prækliniske og kliniske undersøgelser.) Vores resultater viser, at en højere risiko for tilbagefald er relateret til høje niveauer af flere transkripter, herunder ERCC1. Disse patienter kan være resistente over for cisplatin og følsomme over for taxaner eller andre antimikrotubulusmidler lægemidler

Doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s005

(0,13 MB TIF)

tabel S1.

Patient karakteristika for hovedstolen kohorte (N = 126) og for validering kohorte (N = 58)

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s006

(0,04 MB DOC)

tabel S2.

Primere og prober til de ni gener undersøgt

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s007

(0,03 MB DOC)

tabel S3.

Relativ genekspression værdier

Doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s008

(0,03 MB DOC)

Tabel S4.

Genekspression efter sygdom fase

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s009

(0,04 MB DOC)

tabel S5.

Begivenhed overlevelse efter genekspression niveauer

Doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s010

(0,06 MB DOC)

tabel S6.

Begivenhed overlevelse i fase I-patienter i henhold til genekspression niveauer

Doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s011

(0,06 MB DOC)

tabel S7.

Median overlevelse for trin I patienter i henhold til genekspression niveauer

Doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s012

(0,06 MB DOC)

tabel S8.

Multivariat Cox model for overlevelse, der viser en øget risiko for død for patienter med høje niveauer af BRCA1 og for dem med stadie IIIA sygdom

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s013

(0,03 MB DOC )

Tekst S1.

Yderligere oplysninger om de ni gener undersøgte

doi: 10,1371 /journal.pone.0001129.s014

(0,09 MB DOC)