PLoS ONE: Forholdet mellem Neural Ombygning og perineurale Invasion i bugspytkirtelkræft Patienter med Hyperglycemia

Abstrakt

Baggrund

Patienter med højere niveauer af fastende serum glukose har højere dødelighed fra kræft i bugspytkirtlen i forhold til patienter med lavere niveauer af fastende serum glukose. Imidlertid har de grunde, ikke undersøgt. Målet med den aktuelle undersøgelse var at undersøge de neurale ændringer i bugspytkirtlen kræftpatienter med hyperglykæmi og identificere forholdet mellem de neurale ændringer og perineurale invasion.

Metodologi /vigtigste resultater

Den kliniske og patologiske funktioner i 61 formalinfikserede bugspytkirtelkræft prøver og 10 normale bugspytkirtler som kontroller blev analyseret. Endvidere blev ekspressionen af ​​Protein Gene Product 9.5 (PGP9.5), Myelin P0 protein (MPP), NGF, TrkA, og p75 undersøgt ved immunohistokemi. Det mediane antal nerver var medianen område neurale væv, og median nerve diameter pr 10 mm

2 var større i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen (

s

= 0,007,

s

= 0,009, og

s

= 0,004, henholdsvis). Den integrerede optiske densitet (IOD) af MPP-farvning var lavere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppe (

s

= 0,019), mens ekspressionsniveauerne af NGF og p75 var højere i hyperglykæmi gruppe end dem i euglykæmi gruppen (

s

= 0,002, og

s

= 0,026, henholdsvis). Den nerve bundt invasion af kræft i bugspytkirtlen var hyppigere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen (

s

= 0,000).

Konklusioner /Betydning

Nerveskader og regenerering forekomme samtidigt i tumormikromiljøet af pancreas cancerpatienter med hyperglykæmi; den samtidige forekomst kan forværre processen med perineurale invasion. Den unormale udtryk for NGF og p75 kan også være involveret i denne proces, og efterfølgende føre til en lavere kurativ kirurgi

Henvisning:. Li J, Ma Q, Liu H, Guo K, Li F, Li W et al. (2011) Forholdet mellem Neural Ombygning og perineurale Invasion i bugspytkirtelkræft Patienter med Hyperglykæmi. PLoS ONE 6 (2): e17385. doi: 10,1371 /journal.pone.0017385

Redaktør: John Minna, Univesity of Texas Southwestern Medical Center på Dallas, USA

Modtaget: Oktober 6, 2010; Accepteret: 1. februar, 2011; Udgivet: 28 februar 2011

Copyright: © 2011 Li et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne undersøgelse blev støttet af National Natural Scientific Foundation of China (2009 nr 30.900.705) og en videnskabelig Grant fra Xi’an City (2009 nr GG06718) (Q. Ma), og delvist ved ND EPSCoR (E. Wu). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

kræft i bugspytkirtlen (Panca) er en dødelig sygdom med næsten 100% dødelighed. Selvom kirurgi er effektiv i 20% af patienterne, tendensen til lokalt recidiv i retroperitoneum er ikke fuldstændig forstået [1]. En af de vigtigste årsager til lokalt recidiv af tumoren er perineural invasion (PNI) [2], som ofte findes i panca (så højt som 90% -100%) [3], [4]. Som et fælles, men ikke-specifik egenskab ved panca [5], PNI er en vigtig prognostisk faktor i panca. Også, PNI stiger canceren bliver udifferentierede (dvs. MIA PaCa-2 panca celler) i panca [6].

Fordi bugspytkirtlen er et organ med rige innervationer oprindelse fra øvre mesenteriske plexus og solar plexus, vi nødt til at være opmærksom på både ekstrapankreatisk perineurale invasion (med infiltration i en eller flere ekstrapankreatisk neurale plexus) og intrapankreatiske perineurale invasion [7]. Det er blevet foreslået, at perineuriet (kappen af ​​bindevæv omslutter et bundt af nervefibre) blokke neural invasion af panca. Imidlertid har perineuriet skader er identificeret ved slutningen af ​​nerven, på stedet, hvor nerven er invaderet af blodkarrene omkring nerver, og på stedet invaderet af retikulære fibre [8]. Som et resultat, panca celler let invadere fra de svækkede områder af perineuriet til perineurale rum. Hvis systemiske eller lokale faktorer fortsat erodere styrken af ​​perineuriet, kan omfanget af perineural invasion være høj.

Desuden samtidige fremkomst af panca og diabetes mellitus (DM) har længe været anerkendt. Lang stående DM øger sandsynligheden for Panca til et moderat omfang [9]; i de fleste tilfælde dog nyopstået DM er en af ​​de første kliniske tegn på panca [10], [11]. DM er en selvstændig prædiktor for dødelighed som følge af kræft i bugspytkirtlen [12]. Ca. 80% af Panca patienter har glukose intolerance eller åbenhjertige diabetes [13], [14]. I Korea, er begge forhøjede fastende serumglucoseniveauer og en diagnose af diabetes betragtes som uafhængige risikofaktorer for adskillige større cancerformer, såsom mavecancer, levercancer, lungecancer og panca; og risikoen for disse betingelser øges med en øget niveau af fastende serumglucose [15]. Desuden er de koreanske patienter med den højeste fastende serumglucose havde højere dødelighed fra kræftsygdomme såsom kræft i spiserøret, strubehoved, mave, tyktarm, lever, galdegang, pancreas, lunge, prostata, nyre, blære og hjerne som samt leukæmi sammenlignet med patienter med den laveste grad af fastende serumglucose [15]. Blandt disse kræftformer, foreningen mellem dødelighed og fastende serum glucose niveauer var stærkest for Panca hos mænd og kvinder [15], [16]. Også neuronal glukoseoptagelse afhænger den ekstracellulære koncentration af glucose. Hyperglykæmi hos diabetes kan forårsage op til fire-foldige stigninger i neuronale glucoseniveauer. Hvis der findes de vedvarende episoder af hyperglykæmi, derefter intracellulær glucosemetabolisme fører til neuronal beskadigelse [17]. Sådanne skader kan føre til flere invaliderende problemer, da neuropati ofte resulterer i klinisk signifikante følgesygdomme, såsom smerte, tab af følelse, fodsår, koldbrand og amputation [18], [19].

Selvom PNI og hyperglykæmi er almindelige fænomener i panca, har forskningen ikke fastslået, hvis de to faktorer generere en synergistisk virkning til at fremme udviklingen af ​​panca. Nylige undersøgelser [2] har påvist, at PNI kan være involveret i reciprokke signalering interaktioner mellem tumorceller og nerver, og at de invaderende tumorceller kan svare pre-invasive signaler inden nerven milieu perifere. For at undersøge effekten af ​​hyperglykæmi på nervevæv i Panca, vi analyserede de funktionelle og morfologiske ændringer af nerverne i tumorer i Panca patienter med og uden hyperglykæmi, og så vi undersøgte forholdet mellem de ændringer og PNI. For at undersøge de morfologiske træk ved nerverne i den nye tumormikromiljøet blev Protein Gene Product 9.5 (PGP9.5) og Myelin P0 protein (MPP) mærket inden for de nervefibre og myelinskederne, ved hjælp af immunohistokemiske metoder. Derfor kan en bedre forståelse af hyperglykæmi-nerve forhold kaste nyt lys over de mekanismer PNI i Panca.

Metoder

Etisk Tilladelse

Undersøgelsen protokol og samtykke formularer i overensstemmelse med Helsinki-deklarationen og blev godkendt af Etisk Review Board (ERB) Udvalget (The First Affiliated Sygehus af Medical College, Xian Jiaotong Universitet, Kina) og informeret samtykke blev opnået fra alle fag.

Patienter

Fra januar 1999 til marts 2008 513 pancreas tumorer blev udsat for klinisk undersøgelse på First Affiliated Sygehus, Xian Jiaotong Universitet, Kina. Blandt dem, 420 tilfælde var pancreatisk duktalt carcinom eksklusive intraduktal papillære mucinous tumor, acinært cellecarcinom, og ø-celle carcinom. I sidste ende blev tres-one patienter, der fik en radikal helbredende pankreatisk drift med en patologisk diagnose undersøgt i dette studie. Den mediane patientens alder var 58 år, og 22 af patienterne var kvinder. Ingen af ​​patienterne modtog neo-adjuverende behandling før den første operation. Regional lymfeknudedissektion blev udført i alle patienter, og portåren resektioner blev udført hos 17 patienter. Ingen af ​​de 61 patienter fik en adjuverende behandling.

Gruppering og kliniske parametre

De 420 pancreas tumorer blev inddelt i to grupper i henhold til de fastende blodsukkerniveau (et gennemsnitligt niveau på lang sigt for patienter med historien om DM og et gennemsnitligt niveau på tre dage uafbrudt efter indlæggelse) af patienterne: (1) euglykæmi /normal og (2) hyperglykæmi /høj. Som opsummeret i tabel 1 blev fire kliniske parametre evalueret i hver gruppe, herunder: (1) mavesmerter, (2) helbredende operation, (3) tidligere DM, og (4) udstrålende smerter. Af de patienter med tidligere tilfælde af DM, blev sagerne opdelt i en kontrolleret gruppe, og en ukontrolleret gruppe (niveauet af blodsukker blev ikke kontrolleres til normal) i henhold til de fastende blodsukkerniveauer. Tre kliniske parametre blev evalueret i hver gruppe, herunder:. (1) mavesmerter, (2) helbredende operation, og (3) udstrålende smerter

Kvantitativ analyse af nervevæv

en analyse af pancreas nerver blev udført af to uafhængige forskere ved hjælp af digital billedanalyse og Image Pro-plus software (Media Kybernetik, Maryland, USA). En charge coupled device (CCD) videokamera og PROSCAN elektronikken 5000 (Hama, Tyskland) forbundet til Image Pro-plus version 6.0 software (Media Cybernetics) blev anvendt til at måle hele arealet af hvert væv sektion, antal nerver, og nerve område. Fra de registrerede målinger, blev det gennemsnitlige areal af nerver pr 10 mm

2 vævsområder og procentdelen af ​​væv invaderet af nerver beregnet. Den innervation areal pr nerve og antal nerver pr 10 mm

2 væv område blev også beregnet.

Immunhistokemi

Immunohistokemiske farvninger blev udført på 3 um sektioner af formalin-fikseret paraffin -embedded prøver under anvendelse af en standard avidin-biotin kompleks peroxidase teknik. Efter afparaffinering med xylen og rehydrering med seriel gradient ethanol, blev antigenet hentet ved opvarmning af objektglassene i 10 mM citratpuffer (pH 6,0) i 6 minutter i en mikrobølgeovn. Den endogene peroxidase blev blokeret med 0,3% hydrogenperoxid. Objektglassene blev efterfølgende inkuberet med en blokerende protein (Dako, CA, USA) i 10 minutter og primært antistof blev tilsat natten over ved 4 ° C efterfulgt af skylning. De anvendte antistoffer var: monoklonalt anti-Protein Gene Produkt 9,5 (PGP9.5, Zhongshan Goldenbridge Biotechnology Co., LTD, Beijing, Kina), polyklonale anti-Myelin P0 protein (MPP, Beijing Biosyntese Biotechnology Co., LTD, Beijing, Kina ), polyklonalt anti-nervevækstfaktor (NGF) (Millipore, MA, USA), polyklonalt anti-TrkA (Cell Signaling Technology, Inc., MA, USA) og polyklonalt anti-p75 (Sigma, MO, USA). Det sekundære biotinyleret gede-anti-kanin-antistof eller gede-anti-muse-antistof (Dako) blev derefter påført i 30 min, efterfulgt af 30 minutters inkubation med streptavidin-peroxidase (Dako LSAB + HRP kit). Efter skylning blev objektglassene visualiseret ved diaminobenzidin (DAB) chromogenopløsning (Dako) og modfarvet med rutine hematoxylin, efterfulgt af dehydrering gennem gradueret ethanol og montering af objektglassene. Kontrolgruppen blev valgt blandt ti normale pancreas væv fra euglykæmiske patienter med normale body mass indeks og hvis alder var blevet matchet med de eksperimentelle grupper. At sikre specificiteten af ​​de primære antistoffer blev konsekutive vævssnit inkuberet i fravær af det primære antistof. Ingen immunfarvning blev påvist i disse afsnit, der viser specificiteten af ​​de primære antistoffer anvendt i denne undersøgelse.

Histologisk undersøgelse og kriterier for PNI evaluering

De resektion prøver blev fikseret i 10% formalin ved stue temperatur, og størrelsen og grov udseende af tumorerne blev registreret. Hver tumor blev sektioneret med intervaller på 0,5 til 0,7 cm, og alle de sektioner blev rutinemæssigt behandlet og indlejret i paraffin til histologisk undersøgelse. Serielle snit (4 um) af hver tumor blev forarbejdet. Derefter sektionerne, farves med hematoxylin og eosin, blev undersøgt patologisk at bekræfte diagnosen og vurderet for tumorinvasion af nerver. Protokollen for evaluering af graden af ​​PNI blev modificeret fra en tidligere beskrevet metode [20]. Graden af ​​PNI blev inddeles i fire kategorier som følger efter den nye definition af PNI [21]: Ne0-nej perineurale invasion; NE1-neurium invasion; NE2-perineurale plads invasion; NE3-nerve bundt invasion. Protokoller for undersøgelsen blev godkendt af ERB Udvalg for Humanmedicinske Forskning i Xi’an Jiaotong Universitet.

To efterforskere vurderede de histologiske parametre og klassificeret graden af ​​PNI. Når en uoverensstemmelse opstod begge efterforskere igen undersøgt de slides at nå til enighed.

Statistisk analyse

Statistisk analyse blev udført med SPSS 17.0 statistiske program. Data blev givet som middelværdi ± standardafvigelse (S.D.). Til statistisk analyse blev det studenterrelaterede Newman-Keuls (SNK) test, envejs variansanalyse, og Chi-square test, der anvendes. En

s Drømmeholdet værdi mindre end 0,05 blev betragtet som signifikant.

Resultater

Effekten af ​​blodsukker på kliniske parametre

Af alle 420 sager, 153 ( 36,43%) havde hyperglykæmi, herunder nye debuterende diabetes og ukontrolleret diabetes. Resten (267 tilfælde) i euglykæmi gruppe omfattede ingen diabetiske eller kontrolleres diabetiske sager. Som vist i tabel 1, at hyperglykæmi gruppe havde en lavere frekvens af mavesmerter, helbredende operation, og de hyppigere udstrålende smerter. Men disse forskelle var ikke statistisk signifikant. Blandt de 153 hyperglykæmi sager, 37 havde en historie af diabetes, sammenlignet med 10 af 267 euglykæmi sager (

s

= 0,000, Chi-square test), og disse forskelle var statistisk signifikante. Ifølge de fastende blodsukkerniveauer blev sagerne med historien om diabetes opdelt i de kontrollerede eller ukontrollerede grupper. Hyppigheden af ​​mavesmerter og helbredende operation var signifikant lavere i den ukontrollerede gruppe end i euglykæmi gruppe (

s

= 0,017 og

s

= 0,025 henholdsvis Chi-Square test). Graden af ​​udstrålende smerter var ikke signifikant forskellig mellem de to grupper (

s

= 0,359, Chi-Square test).

Sammenligning af neurale ændringer mellem euglykæmi gruppe og hyperglykæmi gruppe

immunfarvning af neuron specifikke protein PGP9.5 blev lokaliseret til de nervefibre af pancreas væv (fig. 1). Antallet af immunfarvninger repræsenterer det antal og areal af pancreas nerve. Den immunfarvning af MPP som guider omviklingen og i sidste ende sammentrykker tilstødende lameller, blev lokaliseret til membranen af ​​Schwann-celler (fig. 2). MPP ekspression i nerverne var signifikant lavere (

s

= 0,019) i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen, hvilket indikerer dysfunktion eller demyelinering af myelinskeden. Som vist i tabel 2, median område og mediane antal nerver pr 10 mm

2 væv område var signifikant højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppe (

s

= 0,007,

p

= 0,009, henholdsvis). Median nerve område og median nerve diameter (

s

= 0,004) var signifikant højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen.

PGP 9.5 immunfarvning i den normale bugspytkirtlen (A, D, pilespids), bugspytkirtelkræft i euglykæmi gruppe (B, E, pilespids), og hyperglykæmi (C, F, pilespids). A, B, C viser en oprindelig forstørrelse på 100 ×, og D, E, F en original forstørrelse på 200 x. I hyperglykæmi gruppen, sammenlignelige stigninger i antallet, området, og diameteren af ​​nervevæv var til stede. Figur pilespidser angiver immunfarvninger.

MPP immunfarvning af bugspytkirtelkræft væv i euglykæmi gruppe (A, B, pilespids) og hyperglykæmi (C, D, pilespids). Det venstre panel viser en original forstørrelse på 100 ×, og det højre panel en original forstørrelse på 400 ×. Hyppigheden af ​​moderat til stærk MPP farvning af nerver var signifikant lavere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen. Figur pilespidser angiver immunfarvninger.

I modsætning hertil MPP udtryk i nerverne var signifikant lavere i den ukontrollerede gruppe end i den kontrollerede gruppe. Median område og mediane antal nerver pr 10 mm

2 i vævsområde var også højere i den ukontrollerede gruppe end alle andre grupper. Median nerve område og median nerve diameter var højere i den ukontrollerede gruppe end alle andre grupper.

Den cytokiner /vækstfaktorer udtryk i forskellige grupper

De fleste af kræftceller og nervevæv viste tydelig immunfarvninger af TrkA, p75NTR og NGF lokaliseret til cytoplasmaet. De nervevæv havde forskellige ekspressionsniveauer af TrkA og p75NTR ved immunfarvning mellem euglykæmi gruppen og hyperglykæmi gruppe. (Fig. 3). Som vist i fig. 4, NGF-farvning i cytoplasmaet af cancercellerne var signifikant stærkere (

s

= 0,002) i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen, der angiver NGF proteinniveauet af cancerceller blev forøget i hyperglykæmi gruppen . Procentdelen af ​​cancer arealet positive NGF farvning cancerceller var signifikant højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen. I tværsnit af nerverne, TrkA immunfarvning af nervefibre var tilsvarende i de to grupper med ingen signifikante forskelle (

s

= 0,626). Den p75NTR immunfarvning havde en perifer mønster, hvor omkreds af nervefibre var stærkt farves og det centrale område var mildt farves i hyperglykæmi gruppe; i modsætning hertil p75NTR immunfarvning i euglykæmi gruppen var lys og ensartet (

s

= 0,026).

A, C, E, G, I, K viser en original forstørrelse på 100 × , og B, D, F, H, J, L en oprindelig forstørrelse på 400 x. Hyppigheden af ​​moderat til stærk NGF farvning af cancerceller var signifikant højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen (pilespids). Den NGF plet af nerver var ikke signifikant forskellig mellem de to grupper. Den moderate til stærke TrkA farvninger var også til stede i de to grupper (pilehoved), men med ingen signifikant forskel. Hyppigheden af ​​moderat til stærk p75 farvning af nerver (pilespids) var signifikant højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen. Figur pilespidser angiver immunfarvninger.

Sixty-én patienter, der fik en radikal helbredende pancreas operationer på First Affiliated Sygehus, blev Xi’an Jiaotong Universitet med en patologisk diagnose undersøgt, som omfattede 45 modellen i euglykæmi gruppe og 16 modellen i hyperglykæmi gruppe. Den MPP, NGF, TrkA og p75 immunfarvninger blev analyseret af Image-Pro Plus software. Den integrerede optiske densitet (IOD) i MPP farvning var lavere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen (

s =

0,019). Den IOD af NGF og p75 farvninger var højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen (

s =

0,002,

s =

0,026). Den IOD af TrkA farvning var ikke signifikant forskellig mellem de to grupper.

PNI evaluering

Repræsentative billeder af normale strukturer i nervesystemet og de invaderende neurale struktur i forskellige stadier af klassificering i pancreas væv er vist i fig. 5. En nerve bundt omgivet af kontinuert lagdelte epiteloide ark kaldes perineuriet, mens det indre rum mellem nerve bundt og perineuriet er perineurale plads. Graden af ​​PNI blev inddeles i fire kategorier i henhold til tilstedeværelsen af ​​kræftceller i de forskellige strukturer i nervevæv. Som vist i tabel 3, den samlede hyppighed af PNI var højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen med ingen statistisk signifikant forskel. Men hyppigheden af ​​NE3 invasionen var signifikant højere i hyperglykæmi gruppen end i euglykæmi gruppen (

s

= 0,000, kontinuitet korrektion)

Ne0-nr perineurale invasion.; NE1-neurium invasion; NE2-perineurale plads invasion; NE3-nerve bundt invasion. De nerve strukturer (A, B) og repræsentative stadier af invaderede neurale struktur for klassificering (C-H). (A) En nerve bundt omgivet af de kontinuerlige lagdelte epiteloide ark af perineuriet (pilespids). (B) Den perineurale rum, et indre rum mellem nerve bundt og perineuriet (pilespids). (C) Neurium invasion af cancerceller i den ydre perineural plads og fastgjort til perineuriet (pilespids). (D) Perineurial celler perineuriet mellem nerve bundt og kræftceller (pilespids). (E) perineural space invasion af kræftceller i perineurale rum (pilespids). (F) Kræftceller invaderer perineurale rum og komprimere nerve bundt glat. Grænsen mellem kræftceller og bundter nerve indeholder ikke perineurial celler eller perineuriet (pilespids). (G) Nerve bundt invasion ved cancerceller. Kræftceller uregelmæssigt komprimere nerve bundt, klart invaderer mellem nervefibre (pilespids). (H) Invasive cancerceller tydeligt ses mellem nervefibre (pilespids). A, C, E, G viser en oprindelig forstørrelse på 100 ×, og B, D, F, H et oprindelig forstørrelse på 400 x. Figur pilespidser angiver nerverne.

Diskussion

I den aktuelle undersøgelse, vi præsenterer den neurale ændringer og omfanget af PNI i de primære tumorer i Panca patienter i forbindelse med blodsukkerregulering. Vore data antyder, at hyperglykæmi, en fælles forstyrrende element forbundet med panca, kan bidrage til PNI. Vi viste, at patienter med hyperglykæmi display reduceret ekspression af MPP, og forhøjet ekspression af NGF og p75 i sammenligning med de patienter med euglykæmi. Endvidere tumorer fra patienter med hyperglykæmi viste en forhøjelse i den fase af PNI i sammenligning med tumorer fra patienter med euglykæmi (tabel 3).

Smerter generation i panca synes at være multifaktoriel. Det spekuleret på, at mavesmerter i Panca patienter skyldes invasionen af ​​kræftceller ind i de omkringliggende organer [22]. Neuropati synes at være forårsaget af intra- og extra-pancreas perineural invasion og beskadigelse af nerver ved inflammatoriske og /eller cancerceller [6], [23] – [25]. Vi fandt ikke relaterede undersøgelser om sammenhængen af ​​PNI lønklasse til smerte. Imidlertid kan kræftceller gennemtrænge perineuriet og bliver tæt forbundet med Schwann-celler og axoner i endoneurium. Det neurale remodeling viser, hvordan pancreas neuropatisk smerte og visceral neuropati er forbundet med ændret pancreas innervation i panca [26]. Nye data viser, at op til 80% af patienterne er enten hyperglykæmiske eller diabetisk, kan detekteres som begge i den præ-symptomatiske fase [14]. Det anerkendes nu, at svækket glucosetolerance, selv uden åbenlys DM, kan være en risikofaktor for diabetisk perifer neuropati (DPN). Neuropatisk smerte er et fremtrædende tidligt træk ved DPN og kan være alvorlig trods minimale tegn på DPN [27].

Derfor vi ræsonnerede, at mavesmerter i panca patienter med historie DM bør forekomme hyppigere end dem uden historie DM. I vores undersøgelse, mavesmerter var hyppigere, i euglykæmi gruppen sammenlignet med hyperglykæmi gruppe. Den helbredende operation var signifikant højere i euglykæmi gruppen sammenlignet med hyperglykæmi gruppen, hvilket indikerer, at historien om DM er forbundet med den nedre helbredende operation sats i panca patienter. Med yderligere undersøgelser, fandt vi, at hos patienter med en historie af DM, satserne for mavesmerter og helbredende operation var signifikant lavere i den gruppe, at niveauet af blodsukker var ukontrolleret til normal sammenlignet med den kontrollerede gruppe (tabel 1). Vi mener, at dette fænomen ikke let forklares med en enkelt teori, fordi mikromiljøet gradvis forværres hos disse patienter. Den destruktive virkning af kræftceller på nerverne med kompression er meget mild, men kræft kan irritere nerver og manifestere sig som mavesmerter. Når disse patienter blev eksponeret i hyperglykæmi tilstand, kan hyperglykæmi udøve en stærk destruktiv effekt på de skrøbelige nerver, som fremmer progression fra første funktionelle skader på sen uoprettelige strukturelle skader med eller uden svækket smerter.

De vigtigste morfologiske træk såsom en kombination af demyelinization (beskadigelse af myeline kappe af neuroner), axonal degeneration af myelinerede fibre, og degeneration med regenerering af umyelinerede fibre og endoneurale mikroangiopati, med nerve fiber tab i sin afsluttende fase, er til stede i den etablerede neuropati [19 ]. Vi fandt, at MPP ekspressionsniveauet var lavere i hyperglykæmi og blodsukker ukontrollerede grupper, som er angivet på dysfunktion eller demyelinization af de berørte nerve skafter. Desuden observerede vi, at det gennemsnitlige antal nerver og mediane nerve diametre var større i hyperglykæmi og blodsukker ukontrollerede grupper; dette fænomen antyder, at nerveskade og reparation er samtidige i det nye miljø.

Det er kendt, at observationerne af abnorme NGF niveauer i gnavere og humane diabetiske nerver ført til kliniske forsøg for at teste effektiviteten af ​​NGF som et terapeutisk agent for deficiente neurotrophiner. NGF-behandling viste sig at stimulere axon forgrening i trædepuden, hvilket antyder, at NGF-behandling udøvede biologiske virkninger på kutane axoner [28]. Vores data viste, at NGF-positive cancerceller var tydelige og sammenfaldende med de forbedrede nerver i hyperglykæmi gruppen. Vi foreslår, at hyperglykæmi kan inducere NGF udtryk for kræftceller, som regenererer de berørte nerver ved at stimulere axon forgrening og at NGF kan være som potentiel central aktør i generation af pancreas neuropati i Panca [29]. Vores observation af øget farvning af p75NTR i hyperglykæmi gruppen angivne dysfunktion eller demyelinization af de berørte nerve skeder og var i overensstemmelse med en tidligere rapport tyder på, at overdreven NGF kan forårsage apoptose via p75NTR [30]. Hvis nerve degeneration overstiger nerve regenerering i patologiske tilstande som DPN, kan nerve fiber tab fremskridt. Men hvis den specifikke behandling kunne vise sig at falde nerve degeneration og /eller øger nerveregenerering, patologiske tilstande, herunder nerve fiber degeneration og tab, kunne forbedres, [31].

I denne undersøgelse har vi også fundet at hyppigheden og omfanget af PNI blev forhøjet i hyperglykæmi gruppen. Således kan de særlige morfologiske træk i de ramte nerver i de nye mikromiljø også korreleres til almindeligt fænomen af ​​PNI. Først nerverne stige i antal, som tilbyder flere muligheder for kræftceller til at invadere og forbinde med den overlegne mesenteriske plexus og solar plexus. Muligheden for tilbagefald øges selv efter kurativ operation. For det andet kan de regenererede axoner og demyelinisering danne en lav modstand kanal, som letter kræftceller at trænge igennem. Når kræftceller trænge ind i nerve og vokse i endoneurium, de påvirker nerve processer og de omkringliggende Schwann celler. Således er alle elementer af nerven er underlagt skade og at være funktionelt ændret. Endvidere kræftcellerne ikke blot strækker sig langs den lange akse af nerven, men også en tendens til at vokse rundt om omkredsen, undertiden efterfølgende isolering af nerven fra det omgivende væv. På denne måde DM forværrer panca prognose ved at fremme PNI.

Det skal bemærkes, at vi kun har analyseret tumorer fra patienter med helbredende operation i begge euglykæmi og hyperglykæmi grupper. Vi var ikke i stand til at opnå egnede prøver fra ikke-hærdende patienter af to grunde. I nogle tilfælde, en undersøgelse af bughulen under operationen afslørede omfattende metastase, så vi kunne ikke behandle kræft. I andre tilfælde kan vi kun udføre palliativ kirurgi såsom dræning for gulsot, fordi tumoren ikke kunne resekteres. På trods af disse markeringer, viste vores data at tumorer fra hyperglykæmiske patienter udviser en højde i den fase af PNI i sammenligning med tumorer fra euglykæmiske patienter (tabel 3).

Sammenfattende vores resultater viser, at DM ødelægger pancreas nerver med et mønster af patologisk axoner regenerering og demyelinisering i tumormikromiljøet, især når blodsukkeret ikke kontrolleres. Konsekvensen af ​​ødelagte nerver kan forværre en dårlig prognose ved to mekanismer: (1) ødelagt nerver skjule mavesmerter af Panca og hindre tidlig påvisning af Panca og (2) ødelagt nerverne øge hyppigheden og omfanget af PNI i Panca, som er en risikofaktor for lokalt recidiv.

tak

Vi ønsker at udvide vores tak til Ronald E. Vincent (SciConnXX), Carrie Wu (Børnehospital Boston), og Mary Træk (North Dakota State University) for deres tankevækkende læsning af manuskriptet.