PI3K /PTEN-mTORC1 signalering regulere Nedd4-1

PTEN er et lipid phosphatase, der konverterer phosphatidylinositol-3, 4, 5-trisphosphat (PtdInsP3) ind phosphatidylinositol-4, 5-bisphosphat (PtdInsP2) og antagoniserer phosphoinositid 3-kinase ( PI3K) -afhængig signalering. Nedd4-1 (neural precursor celle udtrykt, udviklingsmæssigt nedreguleret 4-1) var den første E3 ligase at være impliceret i PTEN ubiquitinering. Nedd4-1 kan katalysere mono- og polyubiquitination af PTEN, hvilket fører til nuklear import af PTEN og PTEN nedbrydning, d derved regulere axonal vækst i neuroner.

Forrige in vitro og in vivo resultater viser, at Nedd4-familien E3 ligaser Nedd4-1 og Nedd4-2 spille en evolutionært bevaret rolle i reguleringen af ​​Axon morfogenese.

først viser vi, at PTEN grænser Nedd4-1 protein niveauer ved at modulere aktiviteten af ​​mTORC1, et protein kompleks, styrer proteinsyntese og cellevækst.

Dernæst Nedd4-familien E3 ligaser Nedd4-1 og Nedd4-2 fremme axon vækst i pattedyr centralnervesystemet neuroner. Udtrykket, ubiquitinering, er lokalisering eller fosfatase aktivitet af PTEN ikke ændret.

Modsat, PTEN negativt regulerer Nedd4-1 udtryk på translationel niveau. Og at pattedyr Nedd4-1 og Nedd4-2 regulerer Axon vækst.

Vores data viser, at Nedd4-familie E3 ligaser fremme axonal vækst og forgrening i udviklingslandene pattedyrs hjerne, wherePten er ikke en relevant substrat. I stedet PTEN kontrollerer neuritis vækst ved at regulere Nedd4-1 udtryk.

retinoid homøostase er kritisk for normal fosterudvikling. Vigtige lovgivningsmæssige faktorer, der formidler de pleiotrope virkninger af RA omfatter flere klasser af RA-bindende transkriptionsfaktorer, retinoinsyrereceptorerne Rara, RaRb, og RARg. SIRT1, en nuklear NAD + -afhængige protein deacetylase, er den mest bevaret medlem af sirtuin familie af enzymer.

For det første viser vi, at SIRT1 de? Vitet er forbundet med forhøjede RA signal- og udvikling defekter i mus. Vi har identificeret? Ed både CRABPI og CRABPII som hyper-acetylerede proteiner i SIRT1 null mus embryonale? Broblasts (MEF’er) i en global stabil isotop mærkning af aminosyrer i cellekultur (SILAC) -baseret analyse af Lys acetylering.

Dernæst vi undersøgt, om SIRT1 fysisk kunne interagere med CRABPs. Vi analyserede subcellulære lokaliseringer af HA-CRABPII i WT og SIRT1 KO MEF’er ved immuno? Uorescent farvning CRABPII er en cellulær RA luftfartsselskab, der translokerer fra cytosolen ind i kernen på RA binding at aktivere de nukleare RA-receptorerne.

Vi viser, at RA-medieret acetylering ofCrabpii på K102 er afgørende for dets nukleare ophobning og efterfølgende aktivering af RA-signalering. SIRT1 interagerer med og deacetylerer CRABPII, regulering sin subcellulære lokalisering.

Til sidst, sletning af SIRT1 fører til øget RA-induceret Mesc differentiering.

Sammenfattende har vi vist, at gennem deacetylering CRABPII, SIRT1 spiller en afgørende rolle i reguleringen af ​​cellulære RA signalering og Mesc pluripotens. Denne SIRT1 /CRABPII /RAR signaleringskaskade vil give en måde at studere gen-miljø interaktioner, der påvirker udviklingen dyr.