Abstrakt
Øre mider (
Otodectes cynotis
) og øre kanalen tumorer er meget udbredt blandt føderalt truede Island ræve (
Urocyon littoralis catalinae
) bor på Santa Catalina Island ud for kysten i det sydlige Californien. Da undersøgelser begyndte i 1990’erne, blev næsten alle ræve undersøgt sig at være inficeret med øremider, og ceruminous kirtel tumorer (carcinomer og adenomer) blev fundet i ca. halvdelen af alle ræve ≥ 4 år. Vi antager, at reduktion af øremide infektion ville reducere otitis externa og ceruminous kirtel hyperplasi, en risikofaktor for tumor udvikling. I denne undersøgelse, vi gennemførte en randomiseret feltforsøg for at vurdere virkningen af acaricid behandling på øremide forekomst og intensitet af infektion, otitis externa, ceruminous kirtel hyperplasi, og mide-specifikke IgG og IgE antistof niveauer. Behandlingen var meget effektiv til at fjerne mider og reducere otitis externa og ceruminous kirtel hyperplasi, og mide-specifikke IgG-antistof niveauer signifikant lavere blandt inficerede ræve. Ceruminous kirtel hyperplasi steget i de kronisk inficeret, ubehandlede ræve under de seks måneders undersøgelse. Vores resultater giver overbevisende dokumentation for, at acaricid behandling er et effektivt middel til at reducere øremider, og at mide fjernelse igen mindsker øre læsioner og mide-specifik IgG antistof niveauer i Santa Catalina Island ræve. Denne undersøgelse har avancerede vores forståelse af den underliggende patogenese hvilket resulterer i ceruminous kirtel tumorer, og har bidraget til at oplyse ledelsesbeslutninger, at bevaring indvirkning arter
Henvisning:. Moriarty ME, Vickers TW, Clifford DL, Garcelon DK, Gaffney PM Lee KW, et al. (2015) Øre Mite Fjernelse i Santa Catalina Island Fox (
Urocyon littoralis catalinae
): Styring Risikofaktorer for Cancer Development. PLoS ONE 10 (12): e0144271. doi: 10,1371 /journal.pone.0144271
Redaktør: Douglas Thamm, Colorado State University, USA
Modtaget: August 1, 2015; Accepteret: November 16, 2015; Udgivet: December 7, 2015
Copyright: © 2015 Moriarty et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres
Data Tilgængelighed: Alle relevante data er tilgængelige via Dryaden (DOI: 10,5061 /dryad.12vb8)
Finansiering:. Denne undersøgelse blev finansieret af Morris Animal Foundation (TWV; tilskud nummer D08ZO-043, https://www.morrisanimalfoundation.org), Institut for Wildlife Studier (TWV, MEM, https://www.iws.org), Catalina Island Conservancy (JLK, CLD, https://www.catalinaconservancy.org), Greer Laboratories, Inc. (KWL, MEM; http : //www.greerlabs.com), Studerende Uddannelse i Advanced Research, UC Davis School of Veterinary Medicine (MEM, https://www.vetmed.ucdavis.edu/research/grad_education/star). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, dataindsamling. Greer Laboratories, Inc ydet støtte i form af løn til forfattere [KWL], men havde ikke nogen ekstra rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet. De specifikke roller disse forfattere er formuleret i »forfatter bidrag« sektion
Konkurrerende interesser:. Vi har følgende interesser: Denne undersøgelse modtaget støtte fra Greer Laboratories, Inc. Kenneth W. Lee ansat af Greer Laboratories , Inc. Der er ingen patenter, produkter i udvikling, eller markedsførte produkter som følge af dette projekt. Dette ændrer ikke forfatternes overholdelse PLoS ONE politikker på datadeling og materialer.
Introduktion
Sygdom er en alvorlig trussel mod bevaring-afhængige dyrearter, især for genetisk og geografisk isolerede befolkningsgrupper [1]. Santa Catalina Island (SCA) ræv (
Urocyon littoralis catalinae
) er en af seks forskellige underarter [2,3] indfødte til Kanaløerne ud for kysten i det sydlige Californien (SCA: 33 ° 24 ‘N, 118 ° 24 ‘V). I 1999 en mistænkt hundesyge epidemi decimerede 85-90% af denne befolkningsgruppe, og de resterende ~ 100 ræve i denne underart blev opført som føderalt truede [4,5]. Intensiv forvaltning aktioner, herunder translokation, opdræt i fangenskab, og vaccination med succes afværget udryddelse, og bidrog til hurtige befolkningstilvækst til en anslået befolkning på 1114 i 2012 [6, 7]. Selvom befolkningen nu er stigende, forblive sygdomsepidemier en primær trussel mod den fortsatte eksistens af de SCA ræve [8, 9].
Ceruminous kirtel tumorer (carcinomer og adenomer) blev først observeret i SCA ræve i 2001 [ ,,,0],10]. I vores kammerat studie gennemført fra 2001-2008, Vickers et al. fandt, at cirka halvdelen af SCA ræve ≥ 4 år havde ceruminous kirtel tumorer, og at øremider var til stede i 98% af SCA ræve [10]. Øre mider er blevet påvist i to andre underarter af Channel Island ræve i de sydlige øer, men aldrig i de tre underarter i de nordlige øer; Men SCA ræve er de eneste underarter, der har øre kanalen tumorer (Fig 1) [8,10]. Det er fortsat uklart, hvorfor nogle underarter af øens ræve har øremider og andre gør ikke, men potentielle hypoteser omfatte historiske indførelse af øremider ved vildtlevende katte til de sydlige øer [8], samt eventuelle forskelle i immunrespons eller genetisk modtagelighed. kvantitative risikovurdering viste, at tumorer er forbundet med ceruminous kirtel hyperplasi (CGH), som igen er stærkt korreleret med otitis externa forårsaget af øremider (
Otodectes cynotis
) [10]. Disse resultater er i overensstemmelse med den hypotese, at SCA ræve entydigt er disponeret for alvorlige øre kanalen læsioner, og at øremider opildne en inflammatorisk respons og ceruminous kirtel hyperplasi, der forud og kan fremme tumor dannelse og carcinogenese [10].
Fordeling af ræve, der er inficerede eller inficeret med øremider, og ræve, der har øre kanalen tumorer. Island ræve ikke bor på Santa Barbara eller Anacapa øer.
Øre mider lever på og i den overfladiske keratin af øregangen og forårsage en inflammatorisk reaktion i dermis, der øger cerumen produktion og keratin vragdele, nogle gange blokerer øregangen, og fører til ceruminous kirtel hyperplasi [11-13]. Denne fortykkede ceruminous ekssudat kan være kræftfremkaldende [14], og en undersøgelse hos hunde og katte viste en stærk sammenhæng mellem kronisk otitis externa og udvikling af ceruminuous kirtel hyperplasi og neoplasi [15]. I SCA ræve, har mide infektion blevet set i forbindelse med udpræget otitis externa, peri-lydlige sår, cellulitis, lokaliseret sekundære bakterielle infektioner og sepsis, samt ceruminous kirtel carcinomer med lokal invasion og fjernmetastase [8,10]. Selvom mider synes at igangsætte en kaskade af begivenheder, som kan prædisponere til ceruminous kirtel tumorer, har ingen tidligere studier undersøgt, hvilken effekt mide fjernelse kan have på sygdomsprogression.
Formålet med dette randomiserede seks måneder feltforsøg var at vurdere effekten af acaricid behandling på øremider, øregange læsioner, og niveauer af mide-specifikke antistoffer (IgG og IgE) i fritgående SCA ræve. Desuden har vi sammenlignet niveauer af mide-specifikke antistoffer fra SCA ræve med Santa Cruz Island (SCZ) ræve (
Urocyon littoralis santacruzae
), et nært beslægtede underart med ingen tegn på øremider, otitis eller ceruminous tumorer . Vi antager, at (1) mide prævalens og intensiteten af infektion vil blive reduceret betydeligt ved at behandle ræve med acaricid; (2) mide fjernelse ville være forbundet med reduceret mellemørebetændelse og ceruminous kirtel hyperplasi; og (3) mide fjernelse ville være forbundet med reducerede niveauer af mide-specifikke IgG og IgE.
Materialer og metoder
Etik erklæring
capture Animal og biologiske prøver af SCA ræve blev godkendt på en amerikansk Fish and Wildlife service (USFWS) Federal 10 (a) en (a) tilladelse (nr TE744878-9) og et aftalememorandum med California Department of Fish and Wildlife (CDFW). Alle procedurer, der involverer dyr blev gennemgået og godkendt af University of California, Davis, Institutional Animal Care og brug Udvalg (protokol nr 13366).
Field Trial Design
SCA ræve blev taget til fange i juli 2009 (t
0), september 2009 (t
1), november 2009 (t
2), og i januar 2010 (t
3) (tabel 1). Foxes fanget ved t
0 blev inkluderet i undersøgelsen, hvis de havde mider på indledende eksamen, blev større end 1 år gammel, ikke var blevet behandlet for øremider i de seneste 12 måneder, og havde ingen historie tidligere sidevæg resektion af øregangen for tumor fjernelse. Tilmeldte ræve blev randomiseret til de behandlede eller ubehandlede sammenligning grupper i blokke af to, som fandt sted på tidspunktet for opsamling og fulgt
a priori
instruktioner til at tilfældigt tildele den første ræv til en af de grupper, og tildeling alternativ gruppe derefter.
Box fælder (Tomahawk live-Trap Company, Tomahawk, Wisconsin, USA) blev sat og agn med en kombination af hund foderpille, dåse kattemad, og bær pasta. Fælder blev placeret langs transekter nær veje og stier, på 250-300 meter intervaller. En til to fælder blev sat på hvert sted, med 15-44 steder, der anvendes hver dag. Alle fælder blev kontrolleret hver morgen, og ræve blev undersøgt, samplet, behandlet, og udgivet på det sted, capture. Ræve blev bind for øjnene og manuelt behersket mens projektet dyrlæge (TWV) udført en fysisk undersøgelse og otoscopic vurdering af både øregange. Baseline data blev indsamlet, herunder passiv integreret transponder tag nummer, køn, alder, vægt, fysisk tilstand, og øre kanalen observationer. Foxes 1-3 år blev klassificeret som ung og ræve ≥ 4 år blev klassificeret som moden. Hvis nøjagtige alder ikke kunne bestemmes fra tidligere fange historie blev ræve tildelt aldersgrupper hjælp tand slidmønstre [16,17], og ræve blev kategoriseret som unge, hvis de havde Klasse 1 dentin eksponeringsmønstre eller modne, hvis de havde Klasse 2- 4 dentin eksponeringsmønstre
Ear mide infektion intensitet blev vurderet ved to metoder:. mide score og mide tæller. En subjektive mide sværhedsgrad point er bestemt otoscopically af projektet dyrlæge (tabel 2). Efter scoring blev en vatpind indsat i hver øregangen til at indsamle mider og derefter anbragt i et glasrør og opbevares i en isoleret beholder med køleelementer, indtil at blive lagret ved 4-8 ° C. Inden for en uge samling blev prøver sendt på tøris til laboratoriet ved University of California, Davis, og antallet af mider blev bestemt ved anvendelse af et dissektionsmikroskop (MEM). Både mide score og mide optælling blev midlet mellem venstre og højre øre at give et samlet skøn for infektion intensitet.
øregangen biopsier blev udført under lokalbedøvelse med lidokain 4% gel, og lidokain injicerbar opløsning infunderes subkutant umiddelbart støder op til biopsi site. Ved hjælp af en steril 5-6 mm hud punch, blev biopsier taget fra den nedre caudale aspekt af de venstre og højre lodrette øregange ved krydset med de vandrette kanaler, og fikseret i 10% neutral bufferet formalin. Proliferative læsioner blev også biopsi og fjernes helt, hvis de helt blokeret kanalen. Efter opnåelse af prøven, blev digital tryk og styptic pulver påføres biopsi websted for at fremme hæmostase. En NSAID (ketoprofen, 2 mg /kg, Zoetis Inc., Kalamazoo, MI, USA) og systemisk antibiotisk (Enrofloxacin, 10 mg /kg, Bayer, West Haven, CT, USA) blev givet subkutant.
en 10 ml blodprøve blev indsamlet ved jugularis venepunktur i et serum samling rør og opbevares i en isoleret beholder med isposer. Efter størkning blev blodprøver nedkølet og centrifugeres ved 1176 x g (Fischer Scientific Centrific Model 225) inden for 24 timer capture; sera blev dispenseret i aliqots og opbevaret ved -80 ° C indtil anvendelse til testning mide-specifik IgG og IgE. Ræve i den behandlede gruppe fik fipronil (Frontline Top Spot, 30 mg /kg, Merial, Ltd., Duluth, GA, USA) topisk mellem skulderbladene og ivermectin (Acarexx, 0,5 ml 0,01% opløsning, Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc ., St. Joseph, MO, USA) i hvert øre. Fipronil blev givet som en forstærkning til at hjælpe med behandling af
Otodectes
. Dette er en off-label brug, men var berettiget at reducere sandsynligheden for øjeblikkelig re-angreb fra kontakt med andre ræve (længere halveringstid end ivermectin), og for at forhindre genindførelse af mider fra det ene øre til det andet via hudoverfladen . Ræve i den ubehandlede sammenligningsgruppen ikke modtog enten behandling.
Bestræbelserne på at generobre studie ræve blev foretaget hver anden måned over retssagen seks måneders periode (t
1, t
2, t
3). På de første to generobre begivenheder (t
1, t
2) blev alle ræve undersøgt og stikprøven (øremider og blod), mens kun behandlede ræve modtaget acaricid (tabel 1). Ved slutningen af perioden på seks måneder (t
3) blev alle ræve undersøgt, samplet (øremider og blod), biopsi, og behandles for at maksimere antallet af behandlede ræve i SCA befolkning i slutningen af studiet (tabel 1).
Histopatologi vurdering af biopsier
øregangen biopsier blev rutinemæssigt behandlet, paraffin-indstøbt, snittet ved 5 um og farvet med hematoxylin og eosin. Immunhistokemi for pan-cytokeratin blev brugt til definitiv tumor diagnose. Alle histologi blev fortolket af en bord-certificeret patolog (PMG) ved University of California, Davis, som forblev blind for behandling. Prøver blev evalueret for tegn på inflammation i overensstemmelse med otitis (tabel 2), CGH (tabel 2), og nærvær eller fravær af ceruminous kirtel adenom eller carcinom. Pointene fra venstre og højre øre blev beregnet til at give et samlet skøn over otitis og CGH.
Mite ekstrakter og udarbejdelse af coatede brønde
Øre mider isoleret fra SCA ræve under marken evalueringer blev brugt til fremstilling af vandige opløsninger af mide-antigener. Kort fortalt blev mider formalet under anvendelse af en Tenbroeck vævsmalemaskine derefter suspenderet i phosphatbufret saltvand (PBS). Efter inkubation natten over ved -20 ° C blev mide suspensionen centrifugeret ved 12.857 x g, og supernatanten blev opsamlet og anvendt som mide-antigen. Proteinindholdet blev bestemt kolorimetrisk med et BCA Protein Assay (Thermo Fisher Scientific, Pierce, Rockford, IL, USA). Immulon 4HBH fladbundede strimmel samlinger (Thermo Electron Corporation, Waltham, MA, USA) blev anvendt i hele og tjente som den faste fase for alle direkte binder enzymkoblede immunosorbentassays (ELISA). De 12-brønds strimler blev individuelt coatet med mide ekstrakter (1 ug /ml) efter en tidligere defineret procedure [18]. Kort beskrevet blev individuelle ekstrakter fortyndet i bicarbonatbuffer (pH 9,6) og 350 pi sattes til hver tildelt brønd. Efter inkubation natten over ved 4-8 ° C blev brøndene vasket med PBS, blokeret med 1% monoethanolamin (pH 7,5), lufttørret og opbevaret ved -20 ° C i Ziplock poser indtil anvendelse.
ELISA for mide-specifik IgG og IgE
tilstedeværelsen af mide-specifik IgE antistof i ræv serum blev vurderet ved anvendelse af en hunde IgE specifik ELISA [18, 19]. En lignende semikvantitativ ELISA specifik for fox IgG blev udviklet til denne undersøgelse for at bestemme det relative niveau for mide-specifik IgG-antistof i hver sera prøve (KWL og MEM). For IgG assayet tre gange serielle fortyndinger af ræv sera i området fra 1 150 til 1: 36.450 blev tilsat i tre eksemplarer til plader coatet med antigener ekstraheret fra homogeniseret øremider. Biotinylerede monoklonale anti-IgG-antistoffer blev anvendt som det primære probe reagens, streptavidin alkalisk phosphatase som det enzymholdige sekundære sporstof, og p-nitrophenylphosphatase som det kromogene substrat [18].
For at standardisere resultaterne af assayet og muliggøre konsistente sammenligninger af analyseresultater, på tværs af flere analysekørsler og variable serumfortyndinger blev alle resultater omregnes til en fire punkts kalibrering [20]. Den relative mængde af mide-specifik IgG blev interpoleret fra en fire punkt regressionskurve skabt ved at afbilde baggrunden korrigeret ekstinktion observeret med hver af kalibratorerne versus en vilkårligt tildelt koncentration værdi baseret på fortynding skema anvendes til fremstilling af kalibratoropløsninger. Den relative IgG niveau stede i den oprindelige serumprøven er produktet af den interpolerede værdi og serummet fortyndingsfaktoren, der blev testet. Sera indsamlet fra Santa Cruz Island (SCZ) ræve (n = 43) tjente som øre mide inficerede sammenligninger. De ræve på denne ø er en separat underart og er aldrig blevet opdaget øremider på undersøgelse af levende eller døde SCZ ræve.
Statistisk analyse
For at afgøre, hvorvidt behandlede og ubehandlede ræve var sammenlignelige ved begyndelsen af undersøgelsen sammenlignede vi alder, køn, brutto øregang vurdering (øremider, proliferative læsioner, inflammation, nodulær fortykkelse, pus), histologiske øregang vurdering (otitis externa, CGH, Talgkirtel hyperplasi, epidermal hyperplasi, acanthosis , hyperkeratose, adenom, carcinom eller tidligere tumordiagnose), og mide-specifik IgG /IgE niveauer ved hjælp af Yates ‘korrigeret chi-square test, to stikprøver t-test, og Mann-Whitney U-test [21]. Generobre succes, defineret som andelen af ræve oprindeligt stikprøven resamples ved hver capture periode, blev sammenlignet med en Pearsons chi-square test [21].
For at afgøre, hvorvidt øre mide byrde faldt efter behandling ræve med acaricid vi evaluerede både mide forekomst og intensitet af infektion. Udbredelse blev defineret som andelen af ræve med en mide score og /eller tælle 0, og inficerede ræve blev defineret som dem med både mide score og tælle lig med 0. Intensitet af infektion blev vurderet ved hjælp af både mide score og tælle, og en Spearman rang test blev udført for at vurdere sammenhængen mellem de to foranstaltninger [21]. Udbredelse og intensiteten af infektion blev sammenlignet mellem behandlede og ubehandlede grupper ved hver capture periode under anvendelse af en Pearsons chi-square test og Mann-Whitney U test hhv. Ændringer i forekomsten og intensiteten af infektion fra t
0 og t
3 blev evalueret ved hjælp af en McNemar chi-square test og Friedman test henholdsvis [21].
For at afgøre, hvorvidt mellemørebetændelse og CGH reduceret med mide fjernelse blev histopatologi scores sammenlignet mellem behandlede og ubehandlede grupper ved t
3 ved anvendelse af en Mann-Whitney U test. Ændringer i øret patologi mellem t
0 og t
3 blev evalueret ved hjælp af en Friedman test. For at bestemme om IgG- og IgE-niveauer blev reduceret med mide fjernelse blev værdier sammenlignet mellem behandlede og ubehandlede grupper ved hver capture periode under anvendelse af en Mann-Whitney U test. Ændringer i IgG og IgE niveauer mellem t
0 og t
3 blev sammenlignet under anvendelse af en Friedman test. IgG- og IgE-niveauer blev sammenlignet mellem SCA ræve ved hver capture periode og SCZ ræve bruger Mann-Whitney U test.
Fordi behandling er simpelthen en fremgangsmåde til reduktion mider, og mide tilstedeværelse og intensitet er de faktiske risikofaktorer af interesse, alle de ovennævnte analyser blev også udført en sammenligning inficerede og ikke-inficerede ræve, uanset behandlingsgruppe. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS software (version 20.0, IBM SPSS Statistics for Windows, Armonk, NY) med en alfa-niveau på 0,05.
Resultater
Et hundrede sytten ræve blev indskrevet i undersøgelse: 59 blev tildelt til den behandlede gruppe og 58 til den ubehandlede gruppe (S1 tabel). I løbet af undersøgelsen, to ræve, både fra den behandlede gruppe, døde af køretøjet traumer., Ingen bivirkninger for prøveudtagning eller behandling blev observeret under generobre eksamen. Ved begyndelsen af undersøgelsen blev ikke fundet nogen signifikante forskelle mellem behandlede og ubehandlede grupper i forhold til alder, køn, brutto øregang vurdering, histologisk øregang vurdering eller mide-specifik IgG /IgE-niveauer (p ≥ 0,1). Generobre succes var ens mellem behandlede og ubehandlede ræve ved t
1 (39/59 = 66% og 43/58 = 74%, henholdsvis) og t
3 (40/59 = 68% og 37/58 = 64%, henholdsvis) (p ≥ 0,3); blev dog færre behandlede ræve generobrede end ubehandlede ræve ved t
2 (25/59 = 42% og 36/58 = 62%, henholdsvis) (p = 0,03) (S1 og S2 Fig).
Effekt af mider paa mide prævalens og intensiteten af infektion
Øre mide score og tæller var signifikant korreleret (p 0,001), derfor mide optælling blev brugt til at beskrive intensiteten af infektion. Behandlede ræve havde signifikant lavere mide prævalens og intensiteten af infektion sammenlignet med ubehandlede ræve ved t
1, t
2, og t
3 (p 0,001, Fig 2). Mite prævalens faldet markant inden for den behandlede gruppe (p 0,001), men ikke inden for den ubehandlede gruppe (p = 0,1) mellem t
0 og t
3. Men mide infektion intensitet faldt betydeligt inden for både de behandlede (p 0,001) og ubehandlede grupper (p = 0,02) mellem t
0 og t
3. Vi skønnede varigheden af acaricid effekt ved at undersøge en delmængde af ræve, der kun blev behandlet én gang (ved t
0), derefter igen evalueres to, fire eller seks måneder senere. Blandt behandlede ræve, 10/39 smittet to måneder senere, 1/7 smittet fire måneder senere, og 3/7 var inficeret seks måneder senere (S1 Fig)
Udbredelse:. Antal ræve med mider /samlede antal ræve. Intensitet af infektion: median øre mide tæller. Antal behandlede og ubehandlede ræve (t
0: 59, 58; t
1: 39, 42; t
2: 24, 36; t
3: 40, 36). Range af værdier for mide intensitet vist i parentes over hver bar. Ræve er udelukket fra analysen: en ubehandlet ræv ved t
1 og t
2 (manglende mide count), en ubehandlet ræv ved t
3 (uheld behandlet ved t
2).
a, b, c signifikant forskel (Pearsons chi-square test, p 0,001).
d Signifikant forskel (McNemar s chi-square test, p 0,001).
e, f, g Signifikant forskel (Mann-Whitney U test, p 0,001).
h, i Signifikant forskel (Friedman test, p 0,001, p = 0,02)
Effekt af mide fjernelse på otitis og hyperplasi
Behandlede ræve udstillet væsentligt lavere. mellemørebetændelse og CGH score end ubehandlede ræve ved t
3 (p 0,001; fig 3). Mellem t
0 og t
3, otitis scoringer faldt betydeligt i den behandlede gruppe (p 0,001), mens der ikke var nogen signifikant ændring i den ubehandlede gruppe (p = 0,5). CGH scorer også faldt betydeligt i den behandlede gruppe (p = 0,007) mellem t
0 og t
3, men i modsætning til otitis scores, CGH scorer steget betydeligt i den ubehandlede gruppe (p = 0,001) mellem t
0 og t
3. De samme resultater blev observeret, når inficerede ræve blev sammenlignet med inficerede ræve.
Sammenligning mellem behandlede og ubehandlede ræve ved t
3, og mellem t
0 og t
3 inden for hver gruppe. Antal behandlede og ubehandlede ræve ved t
0 og t
3 (37, 33). Range af værdier for otitis og CGH vist i parentes over hver bar. Foxes udelukket fra analyserne: tre behandlede og to ubehandlede ræve ved t
0, en behandlet og ubehandlet ræv ved t
3 (ikke-diagnostisk biopsi), 18 behandlede og 22 ubehandlede ræve ved t
3 (ikke generobrede).
a, b signifikant forskel (Mann-Whitney U test, p 0,001).
c, d, e Signifikant forskel (Friedman test, p ≤ 0,007).
Effekt af mide fjernelse på IgG og IgE niveauer
Behandlede og ubehandlede grupper havde ikke markant forskellige IgG-niveauer ved t
1 (p = 0,08), t
2 (p = 0,3) eller t
3 (p = 0,06), men der var et signifikant fald i IgG niveauer inden for både grupper mellem t
0 og t
3 (p 0,001; fig 4). Begge grupper af SCA ræve ved t
0 havde signifikant højere IgG niveauer end ikke-inficerede SCZ ræve (p 0,001). SCA behandlet ræve opretholdt betydeligt højere IgG-niveauer end SCZ ræve ved t
1 (p 0,001) og t
2 (p = 0,01), men deres IgG faldt til niveauer svarende til SCZ ræve ved t
3 (p = 0,6). I modsætning hertil SCA ubehandlede ræve opretholdt betydeligt højere IgG-niveauer end SCZ ræve overhovedet generobre perioder (t
1 og t
2: p 0,001, t
3: p = 0,004)
.
IgG niveau: en relativ mængde mide-specifikt antistof (bestemt ved interpolation fra en fire-punkts kalibreringskurve, se tekst for yderligere forklaring). Antal behandlede og ubehandlede ræve (t
0: 59, 57; t
1: 38, 42; t
2: 24, 36 t
3: 40, 36); Antallet af inficerede og inficerede ræve (t
0: 116; t
1: 31, 49; t
2: 25, 35 t
3: 42, 35); antal SCZ ræve (43). Række værdier for IgG vist i parentes over hver bar. Foxes udelukket fra analyser: en ubehandlet /smittet ræv ved t
0 og en behandlet /ikke-inficerede ræv ved t
1 (manglende IgG-niveau).
a, b Signifikant forskel (Friedman test, p 0,001).
c Signifikant forskel mellem SCZ ræve vs. SCA behandlede og ubehandlede ræve på alle capture begivenheder (Mann-Whitney U test, p ≤ 0,01), bortset fra SCA behandlede ræve ved t
3 (p = 0,6).
d, e, f signifikant forskel (Mann-Whitney U test, p ≤ 0,01).
g, h signifikant forskel (Friedman test, p ≤ 0,004).
i Signifikant forskel mellem SCZ ræve vs. SCA inficerede og ikke-inficerede ræve på alle capture begivenheder (Mann-Whitney U test, p ≤ 0,001), undtagen for SCA-inficerede ræve ved t
2 (p = 0,1) og t
3 (p = 0,9).
Når IgG-niveauer blandt SCA ræve blev sammenlignet på grundlag af infektion status, ikke-inficerede ræve havde væsentligt lavere IgG niveauer end inficerede ræve ved t
1 (p 0,001), t
2 (p = 0,01), og t
3 (p = 0,01, fig 4). Mellem t
0 og t
3, var der et signifikant fald i IgG niveauer under både ikke-inficerede og inficerede ræve (p 0,001, 0,004). SCA inficerede ræve havde signifikant højere IgG niveauer end SCZ inficerede ræve ved t
1 (p 0,001); dog IgG niveauer var ens ved t
2 (p = 0,1) og t
3 (p = 0,9). I modsætning hertil SCA inficerede ræve fastholdt IgG niveauer, der var væsentligt højere end SCZ ræve overhovedet genvinde begivenheder (t
1 og t
2: p 0.001, t
3: p = 0,001). IgE niveauer for SCA og SCZ ræve var under detektionsgrænsen for analysen; Derfor blev data ikke analyseret yderligere.
øregangen tumor forekomst
Den oprindelige tumor udbredelse i hele studiepopulationen af SCA ræve var 21% (23/111). Seks ræve blev udelukket fra denne analyse på grund af utilstrækkelige biopsier indsamlet i starten af studiet. Langt de fleste af tumorer ved t
0 blev påvist i modne ræve, hvor 51% (22/43) af ræve ≥ 4 år udstillede øre kanalen tumorer. Selvom 79% (88/111) af rævene var oprindeligt uden tumorer, et betydeligt antal af disse ræve udviklet nye tumorer i løbet seks måneders forsøgsperiode. Under den afsluttende capture periode (t
3), 53 af de oprindeligt tumor -fri ræve blev fanget og undersøgt, og 12 af disse ræve var ≥ 4 år gammel. Nye øre kanalen tumorer blev observeret i fem ræve (5/53), hvoraf tre var inficeret (alle ubehandlede) og hvoraf to blev inficerede (en behandlet, en ubehandlet). Igen blev størstedelen af tumorer detekteret i modne ræve, hvor 33% (4/12) af ræve ≥ 4 år udstillede nye øre kanalen tumorer.
Diskussion
Resultaterne af denne undersøgelse give overbevisende dokumentation for, at acaricid behandling er et effektivt middel til at reducere øremider, og at mide fjernelse reducerer kendte risikofaktorer for ceruminous kirtel tumor dannelse i SCA ræve. Mite fjernelse synes at mindske kroniske øregang irritation og overdreven ørevoks produktion, sandsynligvis aftagende patologiske ændringer i øret, der kan føre til tumordannelse. Det faktum, at CGH faktisk steg i sådan en kort periode inden persistent inficerede ræve giver stærke beviser for, at den langsigtede tilstedeværelse af mider sandsynligvis er forbundet med epitelial hyperplasi. Hurtig celledeling over tid øger chancen for at erhverve et onkogent mutation, som fører til ukontrolleret vækst og udvikling af epiteliale tumorer som ceruminous adenomer og carcinomer [22]. Uden indgreb vil hyperplasi i øregangen fortsætte med at fremme i mide-inficerede ræve, sandsynligvis øger risikoen for tumor udvikling.
Faldet i mide forekomst og intensitet af infektion understøtter den fortsatte brug af ivermectin eller andre acaricider fonetisk at reducere øre mide infektioner i SCA ræve. Et lille antal ræve i den behandlede gruppe blev inficeret med mider ved t
3; dette kan skyldes ufuldstændig eliminering af første infektion, eller reinfektion. Mite tæller faldt i både behandlede og ubehandlede grupper over de seks måneders undersøgelse, og selv om faldet var langt mere omfattende i den behandlede gruppe, mide reduktion inden for den ubehandlede gruppe var uventet. Vi formoder, at mekanisk fjernelse af mider og ændring af den auditive miljø under prøvetagning og biopsi procedurer kan have bidraget til denne samlede fald. Administration af lidocain og anvendelse af blodstillende pulver til biopsi sites, samt ekssudat eller serum fremstillet ved helingsprocessen, kan have bidraget til en midlertidig nedsættelse af mide byrder i begge grupper umiddelbart efter biopsi. Enhver proces, der øger inflammation og ekssudat i øregangen kan skabe et barsk miljø for øremider, ofte forårsager mider at opgive øregangen eller dø, således generelt faldende mide byrde [12]. Denne “udvaskning effekt” af serum eller ekssudat er også blevet foreslået i SCA ræve med alvorligt syge øregange hvor få mider er til stede [10]. Det er også muligt, at ved at reducere mide byrde i en del af befolkningen, vi faldt hastigheden af reinfektion, som foregår næsten udelukkende gennem direkte kontakt med inficerede ræve [12]. Seasonal ændring i mide byrde er usandsynligt, fordi SCA øens klima er tør og varm, med kun milde udsving i temperatur og nedbør [23],
O
.
cynotis
er en obligatorisk ektoparasit der fuldender alle livsstadier på sin vært, prævalens høj mide er blevet opdaget [24] i SCA ræve hele året, og den samlede ræv huld synes ikke at ændre sig med årstiderne ( JKL, personlig kommunikation).
i øjeblikket Island ræve er en intensivt drevne art, og vil være for en overskuelig fremtid. Under den årlige ø-dækkende folketælling fældefangst på SCA ø, er et betydeligt antal ræve undersøgt, identificeret med en passiv integreret transponder tag, og vaccineret mod hundesyge og rabies.
Leave a Reply
Du skal være logget ind for at skrive en kommentar.