PLoS ONE: kliniske karakteristika og prognostiske Betydningen af ​​TERT Promotor mutationer i Cancer: En kohorteundersøgelse og en Meta-Analysis

Abstrakt

Baggrund

Forekomsten af ​​telomerase revers transkriptase (TERT) promotor mutationer (pTERTm) i ikke-småcellet lungecancer (NSCLC) er blevet undersøgt, men resultaterne var inkonsistent. Desuden har flere undersøgelser analyseret rolle pTERTm i ætiologien af ​​forskellige kræfttyper imidlertid resultaterne også forbliver inkonsekvent.

Metoder

Det genomiske DNA-sekvensen af ​​103 NSCLC prøver var analyseret for at undersøge frekvensen af ​​pTERTm hos disse patienter, og at fastslå, om disse mutationer er associeret med deres kliniske data. Desuden er en meta-analyse baseret på tidligere publicerede artikler og vores kohorte undersøgelse blev udført for at undersøge sammenhængen af ​​pTERTm med patientens køn, alder ved diagnose, metastaser status, tumor scenen og kræft prognosen (5-års samlet overlevelse sats).

Resultater

i kohorteundersøgelse, 4 patienter havde C228T og 2 havde C250T, med en samlet mutation frekvens på op til 5,8%. Signifikant forskel af kliniske data mellem pTERTm luftfartsselskaber og ikke-bærere blev kun fundet i alder ved diagnose. I metaanalysen, Vi fandt, at pTERTm luftfartsselskaber i kræftpatienter er ældre end ikke-bærere (Mean forskel (MD) = 5.24; 95% konfidensinterval [CI], 2,00-8,48), mandlige patienter var mere tilbøjelige til havnen pTERTm (odds forhold (OR) = 1,38; 95% CI, 1,22 til 1.58), og at pTERTm havde en signifikant sammenhæng med fjernmetastaser (OR = 3,78; 95% CI, 2,45 til 5,82), en højere tumorklassificering hos patienter med gliom (WHO grad III, IV vs. i, II: OR, 2,41; 95% CI, 1,88 til 3,08) og en højere tumor stadium i andre typer af cancer (III, IV vs. i, II: OR, 2,48; 95% CI, 1,48 til 4.15). pTERTm blev også signifikant associeret med en større risiko for død (hazard ratio = 1,71; 95% CI, 1,41-2,08).

Konklusioner

pTERTm er en moderat udbredt genetisk begivenhed i NSCLC. Den nuværende meta-analyse viser, at pTERTm er forbundet med patientens alder, køn og fjernmetastaser. Det kan fungerer som en negativ prognostisk faktor hos personer med kræft

Henvisning:. Yuan P, Cao J-l, Abuduwufuer A, Wang L-M, Yuan X-S, Lv W, et al. (2016) kliniske karakteristika og prognostiske betydning af tert Promoter mutationer i Cancer: En Kohorte og en meta-analyse. PLoS ONE 11 (1): e0146803. doi: 10,1371 /journal.pone.0146803

Redaktør: Alvaro Galli, CNR, ITALIEN

Modtaget: 15 juli, 2015; Accepteret: December 22, 2015; Udgivet: 22 Jan 2016

Copyright: © 2016 Yuan et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed:. Alle relevante data er inden for papir og dens støtte Information filer

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (NSFC 31.170.720). Websted: http: //www.nsfc.gov.cn/. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

telomerase revers transkriptase (TERT) genet koder for et yderst specifik revers transkriptase, der tilføjer gentagelser til 3′-enden af ​​kromosomer [1]. Den øgede telomeraseaktivitet tillader tumorer at undgå induktion af senescens ved bevarelsen af ​​deres telomer ender [2,3]. Promotorregionen TERT anses for at være den mest afgørende regulatorisk element for telomerase-ekspression; det indeholder flere bindingssteder for faktorer, der regulerer gentransskription [4]. Inhibering af telomeraseaktivitet for reversion af den udødelige fænotype af tumorceller har været en af ​​de mest almindelige metoder til cancerterapi [5]. Nyere undersøgelser har vist, at aktivering af telomerase via transkriptionel TERT unregulation kan være forårsaget af mutation i kernen promotorregionen af ​​TERT (CHR5: 1,295,228C T [C228T], CHR5:. 1,295,250C T [C250T], et al) [ ,,,0],6,7]. Disse mutationer giver 2 gange til 4 gange øget TERT transkriptionelle aktiviteter ved oprettelsen af ​​bindingssteder for ETS /ternære komplekse faktorer (TCF) transkriptionsfaktorer og derefter opregulere TERT udtryk, hvilket tyder på en potentiel mekanisme til telomerase aktivering i tumorudvikling [7,8 ].

De relative egenskaber og prognostiske virkninger af tERT promotor mutation (pTERTm) om luftfartsselskaber og ikke-bærere med kræft er uklare. Statistisk forskel i kønsfordelingen mellem pTERTm luftfartsselskaber og ikke-bærere blev fundet i nogle undersøgelser, at mandlige kræftpatienter er mere tilbøjelige til havnen pTERTm [9,10,11]. For nylig, Gandolfi og Wang rapporterede, at pTERTm er forbundet med fjernmetastaser i øvre tarmkanal urothelial karcinom og papillær kræft i skjoldbruskkirtlen. En sådan sammenslutning af pTERTm kan desuden i andre kræftformer. Desuden er virkningerne af pTERTm på patientresultatet tilsløret. Flere undersøgelser har vist en mindre gunstig prognose for gliom i pTERTm luftfartsselskaber end i ikke-bærere [12,13,14,15,16,17], mens en nylig rapport fundet et bedre resultat for pTERTm luftfartsselskaber [18].

udbredelsen og sammenslutning af pTERTms med ikke-småcellet-lungekræft-lungekræft (NSCLC) patienter er blevet undersøgt, men viste forskellige resultater. Ma og kolleger fandt en andel på 2,67% NSCLC patienter i deres kohorte havde pTERTm [19], mens andre undersøgelser ikke har kunnet påvise pTERTm [20,21,22]. Ved at foretage en kohorteundersøgelse i NSCLC-patienter og en meta-analyse, har vi forsøgt at styrke udbredelsen af ​​pTERTm i NSCLC og give endegyldige bevis for den relative effektivitet og egenskaber pTERTm hos kræftpatienter. Dette er den første meta-analyse for at evaluere associering pTERTm med cancer. Resultaterne kan give indsigt i biologi pTERTm, for at forstå den kliniske prognosen for disse mutationsbærere og tilbyde konsekvenser for udformningen af ​​kliniske forsøg, især dem af anticancer midler, der er målrettet TERT.

Metoder

Kohorte studie

patienter og vævsprøver.

Vi opnåede 103 flydende nitrogen-lagret vævsprøver fra 103 NSCLC patienter med patologisk bekræftelse, der er optaget til den første tilknyttede Hospital i Zhejiang University mellem 2013 og 2014. tilstrækkelige høj kvalitet tumor prøver blev taget på tidspunktet for kirurgisk resektion af veluddannede læger med skriftligt informeret samtykke fra hver patient. Hver prøve blev anbragt i flydende nitrogen umiddelbart efter resektion og opbevaret i -80 ° C køleskab. Patient kliniske data blev indsamlet, og deres oplysninger blev anonymiseret og anonymiseres forud for denne analyse. Denne kohorte undersøgelse blev udført under godkendelsen af ​​etiske komitéer i første tilknyttede Hospital i Zhejiang University

DNA-ekstraktion og mutation analyse.

DNA-ekstraktion og polymerasekædereaktion forstærkning til sekventering af TERT promotoren blev udført i alle tilfælde ved standardprotokoller. Det genomiske DNA fra tumorvæv blev ekstraheret med en QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen, Hilden, Tyskland) og oprenset med en EZNA MicroElute DNA Clean-up kit (OMEGA). Polymerasekædereaktion (PCR) amplifikation af TERT-promotor region for mutationerne (fra -27 til -286) blev udført under anvendelse af primere: 5’CCC ACG TGC GCA GCA GGA C3 ‘(fremad) og 5’CTC CCA GTG GAT TCG CGG GC3 ‘(tilbage), Med 3 minutter ved 95 ° C; 35 cykler ved 95 ° C 15 sekunder, 63 ° C 15 sekunder, 72 ° C 1 minut, efterfulgt af et sluttrin ved 72 ° C i 5 minutter. Efter gelelektroforese at bekræfte kvaliteten af ​​PCR-produkterne, sekventering PCR blev udført under anvendelse af en Big Dye terminator version 3.1 cyklussekventering klar reaktion kit (Applied Biosystems), og DNA-sekvensen blev analyseret på en ABI PRISM 3730 automatiseret genetiske analysator (Applied Biosystems) blev Alle prøver kontrolleres frem og bak retninger.

Statistisk metode kohorteundersøgelse.

Statistiske analyser blev udført ved hjælp af SPSS16.0 softwarepakken. Associationer mellem pTERTm og patienternes kategoriske variabler blev analyseret med en chi-square test blev løbende data opsummeres som middelværdien ± SD og analyseret med Mann-Whitney Wilcoxon test. Værdier af p mindre end 0,05 blev betragtet som signifikante.

Meta-analyse

Litteratur søgning.

Vi søgte PubMed og Web of Science for artikler offentliggjort før marts 2015 ved hjælp af systemiske litteratur søgetermer “telomerase revers transkriptase”, “promotor”, og “mutation”. De referencelister af artiklerne hentede blev yderligere screenet for andre potentielle studier. Vi gjorde ethvert forsøg på at indhente de nødvendige oplysninger fra den første og tilsvarende forfattere via e-mail, hvis blev rapporteret tilstrækkelige data i artiklen (dvs. manglende data, manglende Kaplan-Meier kurver eller andre usikkerheder).

. inklusion og eksklusionskriterier

Alle undersøgelserne indgår i denne metaanalyse mødte følgende kriterier: (a) artikler om pTERTm og kræft hos mennesker, der blev udgivet på engelsk. (B) foreligge detaljerede genotype data eller frekvenser, der kan beregnes ud fra artiklen tekst; (C) tilstrækkelige data til at beregne en odds ratio (OR) eller hazard ratio (HR, for prognosen analyse) med en 95% konfidensinterval (CI); (D) hvis overlevelse er ikke tilgængelige for beregning HR, er nødvendig overlevelseskurver for pTERTm luftfartsselskaber og ikke-bærere. Udelukkelseskriterierne var: (a) offentliggjort som en abstrakt, caserapport, kommentar brev, revision eller redaktionelle; (B) ikke-humane undersøgelser; (C) duplikerede studier, i hvilket tilfælde den nyeste eller største undersøgelse blev inkluderet.

udvinding data.

To korrekturlæsere uafhængigt vurderede alle de potentielt relevante studier og nåede til enighed om alle de poster. Eventuelle uoverensstemmelser blev forsonet med diskussion og konsensus. Følgende data blev indsamlet fra hver undersøgelse:. Første forfatter, udgivelsesår, type kræft, befolkning, sekventering metode og antallet af luftfartsselskaber og ikke-bærere

Kvalitetsvurdering

Kvaliteten af. de inkluderede studier blev evalueret i henhold til Newcastle-Ottawa skala (NOS) kvalitetsvurdering, der er tilgængelig på https://www.ohri.ca/programs/clinical_epidemiology/oxford.asp. Dette evalueringssystem fokuserer på tre aspekter af en undersøgelse (udvælgelse af patienter, sammenligneligheden af ​​baseline-karakteristika og resultatet vurdering). Kvaliteten af ​​undersøgelsen blev angivet med en numerisk score fra 0 til 9, med 9 repræsenterer den højeste kvalitet. Kvalitet vurdering blev foretaget af to uafhængige anmeldere. De oprindelige papirer blev scannet når uoverensstemmelser opstod. Uafviklede uoverensstemmelser blev henvist til en tredje forsker til endelig afgørelse.

Statistisk metode til meta-analyser.

metaanalyser, undergruppe analyser og følsomhedsanalyser blev udført med anmeldelse Manager (revman) Version 5.1 software. Den meta-regression, blev Begg-og Egger test udført med STATA software (version 12.0 Stata Corp LP, College Station, Texas).

For dikotome udfald, Odds Ratio (OR) med 95% konfidensintervaller blev beregnet ved ved hjælp af en fast effekt model (Mantel-Haenszel metode) [23] for P

Heterogenitet

0,05, eller tilfældig effekt model (DerSimonian og Laird metode) [24] for P

Heterogenitet

0,05. Såsom vurdering af sammenhængen mellem pTERTm og køn (mand vs. kvinde), lymfatisk metastaser (positiv vs. negativ), fjernmetastaser (positiv vs. negativ), tumor fase (III /IV vs. I /II), og gliom WHO grad (III /IV vs. I /II). De afhængige variabler i disse undersøgelser er hyppigheden af ​​begivenhed versus ikke-begivenheder. Betydningen af ​​den kombinerede OR blev bestemt med en Z-test, hvor p 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant. For kontinuerte udfald, blev den gennemsnitlige forskel (MD) beregnes på grundlag af middelværdi og standardafvigelse givet i de inkluderede studier. Så associationen mellem pTERTm og patientens alder ved diagnose blev evalueret ved gennemsnitlig alder forskel (bærere vs. ikke-bærere) kombineret med de tilsvarende 95% CIs. Poolet HR med 95% konfidensinterval blev beregnet for associationen mellem 5-års samlet overlevelse og pTERTm status (bærere vs ikke-bærere). HR 1 betyder, at prognosen for patienter med pTERTm luftfartsselskab er værre end ikke-bærere, mens HR 1 betyder det modsatte. Hvis en direkte rapport om overlevelse ikke var til rådighed, så de overlevelsesdata læst fra Kaplan-Meier kurver blev læst af Engauge Digitizer-version 4.1 (https://digitizer.sourceforge.net/). Befolkning datasæt blev kategoriseret som asiatisk og ikke-asiatisk. Stratificerede analyser blev udført ved cancer type (Hvis en cancertype indeholdt kun én datakilde, blev det kombineret i “andre kræftformer” -gruppen.). Evalueringen af ​​de meta-analyseresultater omfattede en undersøgelse af heterogenitet, en analyse af følsomheden, meta-regression og en undersøgelse til offentliggørelse bias.

heterogenitet mellem studier blev evalueret ved hjælp af en chi-square-baserede Q test og ap-værdi på mindre end 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant. Den Higgins I

2 blev beregnet til kvantitativ estimere heterogenitet, med jeg

2 25%, jeg

2 = 25-75%, og jeg

2 75%, der repræsenterer lav, moderat og høj heterogenitet, hhv. Undergruppe og meta-regression blev udført for at afgrænse de vigtigste kilder til heterogenitet. Følsomhed analyser blev udført for at vurdere stabiliteten af ​​resultaterne og til at identificere de enkelte potentielle påvirkninger af OR eller HR. Funnel plots og Egger test blev brugt til diagnosticering af potentielle publikationsbias, en asymmetrisk plot antyder en mulig publikationsbias og P-værdi af Egger test overvejes repræsentative for væsentlig publikationsbias hvis det var mindre end 0,05.

Resultater

Resultater af kohorteundersøgelse

undersøgelsen omfattede 103 kirurgiske prøver fra patienter med NSCLC. Resultaterne af kohorte undersøgelse er vist i tabel 1. Vi identificerede seks mutationer (5,8%) i TERT-promotor-regionen (fire C228Ts og to C250Ts) (tabel 2). Foreningerne i de patientkarakteristika og kliniske funktioner med pTERTm status blandt vores patienter viste en statistisk signifikant forskel kun for alder. De pTERTm luftfartsselskaber havde tendens til at være ældre på tidspunktet for diagnosen end ikke-bærere (p = 0,031). Ingen signifikante forskelle blev fundet i fordelingerne af køn (P = 0,551), tumorstørrelse (0,196), lymfatisk metastaser (p = 0,567), fjernmetastaser (p = 0,654), tumor fase (p = 0,6) eller andre kliniske funktioner ( tabel 1).

Resultater af metaanalysen

Karakteristik af de identificerede studier.

den detaljerede udvælgelsesproces demonstreres i figur 1. i den indledende søgning, blev 245 undersøgelser findes i PubMed, blev 193 undersøgelser findes i Web of science. I alt 388 studier tilbage efter den indledende elimination for dobbeltarbejde. 341 undersøgelser blev udelukket efter titler og abstracts blev undersøgt. Efter en fuldtekst gennemgang og detaljeret evaluering blev 35 artikler, der indgår i vores analyser (tabel 3). Hver undersøgelse blev offentliggjort mellem 2013 og 2015 af forfattere fra Kina, Korea, Japan, Østrig, USA, Tyskland, Italien, Frankrig, Sverige og Portugal. Blandt de 35 studier, ni undersøgelser vurderede gliom [12,13,18,25,26,27,28,29,30], syv undersøgelser vurderede kræft i skjoldbruskkirtlen [9,14,31,32,33,34,35], fem undersøgelser vurderede melanom [10,15,16,36,37], to undersøgelser hver vurderede blærekræft [38,39], renalcellecarcinom [40,41] gynækologisk kræft [42,43], hepatocellulært carcinom [11,44 ] og urothelial carcinoma [17,45]. En undersøgelse hver vurderede lungekræft [19], adrenal kræft [46] larynxcancer [47] og meningeom [48]. Resultaterne af vores kohorte studie (Yuan P) er også inkluderet i denne meta-analyse. Således blev analyseret 36 studier med 3001 bærere og 8384 ikke-bærere. Hertil kommer, at nogle uafhængige variable er ikke tilgængelige i visse artikler, antallet af studier i forskellige analyser er varierede.

En liste over fuldtekst udelukkede artikler.

Foreningen af ​​pTERTm med patientens alder, køn, metastaser status og tumor stadie

De overordnede resultater viser, at pTERTm luftfartsselskaber var ældre end ikke-bærere (MD = 5,24; p 0,001). fra en tilfældig model. Stratificering analyse faldt heterogenitet og identificeret øget MD i undergruppe af gliom og lungekræft, mens melanom viste en omvendt mønster (MD = -5,74; p = 0,02). Ingen signifikant forskel blev fundet i andre cancere. (Tabel 4, S1 Fig)

Vi fandt også, at mandlige kræftpatienter var mere tilbøjelige til havnen pTERTm (OR = 1,38, p 0,0001). Men ikke-signifikant risiko blev fundet i gliom, lungekræft og nyrecellecancer (tabel 4, S2 Fig). Som for lymfe metastase, blev statistisk signifikans ikke fundet, men kræftpatienter, der nærede pTERTm var langt mere tilbøjelige til at have fjernmetastaser (OR = 3,78; p 0,0001) og en højere tumor stadie (III /IV vs. I /II: OR = 2,48; p = 0,0005) (tabel 4, S3 fig og S4 fig). Stratificerede analyser af fjernmetastaser og scene udført på kræfttyper afslørede, at den betydelige risiko kun blev observeret i kræft i skjoldbruskkirtlen. Desuden en analyse af tumor etape var ikke tilgængelig for gliom, men gliom patienter med pTERTm var mere tilbøjelige til at have en højere WHO grad (III /IV vs. I /II): OR, 2,41; p 0,0001) (tabel 4).

For de overordnede sammenligninger, signifikant heterogenitet blev observeret med undtagelse af køn analyse. Men de fleste af heterogeniteten faldet markant eller forsvandt efter lagdeling, undtaget for “anden kræft” i alder analyse, renalcellecarcinom i fjernmetastaser og melanom i trin analyse (I

2 75). Følsomhedsanalyse med en undersøgelse udeladt hver gang viste, at resultatet betyder ikke var påvirket af nogen enkelt studie (S1-S4 Tables)

pTERTm og prognostisk betydning.

HRs for 5- år samlet overlevelse var til rådighed fra 25 studier. Alle undersøgelser blev offentliggjort mellem 2013 og 2015 og blev udført i Kina, Japan, Østrig, USA, Tyskland, Frankrig, Spanien og Portugal. Vi fandt en signifikant øget risiko for død for pTERTm luftfartsselskaber (HR = 1,71; p 0,0001) (tabel 4 og 5). Stratificering analyse identificerede væsentlige risici i undergrupper af gliom (HR = 1,52; p = 0,004), kræft i skjoldbruskkirtlen (HR = 2,73; p = 0,002), gynækologisk kræft (HR = 2,08; p = 0,006) og “andet kræft” (HR = 1,45; p = 0,0005) (fig 2, tabel 4). Alle resultaterne af meta-analyser er vist i en forenklet tabel (tabel 5).

Den tilfældige effekt model og fixed effect model er begge viste.

Vi foruddannet meta-regressionsanalyser af kovariater, herunder befolkning, prøve størrelse, alder, behandling, HR estimering og NOS score. Ingen signifikant ændring blev fundet i HR disse kovariater, og resultaterne viste, at forskellene mellem undergrupperne ikke nåede statistisk signifikans (tabel 6). Der blev ikke fundet dokumentation for, at nogen af ​​disse kovariater kunne forklare heterogenitet. Desuden følsomhedsanalyser udelade en undersøgelse hver gang viste, at studiet af Chen, A K (gliom), Liu, T (Kræft i skjoldbruskkirtlen) og Egberts, F (melanom) havde den største indflydelse på resultatet; Heterogeniteten blive ikke-signifikante, når de udgår. Og resuméet HR af modermærkekræft blev betydelig og heterogenitet forsvandt, da studiet af Egberts, F blev udeladt (HR = 2,04; 95% CI = 1,41-2,95) (S5 Table)

Offentliggørelse bias..

Begg s tragt plot og Egger test blev begge udført for at vurdere publikationsbias af undersøgelserne. Formerne af tragten parceller viste ingen tegn på en indlysende asymmetri i enhver sammenligning model. Som vist i S5 Fig Den p-værdi på Egger s regressionstest yderligere fremlagt dokumentation for tragt plot symmetri. (Tabel 7).

Diskussion

vedligeholdelse af telomer længde er af ultimativ betydning for normale selvfornyende stamceller og kræftceller til at forhindre ældning induktion. Det er blevet foreslået, at tumorceller er afhængige af epigenetiske mekanismer eller ændringer, der opretholder telomeraseaktivitet at bevare deres udødelighed [49,50,51]. Den tilbagevendende pTERTm skaber en formodet bindingssted for ETS /TCF bindende motiver, hvilket letter transskription af TERT [7,8]. pTERTm er for nylig blevet vist som en hidtil ukendt genetisk mekanisme underliggende telomerase aktivering og til stede i forskellige humane tumorer med et stort udvalg af prævalens. Det blev først rapporteret i melanom, og derefter forekomsten af ​​pTERTm blev rapporteret hos 43-51% af cancere i det centrale nervesystem, 59-66% af blæren, 59% af hepatocellulær, 10% af kræft i skjoldbruskkirtlen, og 29-73 % af hudkræft. Ikke desto mindre pTERTm blev fundet fraværende i mammacancer, lav i kræft i fordøjelsessystemet organer, hæmatopoietisk system og visse reproduktive system (serøse carcinom) [52].

Forekomsten af ​​pTERTm i småcellet lungecancer (SCLC ) og NSCLC er blevet undersøgt. Zheng et al [22] har undladt at påvise tilstedeværelsen af ​​pTERTm i SCLC. Chen et al [21] og Li et al [20] forsøgt at identificere pTERTm i NSCLC men ingen positivt resultat blev fundet. I de foreliggende undersøgelser identificerede vi en lav frekvens af pTERTm (5,8%) i NSCLCs og mutationen var signifikant associeret med ældre patienter, svarende til resultatet af Ma og hans kolleger [19]. De opdages 8 adenocarcinomer, 3 pladecarcinom og en anden histologiske type 467 NSCLC patienter er pTERTm luftfartsselskaber. vi forsøgte yderligere at undersøge sammenhængen af ​​pTERTm med tumorstørrelse, differentiering niveau og fjernt metastase, men ikke signifikant sammenhæng blev fundet.

I den aktuelle meta-analyse, et grænsetilfælde signifikant sammenhæng mellem pTERTm og relevante kliniske data var observeret i samlet analyse bortset lymfatisk analyse. Den indlysende mellem-studie heterogenitet i hver analyse faldet markant i lagdeling analyser af tumor typer, hvilket tyder på, at forskellige tumortyper kunne være en potentiel kilde til heterogenitet. Interessant, observerede vi en signifikant sammenhæng med pTERTm med en højere alder ved diagnose hos patienter med gliom og thyreoideacancer, mens patienter med melanom viste en modsat mønster. Det er sandsynligvis fordi genetiske faktorer og miljømæssige faktorer bidrager ligeligt til udviklingen af ​​melanom. Nylige undersøgelser antydet, at modermærkekræft er fundet hyppigere i huden med intermitterende sol-eksponering end i hud, der ikke er udsat eller kronisk eksponeret [53,54].

Desuden fandt vi, at skjoldbruskkirtlen kræftpatienter med pTERTm har en højere risiko for fjernmetastaser, der er fire gange større end for patienter uden pTERTm (OR = 4,01, 95% CI = 3,15-5,10), i overensstemmelse med den undersøgelse udført af Gandofi et al. De fandt, at pTERTm stærkt forbundet med tumorudvikling og udvikling af fjernmetastaser i papillær thyroidcancer [31]. Ligeledes Landa et al viste, at pTERTm er meget udbredt i avancerede skjoldbruskkirtelkræft (51%) sammenlignet med godt differentierede tumorer (22%) [55]. Taget sammen indikerer disse data, at pTERTm er sandsynligvis en genetisk hændelse under erhvervelse af metastatisk potentiale. Mekanismen af ​​pTERTm i kræft progression er stadig uklart. Det er blevet rapporteret, at pTERTm er i stand til at øge den transkriptionelle aktivitet af TERT-promotoren i tumorer og udtrykke højere TERT-mRNA sammenlignet med vildtype-tumorer [7,8,11,33,39,56]. I denne forbindelse er det tænkeligt, at købet af pTERTm fører til TERT aktivering er en vigtig begivenhed i løbet af kræft progression, da det giver tumorceller at undgå spredning begrænsning og erhverve immortalisering [37]. En anden undersøgelse udført af Papathomas et al rapporterede, at pTERTm forekommer fortrinsvis i succinat-dehydrogenase (SDH) deficiente tumorer, og denne genetiske ændring kan samarbejde med pTERTm at forlænge levetiden af ​​muterede kloner, for således at gøre dem uendelig proliferation potentiale og akkumulering af yderligere genetiske ændringer [57]. Imidlertid blev sådan forening ikke fundet i melanom, renalcellecarcinom og “andet kræft”. Hvorvidt denne effekt kan være kræft-typespecifikke og spille en anden rolle i ætiologien af ​​andre kræft er stadig uklart, således at resultaterne bør fortolkes med forsigtighed.

De 5-årige overordnede overlevelsesdata fra 25 studier indikeret at patienter med pTERTm havde en 70% større risiko for at dø end dem uden pTERTm. Da pTERTm resulterer i skabelsen af ​​bindingssteder for ETS /TCF transkriptionsfaktorer, som er nedstrøms mål for RAS-RAF-MAPK pathways. pTERTm er foreslået at have synergistiske virkninger promotor tumorcelleproliferation med aktivering BRAF eller NTM mutationer, der er blevet foreslået at være driver mutationer i udviklingen af ​​kutane melanocytiske neoplasmer. Det er sandsynligt, at disse mutationer slå pTERTm til et mål på ETS-domæne transkriptionsfaktorer. Således supplerende undersøgelser kunne yderligere at undersøge, om pTERTm er af terapeutisk betydning, enten i form af at påvirke effekten af ​​etablerede behandlinger (dvs. BRAF /nationale tilsynsmyndigheder hæmmere eller immunoterapi), eller om de måske endda vise sig at være direkte værdifuld for terapeutiske mål [6,58 , 59]. Sammenhængen mellem pTERTm og kræft prognose blev omhyggeligt undersøgt. Vi har forsøgt at spore oprindelsen af ​​den betydelige heterogenitet ved at udføre undergruppe og meta-regressionsanalyse. Prognose analyser i gynækologisk cancer, blærekræft og “andet kræft” indgivet til at udstille betydelig heterogenitet når stratificeret efter kræftformer uden at ændre HR materielt. Yderligere Meta regressionsanalyse ved præspecificerede faktorer såsom befolkning, prøve størrelse, alder, behandling, metode HR estimering og NOS score ændrede ikke HR så godt, og giver ingen beviser til at redegøre for heterogenitet. Hertil kommer, at heterogenitet blev ikke-signifikante i gliom, kræft i skjoldbruskkirtlen og melanom ved følsomhedsanalyse.

tragten plots og Egger test ikke identificere nogen publikationsbias. Dog bør visse begrænsninger behandles i fortolkningen af ​​resultaterne af vores kohortestudie og meta-analyse. For det første stikprøvestørrelse på vores kohorte undersøgelse var relativt lille. Der er behov for Velkonstruerede populationsbaserede studier med store stikprøvestørrelser og detaljerede oplysninger eksponering for yderligere at bekræfte vores resultater. For det andet, undergruppe metaanalyse stratificeret efter kræft type, såsom hepatocellulært carcinom, blærecancer og larynxcancer, kunne indeholde tilstrækkelige data til at håndhæve statistisk styrke til at kontrollere, om en forening, på trods af vores bestræbelser på at kontakte forfatterne for data. Vi var i stand til at omfatte flere artikler, fordi forfatterne af nogle få studier med ufuldstændige data undladt at svare på vores anmodninger. Derfor ville mere individuel studieplan være forpligtet til at tegne en mere præcis konklusion

Som konklusion, fandt vi, at pTERTm er til stede i en brøkdel af NSCLCs og er signifikant associeret med ældre patienter. De metaanalyser foreslog, at pTERTm luftfartsselskaber var ældre end ikke-bærere i gliom, kræft i skjoldbruskkirtlen og lungekræft, med melanom demonstrere en reserveret mønster. Mandlige cancerpatienter udviste en signifikant forhøjet risiko for at få pTERTm i thyroidcancer, melanom og hepatocellulært carcinom. Bortset fra andre kræftformer, vi identificerede også skjoldbruskkirtlen kræftpatienter med hTERTm er mere tilbøjelige til at have fjernmetastaser og højere stadier tumor. Desuden pTERTm luftfartsselskaber havde en højere risiko for død i vores prognose analyse giloma, kræft i skjoldbruskkirtlen, gynækologisk kræft og “andre kræftformer”. Alt i alt synes påvisning af pTERTm at være en lovende prognostisk indikator i patienter med cancer og kan have potentiale som en biomarkør for behandling lagdeling. Mere veldesignede prospektive studier er nødvendige for at validere vores resultater.

Støtte Information

S1 PRISMA Tjekliste. PRISMA 2009 Flow Diagram

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s001

(DOC)

S1 Fig. Forest plot af meta-analyse af alder ved diagnose er forbundet med TERT promoter mutation (bærere vs ikke-bærere)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s002

(TIF)

S2 Fig. Forest plot af meta-analyse af patientens køn i forbindelse med TERT promoter mutation

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s003

(TIF)

S3 Fig. Forest plot af meta-analyse af fjernmetastaser patient i forbindelse med TERT promoter mutation

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s004

(TIF)

S4 Fig. Forest plot af meta-analyse af tumor fase af patient i forbindelse med TERT promoter mutation

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s005

(TIF)

S5 Fig. Funnel plot til at undersøge muligheden for at offentliggøre skævhed i dataene for alder (A), køn (B), fjernmetastaser (C), tumor stadie (D) og 5-års samlet overlevelse (E)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s006 Hotel (TIF)

S1 Table. Følsomhedsanalyser af inkluderede studier i alderen analyser

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s007

(DOCX)

S2 Table. Følsomhedsanalyser af inkluderede studier i køn analyser

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s008

(DOCX)

S3 Table. Følsomhedsanalyser af inkluderede studier i fjernmetastaser

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s009

(DOCX)

S4 Table. Følsomhedsanalyser af inkluderede studier i fase analyser

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s010

(DOCX)

S5 Table. Følsomhedsanalyser af inkluderede studier i prognosen

doi:. 10,1371 /journal.pone.0146803.s011

(DOCX)