PLoS ONE: Lav Rbm3 Protein Expression korrelerer med klinisk Stage, Prognostisk Klassificering og øget risiko for behandling Svigt i testikel Ikke-Seminomatous Kimcelle Kræft

Abstrakt

Baggrund

Angivelse af RNA-bindende motiv protein 3 (Rbm3) har vist sig at korrelere med gunstige klinisk-patologiske parametre og prognose i flere kræftsygdomme. Formålet med denne undersøgelse var at undersøge udtryk og prognostiske evne Rbm3 hos patienter med testiklerne ikke-seminomatous kimcelletumorer (NSGCT).

Patienter og metoder

Immunhistokemisk Rbm3 ekspression blev analyseret i væv microarrays med tumorer fra 206 patienter. Chi-square test blev anvendt til at analysere sammenhængen mellem Rbm3 ekspression og klinisk-patologiske parametre. Kaplan-Meier analyse blev anvendt til at vurdere konsekvenserne af Rbm3 udtryk på kræft-specifikke overlevelse (CSS) og fiasko overlevelse (FFS). Cox regression proportionale farer modeller blev anvendt til at estimere den relative risiko for fiasko.

Resultater

I hele kohorte, var der en signifikant sammenhæng mellem klinisk fase (

s = 0

.

044

) og Rbm3 udtryk. Svag Rbm3 udtryk korreleret med en betydeligt reduceret FFS [79,3% versus 90,4% (

s = 0

.

019

)] og CSS [87.5% versus 97,3% (

s = 0

.

047

)]. For patienter med metastatisk sygdom (

n = 88

) blev signifikante sammenhænge findes mellem Rbm3 udtryk og IGCCC gruppe (

s = 0

.

007

). Den FFS var signifikant dårligere for patienter med lav tumor-specifikke Rbm3 udtryk [59,3% mod 79,0% (

s = 0

.

013

)], og denne forening var betydelig i en multivariable model for patienter med metastatisk sygdom (HR = 3,67; 95% CI 1,14, 11,89).

Konklusion

lav Rbm3 udtryk er en uafhængig prædiktor for behandlingssvigt i metastatisk NSGCT, i forhold til den prognostiske faktorer indgår i den internationale Kimcelle Consensus Klassifikation (IGCCC). Disse resultater tyder på, at Rbm3 kan være en potentiel biomarkør for behandling lagdeling i patienter med metastatisk ikke-seminomatous kimcelletumorer, og derfor fortjener yderligere validering

Henvisning:. Olofsson SE, Nodin B, Gaber A, Eberhard J, Uhlén M, Jirström K, et al. (2015) Lav Rbm3 Protein Expression korrelerer med klinisk Stage, Prognostisk Klassificering og øget risiko for behandling Svigt i testikel Ikke-Seminomatous Kimcelle Cancer. PLoS ONE 10 (3): e0121300. doi: 10,1371 /journal.pone.0121300

Academic Redaktør: Yuan-Soon Ho, Taipei Medical University, TAIWAN

Modtaget: December 4, 2014 Accepteret: 29 januar 2015; Udgivet 26. marts, 2015

Copyright: © 2015 Olofsson et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden for papir og dens støtte Information filer

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af Landstinget Kronoberg til SEO, Knut og Alice Wallenberg Foundation til KJ, og Lunds Universitet medicinske fakultet og Universitetshospital Research Grants til MJ. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:. JE og KJ er co-opfindere af to patenter i forbindelse med brug af Rbm3 som prognostisk biomarkør i testikelkræft: 1) Rbm3 protein i testiklerne diagnostik og prognosticering EU patent nr kræft. (EP) 2.396.659, valideret i Danmark, Frankrig, Irland, Nederlands, Schweiz, Storbritannien, Sverige og Tyskland. Australien patent nr. (AU) 2010212769. Der er ansøgt om patent i Japan (2011-549603), Canada (2749349) og USA (13/210809). 2) Forudsigelse af respons på platinbaseret terapi. EU-patent nr. (EP) 2.396.660, valideret i Danmark, Frankrig, Irland, Nederlands, Schweiz, Storbritannien, Sverige og Tyskland. Australien patent nr. (AU) 2010212772, USA patent nr. (US) 8.747.910. Der er ansøgt om patent i Brasilien (PI1008875-0), Hongkong (12.107.047,4), Japan (2011 til 549.604), Canada (2.749.350) og Kina (201.080.007.960,0). Dette ændrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikker om deling af data og materiale. De øvrige forfattere har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser.

Introduktion

Siden indførelsen af ​​cisplatin i behandling af testikelkræft (TC), mere end 95% af patienterne er helbredt. For patienter uden tegn på metastatisk sygdom, dvs. klinisk fase I (CS I), overlevelse nærmer sig 100% [1, 2]. Den internationale Kimcelle Consensus Klassifikation (IGCCC) for ikke-seminomatous kimcelletumorer (NSGCT) [3] anvendes til at klassificere patienter med metastatisk sygdom i tre grupper med god, mellemliggende eller dårlig prognose, baseret på kliniske parametre til stede før behandling ( S1 tabel). I en meta-analyse, udført i 2005, 5-års overlevelsen estimater for patienter med god prognose var 94%, mellemliggende prognose 83% og 71% i dårlig prognose gruppe [4]. Størstedelen af ​​patienterne er unge på diagnosetidspunktet, og det er derfor vigtigt at undgå langsigtet sygelighed som kan skyldes TC behandling. Derfor selv om visse klinisk-patologiske faktorer har vist sig at være af værdi at vejlede behandling, er der et klart behov for yderligere prognostiske markører til bedre skelne mellem patienter med høj risiko og lav risiko for sygdom [5]. I CS I patienter, de risikofaktorer for okkult metastatisk sygdom er vaskulær /lymfe invasion, spredning sats 70% og mere end 50% embryonal carcinoma [6]. Immunohistokemisk vurdering af tumor proliferation under anvendelse MIB-1 (Ki-67 receptor) kan anvendes til at identificere patienter i CS I med lav risiko for tilbagefald. MIB-1-antistof kan også anvendes til diagnosticering af NSGCT [6].

Lav ekspression af RNA bindende motiv protein 3 (Rbm3) er blevet påvist at korrelere med en dårligere prognose i flere større kræftformer, f.eks bryst, ovarie, prostata, kolorektal, blærekræft og malignt melanom [7-12]. Rbm3 udtryk er også blevet påvist at korrelere med følsomhed over for platinbaseret kemoterapi i æggestokkræft in vivo og in vitro [8, 13]. I gonader, har vist sig Rbm3 at blive udtrykt i Sertoli-celler, men ikke kimceller af sædkanaler [14]. Formålet med den foreliggende undersøgelse var at undersøge ekspressionen og prognostisk betydning Rbm3 i NSGCT. I dette papir, har vi ikke undersøgt den diagnostiske konsekvenser af Rbm3 udtryk.

Materialer og metoder

Patienter

Alle voksne patienter diagnosticeret med testikelkræft NSGCT i det sydlige Sverige Sundhed Region fra 1. juli, 1995 til 31. december 2007, hvem var tilgængelige kliniske data, blev inkluderet i denne undersøgelse. Overlevelsen status for alle patienter blev kontrolleret i forhold til nationale befolkning registreringsdatabasen i 2012. Patienterne blev behandlet i overensstemmelse med protokollerne SWENOTECA (svensk-norsk testikelkræft Group) IV (metastatisk sygdom) og SWENOTECA III og VI (ikke-metastatisk sygdom) [ ,,,0],15]. Den SWENOTECA database rummer detaljerede oplysninger om tumor scenen, prognostisk klassificering, behandling, kort- samt langvarig behandling toksicitet og opfølgning data 10 år efter diagnosen.

Etik Statement

Alle EU og nationale regler og krav til håndtering af humane prøver er blevet fuldt ud opfyldt under udførelsen af ​​dette projekt; dvs. beslutning nr. 1110/94 /EF af Europa-Parlamentets og Rådets (OJL126 18,5,94), Helsinki-erklæringen om etiske principper for medicinsk forskning med mennesket som forsøgsperson, og Rådet EU-konventionen om menneskerettigheder og biomedicin. Undersøgelsen blev godkendt af af den etiske komité Lunds Universitet (ref nr 386/99), hvorved udvalget givet afkald på, at et samtykke anden måde end ved muligheden for at fravælge.

Materialer

patienterne blev identificeret i SWENOTECA databasen og de tilsvarende dias og formalinfikserede paraffinindlejrede væv blokke blev hentet fra patologi arkiver. Forud for væv micro array (TMA) konstruktion, alle tilgængelige hæmatoxylin og eosin farvede slides fra hvert tilfælde blev revurderet af en bord-certificeret patolog (KJ). Det samlede antal histologiske undertyper samt deres anslåede andele blev betegnet. Uanset antallet af histologiske komponenter, blev et standardsæt af 4x1mm kerner taget fra hver invasive tumor i en proportional måde, der dækker op til 3 forskellige komponenter. Desuden blev 2×1 mm borekerner udtaget fra områder med intratubulær kønsceller neoplasi (ITGCN) fra 127 tilfælde og tilstødende, godartet forekommende testis fra 49 sager. En halvautomatisk opstillingsindretningen blev anvendt (TMArrayer, Patologi Devices, Inc, Westminster, MD, USA). For immunhistokemisk analyse af Rbm3, 4 um TMA-sektioner blev automatisk forbehandlet (afparaffinering, rehydrering og epitopgenfinding) ved hjælp af PT-link-system (DAKO, København, Danmark) og derefter farvet i en Techmate 500 (DAKO, København, Danmark ) med det monoklonale muse-Rbm3 antistof, klon CL0296, produkt-id AMAb90655, Atlas Antistoffer AB, Stockholm, Sverige (formely kendt som AAb030038, Atlas Antistoffer, Stockholm, Sverige) fortyndet 1: 5000. Antistoffet er blevet valideret i tidligere undersøgelser [8, 10]. Til vurdering af nuklear Rbm3 udtryk, blev både den del af positive celler og farvning intensitet tages i betragtning for de enkelte væv kerne ved hjælp af et semikvantitativ pointsystem, hvorved den anslåede procentdel af celler med nukleare Rbm3 udtryk blev registreret som nukleare fraktion (NF) og kategoriseret i fire grupper, nemlig 0 (0-1%), 1 (2-25%), 2 (26-50%), 3 (51-75%), 4 ( 75%) og den nukleare farvningsintensitet ( NI) betegnes som 0 = negativ, 1 = mild, 2 = mellemliggende og 3 = stærk intensitet. En kombineret nuklear score (NS) i NFxNI, som havde et område fra 0 til 12, blev derefter konstrueret. Cytoplasmisk farvningsintensitet blev betegnet som 0 = negativ, 1 = mild og 2 = moderat-stærk, og den del af positive celler ikke taget i betragtning. Den farvning blev evalueret af to uafhængige observatører (KJ, SEO), som blev blindet til kliniske og outcome data.

endepunkter og statistiske metoder

Rbm3 udtryk (intensitet × fraktion) blev dikotomiseret i svag vs stærk hjælp klassifikation og regression træ (CRT) analyse [16]. Chi-square og Mann-Whitney U test blev anvendt til sammenligning mellem klinisk-patologiske karakteristika og Rbm3 udtryk. Behandlingssvigt blev defineret som tilbagefald efter behandling for metastatisk sygdom, tilbagefald for patienter i CS I, der modtager adjuverende kemoterapi, finde af aktiv cancer ved kirurgi indlæg kemoterapi eller død fra NSGCT. En kontralaterale tumor blev ikke anset et tilbagefald. Manglende overlevelse (FFS) blev defineret som tiden fra orkiektomi til behandlingssvigt eller på anden måde censureret endelig opfølgning (FU) eller død af andre årsager. Samlet overlevelse (OS) blev defineret som tiden fra orkiektomi ihjel fra alle årsager eller på anden måde censureret omsider FU. Cancer specifik overlevelse (CSS) blev defineret som tiden fra orkiektomi ihjel fra NSGCT eller behandling eller på anden måde censureret omsider FU eller død af andre årsager. Tid til tilbagefald blev defineret, for patienter sygdomsfrie, som tiden fra behandlingens afslutning for tilbagefald og censureret på sidste FU eller død af andre årsager. Overlevelse og kumulative incidens kurverne for de ovennævnte endepunkter blev estimeret ved anvendelse af Kaplan-Meier-metoden og log-rank tests blev anvendt til sammenligninger. Cox regression proportional hazards modeller blev anvendt til at estimere den relative risiko for svigt i både uni- og multivariabel analyse. En p-værdi på 0,05 blev betragtet som signifikant, og alle test var tosidet. Alle statistiske analyser blev udført ved hjælp af IBM SPSS Statistics-version 20.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Resultater

Patient karakteristika

i perioden 1. juli, 1995 og december 31, 2007 et samlet antal på 300 voksne patienter blev diagnosticeret med testikelkræft NSGCT i Sydsverige Health Region. I 219 patienter, var til rådighed i databasen SWENOTECA på tidspunktet for udtræk af data kliniske data

Tretten (6%) sager blev udelukket fra undersøgelsen.; fire patienter, der startede kemoterapi før orkiektomi, tre sager med forsvundne væv blokke og seks tilfælde med en utilstrækkelig mængde af væv til rådighed for analyse. Af de 206 patienter, der indgår, 118 (57%) havde klinisk fase 1 (CSI) sygdom og 88 (43%) metastatisk sygdom. Patientkarakteristika, terapi-relaterede data og overlevelsesdata er præsenteret i tabel 1. Hos patienter med metastatisk sygdom ved diagnosen (CSII-IV og kun (Mk +) forhøjet markør), blev 73% klassificeret som havende god prognose, 15% mellemliggende prognose og 12% dårlig prognose ifølge IGCCC. Medianen FU for overlevende patienter (

n = 193

) var 76 måneder (spændvidde 3-167). Det 5-års OS var 96,0% for alle patienter. Tretten patienter døde under opfølgningen, seks på grund af progressiv sygdom og to som følge af behandling. Fem patienter døde af andre årsager uden tegn på NSGCT. Der var 14 tilbagefald, seks i patienter med metastatisk sygdom i komplet remission efter kemoterapi og kirurgi (

n =

61, 69%), og otte patienter med CS I sygdom hvoraf tre efter adjuverende kemoterapi. Tyve patienter med CS Jeg sygdom havde behandlingssvigt, 14 med vital kræft i prøven efter operationen, fem tilbagefald og én døde på grund af progression af sygdommen. Tre patienter med CS I sygdom havde et tilbagefald efter adjuverende behandling hvoraf én senere døde i testikelkræft.

Rbm3 udtryk

Sample immunhistokemiske billeder er vist i figur 1.

Case 1-kolonne 1: atrofisk testis; kolonne 2-4: embryonal carcinoma med negativ Rbm3 ekspression (bemærk positive stromale lymfocytter). Case 2-kolonne 1: intratubulær kønsceller neoplasi (ITGCN); kolonne 2-4: embryonal carcinoma med 10% seminom (kolonne 2) med bedst score 12 og værste score 2. Sag 3-kolonne 1 normal testikel; kolonne 2-4: tumor med komponenter af embryonal carcinoma, umodne teratom og blommesækken tumor med bedste score 12 og værste score 8. Case 4-kolonne 1 normal testikel; kolonne 2-4: tumor med fremherskende seminomatous histologi (~ 80%) blandet med teratom (ikke repræsenteret i TMA), bedste score 12 og værste score 8.

Ved normal testikel blev Rbm3 udtrykt i svag til moderat intensitet i spermatogonier og negativ i spermatocytter. I intratubulær kønsceller neoplasi (ITGCN) blev Rbm3 udtrykt med stærk intensitet i langt de fleste af neoplastiske celler. I testikelkræft kønsceller tumor (TGCT) blev Rbm3 udtrykt i forskellige intensiteter og fraktioner, primært i kernen, men også i cytoplasmaet, med en særlig stærk til udtryk i seminomatous komponenter.

Fordelingen af ​​Rbm3 udtryk for betyde, højeste og laveste score er vist i fig 2. Der var en signifikant forskel i den gennemsnitlige score på Rbm3 ekspression mellem tumorer fra patienter i CS i og CS II-IV, Mk + i alle tre kategorier (fig 2D-2F). Den laveste score viste den bedste korrelation til klinisk-patologiske parametre (data ikke vist), og er derfor blevet anvendt i den følgende statistiske analyser CRT analyse foreslog en cutoff punkt ved NS 0.5 at bestemme den optimale prognostiske konsekvenser af Rbm3 udtryk på FFS og NS 2,5 for CSS (S1 Fig). Lav Rbm3 udtryk var forbundet med et betydeligt dårligere FFS [79,3% versus 90,4% (

s = 0

.

019

)] (Fig 3C og S2 Table) og CSS [87.5% versus 97,3 % (

s = 0

.

047

)] (S2 tabel). I hele kohorte, lav Rbm3 udtryk (NS = 0,5) blev observeret i 16 (7,8%) tilfælde, og der var en signifikant sammenhæng mellem klinisk fase (

s = 0

044

) og Rbm3 ekspression (tabel 2). Ingen signifikante associationer blev fundet mellem alder, CS I vs CS I og Rbm3 udtryk. Cytoplasmisk Rbm3 udtryk var ikke forbundet med nogen klinisk-patologiske faktorer.

(A) gennemsnitlig score, (B) højeste score og (C) laveste score. Rbm3 farvning fordeling i henhold til CS I og CS 1 på (D) gennemsnitlig score, (E) højeste score og (F) laveste score. Boxplots viser de fem statistik (minimum, første kvartil, median, tredje kvartil, og maksimum). P-værdier refererer til Mann Whitney U test til sammenligning af medianer.

(A) 118 patienter med klinisk fase 1, (B) 88 patienter med metastatisk sygdom og (C) 206 patienter med klinisk fase i-IV og Mk +.

Klinisk fase i

for patienter i CSI var der ingen signifikante associationer fundet mellem Rbm3 udtryk og resultat (fig 3A og S2 tabel).

Klinisk fase II-IV, Mk +

Der var en signifikant sammenhæng mellem Rbm3 udtryk og IGCCC (

s = 0

.

007

), kombineret tumormarkør status (

s = 0

.

001

), og med β-humant choriongonadotropin (HCG) niveau (

s = 0

.

010

) (tabel 2), men ikke med indhold af α-føtoprotein (AFP) (

s = 0

.

127

), laktat dehydrogenase (LDH) (

s = 0

.

088

) eller tilstedeværelsen af ​​ikke-pulmonal visceral metastase (NPVM) (

s = 0

.

148

). Den FFS var signifikant dårligere for sager med lav tumor-specifikke Rbm3 udtryk [59,3% mod 79,0% (

s = 0

.

013

)] (Fig 3B og S2 tabel). Med hensyn til CSS, denne forskel var ikke signifikant [88,9% mod 93,6% (

s = 0

.

618

)] (S2 tabel). I en multivariabel model; herunder tumormarkør niveau og tilstedeværelsen af ​​NPVM eller ej; denne risiko elevation forblev signifikant (HR = 4,35; 95% CI 1.28, 14,13), når tumormarkører blev analyseret som kontinuerte variable (tabel 3). Men når tumormarkører blev kategoriseret hjælp af cut-point i IGCCC, kun AFP-niveau forblev som en betydelig prognostisk markør. Når det kombineres med IGCCC grupper i en multivariat model blev Rbm3 udtryk ikke signifikant forbundet med større risiko for behandlingssvigt (HR = 2,62; 95% CI 0,67, 10,31). (Tabel 4)

Discussion

Vores resultater viser, at Rbm3 ekspression er opreguleret i testikelkræft carcinoma in situ (CIS) sammenlignet med normal testis og udtrykkes i forskellige fraktioner og intensiteter i TGCT, med den højeste ekspression i seminomatous komponenter. Hos patienter med metastatisk sygdom, reducerede Rbm3 ekspression korrelerede signifikant med den etablerede prognostiske værktøj (IGCCC), kombineret tumormarkør status og β-HCG niveau samt en betydeligt kortere tid til behandlingssvigt. Endvidere i en multivariabel Cox regressionsmodel, herunder de prognostiske faktorer, der anvendes i IGCCC model, lav Rbm3 udtryk var en uafhængig prædiktor for behandlingssvigt, når tumormarkører (AFP, HCG og LDH) blev opført som kontinuerte variable. Rbm3 har vist sig at være en prognostisk biomarkør i flere kræftformer, f.eks urotelial kræft [12], brystkræft [7], kolorektal cancer [10], prostatakræft [9], esophageal og gastrisk adenocarcinom [18] og ovariecancer [8]. Desuden har Rbm3 udtryk blevet påvist at korrelere med følsomhed over for cisplatin behandling i kræft i æggestokkene in vitro

[8]

. I nærværende serie, lav udtryk for Rbm3 var en prædiktor for øget risiko for behandlingssvigt hos patienter med metastatisk NSGCT, og man kunne hypotesen, at Rbm3 kan være en indikator for følsomhed over for cisplatin-baseret behandling også i denne type kræft. Men hvis Rbm3 kun var relateret til cisplatin følsomhed, man ville have forventet en højere risiko for tilbagefald hos patienter med CS1 og lav Rbm3, modtager adjuverende BEP, som ikke blev observeret.

En foreslået virkningsmekanisme for Rbm3 er, at det kan fremme tumorigenese i tidlige stadier af kræft ved at påvirke DDR (DNA beskadigelse reparation) og checkpoint integritet, og derved sænke tærsklen for udvælgelse af flere maligne kloner [8, 13] og når en invasiv tumor er etableret, høje niveauer af Rbm3 kan påvirke genomisk stabilitet og dermed kemoterapi følsomhed. I andre typer af tumorer, har vist sig Rbm3 ekspression at være opreguleret i preinvasive og cancerøse væv [9, 19, 20]. I den foreliggende undersøgelse, alle prøver taget fra in-situ komponenter viste høj Rbm3 udtryk. CIS har vist sig at være meget følsomme over for strålebehandling, der tilbyder endelige hærdning [5, 21, 22]. En mulig hypotese er, at i de fleste testikulære kimcelletumorer, DDR-systemet er stort set ikke aktiveret og intakt og derved kan bidrage til følsomhed over for kemoterapimidler som platin og til radioterapi. Langs denne linie, blev Rbm3 ekspression sig at være særlig høj i komponenter af seminomatous histologi, som er blandt de mest følsomme over strålebehandling [22]. Men som Rbm3 udtryk korreleret med tumor scene og HCG-niveau, Rbm3 kan også være relateret til hæmning af tumorvækst og formidling, gennem mekanismer stadig ukendte. er behov for yderligere funktionelle undersøgelser, og fra et klinisk perspektiv, ville det være interessant at undersøge Rbm3 udtryk i metastaser efter postchemotherapy kirurgi, hvor en lav Rbm3 udtryk indikerer reduceret cisplatin følsomhed.

IGCCC skelner mellem godt, mellemliggende og dårlig prognose patienter med metastaserende testikelkræft. Den er baseret på primære sted, tumormarkør niveau og tilstedeværelsen af ​​NPVM eller ej. Brugen af ​​denne klassifikation er at guide behandling beslutninger for den enkelte patient med den hensigt at optimere overlevelse og minimere toksicitet. Ofte er mellemrunder og dårlig risiko patienter samles sammen og behandles med lignende protokoller [23, 24]. Derfor er der et klart behov for nye biomarkører, for en mere præcis identifikation af de patienter, vinder fra mere intensiv behandling upfront, såsom dosis intensivering eller højdosis kemoterapi (HDCT) med stamcellestøtte. Vores data tyder på, at Rbm3 udtryk kan give yderligere prognostisk information med den for tumormarkør niveau og mønster af metastaser. Når det kombineres med den IGCCC i en multivariable model, Rbm3 undladt at tilføje væsentlig prognostisk information. Dette kan skyldes den kendsgerning, at plasma tumormarkørantigener niveauer (HCG, AFP og LDH) er kategoriske i IGCCC, og anvendes som kontinuerlige variabler i vores analyse. For optimal udnyttelse af Rbm3 i en prognostisk model, kan have brug for andre cut-off grænser for plasma tumormarkører, der skal anvendes.

Tilsammen vores resultater tyder på, at Rbm3 kan være en potentiel biomarkør for behandling lagdeling i patienter med metastatisk ikke-seminomatous kønsceller tumorer, og derfor fortjener yderligere validering.

Støtte Information

S1 fig. CRT-analyse

CRT analyse for (A) manglende overlevelse og (B) kræft-specifik overlevelse

doi:.. 10,1371 /journal.pone.0121300.s001

(TIF)

S1 Table. . IGCCCG prognostiske iscenesættelse systemet

International Kimcelle Cancer Collaborative Group prognostisk iscenesættelse system til metastatisk ikke-seminomatous kønsceller kræft

doi:. 10,1371 /journal.pone.0121300.s002

(DOCX)

S2 Tabel. 5-årige FFS og 5-års CSS ved patientkarakteristika og Rbm3 udtryk

doi:. 10,1371 /journal.pone.0121300.s003

(DOCX)

Tak

forfatterne vil gerne takke medlemmerne af SWENOTECA for at levere kliniske data.