Behandling af MCF 7CC12 celler med beholderen ABC transporter inhibitor

Vi interessant ikke opdage nogen doxorubicinol i MCF 7DOX2 12 celler eller deres metode, på trods af deres højere udtryk for AKR isoformer i cellerne. Tilsat doxorubicinol til celler kunne eventuelt ekstraheres og kvantificeres i mediet og i celler, hvilket indikerer, at det negative resultat ikke skyldes en fejl i teknik til at detektere doxorubicinol. Helbredelse af enten cellelinje med 5B cholansyre påvirkede ikke den intracellulære mængde af doxorubicinol eller niveauerne af doxorubicinol i medierne.

Behandling af Ivacaftor celler med containeren ABC transporter-hæmmer og 5B cholansyre cyclosporin En forbedret mobil doxorubicin oplysninger ved 800-FDA og 511-gangster, hhv. På den anden side, 5B cholansyre eller cyclosporin A dramatisk forøget doxorubicin indhold i MCF 7DOX2 12 celler med 2. 8 fold. Behandling af MCF 7DOX2 12 celler med både 5B cholansyre og cyclosporin En forbedret mobilt doxorubicin indhold til niveauer 4. 4 gange højere end ubehandlede celler. Vi teoretiseret, at doxorubicinol ikke lokalisere til kernerne i MCF 7CC12 og MCF 7DOX2 12 celler fordi hydroxylering af doxorubicin sænker dets affinitet for DNA.

For at teste denne spekulation, vi sammenlignede DNA bindende parametre for doxorubicin og doxorubicinol ansætte en bindende forskydning analyse beskrevet i Techniques. Både Bmax og Kapp var betydeligt forskellige mellem doxorubicin og doxorubicinol, hvilket antyder, at, på molær basis, doxorubicinol binder til DNA med en reduceret affinitet og kapacitet end doxorubicin, som vist i figur 7 og yderligere dokument 3: Tabel S3. Mikromatrice, high throughput kvantitativ PCR og andre gen profilering strategier har allerede været meget brug ved bestemmelse af variationer i genekspression mellem celler eller tumorer giver et svar på dem, der ikke og kemoterapeutiske stoffer.

Desværre, den falske opdagelse sats for sådanne metoder er meget høj, hovedsagelig på grund af påvisning af en mange passager gener relateret til narkotika respons. Et bredt udvalg af pathway analysemetoder findes lavet hovedsagelig gennem machine learning, og nogle til-dag, nogle manuelt Kurateret. Vanskeligheden med denne tilgang er den blotte størrelse af datasættene, det store antal dokumenterede veje, og de komplekse statistikker til at bestemme betydningen af ​​fund.

I dette studie valgt vi at bruge en simpel model til undersøge biologi doxorubicin modstand, nemlig på udkig efter overrepræsentation af doxorubicin farmakokinetiske og farmakodynamiske gener i datasæt af gener har ændret udtryk i doxorubicin modstand.