PLoS ONE: Primær Screening for livmoderhalskræft Baseret på High-Risk humant papillomvirus (HPV) Detection og HPV 16 og HPV 18 Genotypebestemmelse, i Sammenligning med Cytologi

Abstrakt

Mål

Formålet med dette studie er at vurdere resultaterne af en høj-risiko humant papillomvirus (HR-HPV) DNA-test med individuel HPV-16 /HPV 18 genotypebestemmelse som en metode til primær screening for livmoderhalskræft sammenlignet med væske-baserede cytologi (LBC) i en population af græske kvinder, der deltager i rutinemæssig screening for livmoderhalskræft.

Metoder

undersøgelsen, foretaget med “Hellenic Virkelige liv multicentrisk cervixscreening” (HERMES) studiegruppe, involveret rekrutteringen af ​​4.009 kvinder i alderen 25-55, som deltog i rutinemæssig cervikal screening på ni Gynækologi afdelinger i Grækenland. Ved første besøg cervikale prøver blev indsamlet til LBC og HPV testning ved hjælp af Roche Cobas 4800 system. Kvinder fundet positive for enten cytologi eller HPV blev henvist til colposcopy, mens kvinder er negative for begge prøver vil blive testet igen efter tre år. Undersøgelsen er i gang, og resultaterne af den første screeningsrunde er rapporteret heri.

Resultater

Gyldige resultater for cytologi og HPV testning blev opnået for 3.993 kvinder. Den samlede forekomst af HR-HPV var 12,7%, af HPV-16 2,7% og af HPV-18 1,4%. Af dem, der henvises til kolposkopi, blev cervikal intraepithelial neoplasi grad 2 eller værre (CIN2 +) påvist i 41 kvinder (1,07%). På tærsklen til CIN2 +, cytologi [atypiske planocellulære celler af ubestemt signifikans (ASC-US) eller værre] og HPV test viste en følsomhed på 53,7% og 100% henholdsvis uden ændringer mellem aldersgrupper. Cytologi og HPV test viste specificitet 96,8% og 90,3% henholdsvis, som blev forøget hos ældre kvinder (≥30) i forhold til yngre (25-29). Genotypning for HPV16 /18 havde samme nøjagtighed til cytologi til påvisning af CIN2 + (følsomhed: 58,5%; specificitet 97,5%) samt for triage til kolposkopi (følsomhed: 58,5% vs. 53,7% for cytologi).

Konklusion

HPV test har meget bedre følsomhed end cytologi at identificere high-grade cervikal læsioner med lidt lavere specificitet. HPV test med individuelle HPV-16 /HPV-18 genotypebestemmelse kunne repræsentere en mere nøjagtig metode til primær screening for livmoderhalskræft i sammenligning med væskebaseret cytologi, især i ældre kvinder

Henvisning:. Agorastos T, Chatzistamatiou K, Katsamagkas T, Koliopoulos G, Daponte A, Constantinidis T, et al. (2015) Primær Screening for livmoderhalskræft Baseret på High-Risk humant papillomvirus (HPV) Detection og HPV 16 og HPV 18 Genotypebestemmelse, i Sammenligning med cytologi. PLoS ONE 10 (3): e0119755. doi: 10,1371 /journal.pone.0119755

Academic Redaktør: Xuefeng Liu, Georgetown University, UNITED STATES

Modtaget: September 20, 2014 Accepteret: 15 januar 2015; Udgivet: 20 Marts 2015

Copyright: © 2015 Agorastos et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden papiret

Finansiering:. de cobas HPV testkit og forbrugsstoffer til denne undersøgelse blev leveret af Roche Diagnostics (https://molecular.roche.com). Der var ingen andre finansieringskilder eller kilder til støtte. Alt det nødvendige arbejde for undersøgelse udført af læger, jordemødre og teknikere blev stiftet i deres rutine daglige praksis. Ingen yderligere omkostninger skulle dækkes. Roche Diagnostics spillet nogen rolle i udformningen af ​​undersøgelsen, valg af inkluderede patienter, gennemgang og fortolkning af data, eller forberedelse eller godkendelse af manuskript

Konkurrerende interesser:. Forfatterne har læst tidsskriftets politik og forfatterne af denne manuskript har følgende konkurrerende interesser: KC og TK havde deres rejseudgifter og gebyrer for to Kongresser (EUROGIN 2012 og EUROGIN 2013) er omfattet af Roche Diagnostics. GK, AD, TC og TCC har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser. TA har udført videnskabelige forsøg delvist støttet af Vianex /Sanofi Pasteur MSD og har haft rejseudgifter til konferencer /møder /symposier lejlighedsvis følgebrev omfattet af enten Vianex /Sanofi Pasteur MSD, GlaxoSmithKline og Roche Diagnostics. Dette ændrer ikke forfatternes overholdelse PLoS ONE politikker om datadeling og materialer. Alle forfatterne erklærer ingen konkurrerende interesser knyttet til den forretningsmæssige bidragyder, Roche Diagnostics, vedrørende beskæftigelse, rådgivning, patenter, produkter i udvikling, markedsførte produkter osv

Introduktion

Udbredt screening af kvinder med Papanicolaou testen har ført til et betydeligt fald i forekomst og dødelighed som følge af livmoderhalskræft i lande, hvor det er blevet systematisk implementeret [1,2]. Imidlertid har livmoderhalskræft screening programmer baseret på cytologi givet markant dårligere resultater i lande, hvor screening ikke blev gennemført systematisk, især i udviklingslandene (https://globocan.iarc.fr/Pages/fact_sheets_cancer.aspx). Lav dækning og dårlig patient compliance, subjektiv fortolkning af resultater, sammenholdt med forhold vedrørende folkesundheden og juridiske spørgsmål, er nogle af de mulige årsager til de deklasserede resultater, der er konstateret i cytologi-baseret screening [3].

Under den seneste årtier er opnået enighed om den direkte sammenhæng mellem HPV-infektion og cervikal carcinogenese [4,5], og det er påvist, at HPV-infektion er en nødvendig forudsætning for udviklingen af ​​præ-invasive og invasive livmoderhalskræft [ ,,,0],6,7]. I øjeblikket mere end 200 HPV-typer er blevet identificeret, og dem, inficere livmoderhalsen er blevet kategoriseret efter deres onkogene potentiale som høj risiko (HR), (dvs.) med tilstrækkelige beviser til at årsagerne til livmoderhalskræft (16 – den mest potente form – , 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, og 59), mulig høj-risiko, (dvs.) med begrænset evidens for årsagssammenhæng af livmoderhalskræft (26, 53, 66, 67 , 68, 70, 73, 82), og ikke klassificeres som deres kræftfremkaldende for mennesker (6, 11) [8].

som opdages HR-HPV-typer i mere end 99% af invasive kræfttilfælde og i langt de fleste af high-grade præ-invasive tilfælde kan HPV detektering være et rimeligt alternativ som screeningtest til påvisning af forstadielæsioner som ville fremskridt til kræft, hvis de ikke behandles. Faktisk er påvisningen af ​​HR-HPV-typer anses i dag, af mange, som en bedre metode til screening end cytologi [9-15].

Flere undersøgelser har vist, at HPV-screening er mere følsomt i afsløring af high-grade transformative læsioner og kræft end Papanicolaou testen [16-20], såvel som til at forebygge dødeligheden af ​​denne sygdom [15,21]. Derudover et negativt resultat i HPV-testen giver mulighed for en større tidsinterval, inden repeat screening bliver nødvendigt i forhold til en normal Papanicolaou testresultat, der giver mulighed for mindre hyppig testning og forøget patientefterlevelse med screeningsprogrammer [14,22,23].

den største ulempe ved HPV-testen som en primær screening teknik er den relativt høje forekomst af falske positive tilfælde (lav specificitet). Dette skyldes, at størstedelen af ​​HR-HPV infektioner er forbigående og vil ikke resultere i sygdomme, især blandt yngre kvinder. Risikoen for at dette sker afhænger dels af den specifikke HPV-type [24-26], men også på den genetiske [27] og /eller miljømæssige faktorer, såsom tobaksrygning [28].

Derfor, forbedring af udførelse af systematisk screening for livmoderhalskræft, der oprindeligt baseret på HPV test afhænger gennemførelsen af ​​sekundære triage teknikker, som, inden for gruppen af ​​HPV-positive kvinder, vil identificere, at undergruppe af kvinder med en særlig høj risiko for at udvikle præ- invasive eller invasive læsioner. En af de modeller, der er blevet foreslået, er identifikationen af ​​HPV-typen. Kvinder inficeret med HPV 16 og /eller HPV 18 er mere tilbøjelige til at udvikle mellemliggende CIN (CIN2) eller værre læsioner end inficeret med andre højrisiko-genotyper [29] kvinder. Ifølge den store Portland Kaiser Kohorte studie, den 10-årige kumulative sandsynlighed for læsioner CIN3 eller værre var 17,2% for HPV16 + kvinder og 13,6% for HPV 18 + kvinder, men kun 3,0% for kvinder er positive for høj risiko HPV, men negative for HPV 16 eller HPV18 [24]. Lignende resultater blev rapporteret for 16-årige kumulative sandsynlighed for den samme kohorte [30].

Endelig før gennemførelsen af ​​HPV test som et vigtigt værktøj i et lands screeningsprogram, den særlige metode, der anvendes til påvisning af HPV-DNA bør testes i landets indstilling, som ydeevne ikke kan være ens mellem test og lande. Faktisk en meta-analyse har vist, at der er betydelig heterogenitet mellem studier afhængig af både den geografiske placering af undersøgelsen og den type HPV-test anvendt [31]. Baseret på dette, de “HERMES” (Hellenic Virkelige liv multicentrisk cervixscreening) studiegruppen har udført den nuværende multicentrisk undersøgelse inden for rammerne af generelle befolkning forebyggende screening livmoderhalskræft i Grækenland, der har som primær målsætning at undersøge effektiviteten og nøjagtigheden af cobas HPV-test (Roche Molecular Systems, Pleasanton, CA, USA) som en primær teknik i forhold til den etablerede cytologiske metode. Det sekundære mål var formuleringen og evaluering af forskellige triage algoritmer efter to runder af screening. Her resultaterne fra den første runde af screening præsenteres.

Dette er den eneste multicentrisk undersøgelse, der vurderer udførelsen af ​​en amerikanske Food and Drug Administration (FDA) godkendte HPV-test i forskellige universitetshospitaler Offentlige Hospitaler og familie centre i Grækenland.

Materialer og Metoder

studiepopulation

Kvinder i alderen 25-55 deltog rutinemæssig cervikal screening på ambulatorier på ni Gynækologi Afdelinger (2 i Athen, 4 i Thessaloniki, en i Larissa, 1 i Patras og 1 i Alexandroupolis) blev bedt om at blive optaget i undersøgelsen. Eksklusionskriterier var nuværende graviditet, nuværende eller tidligere historie af CIN i de seneste fem år, opfølgning for cytologiske abnormiteter og hysterektomi.

Studie design

Fra april 2011 til september 2013 kvinder deltager regelmæssig forebyggende livmoderhalskræft screening procedurer blev informeret om undersøgelsen rationale og formål og bedt om at give skriftligt informeret samtykke. Ved hvert besøg (screeningsrunde) prøver blev indsamlet til indledende cytologisk vurdering. Efter at en portion af den tilbageværende prøve blev anvendt for HPV DNA-test.

Rutediagrammet af undersøgelsen design er vist i fig. 1. Undersøgelsen design præciseres det, at kvinder med negative HPV DNA test og cytologi resultater vil blive testet igen 3 år efter det første besøg. Kvinder fundet positive enten for cytologi (ASCUS eller værre) eller HPV DNA-test (14 hr HPV positiv) undergår kolposkopi undersøgelse i hvert OB /GYN Department involveret. Ved tilstedeværelsen af ​​abnorme colposcopic fund, flere fokale biopsier og /eller endocervikale curettage (ECC) bør træffes. Hvis der ikke var unormale colposcopic fund kvinderne vil blive genindkaldt til HPV DNA-test og cytologi undersøgelse et år efter den første test. På tidspunktet for det andet besøg, hvis HPV DNA-test og cytologi er negative, vil kvinder testes igen 3 år efter det andet besøg, hvorimod hvis nogen af ​​disse test er positiv, vil colposcopy /biopsi udføres.

Dette artikel præsenterer resultaterne af den første screeningsrunde (tværsnit fase) af en langsgående screeningstest nøjagtighed undersøgelse.

Cytologi Testing

prøver blev indsamlet ved hjælp af specielt designet trefork-formede cervex Brush (Rovers Medical Devices, BV Oss, Holland) ifølge producentens instruktioner. Børsten blev roteret fem gange med uret udtagning af en prøve fra den ydre og indre livmoderhalsen og cervikale kupler. Efter prøvetagning blev kost-typen sampling enhed direkte nedsænket i samlingen væske (ThinPrep, Hologic, Bedford, MA, USA). Hætteglasset blev hermetisk forseglet, og et fortrykt stregkode tag blev fastgjort til prøven identifikation. En fraktion blev anvendt til cytologi undersøgelse, mens resten blev transporteret inden for to uger til laboratoriet, hvor HPV DNA-test blev udført.

Cytologi smøre undersøgelse blev udført på de tilsvarende cytologi laboratorier sygehusene medvirkede i undersøgelsen som sædvanlig praksis. De cytologists var ikke klar over de HPV DNA testresultater, var heller ikke molekylærbiologer i cytologi resultater. Klassificering af cytologi resultater blev udført i overensstemmelse med direktivet Bethesda 2001 [32]. Positive resultater, derfor opfylder kriterierne for kolposkopi henvisning, blev anset som de er klassificeret som ASCUS eller værre (ASCUS +).

HPV DNA-test

Efter cytologi, en portion af den indsamlede prøve blev transporteret inden to uger under en kontrolleret temperatur miljø på 2-30 ° C til Laboratoriet for hygiejne og miljøbeskyttelse /Laboratoriet for Mikrobiologi af Demokrit Universitet Thrakien i Alexandroupolis, hvor HPV DNA-test blev udført. De indsamlede prøver blev analyseret til påvisning af genomet af 14 højrisiko Human Papilloma Virus (HPV DNA-test) og for individuel identifikation af HPV 16/18, ved hjælp af cobas HPV-test af Roche.

cobas 4800 HPV PCR Master mix omfatter primere og fluorescens-mærkede prober til påvisning af DNA fra 14 høj-risiko (HR) HPV-typer (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 og 68) og human beta-globin, der fungerer som et mål for menneskelig cellularitet i prøven. Specifikt cobas HPV testen anvender primere, der amplificerer en region på ca. 200 basepar i L1 polymorfe område af HPV-genomet. Det fluorescerende signal fra tolv HR typer af HPV (12HR HPV) (31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 og 68) påvises ved anvendelse af den samme fluorescerende mærke, mens HPV 16 , HPV 18 og beta-globin-signaler detekteres med tre separate spektralt unikke fluorescerende mærker, hhv. De forskellige individuelle bølgelængder kendetegner hver etiket mulighed for samtidig genotypning af HPV 16 og HPV 18 amplikon adskilt fra de tolv andre HR-typer.

Kolposkopi og histologisk undersøgelse

Ifølge undersøgelsen design, kvinder fundet positive enten til cytologi eller HPV DNA-test undergik colposcopy i hver OB /GYN Institut involveret, af en erfaren specialist. Desuden blev 106 tilfældigt udvalgte kvinder med normale cytologi resultater og en negativ HPV DNA-test, der er nævnt for colposcopy (2,6% af det samlede antal patienter, der tager del i det første screeningsrunde). Ved tilstedeværelsen af ​​unormalt eller mistænkelige til invasion colposcopic fund -ASSIST kolposkopi Code 1-3 [33] svarende til 2011 colposcopic terminologi Internationale Føderation for Livmoderhalskræft Patologi og Kolposkopi [34] -, flere fokale biopsier og /eller ECC blev taget fra den unormale område af livmoderhalsen. ECC blev udført i tilfælde af usynlige transformation zone. Hvis biopsi /ECC resultater var normale, blev kvinderne mindede for HPV DNA-test og cytologi eksamen efter et år. Hvis biopsi afslørede CIN1 læsioner, kvinderne fornyet overvejelse efter 6 måneder. I tilfælde biopsi viste CIN2 eller værre (CIN2 +) læsioner blev patienterne straks henvist til behandling. Det primære endpoint i studiet var den histologiske diagnose af CIN2 eller værre, og som nævnt, blev disse kvinder tilbydes behandling og forlod studiet. Efter behandlingen, når to forskellige histopatologi resultater var opnået [dvs. fra biopsier /ECC og fra den store loop udskæring af omdannelsen zone (LLETZ) eller conisation], jo mere alvorlig af de to resultater blev betragtet som endelig diagnose. Histologi undersøgelse blev gennemført i hver af de samarbejdende sygehuse, og patologer var klar over cytologi og kolposkopi resultat, men ikke af HPV-DNA-test resultat. Patologiske fund (CIN af enhver grad) blev uafhængigt igen vurderet af en uafhængig specialiseret patolog. Hvis der var enighed i diagnosticering, enhederne blev ikke fornyet overvejelse. Hvis enighed ikke blev nået efter den anden undersøgelse, en tredje uafhængig specialiseret patolog undersøgte prøven pågældende, så i slutningen en to ud af tre beslutning blev taget.

Statistisk analyse

Målet af screening er påvisning af læsioner CIN2 eller værre. For 80% statistisk gyldighed og et statistisk signifikansniveau på p = 0,05, er 44 tilfælde af CIN2 + påkrævet for at detektere pålideligt en stigning i følsomhed fra 75% til 96%. Ved hjælp af en beregnet prævalens på 1,1% for CIN2 + [19,35], vil det nødvendige antal kvinder være ca. 4.000 pr screeningsrunde.

Følgende diagnostiske nøjagtighed indeks med 95% konfidensintervaller (CI) blev beregnet for LBC og HPV test: Sensitivitet, specificitet, positiv prædiktiv værdi (PPV), negativ prædiktiv værdi (NPV), positiv sandsynlighed ratio (PLR) og negative sandsynlighed ratio (NLR). For LBC to positivitet tærskler blev undersøgt (ASCUS + og LSIL +). Fra HPV testresultater nøjagtighedskravene indekser for positivitet for 14 typer, af positivitet for type 16 18 og type 16 kun blev beregnet. Nøjagtighedskravene indekser for kombinationen af ​​positiv LBC (ASCUS +, LSIL + eller HSIL +) og HPV 16 kun og HPV16 eller HPV 18 positivitet blev også beregnet. Bortset fra de relative værdier af disse variabler, blev kontrollen af ​​de absolutte specificitet og sensitivitet værdier bekræftes af tilfældig colposcopy på 2,6% af de involverede i undersøgelsen kvinder, uanset deres screening resultater.

Alle analyser blev udført for hele studiepopulation den og separat for kvinder 25-29 år og for kvinder 30 år eller derover, samt for kvinder i forskellige aldersgrupper. Dette blev gjort for at vurdere forskelle i diagnostisk nøjagtighed hovedsagelig til HPV test i ældre versus yngre kvinder. De diagnostiske nøjagtighed indeks mellem tests blev sammenlignet på grundlag af kumulation af deres konfidensintervaller 95% og med McNemar test. Relative risici for husly CIN2 + blev beregnet for HPV-test og cytologi status ved hjælp firedobbelte tabeller [36,37]. Alle analyser blev udført med SPSS 22,0 statistisk software (IBM Co., New York, USA).

Etik erklæring

Undersøgelsen protokol Den blev godkendt af Etisk Komité Aristoteles-universitetet i Thessaloniki . (Protokol nummer A13719 /31.08.2010). Vores metode indebærer indsamling af data fra anonyme samtykkende kvinder. En patient datablad udfyldes af lægen /jordemoder for hver kvinde tilmeldt. Dette ark er ledsaget af en patient oplysningsskema, som enhver kvinde læser og skilte giver hende skriftligt informeret samtykke. En unik stregkode derefter tildelt hver deltager, der ledsager hendes prøve. Hvis kvinden vælger ikke at deltage deres møde detaljer ikke registreres. Efterforskerne bliver bedt om ikke at give skriftligt samtykke til forskningen krop, da dette forhindrer rekrutteret kvinder i at forblive anonym.

Resultater

De samarbejdende centre rekrutteret 4.009 kvinder, der opfyldte kriterierne for støtteberettigelse. Den gennemsnitlige alder af kvinderne var 39,9 år (standardafvigelse 9,01), og langt de fleste af dem var hvide kvinder i den fødedygtige alder. Ca. 80% af kvinderne var over 30 år, og 13,8% var postmenopausale. De fleste af kvinderne (90%) havde gennemgået cervikal cytologi screening i de seneste 5 år, og 77% af dem var rygere. Kun 4% af kvinderne angav at have påbegyndt vaccination mod HPV, som var forventet, da HPV-vaccination blev implementeret i Grækenland i 2008 og blev gratis for kvinder op til en alder af 26. Det komplette demografiske samt kliniske karakteristika studiepopulation er vist i tabel 1.

af de 4009 kvinder, 16 blev udelukket enten fordi de ikke har en LBC eller en HPV-test udført. Af de resterende 3.993 kvinder, 604 blev henvist til kolposkopi på grundlag af en unormal cytologi (ASCUS eller værre, N = 210) eller på grund af 14 timer HPV positivt resultat med negative for intraepitel læsioner eller malignitet (NILM) cytologi (N = 394) . Men på grund af forskellige årsager (ikke-tilgængelighed, indvandring, uvilje) colposcopy blev ikke udført på 150 kvinder, så den endelige analyse omfattede 454 kvinder, som undergik kolposkopi. Desuden 106 (2,6%) kvinder med NILM cytologi, der testede HR-HPV negative blev randomiseret til at gennemgå colposcopy at justere for verifikation bias. I 93,4% (99/106) af disse kvinder var de colposcopical resultater inden for normale grænser [33]. For de resterende 7 kvinder med unormal colposcopic indtryk, de biopsier udførte viste kun i ét tilfælde en lav kvalitet intraepithelial læsion (CIN1), (dvs.) ingen CIN2 eller værre læsion blev savnet af enten HPV DNA-test eller cytologi.

de udelukkelser /ikke-attenders og resultaterne efter første screeningsrunde er angivet i stard [38] (standarder for Indberetning af diagnostisk nøjagtighed) flowchart, der er vist i fig. 2. Af den medfølgende endelig 3.993 kvinder, der havde begge tests, LBC resultaterne var NILM i 3.783 (94,7%), ASCUS i 118 (2,9%), LSIL i 77 (1,9%) og HSIL eller ASC-H i 15 (0,4 %). De HPV testresultater var positive i 507 kvinder ud af 3993 (12,7%), hvoraf 109 (2,7%) var positive for HPV 16 og 55 (1,4%) for HPV 18. Der var 41 tilfælde af CIN2 eller værre endelig diagnosticeret ved histologi (27 CIN2 og 14 CIN3). Forekomsten af ​​CIN2 + var 1,07%. Den endelige diagnose stratificeret ved screening testresultat er givet i tabel 2.

Blandt de 3.783 kvinder med NILM cytologi forekomsten af ​​14 timer HPV-infektion var 10,4% og prævalensen af ​​HPV 16, 18 og de andre 12HR HPV-typer var 1,3, 0,6 og 7,3% henholdsvis vises i alle aldersgrupper en faldende tendens med stigende alder, som en indirekte tegn på forbigående HPV-infektion (tabel 3). For så vidt angår gruppe kvinder med positiv cytologi (ASCUS eller værre) er bekymret, HPV prævalens den var 53,6, 36,2, 6,2 og 1,9% for nogen af ​​14 højrisiko typer de, for de 12 højrisiko-HPV-typer, for HPV 16 og HPV 18 (tabel 3). I denne gruppe af kvinder et fald i forekomsten af ​​de respektive HPV-typer skal først bemærkes efter det fyldte 39 år-med undtagelse af HPV 18 -, en indirekte tegn på HPV-infektion persistensen, som en sandsynlig årsag til den abnorme cytologi.

Absolut risiko for CIN2 eller værre ved HPV testresultat

Kvinder positive for HPV-DNA med normal cytologi havde en øget risiko for husly CIN2 eller værre. Den samlede anslåede absolutte risiko for CIN 2 eller værre i NILM kvinder, der var positive for HPV, varierede fra 3,1 (95% CI 1,4-6,5) for 12 HR HPV positivitet til 15,0 (95% CI 7,5-27,1) hos kvinder, der var positive for HPV 16 (tabel 4). Disse kvinder som forventet havde den højeste risiko, efterfulgt af kvinder er positive for HPV 16 eller 18 [13,8 (95% CI 7,6-23,2)] og kvinder er positive for HPV 18 kun [12,9 (95% CI 4,2-30,8)]. Den samlede risiko for 14 HR HPV positivitet præsenteret en svag stigning, som kvinder blev ældre. Dette var også tilfældet for undergruppen af ​​HPV 16 eller 18 positive kvinder såvel som for de 12 HR HPV positive kvinder. Vedrørende kun HPV 16, forøgelse af risikoen for udvikling af CIN2 eller værre set hos kvinder mellem 30-39 år sammenlignet med kvinder 25-29 blev efterfulgt af et fald for kvinder 40 år eller ældre.

Hvad angår kvinder med abnorm cytologi resultere en lignende tendens for effekten af ​​HR-HPV positivitet på risikoen for at udvikle CIN2 + overholdes. Det vil sige, den samlede absolutte risiko for CIN2 + for kvinder med ASCUS eller værre cytologi varierede fra 15,6 (95% CI 8,1-27,3) til 45,4 (95% CI 18,1-75,4) for kvinder er positive for 12 HR HPV og for HPV 18. Kvinder er positive for HPV 16 viste en højere risiko med stigende alder (tabel 4).

Relativ risiko for CIN2 eller værre ved HPV testresultat

Positivitet for en bestemt type HPV spiller en vigtig rolle på risikoen for at udvikle cervikal abnormiteter. Den relative risiko for CIN 2 eller værre ved HPV-status hos kvinder i alderen 25-29 år eller ≥30 år med NILM samt med unormal (ASCUS eller værre) cytologi findes i tabel 5. Den ikke-eksistensen af ​​falsk-negative 14 hr HPV resultater gør beregningen af ​​den relative risiko for forskellige HPV + resultater sammenlignet med 14 timer HPV negative resultater umulig. den relative risiko for CIN 2 eller værre var imidlertid højest i cytologisk normale kvinder fundet at være HPV16 positivt sammenlignet med HPV16-negative kvinder i begge aldersgrupper. I gruppen af ​​kvinder med NILM cytologi, men også blandt kvinder med unormal cytologi (ASCUS eller værre), denne risiko var lidt større i ældre sammenlignet med yngre kvinder [NILM: RR: 47,5 (95% CI 16,2 til 139,0) vs 32,7 ( 95% CI 6,2 til 172,7) og ASCUS eller værre: 5,8 (95% CI 2,2-15,1) vs 1,2 (95% CI 0,3-5,1) henholdsvis]. I modsætning hertil HPV18-relaterede risiko for CIN2 + mellem disse to aldersgrupper af kvinder var næsten ens og desuden blandt unge kvinder med abnorm cytologi det var større end HPV16-relaterede [7,0 (95% CI 2,4-20,5) vs 1,2 (95% CI 0,3-5,1)].

test ydeevne

udførelsen af ​​hver test eller kombination af tests blev vurderet ved beregning af sensitivitet, specificitet, positiv og negativ likelihood ratio, og positive og negative prædiktive værdi. Denne analyse blev udført for hele studiepopulationen for tærsklen sygdom CIN2 + eller CIN3 + samt for kvinder 25-29 år og ≥30 år separat for tærsklen sygdom CIN2 + kun.

Alle tilfælde af CIN2 + var positive for cobas HPV-test, derfor på tærsklen til CIN2 + HPV test havde en følsomhed på 100% (95% CI 91,4% -100,0%), hvilket var højere end følsomheden af ​​cytologi [ASCUS +: 53,7% (95% CI 37,4% – 69,3%)] til en statistisk signifikant grad (

P

0,05). Følsomheden forskel (ASCUS + cytologi-14 hr HPV test) var -0,46 (95% CI: -0.61–0.30). I modsætning hertil specificitet cytologi [ASCUS eller værre: 96,8% (95% CI 96,2% -97,4%), LSIL eller værre: 98,8% (95% CI 98,4% -99,1%)] var signifikant højere end specificiteten af ​​HPV test [90,3% (95% CI 89,3% -91,2%)] (

P

0,05). Specificiteten forskel (ASCUS + cytologi-14 hr HPV test) var 0,07 (95% CI: 0,06-0,08). Testning for type 16 18 kun havde lignende diagnostiske nøjagtighed indekser til cytologi. Positivitet for kombinationen af ​​de to tests (co-afprøvning), der er positivitet til enten ASCUS + eller 14 hr HPV testning, resulterede i reduceret specificitet (tabel 6).

På tærsklen til CIN3 + HPV test havde en følsomhed på 100% (95% CI 76,8% -100,0%), hvilket var højere end følsomheden af ​​cytologi [ASCUS +: 64,3% (95% CI 35,1% -87,2%)] men forskellen nåede ikke statistisk signifikans. Følsomheden forskel (ASCUS + cytologi-14 hr HPV test) var -0,36 (95% CI: -0.61–0.07). I modsætning hertil specificitet cytologi [ASCUS +: 96,5% (95% CI 95,9% -97,1%), LSIL +: 98,6% (95% CI 98,2% -98,9%)] var signifikant højere end specificiteten af ​​HPV test [89,7% (95% CI 88,7% -90,6%)] (

P

0,05). Specificiteten forskel (ASCUS + cytologi-14 hr HPV test) var 0,07 (95% CI: 0,06-0,08). Test for type 16 kun havde lignende diagnostiske nøjagtighed indekser til cytologi. Testning for type 16 18 havde kun mindst samme nøjagtighed sammenlignet med cytologi for CIN3 + men ikke i en statistisk signifikant grad. Kombinationen af ​​de to tests (co-test) resulterede igen i reduceret specificitet (tabel 6).

Med undtagelse af 14 timer HPV test, som har en følsomhed på 100% i begge tilfælde, at ændre grænsen fra CIN2 + til CIN3 + har ført til en stigning i følsomhed og NPV for alle undersøgte prøver. Den største stigning i sensitivitet, fra 58,5% (95% CI 42,1% -73,7%) til 78,6% (95% CI 49,2% -95,3%), blev noteret for HPV 16 eller 18 positivitet. PLR var let øget, hvis tærsklen var CIN3 + for alle test bortset fra positivitet for 14 hr HPV-typer, og NLR samt PPV faldet markant. Sammenligning af den diagnostiske nøjagtighed cobas HPV-test til cytologi med McNemar test afslørede en statistisk signifikant forskel (

P

0,0001).

Tilføjelsen af ​​HPV test resulterede i 188% mere colposcopy henvisninger end cytologi alene (210 tilfælde med ASCUS + vs 604 tilfælde med ASCUS + og /eller 14 hr HPV positive), men også i 86% flere tilfælde af CIN2 + opdaget (22 tilfælde med ASCUS + vs 41 tilfælde med ASCUS + og /eller 14 hr HPV positiv) . Antallet af colposcopies nødvendige for at detektere en CIN2 + efter en positiv cytologi eller positiv 14 hr HPV test eller begge (co-test) var 11,1 [41 CIN2 + påvises efter udførelsen af ​​454 colposcopies (454/41)], mens det respektive antal for 14 timer HPV test alene var 10,0 (409/41) og for cytologi (ASCUS +) alene var 6,4 (141/22).

HPV-infektion i almindelighed, og især asymptomatiske eller forbigående HPV-infektioner er mere almindelige i yngre aldersgrupper sammenlignede til ældre, mens det modsatte er tilfældet for forekomsten af ​​high-grade cervikal læsioner (CIN2 eller værre) [39,40]. Derfor blev to separate analyser udført vedrørende test nøjagtighed indekser til påvisning af CIN2 eller værre læsioner. Den første analyse involveret kvinder den 25.-29 og den anden kvinder 30 til 55 år (tabel 6). Generelt betyder følsomheden af ​​enten HPV DNA-test eller cytologi ikke vise en statistisk signifikant ændring mellem yngre og ældre kvinder, mens der observeres det modsatte for specificitet, som steg for alle tests udført hos ældre kvinder. Specificiteten af ​​cobas HPV-test var signifikant højere i gruppen af ​​kvinder ≥30 år sammenlignet med yngre kvinder [92,5% (95% CI 91,6% -93,4%) vs 79,1% (95% CI 75,7% -82,2%)], men fortsat væsentligt lavere end cytologi [97,7% (95% CI 97.1% -98,1%)]. Som forventet blev en statistisk signifikant stigning i PLR bemærket i ældre kvinder vedrørende samtlige tests. Det er bemærkelsesværdigt, at med hensyn PLR Den svage overlegenhed af HPV 16/18 påvisning sammenlignet med positiv cytologi (ASCUS +) bliver mere udtalt hos ældre kvinder. Ændring af udbrud af screeningen fra 25 til 30 år, påvirker ikke følsomhed af de forskellige prøver, men det er interessant, at begge er specificitet og offentligt udlån af HPV test (14 hr HPV) signifikant forøget [90,3% (95% CI 89,3% -91,2%) versus 92,5% (95% CI 91,6% -93,4%) og 10,3 (95% CI 9,4-11,4) vs 13,4 (95% CI 11,8-15,1) henholdsvis]. Vedrørende cytologi en stigning af disse to nøjagtighed indeks blev også bemærket, dog ikke til en statistisk signifikant grad.

Endelig Tabel 7 opsummerer følsomhed, PPV, RR og LR for forskellige kombinationer af HPV 16/18 gentype- og LBC som fremgangsmåder til triage til kolposkopi af HPV-positive kvinder til påvisning af CIN2 eller værre.