PLoS ONE: metastaser Suppressor, N-myc nedreguleret Gene 1 (NDRG1), Er prognostisk biomarkør for human Kolorektal Cancer

Abstrakte

Metastase fortsat at være en af ​​de mest udbredte årsager, der fører til dårlig overlevelse kolorektal cancer (CRC) patienter på lang sigt. De kliniske betydninger af tumor metastatisk suppressor, N-myc nedreguleret gen 1 (NDRG1), er blevet inkonsistent rapporteret i mange forskellige cancersygdomme. I denne undersøgelse med 240 CRC kliniske prøver, viste vi, at NDRG1 ekspression blev signifikant reduceret i de fleste af CRC væv sammenlignet med de parrede ikke-tumor modstykker. Statistisk analyse viste en signifikant omvendt korrelation af NDRG1 udtryk med tumor fase, differentiering status og metastase. Sammenlignet med NDRG1-negative gruppe, NDRG1-positve gruppe havde bedre sygdomsfri /samlet overlevelse (

s

= 0,000) mere end 5 års opfølgning. Endvidere blev NDRG1 anset for at være en uafhængig prognostisk faktor for samlet overlevelse (

s

= 0,001) og tilbagefald (

s

= 0,003). Vores undersøgelse konkluderer, at NDRG1 er en roman gunstig prædiktor for prognosen i CRC patienter

Henvisning:. Mao Z, Sun J, Feng B, Ma J, Zang L, Dong F, et al. (2013) metastaser Suppressor, N-myc nedreguleret Gene 1 (NDRG1), Er prognostisk biomarkør for human tyktarmskræft. PLoS ONE 8 (7): e68206. doi: 10,1371 /journal.pone.0068206

Redaktør: Anthony W.I. Lo, Den kinesiske University of Hong Kong, Hongkong

Modtaget: Marts 4, 2013; Accepteret: 28. maj 2013; Udgivet: 9 jul 2013

Copyright: © 2013 Mao et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne undersøgelse blev støttet af National Natural Science Foundation of China (NSFC, 30.873.000). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

kolorektal cancer (CRC) er en af ​​de mest almindelige ondartede sygdomme verdensplan [1]. Det er blevet vist, at på det tidlige stadium, kan CRC hærdes ved minimalt invasiv radikal kirurgisk [2] resektion. Imidlertid har en stor bestand af CRC patient blevet diagnosticeret på et fremskredent stadium og konventionelle behandlingsmuligheder bliver utilgængelige [3]. Desuden CRC betegner en aggressivt invasiv og metastatisk tumortype [4] og metastatisk gentagelse fortsat er en af ​​de mest udbredte årsager, der fører til dårlig langtidsoverlevelse og høj dødelighed [5]. Derfor forstå det molekylære patogenese kræft tilbagefald og metastaser vil bidrage til at forbedre behandlingsregimer og sygdom prognose for CRC patienter

Kolorektal carcinogenese er en kompliceret proces, der involverer mange protoonkogener og tumorsuppressorgener [6] -. [9 ]. Vi og andre har fundet, at afvigende ekspression af et hidtil ukendt metastase suppressor, N-myc nedreguleret gen 1 (NDRG1), var involveret i processen med CRC udvikling [9] – [12]. NDRG1 udøver sin funktion gennem modulering de store signalveje i en lang række forskellige tumortyper, herunder CRC [9], [10], [13] – [15]. Ikke desto mindre har sammenslutningen af ​​NDRG1 med kræft progression er rapporteret inkonsistente observationer. For eksempel blev NDRG1 ekspression i bryst, lever, lunge og livmoderhalskræft positivt korreleret med sygdommen tilbagefald og var en dårlig prognostisk indikator for patientoverlevelse [16] – [20]. Tværtimod NDRG1 ekspression i prostata, colon og esophageale tumorer var en positiv faktor for patientens kliniske resultat [21] – [23]. Tilsyneladende sker det kliniske rolle NDRG1 i ondartede sygdom i en kontekst-afhængig måde.

De kliniske betydninger og prognostiske værdier NDRG1 i CRC er ikke blevet godt evalueret. Traditionelt har tumor infiltration dybde, antallet af metastatiske lymfeknuder, tumor placering, fjernmetastaser og fuldstændighed af excision, og niveauerne af postoperativ serum carcinoembryonisk antigen (CEA) og kulhydrat antigen 19-9 (CA19-9) blevet anvendt som indikatorer for prognosen, der ikke er fuldt pålidelige endnu [24]. Derfor vil udvikle nye prognostiske biomarkører være af betydning at vejlede behandling af CRC. For nylig har en række potentielle biomarkører blevet udviklet til at forudsige respons på specifikke adjuverende behandling. Disse biomarkører indbefatter prolifererende cellekerneantigen (PCNA), CEA, CA19-9, p53, Kirstenrat sarcom-2 virus onkogen (K-ras), mikrosatelitter ustabilitet (MSI), vaskulær endothelial vækstfaktor (VEGF) og

etc

. [25]. Fra det kliniske synspunkt er deres prognostiske og terapeutiske betydninger er ikke blevet fuldt valideret [25]. I denne undersøgelse blev ekspressionen af ​​NDRG1 og dets klinisk-patologiske betydninger undersøgt i 240 CRC prøver og deres parrede ikke-tumor modstykker. Vores undersøgelser viste, at NDRG1 er en roman gunstig biomarkør for overlevelse i CRC patienter på lang sigt.

Materialer og Metoder

Patienter Selection

Patienter, der fik foretaget laparoskopisk kirurgi for kolorektal cancer blev fortløbende indskrevet fra januar 2006 til december 2007. forsøget blev godkendt fra Research Ethics Committee of Ruijin Hospital, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, og skriftligt informeret samtykke opnået fra alle patienter involverede forud for denne undersøgelse. Ingen af ​​de deltagende patienter var blevet antaget præoperativ strålebehandling eller kemoterapi. Præoperativ kræft iscenesættelse blev udført af forbedret CT-scanning. Alle deltagende patienter er berettiget til at blive behandlet af laparoskopisk tilgang efter præoperativ vurdering. Alle laparoskopiske procedurer blev udført ved den samme kirurgiske team. Alle kirurgiske operationer fulgte en standard D2 lymfeknude dissektion protokol i henhold til retningslinjerne fra radikale laparoskopisk kolorektal cancer kirurgi (2006) fastlagt af studiegruppen af ​​laparoskopisk og endoskopisk kirurgi Tilknyttet kinesiske lægeforening. Alle CRC patienter, der var patologisk diagnosticeret som fase III-V accepterede adjuverende kemoterapi postoperativt. Eksklusionskriterier var:

in situ

sygdom, akut præsentation, body mass index (BMI) 35 kg /m

2, American Society of Anesthesiologists (ASA) klassifikation IV-V, associeret gastrointestinal sygdom, krævede omfattende operative evaluering eller indgreb, graviditet eller ondartet sygdom i de seneste 5 år (bortset fra overfladisk skællede eller basalcellekræft i huden eller

in situ

livmoderhalskræft). Postoperativ klinisk iscenesættelse var baseret på UICC cancer staging manual (7. udgave, 2009), evaluering

via

præoperativ forbedret CT-scanning, intraoperative opdagelser sammen med postoperative patologiske evalueringer.

Immunhistokemi (IHC)

tumorvæv og de parrede ikke-tumorvæv ved resektionsrandene blev indsamlet, fikseret med formaldehyd og indlejret med paraffin. IHC-farvning blev udført som tidligere beskrevet [26]. Efter permeabilisering og antigen-selektion, blev sektionerne inkuberet med anti-NDRG1 antistoffer (HPA006881, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) ved 4 ° C natten over, efterfulgt af inkubation i 1 h /20 ° C med peberrodsperoxidase (HRP) -konjugeret sekundært antistof (Sigma-Aldrich). Negative kontroller blev opnået ved tilsætning af blokerende peptid til det primære antistof. Snittene blev derefter vasket med TBS og behandlet med 2-Solution DAB Kit (Invitrogen, Camarillo, CA, USA) ifølge producentens procedure. Vævene blev modfarvet med Mayers hæmatoxylin.

Scoring af IHC farvningsresultater

Alle IHC sektioner blev undersøgt og scoret under et lysmikroskop (Olympus, Tokyo, Japan) af en patolog og hovedstol forskere. Tilfælde med afvigende scoringer blev rescored af de samme eller supplerende holdrekorder at opnå en konsensus score. NDRG1 scoring blev foretaget i overensstemmelse med den udbredte tyske semikvantitativ pointsystem, under hensyntagen til farvning intensitet og procentdelen af ​​farvede tumorceller [27], [28]. Farvning niveauer blev scoret som 0 (ingen farvning), 1 (svag farvning), 2 (moderat farvning) og 3 (stærk farvning), baseret på farvningsintensitet i tumorcellerne. Procentdelen af ​​farvede tumorceller i hver sektion blev talt og sektionerne blev bedømt i overensstemmelse hermed ( 10% = 0, 10-25% = 1, 26-50% = 2, 51-75% = 3, 76-100% = 4). Det endelige immunostainning score på hver tumor vævssnit blev bestemt ved at multiplicere intensitet scores med snesevis af positivt farvede tumorceller, med et minimum score på 0 og højst score på 12. Tumor sektioner med score 1-4 blev betragtet som negative, mens tumor sektioner med score 5-12 blev betragtet som positive.

Protein Extraction og Immunoblotting

Friske kræft væv fra 10 CRC patienter (fase III-IV) og de parrede ikke-tumor kolleger var høstet og de totale proteiner blev ekstraheret. Immunoblots blev udført i overensstemmelse med de etablerede protokoller [10]. Udtrykkene for NDRG1 og GAPDH blev vurderet med primære antistoffer mod NDRG1 (HPA006881, Sigma-Aldrich) og GAPDH (sc-32233, Santa Cruz, CA, USA), efterfulgt af inkubation med HRP-konjugeret anti-kanin (A9169) og anti -mouse (A4416) antistoffer (Sigma-Aldrich). De kemiluminescerende signaler blev visualiseret og erobrede med Bioimaging System (BIO-RAD, Hercules, CA, USA) og analyseres ved hjælp af billede Lab ™ Software Version 4.0.1 (BIO-RAD). Forsøgene blev gentaget mindst tre gange uafhængigt af hinanden. De relative NDRG1 ekspressionsniveauerne i tredobbeltforsøg blev normaliseret til niveauet for GAPDH.

Postoperativ Opfølgning Evaluering

Alle patienter blev fulgt op efter at være blevet udskrevet fra hospitalet, indtil den dato, 10. december 2012. tilbagefald blev bekræftet klinisk eller histologisk hvis fjernmetastaser, locoregional tilbagefald (tumorvækst begrænset til anastomosen eller regionen af ​​primær drift) og incisional metastase blev detekteret. Varigheden fra datoen for operationen til datoen angiver den sidste opfølgning evaluering, svigt behandling /tilbagefald eller død blev registreret.

Statistisk analyse

Data blev indsamlet prospektivt ved hjælp af en elektronisk database i henhold at pre-undersøgelse

Power

beregning. Kvantitative data blev åbnes ved hjælp af Students

t

-test. Tælledata blev vurderet ved Mann-Whitney, Chi-Square eller Fishers eksakte test, når det er relevant. Tilbagefald og samlet overlevelse blev vurderet ved anvendelse af Kaplan-Meier-metoden og sammenlignet ved log-rank test. Analyse af prædiktive faktorer for overlevelse blev udført, og de variabler, der er forbundet med gentagelse og overlevelse blev derefter anvendt til multivariat analyse ved hjælp af en trinvis Cox proportional-farer regressionsmodel. Statistisk signifikans blev defineret som

s

0,05. Alle beregninger blev udført med SPSS softwarepakken udgave 12.0 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Resultater

Demografiske, Anatomopathological og kliniske data

I alt af 240 patienter blev inkluderet i undersøgelsen. Den gennemsnitlige alder for debut af sygdommen var 68, med de fleste patienter var i aldersgruppen mellem 60 og 80 (61,67%) (tabel 1). Der var 132 (55%) mandlige patienter og 108 (45%) kvindelige patienter involveret i dette studie, med BMI 21,6 ± 5,8 kg /m

2 (16,3-31,7) (tabel 1). Blandt disse 240 patienter, blev 136 patienter kombineret med perioperativ comorbid sygdom (tabel 1). Endvidere blev tumor placering i undersøgelsespopulationen også vist i tabel 1.

Undersøgelser over postoperative prøver indikerede, at den proximale resektionsranden var 12,3 ± 5,9 cm og den distale resektion margin 10,8 ± 4,1 cm i tyktarmskræft tilfælde. I rektal kræfttilfælde, den proksimale resektion marginen var 9,1 ± 2,7 cm og den distale resektion marginen var 5,2 ± 1,9 cm (tabel 2). Resektion marginer blev målt i friske prøver efter operationen uden fiksering. Den postoperative patologisk bekræftelse indikerede, at der var noget tilfælde med positiv resektion margin. Desuden blev lymfeknuderne hentes fra hver prøve efter fiksering og antallet af lymfeknuder hentede var 14 ± 6 (tabel 2). Disse resultater understøttes effekten af ​​de standardiserede operative procedurer i denne undersøgelse.

Postoperativ patologisk iscenesættelse blev udført af en gruppe af erfarne patologer. Den gennemsnitlige tumorstørrelse var 4,6 ± 1,7 cm (1.5-9.0 cm) (tabel 2). De tumorer blev defineret som veldifferentieret i 26 tilfælde (10,83%), moderat-opdelte i 140 tilfælde (58,33%), dårligt-opdelte i 34 tilfælde (14,17%) og mucinøs carcinoma i 40 tilfælde (16,67%) (tabel 2 ). Evalueringerne af tumor infiltration (PT), lymfeknudemetastase (PN) og metastase (PM1) blev vist i tabel 2. I alt det kliniske TNM staging indikerede, at 30 tilfælde (12,5%) var i trin I, 124 tilfælde (51.67 %) i fase II, 62 tilfælde (25,83%) i fase III og 24 tilfælde (10%) i stadie IV (tabel 2).

Alle patienter blev fulgt op i overensstemmelse med den foreslåede postoperative protokol overvågning . Den samlede opfølgning varighed var 3.8-83.9 måneder, med en median follow-up tid på 67,4 måneder. Af alle de inkluderede patienter blev 72 sager (30%) bekræftet som postoperative gentagelse (tabel 3). Desuden den samlede dødelighed var 28.33% (68 tilfælde), hvor 66 tilfælde (27,5%) var tumor-relaterede og to dødsfald var forårsaget af akut hjerneblødning og respiratorisk dysfunktion (Tabel 3). I disse 66 sager, 45 sager (68%) var NDRG1 negative og 21 tilfælde (32%) var NDRG1 positive (p = 0,000). Ingen signifikante relationer mellem NDRG1 og klinisk-patologiske kriterier blev observeret i denne “død gruppe” (tabel 4).

NDRG1 Expression blev reduceret i CRC væv Sammenligning med den parrede Non-tumorvæv

NDRG1 udtryk i CRC og ikke-tumorvæv blev undersøgt ved IHC og immunoblot. IHC-farvning indikerede, at NDRG1 overvejende blev præsenteret i cytoplasmaet i CRC-celler og normale celler i de parrede ikke-tumor kolorektale væv. NDRG1 ekspression blev også observeret ved cellemembranen (figur 1). I CRC prøver, NDRG1 udtryk var negativ i 104 tilfælde (43,33%), og positiv i 136 tilfælde (56,67%). Men i de ikke-tumorvæv, viste NDRG1, en høj ekspression i 196 tilfælde (81,67%) og negativ ekspression i 44 tilfælde (18,33%). Dette viste, at reduktion eller tab af NDRG1 kan lette tumorgenese i tyktarmen.

(A-D) Repræsentative prøver med HE farvning (A) og NDRG1 negative udtryk (B) i cancer væv, såvel som HE farvning ( C) og NDRG1 positivt udtryk (D) i den parrede ikke-tumorvæv. (E-H) Repræsentative prøver med HE farvning (E) og NDRG1 positivt udtryk (F) i cancer væv, såvel som HE farvning (G) og NDRG1 positivt udtryk (H) i den parrede ikke-tumorvæv. De sorte pile angiver NDRG1 ekspression i cytoplasma, medens de hule pile angiver NDRG1 ekspression i cellemembranen. Forstørrelse, 200 ×.

NDRG1 udtryk blev også analyseret ved immunoblot i 10 CRC tumorer på trin III-IV og 10 parrede ikke-tumorvæv (figur 2). Sammenligning til niveauet for NDRG1 i de ikke-tumorvæv, viste 8 CRC væv en betydelig reduktion af NDRG1 (

s

0,001-0,01). Kun 2 CRC væv udtrykte et tilsvarende NDRG1, der observeres i de parrede ikke-tumorvæv. Samlet set har disse data understøttes yderligere et fald på NDRG1 udtryk i avancerede CRC væv

C:. Ikke-tumorvæv; T: Tumor væv. NDRG1 niveauer blev udtrykt i forhold til lastning kontrol, GAPDH. Data er typiske for 3-5 eksperimenter og histogramværdier er gennemsnit ± SD. **

s

0,01, ***

s

. 0,001, i forhold til respektive kontrolgruppe

NDRG1 Expression i CRC korrelerer med Patient Outcomes

Siden ekspression af NDRG1 i CRC væv blev faldet betydeligt sammenligne det i ikke-tumorvæv blev korrelationer mellem NDRG1 udtryk i CRC og kliniske karakteristika analyseret og sammenfattet i tabel 5. NDRG1 ekspression blev påvist i 136/240 (56,67%) CRC tilfælde. NDRG1 udtryk blev omvendt korreleret med pT (

s

= 0,013), PN (

s

= 0,012), pM (

s

= 0,027), patologisk differentiering (

s

= 0,042) og klinisk TNM stadie (

s

= 0,011) (tabel 5). Vores data viste, at NDRG1 var stærkt udtrykt i de mindre aggressive tumorer og havde en omvendt korrelation med de veletablerede prognostiske evaluering faktorer. Derfor kunne NDGR1 bruges som en potentiel gunstig prognostisk biomarkør i CRC.

Vi næste undersøgt sammenhængen af ​​NDRG1 udtryk med patientens overlevelse. Som vist i figur 3A, 5-års samlede overlevelsesrate i NDRG1 positiv gruppe var 82,35%, mens der i NDRG1 negative gruppe, den 5-årige samlede overlevelsesrate var 51,92%. Desuden vil de samlede overlevelse var 76,4 ± 2,4 måneder i NDRG1 positiv gruppe og 55,3 ± 4,1 måneder i NDRG1 negative gruppe. Den NDRG1 positive gruppe viste en signifikant bedre samlet overlevelse sammenlignet med NDRG1 negative gruppe (

s =

0,000) (figur 3A).

(A) Samlet overlevelse analyse mellem NDRG1 positive og negative gruppe blev udført ved Kaplan-Meier-metoden. Den NDRG1 positive population havde signifikant (

s

= 0,000) bedre samlet overlevelse end NDRG1 negative befolkning. (B) Cancer overlevelse analyse mellem NDRG1 positive og negative gruppe blev udført ved Kaplan-Meier-metoden. Den NDRG1 positive population havde signifikant (

s

= 0,000) bedre kræft overlevelse end NDRG1 negative befolkning.

5-års kræft-fri overlevelse i NDRG1 positiv gruppe var 80,89%. Dette var imidlertid kun 44,23% i NDRG1 negativ gruppe. Desuden vil de samlede overlevelse var 75,7 ± 2,6 måneder i NDRG1 positiv gruppe og 47,2 ± 4,8 måneder i NDRG1 negative gruppe. Den NDRG1 positive gruppe viste en signifikant bedre kræft-fri overlevelse sammenlignet med NDRG1 negative gruppe (

s =

0,000) (figur 3B). Således kunne NDRG1 være en ideel biomarkør for overlevelse og sygdomsfri opsving i CRC patient.

NDRG1 Expression kan betragtes som en risikofaktor for CRC Patient

Som vist i tabel 6, univariat analyse viste, at patologisk differentiering (

s

= 0,008), pT

(p

= 0,030), PN (

s

= 0,001), pM (

p

= 0,000), klinisk fase (

s

= 0,001) og NDRG1 udtryk (

s

= 0,000) viste sig at være uafhængige risikofaktorer for samlet overlevelse. Tumor størrelse (

s

= 0,044), pT (

s

= 0,006), PN (

s

= 0,014), klinisk fase (

s

= 0,000) og NDRG1 (

s

= 0,000), blev anset for at være uafhængige risikofaktorer for tilbagefald.

Ligeledes multivariat analyse (tabel 7) anførte endvidere, at pT (

s

= 0,002), PN (

s

= 0,007), pM (

s

= 0,004), klinisk fase (

s

= 0,032) og NDRG1 (

s

= 0,001) var uafhængige risikofaktorer for samlet overlevelse. Ikke desto mindre er kun klinisk fase (

s

= 0,021) og NDRG1 (

s

= 0,003) var de væsentligste uafhængige risikofaktorer for tilbagefald. Tilsammen NDRG1 er en lovende uafhængig biomarkør for vurdering sygdom tilbagefald og overlevelse i CRC patienter.

Diskussion

På trods af fremskridt i kirurgiske og ikke-kirurgiske behandlinger for CRC, metastase og tilbagefald stadig de største udfordringer for kirurger og onkologer [4]. Gentagelse og metastase repræsenterer den vigtigste dødsårsag i CRC patienter efter radikale indgreb [1], [29]. De kliniske tilgængelige biomarkører, herunder PCNA, CEA, CA19-9, p53, K-ras, MSI og VEGF, er blevet brugt til tidlig påvisning og opfølgning ups for postoperative gentagelse og metastase [25]. Selv om disse biomarkører kan give nyttige oplysninger til at forudsige patientens resultat, der er en mangel på god lineær sammenhæng med CRC metastaser og tilbagefald sats [25]. Derfor udvikler nye prognostiske biomarkører med højere specificitet og følsomhed vil gavne for CRC patienter i terapeutisk intervention.

De fleste af humane solide tumorer karakteriseres som højt stofskifte, aktive celle migration og invasion kapacitet og aberration af signalering transduktioner som spille nøgleroller i metastaser [30]. På baggrund af disse egenskaber i tumorceller, er disse celler dyrkes i et miljø med en mangel på ilt og næringsstoffer, indtil tumor angiogenese eller implantation til nye omgivelser [31], [32]. Således gener induceres af hypoxi, såsom NDRG1 [33], kan påvirke cancercelleoverlevelse og metastase. Vi og andre viste, at NDRG1 er en roman tumor metastatisk suppressor i forskellige tumorceller, herunder CRC [9], [10], [12]. I denne undersøgelse blev ekspressionen af ​​NDRG1 i CRC patientprøver undersøgt. Vi viste, at NDRG1 ekspression blev signifikant reduceret i CRC væv sammenlignet med de parrede ikke-tumorvæv, som yderligere understøtning af en tumor undertrykkende funktion af NDRG1 i CRC som tidligere rapporteret [11], [22]. Lignende resultater blev også observeret i bugspytkirtlen, prostata, bryst og esophageal carcinoma væv, hvor NDRG1 mRNA og protein niveauer blev begge faldet i forhold til normale modparter [21], [34] – [38]. I modsætning hertil blev NDRG1 fundet at være højt udtrykt i lever og livmoderhalskræft væv og dets ekspression blev associeret med vaskulære invasion, metastase, og dårlig prognose [13], [16], [17]. Det er sandsynligt, at NDRG1 rolle i kræft progression er reguleret af de potentielle mutationer i forskellige kræft sygdom, der fører til et “tab af funktion” eller ved den iboende genetiske mekanisme af de specifikke organer.

Flere undersøgelser har blevet rapporteret med henvisning til de detaljerede mekanismer i NDRG1 hæmme kolorektal cancer migration, invasion og metastase

in vitro

[9], [10], [12].

NDRG1

mRNA samt proteinekspression blev rapporteret at være over-udtrykt i normal human colon epitelvæv [39]. Desuden Li og Chen rapporterede, at NDRG1 spiller afgørende roller i tumor metastase undertrykkelse og ofte bragt til tavshed i metastatiske tyktarmskræft [12]. De viste en korrelation mellem forøget histon H3S10p og lyddæmpning af NDRG1 genet i coloncancercellelinie SW620, hvilket antyder en potentiel mekanisme af NDRG1 undertrykkelse under tyktarmskræft metastase. Nylige undersøgelser viste hidtil ukendte funktioner af NDRG1 ved inhibering af TGF-β-induceret epithelial-mesenchymal overgang (EMT) [9] og filament actinpolymerisation og stress fiber samling ved modulering af rock1 /pMLC2 pathway i CRC cellelinier [10]. Disse resultater viste potentielle mekanismer bag tumor undertrykkende funktion NDRG1 i CRC observeret i denne undersøgelse.

Tidligere undersøgelser viste, at den faldt NDRG1 udtryk var uafhængige ugunstige prognostiske faktorer for overlevelse af patienter med stadie II tyktarmskræft høj risiko [ ,,,0],22]. Ved at støtte denne, vi medtaget 240 CRC prøver med forskellige TNM stadier (I-IV) for at undersøge den kliniske potentiale NDRG1 alene som en selvstændig prognostisk faktor. I disse CRC sager som gennemgik laparoskopisk procedurer, NDRG1 udtryk omvendt korreleret med pT, PN, pM og TNM stadie. Interessant nok viste Kaplan-Meier analyse, CRC patienter med NDRG1 negative tumorer havde signifikant dårligere prognose i både samlet overlevelse og kræft-fri overlevelse. Derfor NDRG1 var en uafhængig prognostisk faktor for både samlet overlevelse og tilbagefald og dens positivitet kunne være en gunstig prognostisk biomarkør for klinisk anvendelse i CRC patienter. I betragtning af betydningen af ​​andre kendte biomarkører herunder PCNA, K-ras og MSI i CRC, er det af klinisk betydning at undersøge sammenslutning af NDRG1 med disse biomarkører i CRC patienter.

Tak

Vi takker Shanghai Municipal center for Disease Control Forebyggelse for patienternes opfølgende undersøgelser. Vi har også specielt takke professor Qian Zhao og Dr. Ying Zheng fra Shanghai Jiao Tong University School of Medicine for deres værdifulde kommentarer og revision af manuskriptet.