PLoS ONE: Fosfor-32, en klinisk tilgængelige Drug, Hæmmer Cancer Vækst ved at inducere DNA Double-Strand Brud

Abstrakt

Radioisotoper der udsender elektroner (beta partikler), såsom radioaktivt jod, effektivt kan dræbe målceller, herunder kræftceller. Vandig

32P [PO

4] er en ren beta-emitter, der har været anvendt i flere årtier til behandling af ikke-maligne humane myeloproliferative sygdomme.

32P [PO

4] var direkte i forhold til en mere kraftfuld ren beta-emitter, den klinisk vigtige

90Y isotop.

In vitro

,

32P [PO

4] var mere effektiv til at dræbe celler, end det var mere magtfulde isotop

90Y (P ≤ 0,001) og også forårsaget væsentligt mere dobbeltstrenget DNA pauser end gjorde

90Y.

In vivo

, en enkelt lav dosis intravenøs dosis af vandig elementært

32P signifikant hæmmede tumorvækst i det syngene murine cancer model (

P

≤ 0,001). Denne virkning opnås ved direkte inkorporering i spirende DNA-kæder, hvilket resulterer i dobbeltstrenget brud, en unik mekanisme ikke duplicatable af andre, mere kraftfulde elektron-emitterende radioisotoper.

32P [PO

4] bør overvejes til humane kliniske undersøgelser som en potentiel ny anti-cancer stof

Henvisning:. Cheng Y, Kiess AP, Herman JM, Pomper MG, Meltzer SJ, Abraham JM (2015) Fosfor-32, en klinisk tilgængelige Drug, Hæmmer Cancer vækst ved at inducere DNA Double-Strand brud. PLoS ONE 10 (6): e0128152. doi: 10,1371 /journal.pone.0128152

Academic Redaktør: Abhijit De, ACTREC, Tata Memorial Center, INDIEN

Modtaget: December 19, 2014 Accepteret den 22. april 2015; Udgivet: 1 juni 2015

Copyright: © 2015 Cheng et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden papiret

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af National Cancer Institute CA133012-01, National Institutes of Health køreplan DK087454-01, National Cancer Institute CA146799, National Cancer Institute CA190040, og en Sidney Kimmel Cancer center Pilotprojekt Grant. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Beta partikler (elektroner), der udsendes af radioisotoper er kendt for effektivt at dræbe kræftceller. Dette fund er allerede blevet klinisk udnyttes ved brug

131I til behandling kræft i skjoldbruskkirtlen [1], en strategi stadig ansat med succes i mere end 50% af disse patienter i USA, og over en 90% helbrede sats. Ligeledes beta partikel udsender radioaktivt mærkede antistoffer rettet mod CD20, herunder

131I-Bexxar (tositumomab) og

90Y-Zevalin (ibritumomab tiuxetan), er blevet anvendt mod non-Hodgkins lymfom [2,3]. Desuden

90Y-mærkede somatostatin receptorligand anvendes til behandling af neuroendokrine tumorer [4]. Elektroner, der udsendes af

32P har et energiniveau mellemprodukt mellem værdierne for

131I og den mere kraftfulde

90Y, hvilket resulterer i en vejlængde på op til 5 mm i humane væv [5]. Elektroner, der udsendes fra radioaktive isotoper kan ramme tusindvis af celler. Den resulterende tilskuer-virkning forstærker den letale potentiale hver beta partikel udsendes i eller i nærheden af ​​en tumor. Men som vi skal vise nedenfor, har vi opdaget, at blandt alle tilgængelige beta-emitterende isotoper,

32P besidder en unik kemisk og radiologisk-baserede dobbelt-strenget brud mekanisme, som giver større anti-tumor effekt end andre beta-emittere af sammenlignelige magt.

Humane cancer-afledte cellelinjer etableret i immunsvækkede mus er et værdifuldt redskab til at teste effektiviteten af ​​kandidat anticancermidler [6-9]. Vi har tidligere vist sig, at en enkelt, lavdosis intravenøs injektion af [

32P] ATP signifikant inhiberer tumorvækst i flere uger i murine xenograftmodeller [10,11]. Fordi ATP er en lille naturligt forekommende molekyle, dens radioaktivt mærket form, udgør nogle fordele over større syntetiske forbindelser som en potentiel anti-cancer terapeutisk, herunder lavere immunogenicitet, større tumor penetration, og overlegne farmakokinetik [12]. Uorganisk [

32P] PO

4, en simpel vandig ion, har været anvendt i årtier som et terapeutisk middel til polycytæmi vera og essentiel thrombocythemi [13]. Dette ion blev også tidligere anvendt til lindring af knoglesmerter skyldes metastaser, hvor det blev anset for at være inkorporeret i den ekstracellulære matrix [14]. Men vandig

er aldrig blevet etableret 32P brug som en primær anti-cancer strategi

per se

.

Den kliniske anvendelse af

32P blev først forsøgt i 1930 [15 -18]. Siden da, har

32P forbrug generelt været begrænset til en kolloid suspension formular, hvor

32P danner en del af et sammensat, uopløselig partikel [19-22]. Denne form for

32P typisk injiceres direkte i tumoren, med kolloid suspension forhindrer radioisotopen i at forlade det tilsigtede mål og formidling i hele kroppen. Administrationen af ​​vandige

32P som primær anti-cancer middel ikke er undersøgt, bortset fra dets palliativ brug til lindring af smerter på grund af knoglemetastaser.

De seneste eksperimentelle resultater har ført til udvikling og brug af alfa- og beta-emitter

223Ra til selektivt at målrette knoglemetastaser hos patienter med kastrationsresistent prostatacancer [23,24]. Oprindeligt udviklet af et norsk selskab Algeta blev Alpharadin godkendt til brug i USA i 2013, og er nu markedsføres af Bayer under navnet Xofigo [25]. Således

223Ra er den seneste simple radioaktive element at blive en effektiv anti-cancer medicin.

Vi har nu rapporterer, at en enkelt, lavdosis intravenøs injektion af vandige

32P resulterer i hurtig, signifikant vækstinhibering af præ-etableret tumorvækst i en immunkompetent (syngen) murin model. Vi viser også, at

32P er mere effektiv end ækvivalente doser af højere energi ekstracellulære elektroner, såsom dem, der udsendes af

90Y, en beta-emitterende radioisotop i almindelig brug i dag. Vi leverer dokumentation for, at denne højere effektivitet resultater fra direkte iblanding af

32P i spirende DNA, der forårsager dobbelt-strenget DNA brud via en kombineret kemisk-radiologisk mekanisme, der ikke kan duplikeres af andre beta-emitterende radioisotoper, såsom

131I og

90Y. Dette fund har umiddelbare konsekvenser for den udvidede behandling af primære humane kræftformer.

Metoder

Måling af

in vitro

celle drab af

32p og

90Y

To tusinde celler af det murine BALB /c CRL2836 cellelinie eller den humane HeLa S3-cellelinje blev dyrket i komplet medium i en 96-brønds plade og blev eksponeret på dag 0 til enten 0, 1, 2,5, eller 5 uCi

90Y radioisotop eller [

32p] PO

4 radioisotop i komplet medium. Efter en 24 timers inkubation blev den radioaktive isotop-holdige medium fjernet og erstattet med ikke-radioaktiv komplet medium (dag 1). WST-1 proliferationsassays (Roche Applied Science, Indianapolis, IN) blev udført på dag 1, 2, 3, 4 eller 5 til direkte at måle cellevækst. Hvert eksperiment blev udført tre gange. Cellelinjer blev opnået fra American Type Culture Collection (Manassas, VA) og bruges inden for seks måneder efter købet.

Vurdering af dobbelt-strenget DNA pauser

Ti tusind HeLa S3-celler blev podet på Lab-TekII kammer slides (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA). På dag 0 blev celler behandlet med 0 eller 3 uCi af

32P eller

90Y i komplet medium. På dag 1 blev alle brønde vaskes forsigtigt og frisk ikke-radioaktivt medium blev tilsat. Ved dag 1, dag 2, eller dag 3 blev cellerne fikseret med 10% formalin ved stuetemperatur i 10 minutter, vasket med PBS i to minutter og permeabiliseret med 0,2% Triton X-100 med 10% FBS i PBS i 15 min . Efter en skylning med PBS, primær muse-anti-humant H2AX antistof ved 1: 1000 fortynding (Millipore, Billerica, MA) blev inkuberet i 1 time ved stuetemperatur, derefter vasket to gange med PBS i 5 minutter. En fortynding på 1: 400 gede-anti-muse-IgG med Alexa Fluor (Life Technologies, Grand Island, NY) blev inkuberet i 1 time ved stuetemperatur og vasket to gange med PBS i 5 minutter. Celler blev farvet med Hoechst løsning. (1: 1000)

VURDERING af

32P inkorporeret i DNA

Et hundrede og halvtreds tusind mus CRL2836 eller human HeLa S3-celler blev podet på en seks brønds celledyrkningsplade og dyrket i 24 timer (defineret som dag 0). Celler blev derefter enten inkuberet natten over med

32P [PO

4], dyrket i 2 dage i ikke-radioaktivt medium og DNA’et ekstraheret (3 dage); eller dyrket i 24 timer, inkuberet med

32P [PO

4] i 24 timer, der dyrkes i 24 timer i ikke-radioaktive medium og DNA ekstraheret (2 dage); eller dyrket i 48 timer, inkuberet med

32P [PO

4] i 24 timer, vasket med komplet medium og nukleinsyren ekstraheret (1 dag). DNA blev ekstraheret under anvendelse af DNAeasy blod og væv Kit (Qiagen, Valencia, CA) og portioner blev inkuberet med eller uden fire enheder af DNase I (New England Biolabs, Ipswich, MA) i to timer ved 37 ° C, før prøverne blev kørt på en 5% polyacrylamidgel, eksponeret for film natten over ved 4 ° C og udvikles.

Assay for apoptose i cellelinjer inkuberet med

32p.

hundredetusinde muse CRL2836-celler eller HeLa S3-celler blev podet i hver brønd på 6-brønds kulturplader og dyrket i 24 timer. Celler blev derefter inkuberet med 0, 2,5, 5, 10 eller 20 uCi

32P [PO

4] i to ml komplet medium i 24 timer, og ikke-radioaktivt medium tilsat i yderligere 24 timer. Protein blev ekstraheret fra hver brønd med RIBA puffer (Cell Signaling Technology, Boston, MA) blev proteinet kvantificeret under anvendelse af et BCA-proteinassay-kit (Pierce, Rockford, IL), og identiske mængder blev kørt på en 10 til 20% polyacrylamidgel , og blottet til nitrocellulose. En western blot med et primært antistof mod spaltet caspase-3-protein (Cell Signaling Technology, Boston, MA) blev anvendt til assay for apoptose. En anden western blot med identiske proteinmængder blev probet med antistof mod beta-actin (Cell Signaling Technology, Boston, MA).

Etablering af musetumorer

Syngene BALB /c-mus tumorer blev etableret ved at injicere 2 X 10

6 BALB /c tumor CRL2836-celler (American Type Cell Culture, Manassas, VA) i en volumen på 0,2 ml (50% Matrigel, 50% 1 X PBS) subkutant i venstre bag og højre bag flanke. Alle mus var kvinder, 10 uger gamle, og indkøbt fra Charles River Laboratories (Wilmington, MA).

32P-Mediated tumorvækstinhibering

Efter ti dage, i hvilket tidsrum godt vaskulariserede tumorer blev veletableret, en injektion af 5 uCi monophosphatformen af ​​

32P (Perkin-Elmer, kat. # NEX06000, Waltham, MA) blev injiceret intravenøst ​​

via

halevenen i 0,1 ml 1 X HBSS. Seks tumorer (tre dyr) blev undersøgt for hver gruppe. Efter injektion blev tumorvækst målt tre gange om ugen med en digital skydelære, og volumenet blev bestemt ved anvendelse af formlen: volumen = ½ (bredde)

2 X (længde). Musene blev opretholdt ved Johns Hopkins University faciliteten i overensstemmelse med Laboratory Animal Resources Kommissionens standarder under tilsyn og godkendelse af Johns Hopkins University Institutional Animal Care og brug Udvalg (IACUC).

Statistisk analyse

dataene fra WST-1-celleproliferation blev præsenteret som gennemsnit ± standardafvigelse, og signifikans blev bestemt under anvendelse af uparret Students

t

test. Tumorvolumener af de ubehandlede og behandlede mus blev vist som middelværdier ± SE; ingen outliers blev udelukket eller anden grund. Signifikans blev bestemt ved hjælp af den uparrede Students

t

test.

Resultater

Celler udsat for [

32p] PO

4 blev sammenlignet med dem, der udsættes for identiske tællinger per minut af den mere kraftfulde beta-partikel emitter,

90Y, hvorefter WST-1-celleproliferation assays blev udført (figur 1). Forskellige cellelinjer forventedes at demonstrere forskellige niveauer af følsomhed over for radioisotoper. Den 1 pCi dosering viser, at HeLa-celler var mindre modtagelige for beta-emitterende isotoper end var BALB /c mus CRL2836-celler, der opstod som en osteosarcom og blev isoleret efter at den havde metastaseret til lungen. Både 2,5 uCi og 5 uCi doser demonstrerede tilsvarende resultater i begge cellelinier. Selvom

90Y ville havde været forventes at være mere dødbringende end

32P (baseret på dets højere energi elektroner),

32P dræbte celler mere effektivt end gjorde

90Y. I sammenligninger af 2,5 uCi og 5 uCi doser, [

32p] PO

4 producerede overlevelsesrater på dag 5, der var knap halvdelen af ​​dem, der produceres af

90Y.

WST- 1 proliferationsassay blev gjort for at bestemme niveauet af celledrab ved

32P eller ved

90Y. BALB /c-tumor CRL2836-celler eller HeLa S3-celler blev eksponeret for 0 Ci, 1 pCi, 2,5 uCi, eller 5 uCi i komplet medium. Efter 24 timer skiftedes mediet, og celler blev dyrket i ikke-radioaktivt komplet medium. WST-1 celleproliferationsanalyser blev gjort på dag 1, 2, 3, 4, og 5 i tre eksemplarer. Den gennemsnitlige vises plus /minus standardafvigelsen. Den studerendes tosidede t-test bestemmes

P Drømmeholdet værdi vist.

De H2AX analyser blev anvendt til at sammenligne dobbelt-strenget DNA brud i celler inkuberet med

32P

vs

.

90Y (figur 2) [26,27]. Dette assay detekterer præcist brud i begge strenge af DNA på samme genomiske locus. Nuklear farvning af HeLa S3-celler demonstrerede betydelige, tidsafhængig dobbeltstrenget DNA brud i celler udsat for

32P, mens de udsættes for de samme niveauer af

90Y-baserede stråling havde meget mindre eller ingen detekterbar DNA dobbeltstrenget brud. Fordøjelse med DNase I viste, at administreres

32P var blevet direkte inkorporeret i cellulært DNA (Fig 3A). Mere end halvdelen af ​​den

32P tilbageholdes af cellerne, der blev inkuberet med

32P [PO

4] i 24 timer og derefter dyrket i ikke-radioaktivt medium i 48 timer før DNA’et blev ekstraheret havde været permanent inkorporeret i cellulært DNA. For at bestemme om celledød involverer apoptose samt nekrose, muse CRL2836-celler eller HeLa S3-celler blev inkuberet med varierende mængder af

32P i 24 timer, erstattet med ikke-radioaktivt medium i yderligere 24 timer, og cellerne blev analyseret ved western blot for tilstedeværelsen af ​​spaltet caspase-3 indikerer apoptose (fig 3B). De CRL2836-celler viste klart, at apoptose var involveret i celledød, mens HeLa S3-celler viste ingen påviselige spaltede caspase-3 (data ikke vist). Antistof rettet mod beta-actin blev anvendt til at verificere lige belastning af proteinmængder i gelen brønde. HeLa S3-celler udtrykker E6 fra HPV18 og gøres p53 null som alvorligt hæmmer apoptose funktioner [28,29].

HeLa S3-celler eller muse BALB /c CRL2836-celler blev dyrket i flere sektioner af kammerskiver og udsat for 0 uCi eller 3 uCi [

32P] PO

4 eller

90Y i komplet medium på dag 0. Efter 24 timer blev mediet ændret, og cellerne blev dyrket i ikke-radioaktivt komplet medium. Ved dag 1, 2, eller 3 tilstedeværelsen af ​​dobbelt-strengede DNA-brud i cellerne blev bestemt ved farvning for phosphorylerede H2-AX histoner som indikerer dobbeltstrenget DNA-skade.

A.

32P er direkte inkorporeret i cellulært DNA. Muse CRL2836 eller humane HeLa S3 cellelinier blev inkuberet natten over med

32P [PO

4] og derefter dyrket i 48 timer i ikke-radioaktivt medium (bane 1 til 4), eller dyrket i 24 timer i ikke-radioaktivt medium, dyrket i 24 timer med

32P [PO

4], og derefter dyrket i 24 timer i ikke-radioaktivt medium (bane 5 til 8), eller dyrkes i 48 timer i ikke-radioaktivt medium, derefter dyrket i 24 timer med

32P [PO

4] (bane 9 til 12). De ekstraherede nukleinsyrer blev inkuberet med DNase I, blev fordøjelsesprodukter kørt på en 5% polyacrylamidgel og eksponeret for film. B. Apoptose induceret af

32P i muse CRL2836-celler. Muse CRL2836-celler blev inkuberet med 0, 2,5, 5, 10 eller 20 uCi

32P [PO

4] i 24 timer, og ikke-radioaktivt medium tilsat i yderligere 24 timer. Protein blev ekstraheret fra hver brønd og analyseret for apoptose ved western blots ved anvendelse af antistof mod spaltet caspase-3-protein (bane 1 til 5). Antistof mod beta-actin blev anvendt til at verificere identiske mængder protein blev påsat (bane 6 til 10).

Tidligere demonstrerede vi signifikant inhibering af HeLa S3 cell xenograft vækster i nøgne mus ved en enkelt lav -dose intravenøs (IV) injektion af [

32P] ATP. Her valgte vi immunokomponent syngene BALB /c-mus for bedre at rekapitulere human malignitet. En enkelt IV-injektion af vandig [

32P] PO

4 signifikant inhiberede etableret syngene tumorvækst i BALB /c-mus (figur 4). Der var ingen påviselige skadelige virkninger af [

32P] PO

4 sammenligning af vægten af ​​de behandlede mus til kontrolgrupperne (data ikke vist).

Syngene BALB /c CRL2836 tumorer blev etableret i de bageste flanker af Balb /C-mus på dag 0. Efter ti dage, hvor tumorerne blev godt vaskulariseret, modtog musene en injektion af 5 uCi [

32P] PO

4 intravenøst ​​via halevenen. Tumorvolumenerne er vist som middelværdien af ​​seks tumorer plus /minus standardfejl på middelværdien. Den studerendes tosidede t-test bestemmes

P Drømmeholdet værdi vist. Indsat: Repræsentant billede på 35 dage efter CRL2836 celle injektion, der viser to kontrol mus til venstre, og en mus, der fik en 5 uCi [

32P] PO

4 dosis (til højre)

.

diskussion

denne undersøgelse dokumenterer vores opdagelse af, at en enkelt intravenøs dosis af

32P radioisotop betydeligt hæmmer væksten af ​​præ-etablerede tumorer i en murin syngen model, samtidig med oprettelse af mekanismen bag dette anti -cancer virkning. Specifikt viser vi, at vandige

32P er inkorporeret i nascent DNA, hvor isotopiske henfald saks begge strenge, der forårsager dobbeltstrenget brud som bevist ved phosphorylering af histon H2-AX. Vores

in vitro

eksperimenter viser også, at den rene beta-emitter

32P er overlegen i forhold til den mere kraftfulde rene beta-emitter

90Y i tumor cytotoksicitet, og endelig, at apoptose bidrager til denne cytotoksicitet.

fig 5 viser en foreslået mekanisme for

32P-induceret celle drab. I denne skematiske,

32P inkorporeres direkte i én streng af replikerende DNA. Radioaktivt henfald af

32P til

32S forårsager kemisk brud på samme DNA-streng. Dernæst elektronen frigives af denne henfald begivenhed behov for at rejse kun 2 nm at nå den kontralaterale streng af det dobbelt helix, overskæring det og således bevirker en dobbelt-strenget pause på denne genomiske locus. Denne mekanisme står i stærk kontrast til ikke-inkorporerede beta-emitterende radioisotoper, hvor kun en lille brøkdel af udsendte elektroner rejser i den præcise orientering nødvendigt at finde en streng plus dens modsatte streng og forårsage en dobbelt-strenget DNA break [30,31] . Med

32P, den ekstreme nærhed af den kontralaterale målstrengen til henfald produceret elektron gør denne dobbeltstrenget brud meget mere tilbøjelige til at forekomme [32].

radioisotop er indarbejdet i ribose-phosphat rygraden i DNA i delende celler. Processen med rådnende til svovl (

32S) bryder rygraden obligation af den oprindelige streng på en 67% sats og frigiver en høj energi beta partikel (elektron), der kun skal rejse to nm over helix til den modsatte målstreng. Selv om en udsendt elektron, der bevæger sig i den perfekte orientering fra dette

32P henfald at bryde den modsatte streng vil kun ske ved en lav procentdel af tiden, er det stadig meget højere og mere effektiv end de elektroner, der er genereret af andre beta producerende radioisotoper på celleoverfladen eller i cytosolen, som skal rejse afstande, der normalt tusind gange eller mere længere i længden.

Vandig [

32P] PO tilbyder

4 mange potentielle fordele i forhold til andre anti-cancer terapeutiske midler. For det første tillader hurtig systemisk fordeling og inkorporering i primære tumorer og

32P fortrinsvis er absorberet af hurtigt proliferende celler, såsom cancerceller. Desuden [

32p] PO

4 forbedrer den tidligere direkte indsprøjtning af partikulært kolloid

32P i primære tumorer, da vandig [

32P] PO

4 giver mulighed for en enkel intravenøs injektion [33-35].

For det andet,

32P er allerede en FDA-godkendt lægemiddel, med en kendt lav toksicitet profil [36]. Tidligere kliniske undersøgelser af

32P-orthophosphat [PO

4] i vandig opløsning til polycytæmi vera og essentiel thrombocythemi har etableret tolerable dosisniveauer, især med hensyn til myelosuppression [36]. I denne sammenhæng er det bemærkelsesværdigt, at nogen indlysende toksiske bivirkninger forekom i nogen af ​​de modelsystemer vi har studeret til dato. Den anden bekymring med dets anvendelse i disse benigne hæmatologiske lidelser har været en øget forekomst af efterfølgende akut myeloid leukæmi (AML) [37,38], men hos patienter med fremskredne solide tumorer er mindre bekymrende, da efterfølgende AML forekommer i kun 10%

ti år

efter

32P behandling [39]. Desuden er denne nye indikation og benyttelse for en eksisterende lægemiddel sparer megen tid og omkostninger i forhold til de nødvendige investeringer til nye anticancer midler.

For det tredje, i modsætning til andre beta-emitterende isotoper, såsom

131I og

90Y,

32P er indarbejdet direkte i spirende DNA [40,41]. Vore data antyder, at denne inkorporering forøger dramatisk celledræbende effektivitet

32P, idet henfaldet af inkorporeret

32P til svovl kemisk bryder den første streng af DNA’et og den frigjorte elektron behov for at rejse kun 2 nm at nå dens kontralaterale DNA-streng. Således er denne proces effektivt forårsager dobbelt-strenget DNA brud, som er nødvendig for at overvinde iboende DNA reparation veje og opnå celledød. I modsætning til

32P, andre elektron-emitterende isotoper (såsom

131I og

90Y) udsender elektroner fra afstande på 1000 til 5000 nm væk fra DNA, nogle 500 til 2500 gange længere end afstanden af en indbygget

32p atom fra sin søster DNA-streng [42-44].

Det er spændende at bemærke, at tidlige forskere udfører Sanger sekventering med [

32p] dATP i 1980’erne bemærkede, at sekventering produkter krævede elektroforese inden for to dage efter sekventeringsreaktionen, ellers bands syntes at dispergere og var vanskelige at fortolke [45]. Det samme princip kan arbejde med

32P som et anti-cancer middel. Henfald af

32P til svovl kemisk saks strengen af ​​DNA i hvilket det indarbejdes. Vi hypotesen, at denne begivenhed, kombineret med den meget tæt nærhed af inkorporeret radioisotop til sin søster DNA-streng, resulterer i en dramatisk stigning i celle-drab effektivitet

vs

. andre beta-partikel udledere såsom

131I og

90Y, som ikke er indarbejdet i spirende DNA. De resulterende konsekvenser for den potentielle kliniske behandling af primære humane tumorer er indlysende og vidtrækkende.

Tak

Vi vil gerne takke Mr. Gilbert Green for ekspert teknisk bistand injicere mus.