PLoS ONE: prognostiske værdi for Human equilibrativ NucleosideTransporter1 i kræft i bugspytkirtlen Modtagelse Gemcitabin kemoterapi: En Meta-Analysis

Abstrakt

Baggrund

Den potentielle prognostiske værdi af menneskets equilibrativ nukleosid transporter1 i bugspytkirtlen kræft modtager gemcitabin kemoterapi er variabelt rapporteret.

målsætning

Formålet med denne undersøgelse var at foretage en systematisk gennemgang af litteraturen evaluere menneske equilibrativ nukleosid transporter1 udtryk som en prognostisk faktor i bugspytkirtelkræft modtagende gemcitabin kemoterapi og til at foretage en efterfølgende metaanalyse at kvantificere den samlede prognostiske effekt.

Metoder

Relaterede studier blev identificeret og vurderet for kvalitet gennem flere søgestrategier. Kun undersøgelser analysere bugspytkirtelkræft modtager gemcitabin kemoterapi var berettiget til inklusion. Data blev indsamlet fra undersøgelser, der sammenligner overordnet, sygdomsfri og progressionsfri overlevelse (OS, DFS og PFS) hos patienter med lavt menneske equilibrativ nukleosid transporter1 niveauer og dem, der har høje niveauer. Hazard ratio (HR) og dets 95% konfidensinterval (95% CI) blev anvendt til at vurdere styrken af ​​associationer. Hazard ratio større end 1 afspejler negativ overlevelse forbundet med lav menneske equilibrativ nukleosid transporter1 niveauer.

Resultater

I alt 12 studier (n = 875) var involveret i denne meta-analyse (12 for OS, 5 for DFS, 3 for PFS). For den samlede og sygdomsfri overlevelse, de puljede HRs af menneskelig equilibrativ nukleosid transporter1 var signifikante på 2,93 (95% konfidensinterval [95% CI], 2,37-3,64) og 2,67 (95% CI, 1,87-3,81), hhv. For progressionsfri overlevelse, den poolede HR i højere menneske equilibrativ nukleosid transporter1 udtryk i bugspytkirtelkræft modtager gemcitabin kemoterapi var 2,76 (95% CI, 1,76-4,34). Ingen tegn på betydelig heterogenitet eller publikationsbias blev set i nogen af ​​disse undersøgelser.

Konklusion

Disse resultater understøtter tilfældet for en lav menneske equilibrativ nukleosid transporter1 niveau repræsenterer en betydelig og reproducerbar markør for negativ prognose i bugspytkirtelkræft modtager gemcitabin kemoterapi

Henvisning:. Liu ZQ, Han YC, Zhang X, Chu L, Fang JM, Zhao HX, et al. (2014) prognostiske værdi for Human equilibrativ NucleosideTransporter1 i kræft i bugspytkirtlen Modtagelse Gemcitabin kemoterapi: en meta-analyse. PLoS ONE 9 (1): e87103. doi: 10,1371 /journal.pone.0087103

Redaktør: Balraj Mittal, Sanjay Gandhi Medical Institute, Indien

Modtaget: September 20, 2013; Accepteret: 18. december 2013; Udgivet: 27 Jan 2014

Copyright: © 2014 Liu et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne artikel er støttet af National Natural Science Foundation of China (NO 30.872.591) og Shanghai Videnskab og Teknologi Kommissionen (NO: 11411950602). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

pancreas karcinom, en af ​​de mest dødelige maligne lidelser, er den fjerde hyppigste årsag til kræft-relaterede dødsfald på verdensplan [1], dels på grund af resistens over for de fleste kemoterapeutiske stoffer. Trods de seneste kirurgiske fremskridt, succesraten fortsat utilfredsstillende på 9% til 20% [2], [3]. Gemcitabin (GEM), nucleosidet pyridinanalogen, er godkendt til brug i ikke-småcellet lungecancer, brystcancer og ovariecancer. Det er en af ​​de mest almindeligt anvendte kemoterapeutiske midler og er den mest effektive middel i lindring af fremskreden pancreascancer, hvor det har vist sig at forbedre kliniske symptomer og beskedent forlænge overlevelsen [4]. Men behandlingsresultater og gunstige resultater med GEM forblive variabel. Svarprocenten med GEM varierer fra 5,4% til 16,7% [4], [5] i fremskreden eller metastatisk kræft i bugspytkirtlen. GEM forlængede median overlevelsestid (MST) af patienterne behandlet med 5FU fra 4,2-4,5 måneder [4] til 5.9-6.5 måneder [5], [6] i lokalt fremskreden eller metastatisk pancreascancer. Et stort randomiseret fase III forsøg, den Charite Onkologie 001 (CONKO-001) Undersøgelsen viste, at patienter med komplet resektion af kræft i bugspytkirtlen, brug af adjuverende gemcitabin i 6 måneder resulterede i øget samlet overlevelse samt sygdomsfri overlevelse [ ,,,0],7]. Den anden store randomiserede fase III forsøg, den europæiske Study Group for kræft i bugspytkirtlen 3 (ESPAC’er-3) undersøgelse, bekræftede også resultatet [8]. Gemcitabin er stærkt hydrofil, og derfor er forbundet med langsom passiv diffusion gennem hydrofobe cellemembraner. Effektiv gennemtrængning af gemcitabin gennem cellemembraner kræver specialiserede integrale membran transportproteiner [9]. Blandt disse transportere, den humane equilibrativ nukleosid transporter 1 (hENT1) er den vigtigste mediator af gemcitabin optagelse i humane celler [10]. Celler, der mangler hENT1 er meget modstandsdygtige over gemcitabin [11].

Gemcitabin er et deoxycytidin analog, som krydser cellemembranen gennem nukleosid transportører. Kinetiske studier af humane cellelinjer med definerede nukleosid transportør processer har vist, at gemcitabin intracellulær optagelse blev medieret af hENT1, hENT2, hCNT1, og hCNT3, den hENT1 protein, som er lokaliseret i plasma og mitochondriemembraner, medierer de fleste af gemcitabin transport i prækliniske modeller [11] – [13]. De nucleosidtransportinhibitorer nitrobenzyl thioinosine eller dipyridamol reduceret følsomhed over for gemcitabin ved 39- til 1.800-fold [11]. Inden i cellen, er gemcitabin omdannes til dets aktive difosfat (dFdCDP) og triphosphat metabolitter (dFdCDP). I denne reaktion deoxycytidinkinase (dCK) er det hastighedsbegrænsende enzym, og cytidindeaminase (CDA) og 5’nucleotidase (5′-NT) er centrale hastighedsbegrænsende enzymer [14]. Den dFdCTP er inkorporeret i DNA med en efterfølgende tilsætning af et naturligt nukleotid, hvorved strengen mindre sårbar over for DNA reparation ved basepar excision [15]. Imidlertid er cytotoksiciteten forstærket gennem flere mekanismer. For eksempel dFdCDP hæmmer ribonukleotid reduktaser (RRM1 og RRM2 underenheder), som er de vigtigste enzymer i syntesen af ​​dNTP, hæmmer de novo-DNA-syntese og reparation veje [16]. Nedsat dCTP øger hastigheden af ​​inkorporeringen af ​​dFdCTP i DNA, for at overvinde den negative dCK feedback [17]. Kemoresistens af kræft i bugspytkirtlen cellelinje til gemcitabin var relateret til balancen i dCK, RRM1, RRM2 og hENT1, som er de vigtigste enzymer involveret i gemcitabin transport og metaboliske veje [16].

For nylig, lav hENT1 var forbundet med dårlig prognose i bugspytkirtelkræft modtager gemcitabin kemoterapi (PCGC) [18]. Andre undersøgelser viste ingen signifikant sammenhæng mellem hENT1 og overlevelse i PCGC [19]. Men begge undersøgelserne involverede en lille stikprøve. Vi har derfor foretaget en systematisk gennemgang og meta-analyse for at vurdere den samlede risiko for lav hENT1 for overlevelse i PCGC.

Materialer og metoder

1 Søgestrategi

En systematisk litteratursøgning op til September2013 blev udført i MEDLINE og EMBASE at identificere relevante studier. En indledende søgestrategi ved anvendelse af anerkendte søgetermer [(hENT1 eller menneskers equilibrativ nukleosid transporter1) og “prognose” og ( ‘bugspytkirtelkræft “eller” pancreas karcinom) og gemcitabin] blev gennemført.

2 Udvælgelseskriterier

Der blev støtteberettigede, hvis de opfyldte følgende kriterier: (i) måling af forbehandling hENT1 værdier; (Ii) evaluering af den potentielle sammenhæng mellem forbehandling hENT1 og overlevelse resultatet af PCGC; (Iii) prospektivt eller retrospektivt studie design; og (iv) gemcitabin behandling. Artikler blev udelukket baseret på følgende kriterier: (i) bogstaver eller oversigtsartikler, (ii) laboratorieundersøgelser (iii) ikke-engelske eller kinesiske artikler, eller (iv) fravær af vigtige oplysninger såsom stikprøvestørrelse, hazard ratio (HR ), 95% CI, og P-værdi.

Alle søgninger blev gennemført uafhængigt af 2 korrekturlæsere (ZL og YH) .De undersøgelser identificerede var dobbelt-tjekket af både. Uoverensstemmelser blev løst ved konsensus mellem de 2 korrekturlæsere eller i samråd med en tredje korrekturlæser (Q.X.). Desuden blev en manuel søgning udføres ved hjælp af referencer fra den relevante litteratur, herunder alle de identificerede undersøgelser, anmeldelser, og ledere. Når dublerede undersøgelser blev fundet, studiet med rapporterede HRs eller involverer yderligere patienter (sædvanligvis den seneste), blev anvendt til meta-analyse for at forhindre overlapning mellem kohorter og overvurdering af den samlede HR.

3 Kvalitetsvurdering

Vi systematisk vurderes kvaliteten af ​​alle de undersøgelser, der indgår, ifølge en afgørende revision tjekliste over den hollandske Cochrane Center foreslået af MOOSE [20]. De vigtigste punkter i den aktuelle tjekliste omfatter (i) klar definition af studiepopulation og oprindelse land; (Ii) klar definition af studiedesign; (Iii) klar definition af resultatet vurdering, samlet overlevelse (OS), sygdomsfri overlevelse (DFS) og progressionsfri overlevelse (PFS), med den manglende begivenhed for DFS defineret som sygdom tilbagefald (lokal eller regional), fjern sygdom ( herunder abdominal ascites, peritoneal såning og andre abdominale sites), anden primær eller død uanset årsag; (Iv) klar definition af cutoff for hENT1, og (v) tilstrækkelig lang opfølgning. Undersøgelser ses bort alle 5 af disse punkter blev udelukket for at sikre høj kvalitet i metaanalysen.

En flowdiagram over udvælgelsen undersøgelsen processen er vist i figur 1.

4 Data udvinding og konvertering

følgende data blev indsamlet: (i) offentliggørelse detaljer, herunder første forfatters efternavn, udgivelsesår, studiepopulation, land, hvor undersøgelsen blev udført; (Ii) undersøgelse design; (Iii) kendetegn for den undersøgte population, herunder prøve størrelse, alder, og antallet af høj ekspression; (Iv) behandling indstilling, regime, måling af prøven, og cutoff; og (v) HR af forhøjet hENT1 til OS, DFS og PFS samt deres 95% kreditinstitutter. Den enkleste metode bestod i direkte indsamling af HR og deres 95% kreditinstitutter fra den oprindelige litteratur, med en HR på mere end 1associated med et dårligt resultat. Hvornår blev ikke direkte indberettet disse data, vi udvindes det samlede antal observerede dødsfald og antallet af patienter i hver gruppe til at beregne HR [21]. Data blev udvundet fra overlevelse plots når data var kun tilgængelig som Kaplan-Meier kurver, efterfulgt af måling af HR ved hjælp af den beskrevne metode [21].

5 Statistisk analyse

heterogenitet kombineret HRs blev udført ved hjælp af Cochran Q test og Higgins ‘I-squared statistik. En P-værdi på mindre end 0,05 blev betragtet som signifikant. Vi anvendte en tilfældig effekt model (Der Simonian og Laird metoden) hvis der blev konstateret heterogenitet (P 0,05). En fastforrentede effekter modellen blev anvendt i fravær af mellem-studie heterogenitet (P ≥ 0,05). Offentliggørelse skævhed blev evalueret ved tragten plot med Egger partiskhed indikator test [22]. Alle analyser blev udført ved hjælp af den statistiske software Stata (version 12.0).

Resultater

1 data hentning

Vi identificerede 127 poster for hENT1 efter en primær søgning af PubMed og EMBASE . Efter at have læst titler og abstracts, blev 113 undersøgelser udelukket. Af de udvalgte til detaljeret evaluering studier blev en undersøgelse udelukket som replikere [23], og en undersøgelse blev udelukket på grund af manglende HR-data [24]. Den endelige meta-analyse involverede 12 undersøgelser for hENT1 [1], [18], [19], [25] – [33] (fig. 1). Otte publikationer specifikt involveret to undersøgelser [18], [19], [26] -. [30], [33]

2 Undersøgelse egenskaber

De karakteristiske træk af overført studier er sammenfattet i tabel 1. Vi indsamlede data fra 12 studier med i alt 875 patienter med en median antal 55,5 patienter pr studie (range = 21-222). Fem undersøgelser blev foretaget i Japan [19], [27] – [29], [32], to i USA [18], [33], en i Kina [26], en i Frankrig [31] og 2 i Belgien [1], [30] og 1 i Italien [25]. Seks artikler erklærede opfølgningsperioden, og præciseret medianen opfølgningsperiode. I de 12 studier (n = 875), blev værdier for hENT1 analyseres ved forskellige metoder i hver undersøgelse. I 8 undersøgelser blev hENT1 niveau målt ved immunohistokemi (IHC). I de øvrige 4 undersøgelser blev hENT1 mRNA målt ved polymerasekædereaktion (PCR). Alle artikler relateret til IHC vurderet og scorede hENT1 intensitet. Blev dog positiv hENT1 farvning i IHC defineres forskelligt i forskellige undersøgelser. Tre af de IHC studier medførte en konkordans analyse for hENT1 positivitet med mindst to observatører, for 100% enighed. Men ingen artiklen, at Kappa-koefficienter. I 9 undersøgelser blev gemcitabin anvendt som adjuverende behandling, blev det brugt som neoadjuverende terapi i en undersøgelse, og som palliativ behandling i to andre studier. Tre af studierne var fremadrettede analyser og ni var retrospektive analyser. Elleve af de udvalgte studier præsenteret HRs. I den resterende undersøgelse, vi beregnet HRs fra de tilgængelige data eller overlevelseskurver.

3 OS

Undersøgelser evaluerer OS præsenterede ingen tegn på signifikant heterogenitet for hENT1 (I

2 = 0,0%, P = 0,977). Derfor blev en fastforrentede effekter model, der anvendes til at beregne en samlet HR og dens 95% CI. Den lave hENT1 niveau var signifikant korreleret til OS med en samlet HR-estimat på 2,93 (95% CI: 2,37-3,64) (. Figur 2).

Overlevelsesdata rapporteres som den samlede overlevelse, sygdomsfri overlevelse, . og progressionsfri overlevelse

i undergruppe meta-analyser udføres separat, det lave hENT1 niveau var signifikant korreleret til OS med en samlet HR-estimat på 3,06 (95% CI: 2,37-3,93) i IHC gruppe. Den samlede HR var 2,63 (95% CI: 1,75-3,97) i PCR-gruppe. Foreningen af ​​lav hENT1 med OS i bugspytkirtelkræft heller ikke afvige studiested, studie type eller behandlingsmetode (tabel 2).

4 DFS og PFS

En fast virkninger modellen blev anvendt i DFS og PFS analyser som P-værdier på mellem-undersøgelse heterogenitet var 0,87 og 0,86. Som illustreret i figur 2, den kombinerede HR på 2,67 (95% CI: 1,87-3,81) viste signifikant sammenhæng mellem det lave hENT1 niveau og DFS i PCGC patienter. Den samlede HR var 2,76 (95% CI, 1,76-4,34) for lav hENT1.

5 Offentliggørelse skævhed

Endelig har vi anvendt funnel plots og Egger test til at evaluere publikationsbias af de inkluderede studier . Som vist i figur 3, alle i tragten plots var symmetrisk. Vi observerede ingen tegn på signifikant publikationsbias i OS, DFS og PFS, da P-værdier for Egger regression aflytninger var mere end 0,05 (P = 0,22, 0,769 og 0,707 henholdsvis).

A) samlet overlevelse, B) sygdomsfri overlevelse, og C) progressionsfri overlevelse.

diskussion

Tidligere metaanalyser af undersøgelser undersøgte den prognostiske værdi af molekylære markører i forskellige maligniteter. Disse omfatter VEGF [34] og p53 [35]. Til dato, ikke sådan metaanalyse evalueret ent1 i bugspytkirtelkræft behandlet med gemcitabin. Endvidere har lav hENT1 blevet forbundet med dårlig prognose i bugspytkirtelkræft forvaltes med gemcitabin kemoterapi [18]. Andre undersøgelser har ikke vist nogen signifikant sammenhæng mellem hENT1 og PCGC overlevelse [19]. Men antallet af patienter, der indgår i hver undersøgelse var lille. Derfor var det nødvendigt at kombinere og analysere data for at opnå acceptable resultater.

I den nuværende meta-analyse, vi indskrevet 12 undersøgelser vedrørende virkningerne af lav hENT1 udtryk på PCGC overlevelse. I alle disse undersøgelser blev hENT1 ekspression påvist ved immunhistokemi eller PCR med kirurgiske prøver. Meta-analyse antydede, at lav hENT1 var en faktor i forbindelse med dårlig prognose i PCGC. Vi yderligere udført undergruppe analyse, hvor hENT1 ekspression blev målt ved IHC. Resultaterne viste, at lav ekspression af hENT1 var tæt forbundet med dårlig prognose hos patienter med PCGC. Desuden hENT1 udtryk ved PCR viste også stor indflydelse på patienternes OS.

De seneste Prodige 4 /Accord 11 forsøgsresultater har udvidet de terapeutiske muligheder i metastatisk PAC, ved at demonstrere overlegenhed FOLFIRINOX regime sammenlignet med gemcitabin alene [36]. Denne undersøgelse omfattede kun patienter, som var i alderen under 76 år, med en god performance status (ECOG 0 eller 1), ingen hjerte-iskæmi, og normale eller næsten normale bilirubinniveauer. ingen studie undersøgte imidlertid, om dette regime eller andre regimer (fluoropyrimidiner eller erlotinib) blev indiceret til patienter med lav hENT1 ekspression i en adjuvans indstilling. Flere undersøgelser rapporterede metoder med histopatologiske eller cytopathologic diagnose, herunder USA-og CT-vejledt perkutan biopsi, transpapillary pancreas kanalen biopsi, og cytologisk evaluering af bugspyt opnået via ERCP [37] – [39]. Evnen til at visualisere små læsioner med EUS er fremragende, og i modsætning til andre metoder, er hele pancreas let afbildes [37], [39], [40]. Således er EUS-FNA almindeligt anvendt som en cytologisk og histologisk prøveindsamling værktøj i bugspytkirtelkræft. Evaluering af hENT1 i bugspytkirtelkræft væv erhvervet med minimalt invasive procedurer (endoskopisk ultralyd-vejledt bøde-nål aspiration eller edb tomografi-vejledt biopsi) garanterer yderligere undersøgelse for at bestemme potentialet til at individualisere gemcitabin behandling i størstedelen af ​​bugspytkirtlen kræftpatienter, der præsenterer med lokalt fremskreden eller metastatisk sygdom.

meta-analyse af prognostisk litteratur er forbundet med en række iboende begrænsninger. Retrospektiv undersøgelse design er en af ​​de vigtigste begrænsninger. Kun tre af de undersøgelser, der indgår i den aktuelle metaanalyse indebærer en potentiel design. Tilgængeligheden og tilstrækkeligheden af ​​tilsvarende klinisk-patologisk data er også en væsentlig overvejelse i retrospektive undersøgelser af denne type. Vi identificerede flere undersøgelser rapporterer ufuldstændige histopatologiske datasæt. Andre ulemper omfatter følgende: For det første, vi har undladt at gennemgå upublicerede artikler og abstracts, som de fleste af de data, der ikke var påkrævet. For det andet, vi medtaget støtteberettigede engelske og kinesiske undersøgelser kun, hvilket tyder på et sprog bias. For det tredje, HR beregning fra data eller ekstrapolation fra overlevelseskurverne i de artikler, i mangel af direkte indberettede HR værdier, der blev indført et element af nedsat pålidelighed.

Vores meta-analyse viste også betydelige styrker. Først, at kvaliteten af ​​undersøgelser, der indgår i metaanalysen var tilfredsstillende og strengt mødte inklusionskriterierne. For det andet havde de resumé risiko estimater af vores undersøgelse ikke vise tegn på heterogenitet og offentliggørelse bias. For det tredje, vi udførte undergruppe analyse ved at måle hENT1.

Konklusion

Som konklusion, vores meta-analyse viste, at lav hENT1 udtryk var signifikant associeret med dårligere PCGC overlevelse. hENT1 var en stærk prædiktor for alle 3 Survival resultater. Den kritiske rolle hENT1 i kræft prognosen kan bidrage til den kliniske anvendelighed. I betragtning af de begrænsninger den nuværende metaanalyse, yderligere forskning med standardiserede, upartiske metoder og større, er hele verden stikprøvestørrelser forpligtet til at bekræfte vores resultater.

Støtte oplysninger

Tjekliste S1.

doi: 10,1371 /journal.pone.0087103.s001

(DOC)

Tak

Vi takker Bangbao Tao og Lin Ma for deres fremragende tekniske support; Dongqing Zuo for statistisk rådgivning; samt Fei Hu og Chunyan Li for frugtbare diskussioner.