PLoS ONE: SULF2 methylering associeret med In Vitro cisplatin Følsomhed og Klinisk effekt for mavekræft Patienter behandlet med en modificeret FOLFOX Regimen

Abstrakt

Målsætning

Biomarkører i stand til at diskriminere de patienter, der er tilbøjelige til at reagere på visse kemoterapeutiske midler kunne forbedre den kliniske effektivitet. De sulfataser (SULFs) spiller en kritisk rolle i patogenesen af ​​en række forskellige humane cancere. Her har vi fokuseret vores undersøgelse på prognostiske og prædiktive effekt af

SULF2

methylering i mavekræft.

Metoder

Promotor CpG ø methylering af

SULF2

blev analyseret i 100 mavekræft prøver.

in vitro

følsomhed over for cisplatin, docetaxel, gemcitabin, irinotecan og pemetrexed blev bestemt ved histoculture lægemiddelrespons assay (HDRA). Derudover 56 gastric kræftpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime (hver anden uge oxaliplatin plus 5-FU og folinsyre), blev efterfølgende analyseret for yderligere at vurdere den prognostiske og prædiktive effekt af

SULF2

methylering i mavekræft.

Resultater

methyleret

SULF2 Hotel (

SULF2M

) blev påvist i 28 patienter, mens de resterende 72 patienter viste umethyleret

SULF2 Hotel (

SULF2U

, methylering rate: 28%). Prøver med

SULF2U

var mere følsomme over for cisplatin end dem med

SULF2M

(hæmning rate: 48,80% vs. 38,15%,

P

= 0,02), mens prøver med

SULF2M

var mere følsomme over for irinotecan end

SULF2U

(hæmning rate: 53,61% vs. 40,92%,

P

= 0,01). Der var ingen sammenhæng mellem

SULF2

methylering og

in vitro

følsomhed over for docetaxel, gemcitabin og pemetrexed.

SULF2

methylering viste sig at have en signifikant sammenhæng med cisplatin effekt (

SULF2M

: 57,14%,

SULF2U

: 80,56%,

P

= 0,02 ) og irinotecan effekt (

SULF2M

: 89,29%,

SULF2U

: 62,50%,

P

= 0,01). Blandt de 56 patienter, der fik den modificerede FOLFOX regime blev der observeret en signifikant sammenhæng mellem overlevelse og

SULF2

methylering status (

SULF2M:

309 dage, 95% CI = 236 til 382 dage;

SULF2U:

481 dage, 95% CI = 418 til 490 dage;

P

= 0,02). Multivariat analyse viste, at

SULF2

methylering var en uafhængig prognostisk faktor af den samlede overlevelse i mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi.

Konklusion

SULF2

methylering er negativt forbundet med cisplatin følsomhed

in vitro

.

SULF2

methylering kan være en roman prognostisk biomarkør for mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi

Henvisning:. Shen J, Wei J, Wang H, Yang Y, Yue G, Wang L et al. (2013)

SULF2

Methylering er associeret med

In Vitro

cisplatin Følsomhed og Klinisk effekt for mavekræft patienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime. PLoS ONE 8 (10): e75564. doi: 10,1371 /journal.pone.0075564

Redaktør: Dong Zhang, Nanjing Medical University, Kina

Modtaget: Juni 12, 2013; Accepteret: 14. august 2013; Udgivet: 4 okt 2013

Copyright: © 2013 Shen et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev finansieret af tilskud fra National Natural Science Foundation of China (Grant nr 81220108023 og 81.172.094) og Top Seks Talents projekt i Jiangsu-provinsen (Grant nr 2011ws005). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

mavekræft er en af ​​de hyppigste årsager til kræft-relaterede dødsfald på verdensplan [1], [2]. Multimodale behandlingsprotokoller, hovedsagelig baseret på platin og 5-fluorouracil (5-FU), har vist sig at forlænge patientens overlevelse; dog med en hvilken som helst kombination af kemoterapeutiske midler, svarprocenten er kun ca. 30% -50% [3], [4]. I et forsøg på at forbedre den kliniske effektivitet, er det vigtigt og nødvendigt at identificere biomarkører i stand til at diskriminere de patienter, der er tilbøjelige til at reagere på visse kemoterapeutiske stoffer [4] -. [9]

heparansulfatproteoglycaner (HSPGs ) er co- receptorer for heparinbindende vækstfaktorer og cytokiner fordelt på celleoverfladen og i den ekstracellulære matrix. To isoformer af de ekstracellulære heparansulfat 6-O-endosulfatases (SULFs), SULF1 og SULF2, er blevet afsløret i pattedyr. Begge proteiner udskilles til celleoverfladen at modulere sulfatering af HSPGs [10]. Selvom tidligere rapporter utvetydigt har fremhævet den kritiske rolle, SULFs spiller i patogenesen af ​​forskellige humane kræftformer, har udtalelserne om rolle SULFs i udviklingen af ​​kræft været noget polariseret. Adskillige beviser viser, at SULFs er negative regulatorer af tumorcellevækst, og at overekspression af SULFs i tumorceller inhiberer cellevækst ved at deregulere flere faktorer, herunder FGF-2, HB-EGF og HGF [11] – [13]. Andre undersøgelser af den opfattelse, at SULFs er positive regulatorer af oncogenetic signalveje, herunder Wnt, BMP, pindsvin og GDNF [14] – [16], og forøget ekspression af SULFs er udbredt i forskellige kræftformer, herunder gastrisk, hepatocellulær, bugspytkirtel og bryst kræft, ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) og hoved og hals tumorer [10], [13], [17] – [20]. Høj ekspression af SULF2 er blevet forbundet med ringe overlevelse hos patienter med hepatocellulær carcinom og NSCLC [18], [20]. Den foreliggende dokumentation på methylering status og ekspressionsniveauer af

SULFs

i gastrisk kræft, dog er ikke-afgørende, og prognostiske eller prædiktive værdi af

SULFs

for kemosensitivitet forudsigelse fortsat ukendt.

i denne undersøgelse har vi analyseret promoter CpG øen methylering af

SULF2

, det gen, der koder for SULF2 endosulfatase, og dens tilknytning til

in vitro

følsomhed over for cisplatin, docetaxel , gemcitabin, irinotecan, og pemetrexed i 100 humane gastriske cancer prøver. Til dette formål udføres vi en serie af

in vitro

følsomhed test på frisk fjernede gastrisk tumor væv og evalueret den mulige brug af

SULF2

methylering status til at forudsige den kemoterapeutiske effekt af der agenter. Derefter analyserede vi efterfølgende

SULF2

methylering i en kohorte af 56 mavecancerpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime og konkluderede, at

SULF2U

fungerer som en selvstændig prognostisk biomarkør i mavecancerpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime.

Materialer og metoder

Etik Statement

Alle forskning med mennesket deltagere er blevet godkendt af det menneskelige forskningspotentiale Beskyttende Komité Drum Tower Hospital Tilknyttet til Medical School Nanjing Universitet og skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle patienter.

patienter og vævsprøver

Tilmeldte patienter var dem, der gennemgår den gastrektomi i Institut for Almen Kirurgi af Drum Tower Hospital, Nanjing, Kina i perioden fra august 2010 til oktober 2011. kriterier for optagelse i studiet omfattede følgende parametre: (1) alder 18 år; (2) histologisk bekræftet gastrisk adenocarcinom, mucinøs eller signetring celle adenocarcinom; (3) ingen andre end mavekræft tidligere eller samtidige maligniteter; (4) ingen tidligere kemoterapi eller strålebehandling, enten adjuvans eller palliativ; og (5) passende funktion af alle større organer. Vævsprøver blev ekstraheret fra 100 frisk fjernede gastriske tumorer. Hver tumorvæv var opdelt i to dele: (1) den ene del blev holdt i 4 ° C Hanks ‘balanceret saltopløsning med 1% penicillin /streptomycin efter indsamling, og derefter sendt til laboratoriet inden for 15 minutter i 4 ° C, for

In vitro

evaluering af kemosensitivitet ved histoculture lægemiddelrespons assay (HDRA) [21], [22]; (2) den resterende del blev omdannet formalinfikserede paraffinindlejrede (FFPE) tumorblokke for patologisk observation og detektion methylering. Vi efterfølgende revideret patienternes journaler og kirurgi rapporter til at identificere kliniske og histopatologiske data, herunder køn, histologi, tumor site, scene, histologisk kvalitet og lymfeknude metastaser. Tumorer blev klassificeret i henhold til International Union Against Cancer (UICC) TNM klassifikation. Skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle patienter og protokollerne til denne undersøgelse blev godkendt af Human Research Protective Komité Drum Tower Hospital.

HDRA

HDRA procedurer blev udført som tidligere rapporteret af Furukawa og kolleger [21], [22]. Kort fortalt blev frisk tumorvæv vasket to gange med Hanks balancerede saltopløsning og hakket i små stykker på ca. 10 mg i vægt og 0,5 mm i diameter, som derefter blev anbragt på tilberedt collagen (Health Design, Rochester, NY) overflader i 24 -Nå mikroplader. Optimale koncentrationer af lægemidler, der anvendes til at skelne

in vitro

følsomhed og modstand var 20 ug /ml for cisplatin [23], 100 ug /ml for docetaxel [22], 50 ug /ml for gemcitabin [23], 20 ug /ml for irinotecan [23], og 400 ug /ml for pemetrexed [5], i henhold til dens maksimale plasmakoncentration hos patienter. Cisplatin, docetaxel og irinotecan blev opnået fra Jiangsu Hengrui Medicine Company (Jiangsu, Kina), mens pemetrexed og gemcitabin blev opnået fra Eli Lilly and Company (Shanghai, Kina). 8 parallelle dyrkningsbrønde blev anvendt til hver lægemiddelkoncentration, samt til kontrol. Pladerne blev inkuberet i 7 dage ved 37 ° C i nærværelse af lægemidler opløst i RPMI 1640 medium indeholdende 20% føtalt kalveserum og efterlades i en fugtig atmosfære indeholdende 95% luft-5% CO

2. Efter histoculture, 100 pi type I collagenase (0,1 mg /ml, Sigma, Shanghai, Kina) og 100 pi 3- (4,5-dimethyl-2-thiazotyl) -2,5-diphenyl-2H- tetrazoliumbromid ( MTT) opløsning (5 mg /ml, Sigma, Shanghai, Kina) blev tilsat til hver kultur brønd og inkuberet i yderligere 16 timer. Efter ekstraktion med dimethylsulfoxid blev opløsningens absorbans i hver brønd læses ved 540 nm.

Evaluering af følsomhed til Anti-cancer Agenter i HDRA

Absorbansen per gram dyrkede tumorvæv blev beregnet ud fra den gennemsnitlige absorbans af væv fra 8 parallelle dyrkningsbrønde, og tumorvævet vægt blev bestemt før kultur. Inhiberingen af ​​hvert enkelt anticancermiddel blev beregnet ved anvendelse af følgende formel: Inhibition rate (%) = (1-T /C) x 100, hvor T er den gennemsnitlige absorbans af behandlede tumor /Vægt og C er den gennemsnitlige absorbans af kontrol tumor /vægt. De afskårne hæmning kurser, der anvendes til at skelne den følsomme og resistente tilfælde blev vedtaget på 30%, 40%, 50% og 60% for hvert testet lægemiddel.

in vitro

effekt rate blev også estimeret baseret på cut-off hæmning sats som følger:. Effekt rate (%) = antal følsomme sager /samlede antal sager

Patienter ‘Kemoterapi

af alle patienter, 56 med Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG) performance status (PS) ≤2 modtaget en modificeret FOLFOX (en kombination af 5-FU og platin) kemoterapi efter resektion af primære tumorer som følger: oxaliplatin 85 mgm

-2 plus folinsyre 200 mgm

-2 som en 2 h infusion på dag 1, efterfulgt af en 22 h infusion af 5-FU 2000 MGM

-2 på dag 1 og 2, hver anden uge. Disse 56 patienter blev yderligere fulgt op og deres overlevelse tid blev beregnet fra datoen for diagnosen til datoen for den sidste opfølgning eller død uanset årsag.

DNA Udvinding og Modification

Tre 7 um snit blev fremstillet fra primære tumorblokke der indeholdt mindst 80% tumorceller. Efter hæmatoxylin-eosin-farvning blev de ondartede dele mikrodissekeres og overført til et mikrocentrifugerør. DNA blev isoleret rutinemæssigt og blev derefter kemisk modificeret ved natriumbisulfit at konvertere alle ikke-methylerede cytosiner til uraciler mens methylcytosines uforandret [18]. Derefter blev de opbevaret ved -20 ° C til yderligere analyse.

methyleringsspecifik polymerasekædereaktion (MSP)

MSP blev udført for at bestemme status for methylering af

SULF2

anvendelse af ABI Prism 7300HT Sequence Detection System (Applied Biosystems). Hver PCR reaktion indeholdt genomisk DNA 2 pi, SYBR Green PCR Mix (Takara, Japan) 10 pi, vand 7,7 pi, og primere 0,15 pi (10 pmol /l). PCR-betingelserne var 95 ° C i 10 minutter, efterfulgt af 45 cykler ved 59 ° C i 30 s, 72 ° C i 30 s og 95 ° C i 30 s. Primere til

SULF2

methylerede PCR (Takara, Japan) var som følger: fremad 5’TAAGTGTTTTTTTTATAGCGGC 3 ‘, omvendt 5’TACCGTAATTTCCGCTATC 3’. Primere til

SULF2

umethyleret PCR (Takara, Japan) var som følger: fremad 5’GTTTATAAGTGTTTTTTTATAGTGGT3 «, omvendt 5’TACCATAATTTCCACTATCCCT 3 ‘. Hver batch af reaktionen omfattede en positiv kontrol fra methyltransferase (M.SssI) -behandlede humant genomisk DNA (fuldt methyleret), en negativ kontrol fra DNA-prøver, som var blevet bekræftet som ikke-methyleret og en anden negativ kontrol uden DNA. Samtlige forsøg blev udført in duplo. Resultaterne blev valideret for udvalgte prøver gennem kombineret bisulfit modifikation og bisulfit sekventering.

Statistisk analyse

Værdier blev udtrykt som middelværdi ± standardafvigelse. Forskelle i hæmning satserne mellem grupper blev evalueret ved brug af t-test. De mulige sammenslutninger af SULF2 methylering med kliniske karakteristika og

in vitro

kemosensitivitet virkningsfuldhed blev analyseret under anvendelse af Fishers eksakte sandsynlighedstest. Alle statistiske tests var to-sidet og en P-værdi på mindre end 0,05 blev betragtet som statistisk signifikans. Statistisk analyse blev udført ved hjælp af SPSS version 16.0.

Resultater

Patienternes Kendetegn

karakteristika for alle patienter er vist i tabel 1. Størstedelen af ​​patienterne var mænd (73%), og den fremherskende histologi var adenocarcinom (79%). I 35 (35%) patienter, blev tumoren placeret i den distale mave, i 38 (38%) i den proximale mave, og i 27 (27%) i hele mave. Treogtres (63%) patienter havde stadium III eller IV sygdom. Lymfeknudemetastaser var til stede i 75 (75%) patienter. Methyleret

SULF2

(

SULF2M

) blev påvist i 28 patienter, mens de resterende 72 patienter viste umethyleret

SULF2 Hotel (

SULF2U

, methylering rate: 28 %). De RT-PCR-amplifikation kurver af

SULF2M

og

SULF2U

blev vist i figur S1. Der var ingen sammenhæng mellem

SULF2

methylering og nogen af ​​patienternes karakteristika, herunder køn, histologi, tumor site, scene, histologisk kvalitet og lymfeknude metastaser.

In vitro

Effektivitet Sats for testet Narkotika

In vitro

følsomhed over for cisplatin, docetaxel, gemcitabin, irinotecan og pemetrexed testet og godkendt i alle prøverne. De gennemsnitlige hæmning satser for hver testet lægemiddel er anført i tabel 2. Prøver med

SULF2U

var mere følsomme over for cisplatin end dem med

SULF2M

(48,80% mod 38,15%,

P

= 0,02), mens prøver med

SULF2M

var mere følsomme over for irinotecan end

SULF2U

(53,61% mod 40,92%,

P

= 0,01, tabel 2 og figur 1). Der var ingen sammenhæng mellem

SULF2

methylering og

in vitro

følsomhed over for docetaxel, gemcitabin eller pemetrexed (tabel 2). Som vist i tabel 3, var der ingen sammenhæng mellem de hæmning satser observeret for de anti-cancer agenter og nogen af ​​de kliniske karakteristika.

Medianen er den centrale linje i hver boks.

for yderligere at undersøge den mulige sammenhæng mellem

SULF2

methylering og cisplatin eller irinotecan følsomhed,

in vitro

effekt på hver koncentration lægemiddel blev undersøgt oprette forskellige cut-off hæmning satser (tabel 4). blev vedtaget fire forskellige afskæringsværdier: 30%, 40%, 50% og 60%. Ved cut-off på 30% hæmning sats,

SULF2

methylering viste sig at have en signifikant sammenhæng med cisplatin effekt (

SULF2M

: 57,14%,

SULF2U

: 80,56 %,

P

= 0,02) og irinotecan effekt (

SULF2M

: 89,29%,

SULF2U

: 62,50%,

P

= 0,01, figur 2 og tabel 4). Ved cut-off på 40%, 50% og 60% hæmning sats, var der en tendens til, at

SULF2M

prøver viste højere irinotecan effekt, men lavere cisplatin effektivitet end den

SULF2U

prøver (tabel 4).

Foreningen af ​​

SULF2

Methylering med klinisk respons på kemoterapi

Blandt de 56 patienter, der fik den modificerede FOLFOX regime, medianen overlevelse var 434 dage (interval: 111-641 dage). En signifikant sammenhæng blev observeret mellem overlevelse og tumorsted (

P

= 0,01). Ingen anden forbindelse mellem kliniske karakteristika og overlevelse blev fundet (tabel 5 og figur 3).

SULF2M

blev påvist hos 19 patienter, mens

SULF2U

blev fundet i 37 patienter (

SULF2

methylering rate: 34%). En signifikant sammenhæng blev observeret mellem overlevelse og

SULF2

methylering status. Den mediane samlede overlevelse var 309 dage (95% CI = 236 til 382 dage) for patienter med

SULF2M

, og 481 dage (95% CI = 418 til 490 dage) for dem med

SULF2U

(

P =

0,02, figur 3). Brug både univariate og multivariate Cox proportional risikoanalyse, der tog hensyn til alder, køn, tumor site, scene, histologisk klasse, lymfeknude metastaser og

SULF2

methylering som kovariater, tumorsted og

SULF2

methylering forblev signifikante markører for samlet overlevelse i mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi (tabel 6). Vejviser

diskussion

Selvom tidligere undersøgelser har vist, at inddragelse af SULF2 i kræft patogenese, sin værdi for kemosensitivitet forudsigelse er fortsat uklart. Denne undersøgelse fokuserer på promotor CpG øen methylering af

SULF2

som en potentiel biomarkør i mavekræft. De store resultaterne af den foreliggende undersøgelse viser, at: (i) antallet af

SULF2M

i human gastrisk cancer er omkring 30%; (Ii) de første beviser for

SULF2U

er forbundet med cisplatin følsomhed i kræft; (Iii) bevis for

SULF2M

er forbundet med irinotecan følsomhed i gastrisk kræft; (Iv) en retrospektiv undersøgelse og godtgørelse for

SULF2

methylering i en kohorte af 56 patienter med mavekræft, der tillod os at opdage, at

SULF2U

er en uafhængig prognostisk biomarkør i mavecancerpatienter behandlet med en modificeret FOLFOX regime.

I tidligere undersøgelser af mavekræft, resultaterne vedrørende methylering status og ekspressionsniveauer af

SULFs

var resultatløse. I en undersøgelse, kun 13 tidlige fase bryst og mave kræftformer, hvoraf de fleste var fase I, blev analyseret af semi-kvantitativ RT-PCR for

SULF1

udtryk [24]. Det blev vist, at lav udtryk for

SULF1

var fremherskende i disse to typer af kræft. I en anden undersøgelse udtryk for både

SULF1

og

SULF2

mRNA blev bestemt ved real-time RT-PCR for en stor kohorte af mavekræft væv, konstatering af, at

SULFs

blev udtrykt ved højere niveauer i mavekræft sammenlignet med normale væv. I den aktuelle undersøgelse fandt vi ved at undersøge

SULF2

methylering i 100 mavekræft prøver, at satsen for

SULF2M

var ca. 30%, hvilket indikerede, at fremherskende mavekræft var

SULF2U

. Nylige undersøgelser af integrerede genomiske analyser afslørede, at

SULF2

fungerer som en nedstrøms effektor af p53, og at aktivering af p53 kunne føre til

SULF2U

opregulering af

SULF2

. Den mulige sammenhæng mellem p53 og SULF2 i vækstfaktor signalvejen foreslog en mulig rolle for SULF2 i kræft udvikling og kræftpatienters udfald [25]. Forholdet mellem

SULF2

unmethylation og

SULF2

opregulering skal yderligere testet i disse prøver. Den forskellige udtryk niveauer og methylering status

SULF2

mellem tumor og normalt væv også nødt til at blive yderligere verificeres.

Undersøgelser af

SULF2

methylering som kemosensitivitet prædiktor er knappe. Methylering af

SULF2

promotor er blevet forbundet med bedre overlevelse resektion lunge adenocarcinom patienter, og også med en marginal forbedring i overlevelse af avanceret NSCLC patienter, der fik standard kemoterapi (hazard ratio = 0,63,

P

= 0,07) [18]. Efterfølgende undersøgelser viste, at NSCLC cellelinjer med

SULF2M

var 134 gange mere følsom over for topoisomerase I inhibitor end dem med

SULF2U

. I den aktuelle undersøgelse har vi påvist, at gastriske tumorer med

SULF2M

er mere følsomme over for irinotecan end dem med

SULF2U

. Desuden vi demonstreret for første gang, at

SULF2

methylering er også en potentiel prædiktiv biomarkør for cisplatin effekt. Gastric tumorer med

SULF2U

var mere følsomme over for cisplatin end dem med

SULF2M

, og gastrisk cancer patienter med

SULF2U

viste lavere dødelighed, når de modtager platinbaseret kemoterapi. Selv om flere prædiktive biomarkører er blevet identificeret for cisplatin, såsom ERCC1 [7], BRCA1 [4], [26], [27] og XRCC1 [28] – [30], i betragtning af de relativt lave responsrater på de almindeligt anvendte platin /5FU-baserede neoadjuverende behandling protokol for avancerede gastrisk karcinom patienter, er et presserende behov for identifikation af biomarkører til at forudsige respons. Opdagelsen af ​​en roman prædiktiv biomarkør, der kan undersøges ved methylering analyse er spændende og supplerende. Grunden

SULF2

unmethylation øger tumor følsomhed over for cisplatin kan ligge på ubiquitin konjugerende enzymer (UBE). Det er blevet rapporteret, at

SULF2

methylering resulterer i øget ekspression af UBE [18]. UBE tilføjede ubiquitin til visse lysinrester og var involveret i DNA-reparation, mutagenese og celleproliferation. Overekspression af visse UBE’er, ligesom RAD6B, kan resultere i en betydelig modstand mod cisplatin [31]. Yderligere undersøgelser skal udføres for at undersøge den molekylære mekanisme af

SULF2M

induceret cisplatin modstand.

En væsentlig synergistisk effekt af cisplatin og DNA methyltransferase (DNMT) hæmmere 5-aza-dC (DAC) på celleviabilitet blev observeret i cisplatin-resistente AGS cellelinie, men ikke i cisplatin-sensitive MKN28 cellelinje [32]. Data fra at analysere kolonidannelse kapacitet viste, at knockdown af DNMT1 forårsagede en stigning i cisplatin følsomhed [32]. Den molekylære mekanisme er stadig uklar. Men forholdet mellem

SULF2

methylering og cisplatin følsomhed delvis kan forklare dette fænomen. Behandling af mavekræft med DNMT hæmmere kan resultere i demethylering af

SULF2

og dermed øge følsomheden over for cisplatin. Således, ud over den prædiktive virkning, vores data understøtter også optagelse af en DNMT inhibitor i aktuelle behandlingsprotokoller i mindst en delmængde af mavecancerpatienter.

Som konklusion vores undersøgelse tilvejebringer nye beviser,

SULF2

methylering er negativt forbundet med cisplatin følsomhed

in vitro

.

SULF2

methylering er en potentiel prognostisk biomarkør for mavecancerpatienter behandlet med platinbaseret kemoterapi.

Støtte oplysninger

figur S1.

Den RT-PCR-amplifikation kurver SULF2M og SULF2U. Den røde kurve står for amplifikation af SULF2M, og den blå kurve står for amplifikation af SULF2U. Figur S1a angiver forstærkningen kurver af prøven med SULF2M; Figur S1b viser forstærkning kurver af prøven med SULF2U

doi:. 10,1371 /journal.pone.0075564.s001

(TIF)