PLoS ONE: miRNA gener og deres Target 3′-Uoversatte regioner er Sjældent somatisk muteret i æggestokkene Cancers

Abstrakt

MikroRNA’er er centrale regulatorer af genekspression og har vist sig at have ændret udtryk i en række forskellige kræft typer, herunder epitelovariecancer. MiRNA funktion opnås oftest ved binding til 3′-utranslaterede region af mål-proteinkodende gen. screening Mutation hjælp massivt-parallel sekventering af 712 miRNA gener i 86 æggestokkene kræfttilfælde identificeret kun 5 muterede miRNA gener, hver i en anden sag. Én mutation var placeret i den modne miRNA, og tre mutationer blev forudsagt til at ændre den sekundære struktur af miRNA transkriptet. Screening af 3′-utranslaterede region på 18 kandidat cancer gener identificeret en mutation i hver af

AKT2

,

EGFR

,

ERRB2

CTNNB1

. Den funktionelle effekt af disse mutationer er uklar, da udtryk data for

AKT2

EGFR

viste ingen stigning i gen-udskrift. Mutationer i miRNA gener og 3′-utranslaterede områder er således ualmindelige i æggestokkræft

Henvisning:. Ryland GL, Bearfoot JL, Doyle MA, Boyle SE, Choong DYH, Rowley SM, et al. (2012) miRNA gener og deres Target 3′-Uoversatte regioner er Sjældent somatisk muteret i ovariecancer. PLoS ONE 7 (4): e35805. doi: 10,1371 /journal.pone.0035805

Redaktør: Austin John Cooney, Baylor College of Medicine, USA

Modtaget: Januar 29, 2012; Accepteret: 22 Marts 2012; Udgivet: 20. april, 2012 |

Copyright: © 2012 Ryland et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af den victorianske Breast Cancer Research Consortium, Australien, og Australian National Sundhed og Medical Research Council (NHMRC). GLR er understøttet af en australsk Postgraduate Award. Den australske kræft i æggestokkene Study Group blev støttet af USA Army Medical Research og Materiel Kommando under DAMD17-01-1-0729, The Cancer Råd Tasmania, The Cancer Foundation of Western Australia og NHMRC. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

MikroRNA’er (miRNA), en klasse af små ikke-kodende RNA-molekyler, har vigtige regulatoriske roller i diverse cellulære veje, herunder proliferation, differentiering, ældning og metabolisme [1]. Denne regulering opnås ved semi-komplementær base, skrælle med 3′-utranslaterede region (3′-UTR) af mål-messenger-RNA (mRNA) [1] – [3], samt 5′-utranslaterede region eller kodning regioner af mRNA’er, som efterfølgende nedbrydes eller post-transkriptionelt til tavshed [4] – [6]. Akkumulerende beviser viser nu, at miRNA udtryk er afvigende i kræft [7], der fører til den hypotese, at ændringer i miRNA veje kan være et vigtigt skridt i initiering og progression til malignitet. I overensstemmelse med denne hypotese er den observation, at miRNA gener ofte er lokaliseret i genomiske regioner almindeligvis ændret ved cancer, herunder minimale regioner af deletion, tab af heterozygositet og amplifikation samt skrøbelige sites [8] – [10]. Mutation er en alternativ mekanisme til miRNA deregulering i indstillingen kræft, hvorved mutation kan ændre miRNA transskription, forarbejdning eller miRNA-mRNA interaktioner. Denne mekanisme blev først beskrevet af Calin

et al.

[8], der identificerede en kimlinie variation i

HSA-miR-16-1 Hoteller, som var forbundet med følsomhed over for kronisk lymfatisk leukæmi. Siden da har germline polymorfier i miRNA gener været forbundet med disposition for andre typer kræft [11]. På trods af den hypotese, at miRNA kan fungere som konventionelle onkogener eller tumor undertrykkere, har flere undersøgelser antydet, at somatisk mutation inden for miRNA er en sjælden begivenhed, og dem, der er blevet rapporteret show ringe effekt på miRNA-aktivitet [10], [12] – [14] . Imidlertid har de fleste af disse undersøgelser begunstiget en kandidat gen tilgang og til dato, er un-partisk vurdering af forekomsten af ​​somatiske ændringer i miRNA gener i enhver kræft typen mangler.

Analogt mutationer forekommer i miRNA frø regioner, kan mutationer der sker i target mRNA sekvens ændre binding og efterfølgende miRNA-afhængig regulering af genekspression. Mens germlinie ændringer på miRNA bindingssteder i 3′-UTR’er kan bidrage til kræft modtagelighed [11], [15] – [17], rapporter om somatiske mutationer forekommer i en lignende sammenhæng er begrænset til et enkelt tilfælde rapport [13] og har alligevel være til undersøgt i store tumor kohorter. Hvis somatiske mutationer forekommer på miRNA bindingssteder, ville være en hidtil uudforsket genetisk mekanisme til undertrykkelse eller aktivering af et cancerassocieret mRNA.

Aberrant miRNA aktivitet er ofte forbundet med patogenesen og progression af epitelial ovariecancer den mest almindelige form for ovarie malignitet. MiRNA profilering undersøgelser konsekvent observere global lyddæmpning af miRNA udtryk i æggestokkene tumorer, som er bidraget til delvist af genomisk tab og epigenetiske ændringer [10], [18] – [22]. Tilsvarende er ekspression af mange kendte og formodede cancergener dysreguleret i ovariecancer, fx

BRCA2

, hvor kun en del af den observerede tab af ekspression kan tilskrives mutation og promotor-methylering observeres ikke [ ,,,0],23]. Vi har tidligere vist, at hyppigheden af ​​somatiske mutationer i 10 kræft-impliceret miRNA er lav i ovarietumorer [24]. I den foreliggende undersøgelse, vi udvide denne analyse af omfattende karakteriserer somatiske mutationer i 712 miRNA gener ved hjælp af massivt parallelle målrettet re-sekventering. Desuden har vi screenet 3′-UTR’er af 18 kandidat cancer gener med henblik på at identificere somatiske mutationer, der ændrer forudsagte miRNA bindingssteder. Selv om disse gener er ofte impliceret i tumorigen proces, kodning mutationer, methylering eller kopi nummer ændringer kun udgør en delmængde af udtrykket forskelle set i tumorer i æggestokkene.

Resultater og Diskussion

Somatiske mutationer rettet mod microRNA gener er sjældne begivenheder i ovarietumorer

for at undersøge om mutationer i miRNA gener bidrager til ændret miRNA aktivitet i kræft i æggestokkene, blev 86 primære epiteliale tumorer i æggestokkene vurderet for somatiske mutationer i genomiske regioner svarende prækursorer eller modne miRNA sekvenser. Kliniske karakteristika for disse tilfælde er opsummeret i tabel S1. Målrettet næste generation sekventering blev anvendt til at vurdere 712 miRNA gener kommenteret i Sanger miRNA-databasen (version 13.0 marts 2009). Efter alignment data, 95% af målrettede baser inden for de 712 miRNA gener havde et minimum 10-fold sekvensdækning med en tilsvarende gennemsnitlig dækning på 92-fold. Filtrering at fjerne germline varianter påvist i matchet normal lymfocyt DNA og validering ved konventionel sekventering identificeret somatiske mutationer i 5 miRNA gener:

HSA-miR-10a

,

HSA-miR-622

,

HSA-miR-767-5p

,

HSA-miR-888

HSA-miR-1280

(figur 1). Samlet set blev påvist somatiske mutationer i 6% (5/86) af tumorer og i mindre end 1% (5/712) af miRNA gener analyseret, uden miRNA gener gentagne målrettet ved mutation. I overensstemmelse med tidligere rapporter, mutationer i modne miRNA var ikke almindelige; kun én mutation var placeret inden for den modne region af

HSA-MIR-767-5p

(men uden for frø-regionen), mens de resterende fire forekom inden forstadiet hårnål. Disse data er i overensstemmelse med tidligere undersøgelser på mindre tyder på, at somatiske mutationer i miRNA gener er en sjælden begivenhed i tumorprøver [8], [12], [14], [24], [25].

tumor specifikke mutationer er markeret som sorte bjælker i forhold til den modne microRNA (hvid boks) og forløber microRNA (grå boks) sekvenser. Positionerne af mutationer rapporteres med hensyn til følgende precursor microRNA udskrifter:

HSA-miR-10a

NR_029608.1;

HSA-miR-622

NR_030754.1;

HSA-miR-767-5p

NR_030409.1;

HSA-miR-888

NR_030592.1;

HSA-miR-1280

NR_031703.1.

miRNA biogenese er en flertrins proces initieret af RNA-polymerase II-medieret transkription, efterfulgt af RNAse III-afhængige trimning i en hårnål mellemliggende og efterfølgende spaltning til et funktionelt modne miRNA [1], [26]. Denne proces er afhængig af sekvensmotiver og RNA sekundære strukturelementer inden for de primære og precursor miRNA molekyler [26]. Som sådan kan mutationer opstår i precursor regioner ændre RNA sekundære struktur og derved blokere forarbejdning til modne miRNA. For at bestemme om RNA strukturelle ændringer kan skyldes de somatiske miRNA identificerede mutationer har vi benyttet RNAfold programmet [27] til at forudsige den mest stabile sekundære struktur for både vildtype og mutant sekvenser. Konformationsændringer blev forudsagt for mutant

HSA-miR-622

,

HSA-miR-767-5p

HSA-miR-1280

(figur S1). Men forudsagt, konformationsændringer

i silico

sjældent svare til en fysiologisk virkning [12] og den funktionelle konsekvenser af mutationer identificeret her kræver yderligere undersøgelser med

in vitro

analyser.

i modsætning til den hyppige observation af tumorspecifikke variationer bidrager til aktivering eller repression af proteinkodende gener i cancer, disse resultater viser, at somatiske mutationer i miRNA gener er en sjælden hændelse under ovarie patogenese og tilføje til akkumulerende beviser fra en række tumor typer tyder på, at miRNA sjældent dysreguleret af denne mekanisme. I betragtning af det store antal mRNA-mål forudsagt for en enkelt miRNA og de forskellige roller i disse forudsagte målgener, enhver somatisk mutation i en miRNA gen (og især dem, der forekommer inden frøet sekvens) vil sandsynligvis påvirke mange biologiske veje [2], [3], kan hvoraf nogle være involveret i at opretholde cellehomeostase. Selv hvis en somatisk muteret miRNA gen ændret mRNA udtryk for en positiv indflydelse tumor overlevelse, er det sandsynligt, at der ville være et større antal genekspression ændringer, som ikke ville være befordrende for tumorcelleoverlevelse. Omvendt i visse situationer kan mRNA transkriptionel repression skyldes virkningen af ​​flere miRNA [28], og som sådan kan den ændret aktivitet af en enkelt miRNA være utilstrækkelig til at resultere i en biologisk virkning. Endelig er det i stigende grad erkendt, at miRNA ændringer observeret i kræft væv kan forekomme sekundært til defekter i dele af miRNA maskiner, herunder transkriptionsfaktorer og kromatin remodeling gener, der regulerer miRNA transskription, samt dele af miRNA post-transkriptionel regulering [29 ], [30]. I ovarietumorer,

DICER1

EIF2C2

(Argonaute2) DNA kopital gevinster er set hos 24,5% og 51,5% af tumorer henholdsvis [9] og overlevelse reduceres blandt kvinder, hvis tumorer har lavere

DICER1

drosha

mRNA udtryk [31]. er behov for yderligere undersøgelser fastslå betydningen af ​​ændringer af disse og andre komponenter i miRNA biogenese vej i patogenesen af ​​kræft i æggestokkene.

Somatiske mutationer rettet mod 3′-uoversatte regioner er sjældne begivenheder i ovarietumorer

for at undersøge muligheden for, at somatiske mutationer forekommer inden 3′-UTR’er af cancer gener ændre en eksisterende miRNA bindingssted, og dermed betyde en ny mekanisme for afvigende mRNA genekspression i kræft, vi sekventeret 3′-UTR’er af 11 onkogener (

AKT2

,

BRAF

,

CCNE1

,

CTNNB1

,

EGFR

,

ERBB2

,

FGF1

,

KRAS

,

MYC

,

PIK3CA

RAB25

) ved målrettet re-sekventering i de 86 ovarietumorer. I tilfælde af et onkogen, kan ophævelsen af ​​en miRNA bindingssted tillade ureguleret onkogen ekspression. Desuden er de 3′-UTR’er af 7 tumorsuppressorgener (GTS) (

BRCA1

,

BRCA2

,

CDKN2A

,

PTEN

,

RB1 ​​

,

SPARC

TP53

) blev også sekventeret at vurdere forekomsten af ​​somatiske mutationer, der ville generere en

de novo

miRNA bindingssted og resultere i TSG nedregulering. Disse gener er anerkendt af Cancer Gene Census skal kausalt impliceret i æggestokkene tumor udvikling enten ved somatisk mutation, genamplifikation eller sletning [32].

FGF1

,

RAB25

SPARC

blev valgt ud fra deres demonstreret funktionel rolle i æggestokkræft [33] – [37]. 3′-UTR’er blev sekventeret til 108-fold betyde dækning og mere end 99% af de målrettede baser inden for disse områder blev dækket med 10 eller flere sekvens læser. Tumor-specifikke mutationer blev sjældent identificeret i 3′-UTR’er af æggestokkene prøver: 4/86 tumorprøver blev hver identificeret med en mutation i en af ​​fire forskellige onkogener (

AKT2

,

CTNNB1

,

EGFR

ERBB2

) (tabel 1), med ikke registreres i de 7 undersøgte GTS mutationer.

I silico

miRNA target forudsigelse algoritmer tyder på, at muteret loci i

AKT2

,

CTNNB1

og

ERBB2

kan forekomme inden for området af en forudsagt miRNA bindende site, med to mutationer, c * 538T . A (

CTNNB1

) og c * 460g . C (

ERBB2

) udskiftninger, forudsagde at forekomme inden frøet sekvens af

HSA-miR-630

HSA-miR-640

binding henholdsvis. RNA udtryk profilering var til rådighed for prøver med mutationer i

AKT2

EGFR

og viste, at afskriften niveauer af disse gener ikke blev ændret i prøver med somatiske 3′-UTR mutationer i forhold til andre tumor prøver af det samme æggestokkene undertype (figur S2).

Selv om det er anerkendt, at miRNA også kan bibringe transkriptionel repression gennem handling på 5′-UTR af et mRNA mål, denne undersøgelse giver foreløbige beviser for, at somatiske mutationer ændrer miRNA bindingssteder i 3′-UTR af fælles cancer gener er sjældne i epiteliale tumorer i æggestokkene. Effektiv translationel lyddæmpning kan kræve synergistisk virkning af miRNA på flere steder på tværs af en UTR, enten af ​​en enkelt familie af microRNA eller ved en kombination af uafhængige microRNA’er, og dermed de enkelte somatiske mutationer identificeret her sandsynligvis utilstrækkelige til at lukke munden på den respektive udskrift [28] , [38]. Den somatiske mutation udbredelse i 3′-UTR regioner af kandidat cancer gener sekventeret var 1.43 mutationer per Mb. Til sammenligning mutationen forekomsten i protein-kodende regioner af kendte cancer gener i denne tumor kohorte er 570,57, 183,60 og 32.63 mutationer per Mb for

TP53

,

KRAS

PIK3CA

henholdsvis mens den anslåede mutation prævalens i kodningen exome er 2,4 mutationer per Mb i ovarietumorer [23]. Således er det sandsynligt, at den lave mutation i 3’UTRs sammenlignet med exoner viser, at størstedelen af ​​mutationer i 3′-regulatoriske regioner er identificeret her, optræder som bystander begivenheder i tumorceller udvikling.

Sammenfattende somatiske mutationer i miRNA gener sjældent observeret i ovarietumorer og dermed er usandsynligt, at redegøre for ændret miRNA aktivitet observeret i denne tumortype. Derudover leverer vi foreløbige beviser, at selektion for somatiske mutationer i 3′-UTR’er af kandidat cancer gener, som ville blive antaget at forstyrre miRNA afhængig genregulering, er usandsynligt, at repræsentere en fælles mekanisme til ændret mRNA ekspression i ovarietumorer.

materialer og metoder

Etik erklæring

Periodisering og brug af patientens materiale til denne undersøgelse blev godkendt af de følgende Menneskelige Research etiske komitéer: Southampton Hospital menneskelige forskningspotentiale Ethics Committee, Peter MacCallum Cancer Center menneskelige Research Ethics Committee, Queensland Institute of Medical Research menneskelige forskningspotentiale etiske komité, University of Melbourne menneskelige forskningspotentiale etiske komité, Westmead Hospital menneskelige Research Ethics Committee. Alle individer gav skriftligt informeret samtykke til brug af deres væv i forskning. Dette projekt blev godkendt af Peter MacCallum Cancer Centre menneskelige Research Ethics Committee (Godkendelse # 29/9).

æggestokkene tumor kohorte

86 primære epitelial ovariecancer tumor vævsprøver blev opnået gennem Peter MacCallum Cancer Centre Tissue Bank, Australien Kræft i æggestokkene Study eller fra patienter præsentere til hospitaler i det sydlige England [39]. Alle tumor DNA-prøver blev mikrodissekeres at sikre større end 80% epitelcelle komponent. Denne tumor kohorte omfattede en blanding af serøs (n = 45), endometrioide (n = 28), mucinøs (n = 7) og clear cell (n = 6) undertyper. Matchende perifere blodprøver blev også indsamlet fra alle patienter på tidspunktet for tumor indsamling og anvendes som en kilde til germlinie DNA.

Behandles identifikation region for målrettet næste generation sekventering

3′-UTR’er af 18 protein-kodende gener blev udvalgt til somatisk mutation screening. Genome koordinater for udvalgte 3′-UTR’er blev identificeret baseret på dem, kommenteret i Ensembl databasen (frigive 54) for følgende udskrifter:

AKT2

(ENST00000392038),

BRAF

(ENST00000288602) ,

CCNE1

(ENST00000262643),

CTNNB1

(ENST00000349496),

EGFR

(ENST00000275493 og ENST00000344576),

ERBB2

(ENST00000269571),

FGF1

(ENST00000359370),

KRAS

(ENST00000256078),

MYC

(ENST00000259523 og ENST00000377970),

PIK3CA

(ENST00000263967),

RAB25

(ENST00000361084),

BRCA1

(ENST00000309486),

BRCA2

(ENST00000380152),

CDKN2A

(ENST00000304494),

PTEN

(ENST00000371953),

RB1 ​​

(ENST00000267163),

SPARC

(ENST00000231061) og

TP53

(ENST00000269305). De genomiske koordinater for humane precursor miRNA blev opnået fra Sanger Institute miRBase (frigive 13,0 marts 2009) [40], [41], herunder 548 individuelle miRNA gener samt 164 miRNA inden 62 miRNA klynger. Alle kodende exoner af

TP53

,

KRAS

PIK3CA

blev inkluderet for sekvensanalyse.

Bibliotek forberedelse og target berigelse

200 ng af tumor eller matchet normal lymfocyt DNA var tilfældigt fragmenterede til ca. 200 bp (Covaris, Woburn, MA) og ende reparation og A-hale udført ifølge den Illumina genomisk DNA-bibliotek forberedelse protokol (Illumina, San Diego, CA). Derefter blev DNA ligeret med et af 7 brugerdefinerede multipleksing Adapter forenelig med Illumina enkelt ende sekventering. Indekseret DNA-prøver blev samlet lige før PCR berigelse. Alle reagenser, der anvendes under biblioteket præparat blev opnået fra New England Biolabs (NEB, Ipswich, MA). En butik exon capture (SureSelect, Agilent Technologies, Santa Clara, CA) blev anvendt til specifikt at berige for udvalgte 3′-UTR’er, miRNA og kodende exoner af cancer gener fra genomiske DNA-biblioteker før næste generation sekventering. Capture prober blev konstrueret under anvendelse af standardparametre ved at indsende genomiske koordinater til eArray (Agilent Technologies, Santa Clara, CA). Opløsning hybridisering blev vaskning, eluering og amplifikation udføres ifølge den anbefalede protokol.

somatisk mutation analyse ved Illumina GAIIx sekventering og kapillarelektroforese

Target beriget DNA-biblioteker blev sekventeret på en Illumina GAIIx, genererer 75 bp enkelt ende sekvens læser. Billedanalyse og base calling blev udført ved anvendelse af Genome Analyser Pipeline v1.6. Sekvens læser blev justeret til den menneskelige henvisning genom (GRCh37 /hg19 samling) hjælp BWA og resterende unmapped læser blev afstemt med Novoalign software [42]. Dette blev efterfulgt af lokal justering med GATK [43]. Punktmutationer og indsættelser /sletninger (indels) blev identificeret ved hjælp af GATK og Dindel [44] henholdsvis og kommenteret med oplysninger fra Ensembl release 56. Kun mutationer indenfor miRNA udskrifter kommenteret i miRBase blev anset for yderligere analyse.

Punktmutationer og indels blev identificeret som somatiske ændringer, når (

i

) varianten ikke blev kaldt i matchede normale prøve eller identificeret som en kimlinie ændring i en anden tumor /normal par (

ii

) den variant blev ikke set i 2% af læser i matchede normale prøve efter manuel inspektion af sekvens læser bruge den integrerede Genomics Viewer [45] (

iii

) varianten blev identificeret i mindst fire unikke sekvens læser med mindst to kortlægning i den forreste og to kortlægning i omvendt orientering.

Alle mutationer, der opfyldte ovennævnte kriterier blev underkastet validering af konventionel PCR-amplifikation og tovejs kapillarelektroforese på ABI3130 Genetic Analyser hjælp BigDye Terminator v3 0,1 sekventering kemi (Applied Biosystems, Foster City, CA).

Identifikation af miRNA-bindingssteder

Targetscan (frigive 5.2) [46], mikrokosmos Mål (version 5) [40 ], DIANA-MicroT (version 3.0) [47], [48] og Miranda (release august 2010) [49] prædiktive algoritmer blev anvendt til at bestemme, om de somatiske mutationer fundet i mRNA 3’UTRs forekom inden for miRNA bindingssteder. En mirSVR score tærskel på mindre end -0.1 og folde energi score tærskel på mindre end eller lig minimum til -16 kcal /mol blev anvendt til Miranda algoritme. Standard parametre blev anvendt for alle andre algoritmer.

Støtte Information

Figur S1.

Forudsagt sekundære struktur ændres som følge af somatiske mutationer i miRNA udskrifter. Modne sekvenser er skygget og den muterede base, angivet ved pilespids i (a)

HSA-MIR-622

, (b)

HSA-MIR-1280

og (c)

HSA -miR-767-5p

. Forløberen miRNA sekvens plus 50 bp flankerer forløber i 5’og 3′-enderne blev brugt til at forudsige den sekundære struktur med det laveste fri energi ved RNAfold programmet [29] med standardparametre

doi:. 10,1371 /tidsskrift. pone.0035805.s001

(PDF)

figur S2.

AKT2

EGFR

mRNA-ekspression ikke er ændret i nærvær af 3′-utranslateret region somatiske mutationer i forhold til andre æggestokkene prøver af samme subtype. (A)

AKT2

udtryk i endometrioide tumorer, herunder prøve P1768 med en

AKT2

c * 892C . T somatisk mutation (angivet med rødt). mRNA-ekspression profilering data blev opnået fra Tothill

et al.

[50].

AKT2

udtryk sonde sætter 225471_s_at og 226156_at vises. (B)

EGFR

udtryk i endometrioide tumorer, herunder prøve IC151 med en

EGFR

c * 101c . G somatisk mutation (angivet med rødt). mRNA-ekspression profilering data blev opnået fra Ramakrishna

et al.

[51]. Fejl barer er repræsentative for middelværdi ± SD

doi:. 10,1371 /journal.pone.0035805.s002

(PDF)

tabel S1. Salg Kliniske karakteristika af ovarietumorer sekventeret for somatiske mutationer i microRNA gener og kandidat 3′-uoversatte regioner.

doi: 10,1371 /journal.pone.0035805.s003

(XLS)

Tak

Vi takker for samarbejdet med institutionerne i Australien deltager i den australske Kræft i æggestokkene Study (AOCS). Vi anerkender også bidrag AOC studie sygeplejersker, forskningsassistenter og alle kliniske og videnskabelige samarbejdspartnere og vil gerne takke alle de kvinder, der deltog i AOCS. Medlemmer af den australske kræft i æggestokkene Study Group, kan samarbejdspartnere og hospitaler er involveret i AOCS findes på https://www.aocstudy.org

Australian Kræft i æggestokkene Study Group:. David Bowtell (Peter MacCallum Cancer Centre, East Melbourne, Victoria, Australien), Georgia Chenevix-Trench (Queensland Institute of Medical Research, Brisbane, Queensland, Australien), Adele Green (Queensland Institute of Medical Research, Brisbane, Queensland, Australien), Penny Webb (Queensland Institute of Medical Research, Brisbane, Queensland, Australien), Anna DeFazio (Westmead Institute for Cancer Research, Westmead Millennium Institute, Westmead, New South Wales, Australien), Dorota Gertig (Victorian livmoderhalsprøver Registry, Carlton South, Victoria, Australien).