PLoS ONE: Tc17 Celler i patienter med uterin Livmoderhalskræft Cancer

Abstrakt

Baggrund

Eksistensen af ​​Tc17 celler blev for nylig vist i flere typer af smitsomme og autoimmune sygdomme, men deres fordeling og funktioner i uterin livmoderhalskræft (UCC) er ikke blevet fuldt belyst.

Metoder

frekvensen af ​​Tc17 celler i perifere blodprøver opnået fra UCC patienter, cervikal intraepithelial neoplasi (CIN) patienter og raske kontrolpersoner blev bestemt ved flowcytometri. Desuden blev forekomsten af ​​Tc17 celler og deres relationer til Th17 celler og Foxp3-udtrykkende T-celler samt mikrokar i vævsprøver af patienterne vurderet ved immunohistokemi farvning.

Resultater Salg

Sammenlignet med kontroller, patienter med UCC eller CIN havde en højere andel af Tc17 celler i både perifert blod og cervikale væv, men niveauet af Tc17 celler i UCC væv var signifikant højere end i CIN væv. Desuden blev det øgede niveau af Tc17 i UCC patienter er forbundet med status af bækken lymfeknudemetastaser og øget mikrokar tæthed. Endelig blev signifikante korrelationer af infiltration mellem Tc17 celler og Th17 celler eller Foxp3-udtrykkende T-celler observeret i UCC og CIN væv.

Konklusioner

Denne undersøgelse viser, at Tc17 celle infiltration i livmoderhalskræft er forbundet med cancer progression ledsaget af øgede infiltrationer af Th17 celler og regulatoriske T-celler samt forfremmet tumor vaskulogenese

Henvisning:. Zhang Y, Hou F, Liu X, Ma D, Zhang Y, Kong B, et al . (2014) Tc17 Celler i patienter med uterin livmoderhalskræft. PLoS ONE 9 (2): e86812. doi: 10,1371 /journal.pone.0086812

Redaktør: Jian-Xin Gao, Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Kina

Modtaget: Marts 27, 2013; Accepteret: December 19, 2013; Publiceret: 11 feb 2014

Copyright: © 2014 Zhang et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne undersøgelse blev støttet af tilskud fra National Natural Science Foundation of China (nr. 81.172.486, 81.170.515, og 81.072.122) og Shandong teknologisk udvikling Project (nr 2006BS03060). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Livmoder livmoderhalskræft (UCC), den anden mest udbredte malignitet hos kvinder på verdensplan [1], anses for at være en vigtig immunogen tumor, som humant papillomvirus (HPV) højrisiko undertyper forårsager flertrins carcinogenese fra cervikal intraepithelial neoplasi (CIN) gennem carcinoma in situ til invasiv cancer og metastatisk cancer. I mellemtiden svarene fra værten immunforsvar, især det cellulære immunrespons, spiller en vigtig rolle i kontrollen af ​​både HPV infektioner og HPV-associeret neoplastisk dannelse [2], [3]. Selvom det cellulære adaptiv immunitet er en vigtig komponent i tumoren immun overvågning, er mekanismerne bag tumor immunitet ikke fuldt forstået [4].

De primære celler, der er ansvarlige for det cellulære immunrespons er et sæt af T-delmængder, herunder hjælper-T-celler (Th), cytotoksiske T-celler (Tc) og suppressor-T-celler (Ts). En nyligt beskrevet Th delmængde, CD4

+ T-celler med IL-17 produktion (Th17 celler), har vist sig at spille en vigtig rolle i betingelserne for inflammation, autoimmunitet og allergiske reaktioner [5] – [7]. I en nylig undersøgelse, observerede vi, at Th17 celler blev stærkt beriget i perifert blod fra humane UCC patienter, og deres niveauer var positivt korreleret med status af lymfeknudemetastaser og vasoinvasion [8]. Men delmængder af IL-17

+ CD8

+ T-celler (Tc17 celler), for nylig fundet i en række betingelser for infektion og autoimmune sygdomme [9] – [12], er ikke blevet fuldt undersøgt og deres biologiske funktioner er stadig mangler.

CD8

+ cytotoksiske T-celler (Tc celler) spiller en afgørende rolle i værtens immunrespons på intracellulære patogener og kræft. På grund af den redundante ekspression af T-box-transkriptionsfaktor Eomes og T-bet, er Tc-celler skæbnesvangre at udvikle sig til cytolytiske effektorceller, der producerer IFN-γ og hurtig granzym B og perforin at dræbe målcellerne [13], [14] . Men undersøgelser af effekterne af Tc17 celler på immunreaktioner er knappe. I modsætning til klassiske CD8

+ Tc celler, Tc17 celler er negative for granzym B samt perforin og mangler cytolytisk aktivitet

in vitro

[9], [12], [15], og fraværet af Eomes i tumorinfiltrerende lymfocytter er korreleret med øget lymfeknudemetastase i kolorektale cancere [16]. Alligevel er det interessant, at efter adoptiv overførsel af stærkt oprenset, Ag-specifikke, IL-17-secernerende CD8

+ T-celler til Ag-udtrykkende værter, de overførte Tc17 celler kunne konvertere på IFN-γ-producerende effektor celler, der mangler IL-17-ekspression, som kunne akkumuleres bemærkelsesværdigt og forårsage betydelige pulmonale patologiske forandringer [12] eller regression af store etablerede tumorer [15], [17]. Disse resultater kan forklares ved tilstedeværelsen af ​​plasticitet Tc17 celler. Men den nøjagtige virkninger af naturligt eksisterede Tc17 celler

in vivo

såsom i lunge, i fordøjelseskanalen slimhinde [18], og i de tumorbærende mus [19] er stadig ukendte. Tc17 celler blev for nylig påvist i human hepatocellulært carcinom [20], men oplysninger om deres biologiske funktion samt reguleringsmekanismer mangler stadig. Her var det et mål at undersøge niveauer samt de mulige biologiske funktioner af Tc17 celler i UCC, som er kendt for at være en form for højt immunogent cancer initieret af vedvarende infektion af højrisiko HPV.

denne undersøgelse har vi forsøgt at bestemme fordelingen af ​​Tc17 celler i bothperipheral blod og cervikale væv fra raske kontroller, CIN og UCC patienter. Desuden at bestemme de potentielle roller Tc17 celler blev forholdet mellem Tc17 celler og kliniske træk ved UCC samt mikrokardannelse tæthed i livmoderhalsen væv undersøgt. Desuden kombineret med vores tidligere rapport [8], [25], korrelationerne af niveauerne af Tc17 celler med Th17 celler eller Foxp3-udtrykkende T-celler blev også bestemt.

Design og metoder

Etik erklæring

Tilmelding fandt sted mellem maj 2009 til april 2012 i Qilu Hospital, Shandong University. Vores forskning blev godkendt af Medical Etisk Komité Qilu Hospital, Shandong University. Et skriftligt informeret samtykke dokument er opnået fra hver deltager. Informeret samtykke erklærede, at resterne af patientens perifere blod og cervikale væv udskåret under kirurgi ville blive brugt til undersøgelse af T undergrupper. Disse prøver blev anvendt til at identificere Tc17 celler i UCC og CIN, og perifert blod blev også trukket fra raske frivillige for denne forskning.

Patient og kontrol prøver

Tumor eller perifer blodprøver blev opnået fra 88 ubehandlede UCC patienter (aldersinterval 34-70 år, median 44 år) og 53 ubehandlede CIN patienter (28-60 år, median 42 år) med patologisk bekræftet aktiv sygdom på Qilu Hospital, Shandong University. Prøver fra 46 UCC patienter, som gennemgik helbredende resektion og 28 CIN patienter, som gennemgik livmoderhalskræft conization blev brugt til immunhistokemi. Blodprøver fra 49 UCC patienter og 25 CIN patienter blev anvendt til flowcytometrisk analyse. Personer med samtidige autoimmun sygdom, aktiv eller kronisk infektion, hjerte-kar-sygdomme, bindevævssygdomme eller en historie af maligne tumorer blev udelukket. Ingen af ​​patienterne tidligere modtaget immunsuppressiv, strålebehandling eller kemoterapi. Kendetegnene for den undersøgte population er vist i tabel 1 og 2. Blodprøver (n = 28; 26-67 år, median 42 år) og histologiske eksemplarer af cervices (n = 18; 31-60 år, median 46 år) fra raske kvinder, der gennemgik hysterectomies for godartede uterine sygdomme uden cervikale abnormiteter blev indsamlet. Disse histologiske prøver blev opnået som Paraffin-indlejrede blokke fra Patologisk Institut for Qilu Hospital, Shandong University.

Flow cytometri af Tc17 celler

For at analysere forekomsten af Tc17 celler, IL-17-producerende CD8 (+) lymfocytter blev evalueret med flowcytometri. Kort fortalt hepariniseret perifert fuldblod (200 pi) med et tilsvarende volumen RPMI-1640-medium blev inkuberet i 4 timer ved 37 ° C i 5% CO

2 i nærvær af 25 ng /ml phorbolmyristatacetat ( PMA), 1 ug /ml ionomycin, og 1,7 ug /ml monensin (alle fra Alexis Biochemicals, San Diego, CA). Derefter blev cellerne inkuberet med PE-Cy5-konjugeret anti-humant CD3 og FITC-konjugeret anti-humane CD8 monoklonale antistoffer (eBioscience, San Diego, CA) ved stuetemperatur i mørke i 15 minutter til farvning overfladen. Efter fiksering og permeabilisering, ifølge producentens instruktioner, blev cellerne farvet med en PE-konjugeret anti-IL-17 monoklonalt antistof i 15 min. Isotypekontroller blev anvendt til at muliggøre korrekt kompensation og bekræft antistofspecificitet. Farvede celler blev analyseret ved flowcytometrisk analyse ved hjælp af et FACScan cytometer udstyret med CellQuest software (BD Bioscience PharMingen).

Immunhistokemi påvisning af Tc17 celler og mikrokar tæthed (MVD)

Paraffin-vævssnit blev afparaffiniseret og rehydreret, efterfulgt af mikrobølge antigen-genvinding i EDTA (pH 9,1). Til immunhistokemisk dobbelt farvning af Tc17 celler blev sektionerne behandlet med Doublestain systemet (kit-9999), og de følgende antistoffer blev anvendt: kanin anti-human IL-17 antistof (1:700 v /v; Abcam, USA) og muse-anti-humant CD8-antistof (1:30 v /v; Abcam, USA). Til immunhistokemisk analyse af mikrokardannelse densitet blev sektionerne blokeret med blokerende opløsning (serumalbumin) fortyndet i phosphatbuffer saltvand (PBS) 3 gange i 5 minutter. Derefter blev sektionerne inkuberet med primært antistof i et fugtigt kammer ved 4 ° C natten over. CD34 monoklonalt antistof (Abcam, USA) blev anvendt i denne undersøgelse. Efter vask 3 gange med PBS i 5 minutter blev en peberrodsperoxidase (HRP) polymer-bundet sekundært antistof tilsat og inkuberet i 15 minutter ved 37 ° C. Snittene blev derefter visualiseret med diaminobenzadin (DAB) og modfarvet med hematoxylin. Negativ kontrol-farvning blev udført med en isotype kontrol og PBS i stedet for det primære antistof.

Statistisk analyse

Værdier blev udtrykt som middelværdi ± SD. Dataene blev vurderet af en ANOVA. Sammenligninger mellem to grupper blev vurderet ved studerendes

t

test. Korrelationer mellem variabler blev bestemt ved anvendelse af lineær regressionsanalyse. Alle tests blev udført ved anvendelse af SPSS 13.0 systemet.

P

. 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant

Resultater

Forhøjet cirkulerende Tc17 celler i ubehandlet UCC og CIN patienter

Vi analyserede udtryk for IL -17 på CD8

+ T-celler (Tc17 celler) i perifert blod ved hjælp af flowcytometri. Ekspressionen af ​​typiske Tc17 celler i repræsentative patienter og kontroller blev vist i fig. 1. Desuden er procentdelen af ​​Tc17 celler var signifikant højere i UCC patienter (0,49 ± 0,37%,

P

= 0,0076) og CIN patienter (0,51 ± 0,39%,

P

= 0,0149) , sammenlignet med den i raske kontroller (0,27 ± 0,27%) (fig. 2a). Ingen signifikant forskel blev fundet mellem niveauet for Tc17 celler i CIN og at der i UCC patienter (

P

0,05). For at undersøge den mulige rolle af de øgede Tc17 celler, vi næste forsøgt at afgøre, om dette Tc17 skævhed var forbundet med kliniske symptomer på sygdommen. Især vi observeret en signifikant stigning i hyppigheden af ​​Tc17 celler i UCC patienter med lymfeknudemetastaser (0,77 ± 0,43%;

P

= 0,0026), når sammenlignet med den i patienter uden lymfeknudemetastaser (0,36 ± 0,26%) (fig. 2b). Ingen association blev fundet mellem niveauerne af Tc17 celler og andre kliniske karakteristika såsom klinisk fase, infiltration dybde, vasoinvasion, histologiske tumortype, eller primær tumorstørrelse i UCC patienter (

P

0,05).

Øvre rigtige kvadranter er områderne Tc17 (CD8

+ IL-17

+) celler og de procentdele af dem blev vist i hvert panel.

(a) Tc17 frekvenser i de tre grupper. Betydeligt forøgede Tc17 celler blev fundet i ubehandlede UCC patienter (

P

= 0,0076, n = 49) og CIN patienter (

P

= 0,0149, n = 25) sammenlignet med raske kontroller (n = 28). (B) Tc17 frekvens i positive eller negative lymfeknudemetastaser i UCC patienter. Sammenlignet med patienter uden lymfekirtelmetastaser (n = 15), signifikant forøget Tc17 frekvens (

P

= 0,0026) blev fundet i lymfeknudemetastaser patienter (n = 35). Students t-test blev anvendt og søjler repræsenterer SD, *

P

0,05, **

P

. 0,01

Fordeling af Tc17 celler og mikrokar densitet (MVD) i vævsprøver af UCC og CIN patienter

Vi har tidligere vist sig, at IL-17

+ -celler blev beriget i human UCC, og de fleste af det cirkulerende IL-17

+ -celler var CD4

+ cellepopulation (Th17 celler) [8]. Men i tumorvæv, mere overflod af cellerne var CD8

+ T-celler (Tc17 celler). For at undersøge fordelingen af ​​Tc17 celler på lokalt plan, vi undersøgte forekomsten af ​​Tc17 celler i tumorvæv fra 46 UCC patienter og cervikale væv fra 28 CIN patienter ved hjælp af immunhistokemiske dobbelt farvning (fig. 3). Som vist i fig. 4a, niveauet af Tc17 celler signifikant forøget i væv fra UCC patienter (142,50 ± 28.24 celler /HPF) og CIN patienter (23,42 ± 7,65 celler /HPF), når sammenlignet med den i væv fra raske kontroller (5,52 ± 2,25 celler /HPF

P

UCC = 0,0007,

P

CIN = 0,026). En signifikant forskel blev også fundet mellem CIN og UCC patienter (

P

= 0,0086). Igen blev niveauet for Tc17 celler i væv af UCC patienter positivt korreleret med status som lymfeknudemetastaser, da blev observeret væsentligt højere niveau af Tc17 celler i væv fra UCC patienter med lymfeknudemetastaser (178,20 ± 35,47 celler /HPF) sammenlignet som i UCC patienter uden lymfeknudemetastaser (116,59 ± 25,57 celler /HPF,

P

= 0,035) (fig. 4b). Ingen korrelation blev fundet mellem niveauet for Tc17 celler med de andre kliniske karakteristika såsom klinisk fase, infiltration dybde, vasoinvasion, tumorstørrelse og histologiske tumortype af UCC patienter (

P

0,05).

(A) immunhistokemisk farvning for dobbelt Tc17 celler i kontrolgruppen (A og d), CIN gruppe (b og e) og UCC gruppe (c og f). Repræsentative sites med lav (200 ×, øvre paneler) og høj (400 ×, lavere paneler) forstørrelse blev vist. (B) IL-17-celler blev farvet røde (i cytoplasmaet) og CD8

+ -celler blev farvet sort (i membranen). Co-ekspression af CD8 og IL-17 bekræftet, at en del af Tc17 celler.

(a) Sammenlignet med raske kontroller (n = 30), signifikant forøgede antal af Tc17 celler blev fundet i både væv af UCC patienter (

P

= 0,0007, n = 46) og CIN patienter (

P

= 0,026, n = 28). Signifikant forskel blev også fundet mellem CIN og UCC væv (

P

= 0,0086). (B) I tumor region, de UCC patienter med lymfeknudemetastaser (n = 30) blev påvist signifikant statistisk højere Tc17 celler frekvens end de patienter uden lymfeknudemetastaser (

P

= 0,035, n = 16). *

P

0,05, **

P

0,01, ****

P

. 0,001

Næste densiteten af ​​mikrokar i cervikale væv blev bestemt ved immunhistokemi farvning med antistof mod angiogen tusch CD34. Som vist i fig. 5b, MVD blev observeret hyppigere i UCC (38,37 ± 7,04 /HPF,

P

0,0001) og CIN væv (23,36 ± 5,34 /HPF,

P

0,0001) end i kontrol væv (11,81 ± 2,47 /HPF). Også, var signifikant højere niveau af MVD findes i UCC gruppe sammenlignet med CIN gruppe (

P

0,0001). Da IL-17 er kendt for at være i stand til at fremme tumorudvikling ved at fremme angiogenese [21], [22], analyserede vi forholdet mellem størrelsen af ​​Tc17 celler og mængden af ​​mikrokar. Som vist i fig. 5a, niveauerne af Tc17 celler blev fundet at korrelere positivt med mikrokar tæthed i cervikal CIN og UCC væv (r = 0,923,

P

0,001 i CIN, og r = 0,938,

P

0,0001 i UCC henholdsvis)

(A) Lineær regressionsanalyse mellem niveauerne af Tc17 celler og MVD (Total:. r = 0,987,

P

0,0001, n = 65; kontrol: r = 0,814,

P

0,001, n = 18, CIN: r = 0,923,

P

0,001, n = 17; UCC: r = 0,938 ,

P

0,0001, n = 30). MVD fra hver prøve blev plottet mod Tc17 celler niveau fra den samme person. (B) repræsentant immunhistokemisk farvning af MVD i cervikale væv af tre grupper. Repræsentative sites med lav (100 ×, øvre paneler) og høj (400 ×, lavere paneler) forstørrelse blev vist.

Korrelationer mellem niveauerne af Tc17 celler og Th17 celler samt Foxp3-udtryk T celler

Da Tc17 celler ligner Th17 celler i forbindelse med udviklingsmæssige sti og mulige virkninger [23], [24], er det rimeligt at undersøge forholdet mellem dem. De primære data og metoderne til Th17 detektion celler i de samme tre grupper (UCC, CIN og kontrolgrupperne) blev vist i vores to tidligere offentliggjort papirer [8], [25]. Resultaterne viste, at niveauet af Th17 celler og Tc17 celler positivt blev korreleret i CIN og UCC grupper i både perifert blod (r

CIN = 0,435,

P

= 0,042; r

UCC = 0,403,

P

= 0,016) (figur 6 a og b) og cervikale væv (r

CIN = 0,441,

P

= 0,039;. r

UCC = 0,693,

P

= 0,026) (fig. 6 c og d).

(a, b) Lineær regressionsanalyse mellem frekvenser af Tc17 celle og Th17 celler i blodet (r

CIN = 0,435,

P

= 0,042, n = 22; r

UCC = 0,403,

P

= 0,016, n = 36). (C, d) Lineær regressionsanalyse mellem niveauerne af Tc17 celler og Th17 celler i cervikale væv (r

CIN = 0,441,

P

= 0,039, n = 17; r

UCC = 0,693,

P

= 0,026, n = 30).

Desuden, eftersom Foxp3-udtrykkende T-celler er velkendte for at være immun-undertrykkende for T celle responser [25] , [26], blev også analyseret forholdet mellem niveauerne af Tc17 og Foxp3-udtrykkende T-celler i patientens (CIN og UCC) cervikale væv. De primære data og metoderne for afsløring Foxp3-udtrykkende T-celler var i referencen 38. Som vist i fig. 7, niveauerne af Tc17 celler og Foxp3-udtrykkende T-celler i patientens cervikale væv blev positivt korreleret (r = 0,841,

P

0,001).

(r = 0,713,

P

0,001, n = 47)

diskussion

immunsystemet spiller en kompleks rolle i tumorigenese.. Det blev tidligere antaget, at CD8

+ T omfatter primært CD8

+ cytotoksiske T-celler, Tc-celler, som spiller afgørende rolle i værtens immunresponser på intracellulære patogener og tumordannelse ved hjælp af ekspressionen af ​​IFN-γ, granzym B og perforin [13], [14]. Men en delmængde af CD8

+ T-celler med immunsuppressive egenskaber er blevet beskrevet [27], [28]. Roberts et al. [29] fandt, at CD8

+ T-celler også kan fremme den kutane carcinogenese anvendelse af en to-trins kemisk initiering /promotion protokol (DMBA og TPA). En DMBA /TPA kræftfremkaldende regimen kunne opregulere udtrykkene for TGF-β og IL-6, hvilket resulterer i Tc17 celle skævvridning [30], [31]. Desuden, de fandt også, at en delmængde af tumorfremmende IL-17

+ CD8

+ cellepopulation kan eksistere i denne model.

Tc17 celler nylig defineret som en IL-17-producerende CD8

+ T delmængde, der er forskellig fra TC1 og Tc2 celler. Selvom nogle fremskridt er blevet gjort i forståelsen af ​​differentiering og funktion Tc17 celler i nogle typer af humane sygdomme og i de homeostatiske forordninger [9], [10], [32], lidt om den biologiske funktion og mekanisme underliggende reguleringen af ​​Tc17 celler i humane tumorer. Vores undersøgelse viste, at niveauet af Tc17 celler og Th17 celler fremtrædende steget i både perifert blod og tumorvæv af UCC patienter. Desuden fandt vi, at frekvensen af ​​Tc17 celler var positivt korreleret med den af ​​Th17 celler i både perifert blod og cervikale væv hos patienter med CIN og UCC. En anden undersøgelse har også vist en overflod af Tc17 celler i tumorbærende mus, der ligner den i inflammatorisk tilstand [18]. Også, Kuang et al. [20] fandt, at IL-17

+ celler (herunder Th17 celler og Tc17 celler) akkumuleret i humane hepatocellulære karcinomer (HCC) og Tc17 celler blev beriget med invaderende kant HCCs. Således kan Tc17 celler beriget med UCC patienter spiller en vigtig rolle i udviklingen af ​​denne type af cancer.

Det blev rapporteret, Tc17 celler og Th17 celler delte lignende udviklingsveje med hensyn til differentieringen proces [10 ]. For eksempel, TGF-β, IL-6 og IL-21 kunne stimulere differentiering af både Tc17 og Th17 celler [10], [19], [24]. Desuden har undersøgelser vist, at Tc17 celler kan vise undertrykt cytotoksisk funktion på samme måde som funktionen af ​​Th17 celler i autoimmune sygdomme [23], [33], infektion [9], [23] og antitumor immunitet [15]. Endvidere IL-17 er et pro-inflammatorisk cytokin, som produceres af både Th17 celler og Tc17 celler. IL-17 producerende T-celler er effektorerne er involveret i at inducere inflammation og autoimmune vævsskade [34]. Således har vi spekulere, at produktionen af ​​IL-17 kan mediere de potentielle roller Tc17 celler i cancer progression. Men den tvungne ektopisk overekspression af IL-17 i tumorceller demonstrerede modstridende virkninger på tumorvækst: tumor-inhiberende [35], [36] versus tumorfremmende [21], [37]. Især Nam et al. [31] rapporterede, at IL-17 undertrykte apoptose i flere tumorcellelinier

in vitro

, og knockdown af IL-17-receptor i 4T1 muse brystcancer celler forbedrede apoptose og nedsat tumorvækst

in vivo

. Også vi observerede de forhøjede niveauer af TGF-β, IL-6, IL-17 og IL-21 i livmoderhalskræft (upublicerede observationer). Disse observationer tyder på, at UCC aktivt kan udskille store mængder af TGF-βwhich kan inducere differentieringen af ​​IL-17

+ T-celler, og kan denne til gengæld fremme udvikling og overlevelse af kræft i en IL-17-afhængig måde [31], selv om yderligere undersøgelser stadig er behov for.

for nylig er det blevet vist, at både Th17 og Tc17 celler er til stede i tumor mikromiljøer af flere typer af humane og murine tumorer [19], hvilket tyder på, at dette kan være et relativt udbredt fænomen i tumorigenese. Desuden har vi tidligere rapporteret, at Th17 celler kan forårsage malign progression og ringe overlevelse i UCC patienter [8]. I denne undersøgelse, vi bemærkede også, at den positive korrelation mellem Tc17 celler og Th17 celler gradvist med progression fra CIN til UCC. Endvidere blev forekomsten af ​​Tc17 celler også korreleret med lymfekirtelmetastaser af UCC. Derfor er det muligt, at berigelsen af ​​Tc17 celler fremmer progression af UCC i forståelse med Th17 celler.

Selvom Tc17 celler er effektorceller, kunne de ikke dræber målceller i den måde, at klassisk CD8

+ T-celler gøre [24]. Epidemiologiske undersøgelser har fastslået, at inflammation er associeret med tumorudvikling [38]. Inflammation fører til produktion af vækstfaktorer, angiogene faktorer, og matrix-nedbrydende proteaser af leukocytter, som spiller en vigtig rolle i tumor promotion og progression [4], [38]. Kuang et al. [20] fandt, at Tc17 celler overvejende blev beriget i invaderende kanten af ​​menneskelig hepatocellulært carcinom (HCC). Disse infiltrerende Tc17 celler udtrykte høje niveauer af proinflammatoriske cytokiner, som fremmer tumor forlængelse via den inflammatoriske reaktion. Den neovaskularisering er et andet vigtigt kendetegn for cancer progression. Proinflammatoriske cytokiner, såsom IL-17 kunne også fremme tumorvækst ved at fremme angiogenese [21], [22]. I vores undersøgelse fandt vi også en positiv korrelation mellem hyppigheden af ​​Tc17 celle og mikrokardensitet densitet, understøtter det proinflammatoriske egenskab af IL-17-celler. Desuden har vi også observeret korrelationen mellem Tc17 celler med Foxp3 udtrykker T-celler i livmoderhalskræft væv, Foxp3-udtrykkende T-celler medierer stærkt immunforsvar-undertrykkende aktivitet på T-celle responser [39], [40]. Disse resultater indikerer, at Tc17 celler kan fremme tumor progression, men den nøjagtige funktion af Tc17 celler i UCC behov for yderligere undersøgelse.

Sammenfattende viste vi for første gang, at hyppigheden af ​​Tc17 celler steg naturligvis i CIN og UCC patienter og den øgede forekomst af Tc17 celler var forbundet med lymfeknudemetastaser og mikrokardensitet tæthed, hvilket indikerer en vigtig rolle for Tc17 celler i initiering og progression af UCC. En bedre forståelse af den underliggende mekanisme af IL-17 regulerer antitumor immunresponser kan føre til udvikling af hidtil ukendt terapeutisk strategi for UCC patienter.