PLoS ONE: DMH1, et lille molekyle hæmmer af BMP type I receptorer, Undertrykker Vækst og Invasion af lungekræft

abstrakt

knoglemorfogenetisk protein (BMP) signaleringskaskade er aberrerende aktiveret i humane ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), men ikke i normale lungeepitelceller, hvilket antyder, at blokering BMP-signalering kan være et effektivt terapeutisk tilgang til lungekræft. Tidligere studier har vist, at nogle BMP-antagonister, der binder til ekstracellulære BMP-ligander og forhindre deres tilknytning til BMP-receptorer, dramatisk reduceret lunge tumorvækst. Imidlertid er klinisk anvendelse af proteinbaserede BMP antagonister begrænset af korte halveringstider, dårlig intra-tumor udlevering samt modstand forårsaget af potentielle gain-of-funktion-mutationer i nedstrøms for BMP-vejen. Små molekyler BMP-hæmmere, som er rettet mod de intracellulære BMP kaskader ville være ideel til udvikling anticancer lægemiddel. I en zebrafisk struktur og aktivitet studie embryo-baseret, vi tidligere identificeret en gruppe af højt selektive småmolekylære inhibitorer specifikt antagoniserer det intracellulære kinasedomæne af BMP type I receptorer. I den foreliggende undersøgelse påviste vi, at DMH1, en af ​​sådanne inhibitorer, kraftigt reduceret lunge celleproliferation, fremme celledød og nedsat cellemigration og invasion i NSCLC-celler ved at blokere BMP-signalering, som angivet ved suppression af Smad 1/5/8 phosphorylering og genekspression af Id1, Id2 og Id3. Derudover DMH1 behandling reducerede signifikant tumorvækst i human lungecancer xenograft model. Afslutningsvis vores undersøgelse tyder på, at inhibitorer med små molekyler af BMP type I receptorer kan tilbyde en lovende roman strategi for lungekræft behandling

Henvisning:. Hao J, Lee R, Chang A, Fan J, Labib C, Parsa C, et al. (2014) DMH1, et lille molekyle hæmmer af BMP type I receptorer, Undertrykker Vækst og Invasion af lungekræft. PLoS ONE 9 (3): e90748. doi: 10,1371 /journal.pone.0090748

Redaktør: Carl G. Maki, Rush University Medical Center, USA

Modtaget: 12. december, 2013; Accepteret: 5 Februar 2014; Udgivet: 6 marts 2014

Copyright: © 2014 Hao et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af frø fond af College of Veterinary Medicine ved Western University of Health Sciences (JH), og Western University of Health Sciences Faculty Udviklingsfond (YH). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Lungekræft er en af ​​de mest almindelige typer af kræft og den hyppigste årsag til kræft dødsfald. Omkring 228.190 tilfælde af lungekræft forventes at være nyligt diagnosticeret i 2013, tegner sig for ~27% af alle kræftdødsfald årligt i USA [1]. Den største form for lungekræft, ikke-småcellet lungekræft (NSCLC), omfatter ca. 85% af alle diagnosticerede lungekræft. Trods forbedringer i diagnosticering og kemoterapi, 5-års overlevelse for patienter med NSCLC er stadig meget lav. For nylig er der gjort store fremskridt inden for forståelsen af ​​de molekylære mekanismer køre lungekræft udvikling, hvilket resulterede i et par målrettede behandlinger [2]. Men de patienter, der reagerer indledningsvist uvægerligt tilbagefald. Der er behov for at identificere nye targets for NSCLC.

Knoglemorfogenetiske proteiner (BMP’er) er medlemmer af TGF-β-superfamilien og deres biologiske aktivitet medieres gennem dannelsen af ​​heterodimere komplekser af BMP type I og type II serin /threoninkinaser receptorer. Efter ligandbinding, er BMP type I receptorer phosphoryleres med de konstitutivt aktive type II-receptorer, hvilket fører til phosphorylering af intracellulære Smad 1/5/8 proteiner, som derefter danner et kompleks med Smad4 og translokere ind i kernen for at regulere transkriptionel respons [3], [4]. Over 20 BMP-ligander er blevet identificeret til dato [5]. Overekspression af BMP-2 er blevet associeret med ~98% af NSCLC og andre typer af malignitet [6], [7]. Desuden tvang ekspression af BMP-2 i NSCLC cellelinier væsentligt højere tumorvækst i en musemodel for lungekræft følgende hale intravenøs injektion af tumorceller [8]. Omvendt BMP-antagonisten Noggin og det ekstracellulære pseudoreceptor spp24 (udskilt phosphoprotein 24 kD) dramatisk reduceret lunge tumorvækst i subkutane xenograft musemodeller [9], [10], hvilket antyder, at inhibering af BMP-signalering kan være en effektiv behandling for lungekræft . Men det protein-baserede BMP antagonister eller pseudoreceptor spp24 hovedsagelig interferere bindingen af ​​ekstracellulære BMP ligander til deres receptorer. Deres kliniske anvendelse kunne være begrænset af potentielle gain-of-funktion-mutationer i de nedstrøms medlemmer af BMP signaleringskaskade eller korte halveringstider og dårlig levering til tumorer, der er fælles problemer forbundet med protein-baserede terapi.

i en

in vivo

struktur-aktivitet relationer undersøgelse baseret på en zebrafisk fosterudvikling model, vi tidligere identificeret en gruppe af meget selektive små molekylære BMP-hæmmere, herunder DMH1 og DMH2, som specifikt blokerer BMP signalering ved at målrette det intracellulære kinase domæne af BMP type i receptorer [11] (struktur DMH1 er vist i figur 1A). En meget nylig undersøgelse rapporterede, at DMH2, en af ​​vores BMP-hæmmere, effektivt nedsat vækst og celledød af NSCLC celler

in vitro

[12]. Men

in vivo

undersøgelse af små molekylære BMP inhibitorer på NSCLC tumorvækst er ikke blevet rapporteret,. Som DMH1 viser en bedre selektivitet for BMP type I receptorer end DMH2 [11], i nærværende undersøgelse undersøgte vi effekten af ​​DMH1 på celleproliferation, migration og invasion af NSCLC celle linjer

in vitro

samt på xenotransplantat lunge tumorvækst i mus. Vores undersøgelse viste, at DMH1 var i stand til at reducere NSCLC cellevækst, migration og invasion, og dæmpe xenograft lunge tumor vækst

in vivo

Kemisk struktur af DMH1.; (B) Western blotting for phosphoryleret Smad1 /5/8 i A549-celler behandlet med DMH1 i forskellige koncentrationer (1, 3, og 5 uM); (C) qPCR resultaterne af Id1, 2 og 3 i A549-celler behandlet med DMH1 og køretøj DMSO. *:.

s

-værdi sige 0,05

Materialer og metoder

Cell kultur og reagenser

A549 og H460 celler blev købt fra American Type Culture Collection (ATCC, Manassas, VA), dyrket i RPMI 1640 suppleret med 10% FBS (Gibco) og 1% penicillin-streptomycin (Cellgro) i en atmosfære af 5% CO

2 ved 37 ° C.

Western blotting-

Celler blev lyseret i RIPA cellelyse-buffer (Santa Cruz, Santa Cruz, CA) suppleret med proteasehæmmer cocktail (Santa Cruz) og phosphatase inhibitor cocktail 2 (Santa Cruz). Proteinkoncentrationer blev bestemt ved anvendelse af BCA-protein kit (Thermo Fisher), og cellelysatet blev isoleret i SDS-PAGE og overført til PVDF-membran. Alpha-tubulin og p-Smad1 /5/8 blev detekteret ved Odyssey-system (Li-Cor Bioscience) efter inkubering med de passende primære og sekundære antistoffer. Primære antistoffer blev anvendt, var kanin-anti-p-Smad1 /5/8 (Cell Signaling Tech, 1:1000 fortynding) og muse anti-alfa-tubulin (Cell Signaling Tech, 1:1000 fortynding). De sekundære antistoffer anvendes, indbefatter IRDye 680-konjugeret gede anti-kanin IgG (Li-Cor Bioscience, 1:5000 fortynding) og IRDye 800CW-konjugeret ged anti-mus IgG (Li-Cor Bioscience, 1:5000 fortynding).

Cell scratch-sår Assay

A549 og H460-celler blev podet i 35 mm skåle til at oprette en sammenflydende monolag. Skålene fik lov at inkubere natten over for at tillade cellerne at fæstne til bunden af ​​skålen. På den følgende dag blev sårene skabt af en lige ridse fra en pipettespids i centrum af kulturen. Cellerne blev derefter behandlet med DMSO eller DMH1 ved 1 uM og 3 uM koncentrationer. Fotografier blev taget, da sårene blev skabt, og efter 24 timer er inkubation ved hjælp fase-kontrast mikroskopi, og gap afstande blev kvantitativt vurderet ved hjælp af software ImageJ (NIH). Mellemrummet afstande efter 24 timers inkubation blev normaliseret med afstand ved 0 timer som vandringshastigheder.

celleproliferationsassay

Om 10.000 A549-celler per brønd blev podet i plader med 96 brønde og inkuberet natten over. Dyrkningsmediet blev derefter ændret til frisk medium indeholdende DMSO eller DMH1 i forskellige koncentrationer. Cellerne blev derefter inkuberet i 48 timer og 96 timer før behandlingens ophør ved at erstatte mediet med 100 pi 10% trichloreddikesyre (Sigma) i 1 × PBS, efterfulgt af inkubation ved 4 ° C i mindst 1 time. Efterfølgende blev pladerne vasket med vand og lufttørret. Pladerne blev farvet med 50 pi 0,4% sulforhodamin (SRB, Sigma) assay i 1% eddikesyre i 30 minutter ved stuetemperatur. Ubundet farvestof blev vasket af med 1% eddikesyre. Efter lufttørring og solubilisering af proteinbundet farvestof i 10 mM Tris-opløsning, blev absorbansen aflæst i en mikropladelæser ved 565 nm. Salg

Kvantitativ realtids-PCR Salg

A549 og H460 celler podet i 6-brønds plader ved en densitet på 3 x 10

5 celler pr brønd blev behandlet med DMSO eller DMH1 i 24 timer. Totalt RNA blev ekstraheret under anvendelse af TRIzol Reagens (Invitrogen) ved at følge fabrikantens protokol. cDNA blev syntetiseret under anvendelse af høj kapacitet cDNA Reverse Transcription Kit (Applied Biosystems). Real-time PCR blev udført ved anvendelse af Power SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems) og med Applied Biosystems 7300 PCR System. Alle amplifikationsprodukter kontroller og prøver blev udført tredobbelt. Primersekvenserne er tilgængelige efter anmodning.

Modificeret Boyden kammer assay

Cell invasion blev målt ved hjælp af en 24-Multiwell Insert System (8 uM membran, BD Biosciences) i henhold til fremstilling instruktion. De cellekultur indsætter blev belagt med matrigel (BD Biosciences). A549-celler blev podet ved en koncentration på 3 x 105 celler /kammer, Efter 24 timers inkubation med eller uden DMH1 (3 uM), celler, der ikke var flyttet til de nedre brønde blev fjernet fra den øvre flade af filtrene ved hjælp af vatpinde , og de celler, der invaderede gennem Matrigelcoatede-inserter blev talt. Middelværdier for tre tilfældigt udvalgte felter blev opnået for hver brønd. Eksperimenter blev udført i dobbeltbestemmelse. Middelværdier for tre tilfældige felter blev opnået for hver brønd.

xenotransplantat lunge tumorvækst

Denne undersøgelse blev udført i nøje overensstemmelse med anbefalingerne i Vejledning for Pleje og anvendelse af forsøgsdyr af National Institutes of Health. Den eksperimentelle protokol dyr blev godkendt af Western University of Health Sciences Institutional Animal Care og Brug udvalg (IACUC). blev gjort alt for at minimere dyrenes lidelser. Sub-sammenflydende A549-celler blev trypsinbehandlet og derefter suspenderet i serumfrit RPMI 1640 medium. Suspensionen celle (1 × 10

6 celler i 100 pi medium til hver injektion) blev injiceret subkutant i både højre og venstre flanker af otte uger gamle NOD SCID-mus (Taconic, Hudson, NY) (n = 5 for hver gruppe). Mus blev givet Intraperitoneal (i.p.) injektion af vehikel (12,5% 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin) eller 5 mg /kg DMH1 hver anden dag. Tumorstørrelserne blev målt med en skydelære fra den sjette dag til den fjerde uge efter tumorimplantation. Tumorvolumen (V) blev beregnet ifølge formuleringen: Volume = (bredde) ∧2 x længde /2. Tumorvævene blev dissekeret i slutningen af ​​studiet, og blev snittet og farvet med H 0,05

Resultater

DMH1 blokke BMP signalering i NSCLC celler

Vi undersøgte først, om DMH1 kan blokere BMP signalering i NSCLC celler ved hjælp af Western blotting og kvantitativ real-time PCR (qPCR). NSCLC A549-celler blev behandlet med den vehikel (DMSO) eller DMH1 ved 1, 3 og 5 uM i 24 timer. Western blotting-analyse viste, at A549-celler viste relativ høj basal phospho-Smad 1/5/8 ekspression og DMH1 behandling effektivt blokeret Smad 1/5/8 phosphorylering på en dosisafhængig måde (figur 1B). Eftersom Inhibitorer af DNA-binding /differentiering (Id) familiemedlemmer er direkte mediatorer af BMP signalering [13], og de er involveret i invasionen, proliferation og metastase af cancerceller [14], målt vi genekspressionen af ​​Id1, Id2 og Id3 i A549 ved qPCR. Efter 24 timers behandling, 3 og 5 uM DMH1 robust faldt ekspressionen af ​​alle tre gener (figur 1C). Tilsammen kan DMH1 effektivt blokere BMP signalering i NSCLC-celler.

DMH1 formindsker NSCLC cellemigration og invasion

Da cellemigration og invasion er kendt for at spille en vigtig rolle i progressionen af ​​cancer metastase vi undersøgte virkningerne af DMH1 på NSCLC celle migration og invasion

in vitro

. Vi brugte scratch-sår assay til at bestemme NSCLC cellemigration ved at skabe sår huller i dyrkede A549 celler [15]. Celler blev derefter behandlet med DMSO, en af ​​de BMP-ligander BMP4 eller DMH1 i 24 timer henholdsvis, og afstanden afstande blev derefter normaliseret med de oprindeligt målte afstande. BMP4 blev brugt, fordi det har delt funktion med BMP-2, men med højere potens. Som vist i figur 2A og 2B, BMP4 især fremskyndet cellemigration henviser DMH1 dramatisk bremset migration på en dosisafhængig måde. Lignende virkninger af BMP4 og DMH1 på celle migration blev også observeret i en anden NSCLC cellelinje H460 (Figur 2C). Derudover undersøgte vi effekten af ​​DMH1 på celleinvasion ved brug af modificeret Boyden kammer assay. A549-celler blev podet på Matrigelcoatede kamre, efterfulgt af 24-timers inkubation med eller uden DMH1. 3 uM DMH1 dramatisk reduceret A549 celleinvasion gennem Matrigelcoatede membraner med omkring 52% sammenlignet med køretøjets kontroller (figur 2D).

repræsentativt udvalg fra bunden-viklede assays udført i de dyrkede A549-celler behandlet med DMSO , BMP4 og DMH1 (1 uM og 3 uM) i 24 timer. (B) Cell vandringer A549-celler blev kvantificeret ved gap afstande efter 24 timer behandling normaliseret med de oprindelige gap afstande. (C) Cell vandringer H460 celler blev kvantificeret på en lignende måde. (D) Virkningen af ​​DMH1 (3 uM) på A549 celleinvasion blev bestemt under anvendelse modificeret Boyden kammer assay, en 24-Multiwell Insert system (8 uM membran, BD Biosciences) overtrukket med matrigel. *:

s

-værdi sige 0,05

DMH1 reducerer NSCLC celledeling og inducerer celledød

Vi næste undersøgt virkningerne af DMH1 på NSCLC celle. spredning og overlevelse. A549-celler blev behandlet med DMH1 og køretøjet DMSO i 48 timer, og celleproliferation blev bestemt ved sulforhodamin B (SRB) assay. Resultatet viste, at 5 uM DMH1 førte til nedsættelse omkring 10% i cellevækst efter to dages behandling, hvilket antyder, at inhibering af BMP signalering ved DMH1 reducerer lungecancer celleproliferation

in vitro

(figur 3A) betydeligt. Derudover undersøgte vi effekten af ​​DMH1 på A549 celle overlevelse så godt. A549-celler blev behandlet med DMH1 eller køretøj DMSO i 72 timer, og flydende og adhærerende celler blev høstet og farvet med trypanblåt for at bestemme antallet af døde og døende celler. I modsætning til behandling køretøj, DMH1 steget betydeligt procentdelen af ​​døde celler ved 5 uM koncentrationer, hvilket antyder, at antagonisering BMP signalering ved DMH1 øger lungecancer celledød (figur 3B). Således kan DMH1 behandling dramatisk reducere NSCLC celleproliferation og inducerer celledød

in vitro.

A549-celler blev behandlet med DMH1 (3 og 5 uM) eller DMSO i 48 timer og celleproliferation var bestemt ved sulforhodamin B (SRB) assay. (B) A549-celler blev behandlet med DMH1 eller DMSO i 72 timer, og cellerne blev høstet til celledød under anvendelse af Trypan Blue-farvning. *:

s

-værdi er 0,05

DMH1 dæmper xenograft lunge tumorvækst i mus

Vi næste undersøgte effekten af ​​DMH1 på lunge tumor celle. vækst

in vivo

. De A549 celler blev subkutant podet i de to sider af lavere bageste flanker på Svær kombineret immundefekt (SCID) mus. Intraperitoneal (ip) injektioner af vehikel (12,5% 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin, n = 5) eller 5 mg /kg DMH1 (n = 5) blev påbegyndt på samme dag som tumorcelleimplantation og blev udført hver anden dag for 4 uger. Tumorvolumener blev målt regelmæssigt starter på den sjette dag efter implantation. Den tumorvækst var egnet til en eksponentiel vækstkurve (figur 4A) (R

2 = 0,87 og 0,84 for DMH1 behandlede og kontrolmus, henholdsvis). Resultatet viste, at satsen for fordobling tumorstørrelse i DMH1-behandlede mus var omkring en dag længere end kontrollerne (5,6 versus 4,7 dage i DMH1 behandlede og kontrol mus, henholdsvis) (Figur 4A). Som de indledende tumorvolumener var ens, blev der ikke observeret statistiske forskelle mellem de to grupper indtil dag 25. Ved afslutningen af ​​4-ugers behandling, DMH1 behandling resulterede i en statistisk signifikant reduktion i tumorvolumener med omkring 50% sammenlignet med vehikelkontrollen gruppe (p-værdi 0,05) (Figur 4B). De mus kropsvægt blev målt hver anden dag i hele eksperimentet, og blev ikke observeret nogen bemærkelsesværdige vægtændringer i både kontrol- og DMH1 behandlede grupper, hvilket tyder på et fravær af DMH1 toksiske effekt på den indgivne dosis (data ikke vist). For yderligere at undersøge effekten af ​​DMH1 på tumorcelleproliferation

in vivo

blev prøver tumor væv fra både kontrol bilen og DMH1 behandlingsgrupper udsat for Hematoxylin og eosin-farvede (H 0,05

Diskussion

BMP’er er afvigende udtrykt i mange typer af carcinomceller herunder prostata-, lunge-, bryst-, mave-. og æggestokkene [16], [17], [18], [19]. For eksempel er overekspression af BMP-2 er forbundet med ~98% af NSCLC, men lille eller ingen aktivitet af BMP signaleringskaskade detekteres i voksne normale lungevæv, hvilket antyder, at blokering BMP signalvej kan være en effektiv tilgang til lungekræft behandling [3], [4]. Faktisk blev BMP antagonisten Noggin og de ekstracellulære pseudoreceptor spp24 vist sig at reducere lunge tumorvækst i subkutane xenograft musemodeller [6], [7]. Selvom proteinbaserede BMP antagonister og ekstracellulære pseudoreceptors kan være lovende kilder til lungekræft lægemiddeludvikling, de har nogle potentielle begrænsninger såsom korte halveringstider og vanskelige levering til tumorer [8]. Desuden har både Noggin og spp24 blok BMP-signalering ved at gribe bindingen af ​​BMP-ligander til deres receptorer på ekstracellulære niveau, og deres kliniske anvendelse kunne være begrænset af eventuelle gevinst af funktion mutationer i nedstrøms for BMP signaleringskaskade. Lavmolekylære antagonister som DMH1 som selektivt målretter de intracellulære kinase-domæner af BMP type I receptorer ville være ideelt midler til inhibering af væksten lungekræft og metastase. En nylig undersøgelse viste, at DMH2, en af ​​BMP-hæmmere er identificeret i vores zebrafisk undersøgelse effektivt nedsat vækst og celledød af NSCLC celler

in vitro

[12]. Her viste vi, at en mere selektiv BMP-inhibitor, DMH1, signifikant reduceret NSCLC cellevækst, migrering og invasion

in vitro

, og svækkede tumorvækst i NSCLC xenotransplantat musemodel, hvilket antyder, at inhibering af BMP-vejen ved at antagonisere typen i-receptorer med små molekyler kan være en effektiv metode til lungekræft terapi.

virkningerne af DMH1 på svækkende lunge tumorvækst kan medieres af flere mekanismer, herunder forstyrre tumormikromiljøet eller lunge cancer stamceller. Tidligere undersøgelser rapporteret, at BMP-2 inducerede neovaskularisation af at udvikle tumorer, og stimulerede blodkar dannelse i A549-afledte tumorer i nøgne mus [20]. BMP-2 antagonist noggin ophævet BMP-2-induceret angiogen respons, og vælte BMP-2 faldt blodkardannelse i Matrigel assays [20]. Således DMH1 behandling kan ligeledes forstyrre mikromiljø kræves til lunge tumorvækst ved at blokere angiogenese. Derudover er BMP signalering kendt i reguleringen stamcelle selvfornyelse og differentiering, og nogle undersøgelser har antydet specifik population af lunge kræftceller vise stamcelle-lignende egenskaber, såsom selv-fornyelse og differentiering [21]. Blokering BMP signalering ved DMH1 kan afbryde lungekræft stamceller vækst, og dermed undertrykke tumor progression. Denne hypotese understøttes af en helt ny undersøgelse, at inhibering af BMP-signalering undertrykt vækst af populationen af ​​lungekræft celler, der udtrykker stamcellemarkører [22]. Desuden er det blevet rapporteret fra flere undersøgelser, BMP-aktiverede Smad signal- eller Id-genfamilien har potentiale til at fremme migration og invasion i forskellige typer af cancer [18], [23], [24]. Derfor er det meget muligt, at effekten af ​​at målrette BMP signalering ved DMH1 kan reducere tumor invasion og metastase i bredere kategorier kræft.

I in vivo studie ved hjælp af A549 xenograftmodel blev behandlingen påbegyndt på samme dag i tumorcelleimplantation. Derfor tumorstørrelserne var relativt lille ved afslutningen af ​​de in vivo forsøg. I fremtidige studier, er det fortsat at afgøre, om behandling af DMH1 efter forskellige tidsplaner kan resultere i større anticancer effekter. Selvom DMH1 behandling betydeligt svækket lungekræft vækst

in vivo

sammenlignet med

in vivo

effekter af kemoterapi narkotika, såsom paclitaxel på samme xenograft model (upublicerede resultater), virkningen af ​​DMH1 var ikke så potent. Denne observation tyder på, at DMH1 ikke er et cytotoksisk middel, og kan ikke inducere apoptose ved lavere doser. Således til fremtidig klinisk anvendelse, en af ​​de potentielle forskningsretninger er at fokusere på den kombinerede anvendelse af DMH1 med andre målrettede eller kemoterapi. er behov for en systematisk tilgang til at søge efter en synergistisk kombination. Yderligere undersøgelser er også nødvendige for at identificere undergrupper af lungekræft, der er mere følsomme over for BMP-hæmmere med henblik på individuel terapi.

Sammenfattende vores undersøgelse viste, at modvirkning BMP type I-receptorer med små molekyler er effektiv på at undertrykke lungekræft celleproliferation, migration, invasion

in vitro

og tumorvækst

in vivo

. Ikke-toksiske og yderst selektive små molekyler BMP-inhibitorer, såsom DMH1, kan repræsentere en ny klasse af terapeutiske midler til at reducere lungekræft patientens dødelighed og mobilitet.