PLoS ONE: Målretning mTOR at overvinde epidermal vækstfaktor receptor tyrosinkinasehæmmer Modstand i ikke-småcellet lungekræft celler

Abstrakt

Målsætning

epidermal vækstfaktor receptor (EGFR) tyrosinkinasehæmmere (TKI’er) har vist dramatiske kliniske fordele i fremskreden ikke-småcellet lungekræft (NSCLC); dog modstand stadig et alvorligt problem i klinisk praksis. Nærværende undersøgelse analyserede mTOR-associeret signalering-pathway forskelle mellem EGFR TKI-følsomme og resistent NSCLC cellelinjer og undersøgt mulighederne for at målrette mTOR med specifik mTOR-hæmmer i EGFR TKI resistente NSCLC celler.

Metoder

Vi valgte fire forskellige typer af EGFR TKI-følsomme og resistente NSCLC celler: PC9, PC9GR, H1650 og H1975 celler som modeller til at opdage mTOR-associeret signalering-pathway forskelle ved western blot og Immunopræcipitation og evaluerede den antiproliferativ virkning og cellecyklusstop af ku-0063794 af MTT metoden og flowcytometri.

Resultater

i den foreliggende undersøgelse, bemærkede vi, at mTORC2-associeret Akt Ser473-FOXO1 signalvejen i en basal tilstand var stærkt aktiveres i resistente celler.

In vitro

mTORC1 og mTORC2 kinase aktiviteter analyser viste, at EGFR TKI-resistente NSCLC cellelinjer havde højere mTORC2 kinase aktivitet, hvorimod sensitive celler havde højere mTORC1-aktivitet i den basale tilstand. ATP-konkurrence mTOR-hæmmer ku-0063794 viste dramatiske antiproliferative effekter og G1-cellecyklusstop i både sensitive og resistente celler. Ku-0063794 på IC

50 koncentration effektivt hæmmede både mTOR og p70S6k phosphoryleringsniveauerne; sidstnævnte er en mTORC1 substrat og ikke opregulerer Akt Ser473-phosphorylering, som ville blive induceret ved rapamycin og resulterede i delvis hæmning af FOXO1 phosphorylering. Vi bemærkede også, at EGFR TKI-følsomme og resistente kliniske NSCLC tumor prøver havde højere samlet og fosforylerede p70S6K ekspressionsniveauerne.

Konklusion

Vores resultater indikerer mTORC2-associerede signalering-pathway blev hyperaktiveret i EGFR TKI-resistente celler og målretning mTOR med specifikke mTOR inhibitorer sandsynligvis en god strategi for patienter med EGFR-mutant NSCLC, som udvikler EGFR TKI resistens; de potentielle specifikke roller mTORC2 i EGFR TKI-resistente NSCLC celler var stadig ukendt og bør undersøges nærmere

Henvisning:. Fei SJ, Zhang XC, Dong S, Cheng H, Zhang YF, Huang L, et al . (2013) Målretning mTOR at overvinde epidermal vækstfaktor receptor tyrosinkinasehæmmer Modstand i ikke-småcellet lungekræft Cells. PLoS ONE 8 (7): e69104. doi: 10,1371 /journal.pone.0069104

Redaktør: Jingwu Xie, Indiana University School of Medicine, USA

Modtaget: Februar 14, 2013; Accepteret: 5 juni 2013; Udgivet: den 16. juli, 2013