PLoS ONE: SRPX2 er en roman chondroitinsulfatproteoglycan Det er overudtrykt i Gastrointestinal Cancer

Abstrakt

SRPX2 (Sushi repeat-holdigt protein, X-bundet 2) har for nylig vist sig som et multifunktionelt protein, der er involveret i anfaldslidelser, angiogenese og cellulær adhæsion. Her, analyserede vi dette protein biokemisk. SRPX2 protein blev udskilt med et stærkt posttranslationel modifikation. Chondroitinase ABC behandling helt faldt molekylvægten af ​​oprenset SRPX2 proteinet til dets forudsagte størrelse, hvorimod heparitinase, keratanase og hyaluroinidase ikke gjorde. Secerneret SRPX2 protein blev også påvist ved anvendelse af et anti-chondroitinsulfat antistof. Disse resultater indikerer, at SRPX2 er en hidtil ukendt chondroitinsulfatproteoglycan (CSPG). Endvidere et bindingsassay viste, at hepatocytvækstfaktor dosisafhængigt binder til SRPX2 protein og en ligand-glycosaminoglycaner interaktion blev spekuleret at være sandsynligt i proteoglycaner. Med hensyn til dens molekylære arkitektur, SRPX2 har sushi gentagne ligner fire andre CSPGs /lecticans moduler; dog den molekylære arkitektur SRPX2 synes at være ganske forskellig fra den af ​​de lecticans. Samlet set fandt vi, at SRPX2 er en hidtil ukendt CSPG der overudtrykkes i gastrointestinale cancerceller. Vores resultater giver nøglen glycobiological indsigt i SRPX2 i kræftceller, og vise, at SRPX2 er et nyt medlem af kræft-relaterede proteoglycan familie

Henvisning:. Tanaka K, Arao T, Tamura D, Aomatsu K, Furuta K, Matsumoto K, et al. (2012) SRPX2 er en roman chondroitinsulfatproteoglycan Det er overudtrykt i Gastrointestinal Cancer. PLoS ONE 7 (1): e27922. doi: 10,1371 /journal.pone.0027922

Redaktør: Hana Algül, Technische Universität München, Tyskland

Modtaget: Juni 28, 2011; Accepteret: 27 oktober 2011; Udgivet: januar 5, 2012 |

Copyright: © 2012 Tanaka et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af midler til den samlede 3. Term af 10-års strategi for Cancer Control en Grant-in-Støtte til videnskabelig forskning fra Ministeriet for Undervisning, Kultur, Sport, Videnskab og Teknologi i Japan (19.209.018), og en fond fra Sundhed og Labor Scientific Research Grants. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Sushi repeat protein X-linked 2 (SRPX2) blev først identificeret som et gen opreguleret i pro-B-leukæmiceller og blev beskrevet som sushi-repeat protein opreguleret i leukæmi (SPRUL, [1] ). Flere år senere, SRPX2 viste sig at være ansvarlig for rolandic anfald forbundet med oral og tale dyspraksi og mental retardering [2]. Sygdommen mutation (N327S) og en anden mutation (Y72S) af SRPX2 blev identificeret, og disse mutationer resulterede i gevinst-of-N-glycosyleret form af den mutante [2] protein. Selvom de molekylære og biologiske funktioner SRPX2 har været ukendt i lang tid, en nylig undersøgelse viste klart, at SRPX2 binder til urokinaseplasminogenaktivatorreceptorfunktion (uPAR) i en ligand /receptor-interaktion, og at SRPX2 mutationer førte til en stigning i SRPX2 /uPAR bindingsaffinitet [3]. I de vaskulære endotelceller, Srpx2 regulerer endotelcellemigration og dannelse rør, og samspillet mellem SRPX2 og uPAR er også involveret i de tidlige faser af endotel remodeling under angiogenese [4].

For nylig viste vi, at SRPX2 overudtrykkes i gastrisk cancer væv, og at ekspression blev forbundet med en dårlig klinisk resultat [5]. SRPX2 øger cellulær migration og adhæsion i gastriske cancerceller og interessant nok det konditionerede medium opnået fra SRPX2-producerende celler forøgede cellulære migration aktivitet og cellulær adhæsion [5]. Vi undersøgt yderligere SRPX2, der fokuserer på en biokemisk analyse i denne undersøgelse.

Materialer og metoder

Cell kultur

HEK293 blev opretholdt i DMEM-medium og SNU-16 og MKN7 var opretholdt i RPMI1640-medium suppleret med 10% FBS. HUVEC (humane navleveneendotelceller) blev opretholdt i Humedia-EG2 (KURABO, Tokyo, Japan) medium med 1% FBS under tilsætning af EGF og FGF-2. Cellerne blev holdt i en CO 5%

2-befugtet atmosfære ved 37 ° C. Disse cellelinjer blev opnået fra den japanske Indsamling af Research Bioressourcer Collection (Sennan-shi, Osaka).

Western blotting analyse

western blotting analyse er blevet beskrevet tidligere [6]. I tro blev cellepellets lyseret i RIPA-buffer (Tris-HCI: 50 mM, pH 7,4; NP-40: 1%; Na-deoxycholat: 0,25%; NaCI: 150 mM; EDTA: 1 mM; phenylmethyl-sulfonylfluorid: 1 mM; aprotinin, leupeptin, pepstatin: 1 mg /ml hver; Na3VO4: 1 mM; NaF: 1 mM). Celleekstrakter blev elektroforesebehandlet på 7,5% (vægt /volumen) polyacrylamidgeler og overført til en polyvinyliden di-fluorid membran (Nihon Millipore, Tokyo, Japan). Membranen blev inkuberet i Tris-bufret saltvand indeholdende 0,5% Tween 20 med 3% BSA og omsættes derefter med de primære antistoffer og HRP-konjugeret sekundært antistof i 90 minutter hver. Visualisering blev opnået med et forstærket kemiluminescerende påvisningsreagens (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, UK). Følgende antistoffer blev anvendt:. Anti-HA høj affinitet (Roche Applied Science, Mannheim, Tyskland), anti-SRPX2 [5] og anti-chondroitinsulfat (CS-56, Seikagaku Kogyo, Tokyo, Japan)

Påvisning af endogent SRPX2 protein

dyrkningsmediet blev dialyseret mod 50 mM ammoniumbicarbonat og lyofiliseret. Resten blev opløst i 50 mM Tris-HCI (pH 7,4) og centrifugeret ved 20.000 rpm i 30 min. Supernatanten blev filtreret gennem et 0,22 um filter. Filtratet blev underkastet hurtig protein-væskekromatografi (FPLC; GE Healthcare UK Ltd. Buckinghamshire, England) separation på HiTrap Q HP søjler (5 ml; GE Healthcare). Søjlerne blev ækvilibreret med 50 mM Tris-HCI (pH 7,4). Prøverne blev derefter injiceret på kolonnen, som blev vasket med den samme buffer og elueret ved en strømningshastighed på 4 ml /minut under anvendelse af en lineær gradient bestående af 0-2 M NaCI i 50 mM Tris-HCI (pH 7,4) i løbet af 45 min. Den SRPX2 proteinholdige fraktioner blev derefter udført ved hjælp af gelfiltreringskromatografi (Superdex200 søjle, 16 mm x 60 mm, GE Healthcare).

Ekspressionskonstruktioner og rensning af SRPX2-HA /Hans protein

fremgangsmåden til fremstilling ekspressionskonstruktionerne er tidligere beskrevet [5]. Tomme og SRPX2-HA /Hans vektorer blev derefter transficeret ind i HEK293-celler under anvendelse FuGENE6 transfektionsreagens (Roche Diagnostics, Basel, Schweiz), og cellerne blev derefter udvalgt med hygromycin. De stabile transfektant HEK293 celler blev betegnet som HEK293-Mock og HEK293-SRPX2-HA /His. Det konditionerede medium af HEK293-Mock og HEK293-SRPX2-HA /Hans celler blev underkastet FPLC belastning ved 3 ml /min på en 5-ml HisTrap HP-søjle (GE Healthcare). Det bundne protein blev vasket med 15 ml vaskebuffer (WB: 50 mM Na

2HPO

4, 10 mM Tris-HCI, 20 mM imidazol [pH 8,0] og 600 mM NaCl,) og elueret i elueringspuffer (EB: WB + 230 mM imidazol). De SRPX2-HA /Hans proteinholdige fraktioner blev påført en FPLC Superdex200 søjle (16 mm x 60 mm, GE Healthcare) i ligevægt med 0,15 M af ammoniumbicarbonat. Eluering blev udført under anvendelse af samme puffer ved en strømningshastighed på 1 ml /min. Den SRPX2-HA /Hans-fraktioner blev verificeret under anvendelse af western blotting og lyofiliseret.

Fordøjelse af SRPX2 af specifikke GAG ​​enzymer

Oprenset SRPX2-HA /His protein blev spaltet med flere specifikke enzymer, herunder chondroitinase ABC og chondroitinase AC II (0,1 enheder i 40 mM Tris-HCI, 40 mM natriumacetat [pH 8,0] ved 37 ° C i 2 timer), chondroitinase B (0,02 enheder i 20 mM Tris-HCI, 0,25 uM calcium acetat [pH 7,5] ved 37 ° C i 2 timer), heparinase i og heparinase II (0,05 enheder i 5 mM calciumacetat, 50 mM natriumacetat [pH 7,0] 37 ° C i h), keratanase (0,1 enheder i 7,5 uM Tris-HCI [pH 7,4] ved 37 ° C i 2 timer), og hyaluroinidase (0,02 M acetatpuffer, 0,15 M NaCl [pH 6,0] ved 60 ° C i 2 timer). Enzymer blev indkøbt fra Seikagaku Kogyo. Prøverne blev derefter analyseret under anvendelse af western blotting.

Bindingsassays Salg

En IAsys resonant spejl biosensor (Affinity Sensors, Cambridge, UK) med en carboxymethyldextran-sensing kuvette blev anvendt til at bestemme de kinetiske konstanter af hepatocytvækstfaktor (HGF) binding til immobiliseret SRPX2-HA /His. SRPX2-HA /His blev opløst i 10 mM natriumformiat (pH 4,0) og immobiliseres på carboxymethyldextran overflade af kuvetten ifølge producentens instruktioner. Bindingseksperimenter blev udført i PBS. Ændringer i den resonante vinkel blev overvåget ved 1-s intervaller i ca. 600 s. Eksperimenter blev udført ved 25 ° C med en omrøringshastighed på 80 rpm. De bindende parametre blev beregnet ud fra de associerings- og dissociation faser af de bindende reaktioner ved hjælp af ikke-lineær kurvetilpasning FastFit (Affinity Sensors). Bovint serumalbumin (BSA) blev anvendt som kontrol.

Microarray data

De kliniske prøver af de parrede kolorektale cancere (CRCs), microarray procedure og analysemetode er tidligere blevet beskrevet [7] . Denne undersøgelse blev godkendt af institutionelle review board, og skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle patienter. Alle microarray data er blevet deponeret på Center for Information Biologi genekspression database (CIBEX, https://cibex.nig.ac.jp/index.jsp) som tiltrædelsen nummer # CBX205. Alle data er MIAME kompatibel og at den rå data er blevet deponeret i en MIAME kompatibel database (CIBEX), som beskrevet på MGED Society hjemmeside https://www.mged.org/Workgroups/MIAME/miame.html.

Patienter og prøver

30 CRC og 10 parrede ikke-kræft colon mucosa prøver blev analyseret ved hjælp af real-time RT-PCR. RNA ekstraktionsmetode og kvalitetskontrollen protokol er tidligere blevet beskrevet [7]. Denne undersøgelse blev godkendt af institutionelle gennemgang bestyrelsen for National Cancer Center Hospital, og skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle patienter.

Real-time revers transkription PCR og western blot analyse

metoder, der anvendes i dette afsnit, er tidligere blevet beskrevet [5].

Resultater

Overekspression af SRPX2 i CRC væv

Vi evaluerede mRNA ekspressionen af ​​

SRPX2

i kliniske prøver af CRC’er foruden sin homolog

SRPX

(

SRPX1

) ved hjælp af microarray data.

SRPX2

udtryk var markant opreguleret (20,5 fold, p = 0,00014) i cancer væv sammenlignet med parrede noncancerous mucosa prøver, mens den formodede tumorsuppressorgen

SRPX

blev nedreguleret ( 0,7 fold, p = 0,029) i kræft (fig. 1). Resultatet viser, at

SRPX2

er overudtrykt i CRC under carcinogenese og tumor progression, i modsætning til

SRPX

. Real-time RT-PCR for 30 CRC og 10 parret ikke-kræft colon mucosa prøver bekræftede, at

SRPX2

mRNA blev markant overudtrykt i CRC prøver, men blev kun udtrykt på et meget lavt niveau i ikke-kræft colon slimhinde (figur 1B).

(A) mRNA ekspressionen af ​​

SRPX2

og dens homolog

SRPX

i 15 CRC og parrede normale colon mucosa prøver. Værdierne angiver den normaliserede signal intensitet, der opnås fra microarray data. (B) mRNA ekspressionsniveauer af

SRPX2

bestemmes ved hjælp af real-time RT-PCR. CRC: kolorektal cancer, Rel mRNA:. Normaliseret mRNA ekspression niveauer (

SRPX2

/

GAPD

× 10

6)

Udskilt SRPX2 protein er mistanke skal ændres posttranslationelt

Den forudsagte molekylmasse på SRPX2 protein var 53 kDa; imidlertid viste western blotting, at molekylvægten af ​​det secernerede SRPX2 proteinet var stærkt forøget, med udtværet bånd ved en tilsyneladende molekylmasse på 100-150 kDa i SNU-16 og MKN7 cellelinjer (fig. 2A). Dernæst vurderes vi det eksogent udtrykte SRPX2 protein afledt af HEK293-Mock og HEK293-SRPX2-HA /Hans celler. Den molekylære masse af intracellulær SRPX2 protein svarede til den forudsagte størrelse, mens molekylvægten af ​​det secernerede-SRPX2 protein blev stærkt forøget (100-150 kDa). Udtværede bånd blev også påvist ved anvendelse af både anti-HA og anti-SRPX2 antistoffer (fig. 2B). De ikke-smurt bånd ved 120 kDa i cellelysatet er endogene SRPX2. Disse resultater antydede, at udskilt SRPX2 protein kan undergå posttranslationelle modifikationer.

(A) udskilt form af endogent SRPX2 protein opnået fra dyrkningsmediet (CM) i SNU-16 og MKN7 celler. CM blev underkastet ionbytningskromatografi og anvendt til Western blotting-analyse under anvendelse af anti-SRPX2 antistof. (B) Western blotting for exogent SRPX2 protein opnået fra cellelysat og CM anvendelse af anti-SRPX2 og anti-HA-antistof. Stabile transfektant HEK293-celler, indførelse af fuld længde cDNA-fragment kodende for human SRPX2 med HA og His-mærket vektor eller tom vektor, blev anvendt til analyse. De ikke-smurt bånd ved 120 kDa i cellelysatet er endogene SRPX2. Mock: HEK293-Mock celler, SRPX2: HEK293-SRPX2-HA /Hans celler. IB: immunoblotting, Lysate: cellelysat, CM: dyrkningsmedium

SRPX2 er en roman chondroitinsulfatproteoglycan

Baseret på udseendet af de udtværede bånd på et højt forøget molekylmasse. vi den hypotese, at SRPX2 er en proteoglycan med glycosaminoglycan (GAG) -kæder. Derfor behandlede vi renset-SRPX2 protein opnået fra den dyrkede medium HEK293-Mock (tom kontrol) eller HEK293-SRPX2-HA /Hans celler med chondroitinase ABC, heparitinase 1, heparitinase 2, keratanase, chondroitinase ACII, chondroitinase B, og hyaluroinidase . Western blotting viste, at molekylvægten af ​​det secernerede SRPX2 proteinet tydeligt reduceret med chondroitinase ABC-fordøjelse, men ikke af heparitinase eller keratanase eller hyaluroinidase (fig. 3A, 3B). Yderligere chondroitinase behandling viste, at chondroitinase ABC og chondroitinase ACII fuldstændigt fordøjet GAG’er på SRPX2, men at chondroitinase B partielt fordøjet disse kæder (fig. 3B). En lille fordøjet SRPX2 protein blev også påvist ved anvendelse af anti-SRPX2 antistof (fig. 3C, 3D). Disse resultater indikerer, at SRPX2 indeholder chondroitinsulfat GAG kæder og er et hidtil ukendt chondroitinsulfatproteoglycan (CSPG). Derudover delvis fordøjelse af chondroitinase B antyder, at et dermatansulfat komponent kan indgå i chondroitinsulfat GAG kæder. Dernæst vi bekræftede resultaterne af enzymatisk fordøjelse mod endogen SRPX2 fra HUVEC under anvendelse western blotting med anti-SRPX2 antistof og et lignende resultat blev opnået (fig. 4A). Anti-chondroitin sulfat antistof (CS-56) registreres også chondroitin sulfat GAG på SRPX2 (fig. 4B). De ikke-smurt bånd ved 120 kDa i cellelysatet er endogene SRPX2.

(A, B) Oprenset SRPX2 protein opnået fra dyrkede medium af HEK293-Mock eller HEK293-SRPX2-HA /Hans celler blev spaltet med chondroitinase ABC, heparitinase 1, heparitinase 2, keratanase, chondroitinase ACII, chondroitinase B og hyaluroinidase. Virkningen af ​​fordøjelse af de glycosaminoglycankæder blev påvist under anvendelse western blotting ved anvendelse af anti-HA (A, B) og anti-SRPX2 (C, D) antistof. IB: immunoblotting, CM: dyrkningsmedium. Mock: HEK293-Mock celler, SRPX2:. HEK293-SRPX2-HA /Hans celler

(A) Chondroitinase ABC fordøjelse for endogen SRPX2 protein afledt af HUVEC (human navleveneendotelceller). Den SRPX2 protein blev påvist ved anvendelse af anti-SRPX2 antistof. (B) Western blotting for SRPX2 protein under anvendelse af anti-chondroitinsulfat antistof (CS-56). De ikke-smurt bånd ved 120 kDa i cellelysatet er endogene SRPX2. IB: immunoblotting, Lysate: cellelysat, CM: dyrkningsmedium. Mock: HEK293-Mock celler, SRPX2:. HEK293-SRPX2-HA /Hans celler

HGF binder sig til SRPX2

Det er velkendt, at flere ligander, herunder HGF, heparin-bindende EGF-lignende vækstfaktor, fibroblastvækstfaktor 2 og vaskulær endotelvækstfaktor er i stand til at binde til GAG kæde, og at sådanne interaktioner anses for at være en unik egenskab ved GAG’er og proteoglycaner [8]. Ifølge en rapport om CSPG endocan og HGF bindende [9], vi undersøgte samspillet mellem HGF og GAG ved hjælp af en IAsys resonant spejl biosensor. HGF dosisafhængigt bundet til GAG’er af SRPX2, mens kontrol BSA ikke gjorde (fig. 5A).

K

d Drømmeholdet værdi af denne interaktion, beregnet ud fra forholdet mellem

K

diss /K

røv

, var 5,6 nM; disse data lignede dem for tidligere rapporterede data på HGF og endocan [9]. Dernæst undersøgte vi den biologiske funktion af SRPX2 på HGF. HGF øgede spredning af HUVEC’er, og tilsætningen af ​​oprenset SRPX2 protein i mediet forøget HGF-induceret proliferation (figur 5B) betydeligt. Disse resultater antyder, at interaktionen af ​​HGF med SRPX2 har en positiv effekt på angiogenese.

(A) IAsys resonant spejl biosensor blev brugt til analyse. Bovint serumalbumin (BSA) blev anvendt som en negativ kontrol. (B) Cell proliferation af HUVEC’er evalueret under anvendelse af en MTT assay. Den HUVEC’er blev stimuleret med eller uden 10 ng /ml HGF og 5 ug /ml renset SRPX2 protein i 72 timer. *, SRPX2 (-) vs. (+), s 0,05

SRPX2 har unikke molekylære arkitekturer sammenlignet med andre sushi repeat modul-holdige CSPG

Data fra offentligt tilgængelige databaser. (https://smart.embl-heidelberg.de/) og en tidligere rapport [10] viste, at SRPX2 har tre sushi gentagne moduler (også kendt som supplement kontrol protein moduler eller korte konsensus gentagelser) og en hyalin domæne (fig. 6 ). Interessant, fire CSPG (agrrecan, versican, neurocan og brevican, også kendt som lecticans) er til stede blandt sushi repeat-modulet indeholder familie, og deres fælles molekylære arkitekturer består af en immunoglobulin-lignende domæne, 2~4 LINK domæner, en EGF -lignende domæne, et C-type lectin, og én sushi repeat modul (fig. 6). Tilstedeværelsen af ​​en sushi gentage modul og klassificering som CSPG er de samme for SRPX2 og lecticans, men de andre molekylære arkitekturer af SRPX2 er helt anderledes

data er indhentet fra den offentlige database SMART (http:. //smart.embl-heidelberg.de/). SRPX2 har tre sushi gentagne moduler og en hyaline domæne. Fire sushi repeat modul-holdige CSPG (agrrecan, versican, neurocan og brevican, også kendt som lecticans) er også vist. SP: signalpeptider, AA: aminosyrer. Sushi: sushi gentagne moduler /CCP /korte konsensus gentagelser, Hyaline: hyalin domæne, IG: immunoglobulin-lignende, LINK: hyaluronan-bindende, EGF-l: EGF-lignende (Ca

2 + -bindende), Ct-L :. C-type lektin

tilsammen disse resultater viser, at SRPX2 er en roman CSPG, der er overudtrykt i gastrointestinale kræftceller

diskussion

Den omfattende. bruge og strukturel diversitet af sushi repeatmodulerne afspejler formentlig den alsidighed af et strukturelt stillads, som er blevet tilpasset ved evolution, der passer mange formål, både arkitektoniske og funktionelle, såsom mediering af specifikke protein-protein og protein-kulhydrat-interaktioner [10] – [12]. I mellemtiden, SRPX2 har én hyaline domæne, som synes at være involveret i cellulær vedhæftning. Hyaline domæner er blevet identificeret i adskillige eukaryote proteiner og er ofte forbundet med sushi repeatmodulerne eller anbragt i flere kopier [13]. Disse karakteristika for de molekylære arkitekturer af SRPX2, baseret på viden om protein-protein interaktioner, kan bidrage til ligand /receptor interaktioner mellem SRPX2 og uPAR, med konsekvenser for sygdomme i sproget cortex, kognition, og angiogenese [3], [4] .

Vi har vist, at SRPX2 er et hidtil ukendt CSPG, hvilket antyder, at SRPX2 kan have yderligere endnu ukendte biologiske funktioner som en proteoglycan, herunder samspillet med forskellige ekstracellulære signalmolekyler såsom vækstfaktorer, morfogener, enzymer og chemokiner og /eller kan virke ved cellepositionen ekstracellulære matrix-grænsefladen til at modulere cellesignalering. Det konditionerede medium af SRPX2-producerende celler markant forøget cellulær adhæsion i forskellige cancercellelinier [5]; dette resultat kan forklares ved den biologiske funktion af SRPX2 som en proteoglycan. Desuden, selv om vi kun har vist, at HGF kan binde til SRPX2, vores resultater tyder på, at andre kendte GAG-interagerende ligander kan være i stand til at binde til GAG kæde af SRPX2. Derfor er funktionen af ​​ligand-SRPX2 binding kan bredt påvirke aktiviteterne i signalvejen kritisk for cancerceller, herunder cellulær proliferation, apoptose, migration og overlevelse [14]. Desuden blev SRPX2 fundet at blive udskilt og kan virke som et ekstracellulært matrixprotein ligner andre proteoglycaner; faktisk overtrækning dyrkningsskålen med SRPX2 protein markant forøget cellulær adhæsion [5], støtter denne idé.

Vaskulære endotelceller HUVEC markant udtrykkelig SRPX2 i samme omfang som high-udtrykkende cancercellelinier [5]. En nylig rapport vist, at Srpx2 er en hidtil ukendt mediator af angiogenese og et centralt molekyle involveret i invasive migration af angiogen endotel gennem sin rolle som en ligand for vaskulær uPAR [4]. Vores resultater støtter også inddrages SRPX2 i angiogenese fra et andet aspekt af proteoglycaner. Da endocan er kendt som en vaskulære endotelceller-specifikke CSPG [8], SRPX2 kan kategoriseres som en vaskulær-relateret CSPG ligner endocan.

Som konklusion, fandt vi, at SRPX2 er en roman chondroitin sulfat proteoglycan, der overudtrykkes i gastrointestinal cancer. Vores resultater giver nøglen glycobiological kendskab til dette protein i kræftceller.

Tak

Vi takker fru Eiko Honda (Life Science Center, Kinki University School of Medicine) for hendes teknisk bistand og Mr. Kiyotaka Okada (Institut for Fysiologi, Kinki University School of Medicine) for teknisk rådgivning.