PLoS ONE: Ekspression af pim-1 i tumorer, Tumor Stroma og Tumor-Tilstødende mucosa Co-Bestemmer Prognose for tyktarmskræft patienter

Abstrakt

provirus integration site for Moloney leukæmi virus (pim-1) er en proto-onkogen, der er knyttet til udvikling og progression af flere kræftformer. I denne undersøgelse evalueres vi pim-1-ekspression i tumorer, tumor stroma og tumor-tilstødende slimhinde sammen som en uafhængig prognostisk faktor for patienter med coloncancer. Undersøgelsen omfattede 343 patienter med tyktarmskræft. Immunhistokemisk farvning blev anvendt til at detektere pim-1. Multivariate cox regression til sygdomsfri overlevelse (DFS) blev anvendt til at identificere uafhængige prognostiske faktorer. Analytisk hierarki proces (AHP) blev anvendt til at beregne vægten af ​​pim-1 i tumorer, tumor stroma og tumor-tilstødende slimhinde for at opnå en Pim-1 total score (PTS) for tilbagefald og overlevelse. Kaplan-Meier DFS kurver og OS kurver for patienter med forskellige pim-1 ekspressionsniveauer blev sammenlignet under anvendelse af log-rank test. I denne undersøgelse blev fire uafhængige prognostiske faktorer identificeret for patienter med tyktarmskræft: pim-1-ekspression i tumorer, tumor stroma, tumor-tilstødende slimhinder, samt tumor fase. Det er blevet fastslået, at klinisk fase er en vigtig prognostisk faktor for patienter med coloncancer. Dog kan PTS identificere de patienter, der er tilbøjelige til at gentage sig ikke kun i hele radikal excision gruppe, men også inden for hvert trin i denne gruppe. . På grundlag af resultaterne af denne undersøgelse kan vi konkludere, at PTS kombineret med klinisk iscenesættelse systemet kan være en bedre indikator for tyktarmskræft patienternes prognose end at bruge det kliniske fase systemet alene

Clinical Trials Gov nummer: ChiCTR -PRCH-12002842

Henvisning: Peng Yh, Li Jj, Xie Fw, Chen Jf, Yu Yh, Ouyang Xn, et al. (2013) Ekspression af pim-1 i tumorer, Tumor Stroma og Tumor-Tilstødende mucosa Co-Bestemmer Prognose for patienter med tyktarmskræft. PLoS ONE 8 (10): e76693. doi: 10,1371 /journal.pone.0076693

Redaktør: Keitaro Matsuo, Kyushu University Faculty of Medical Science, Japan

Modtaget: Maj 29, 2013; Accepteret: August 25, 2013; Udgivet: 7 okt 2013

Copyright: © 2013 Peng et al. . Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering: yde støtte blev leveret af Natural Science i Fujian-provinsen (tilskud nummer 009J01184). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Gentagelse og distal metastaser er de vigtigste dødsårsager hos patienter med tyktarmskræft. Den aktuelt tilgængelige mellemstationer system ikke kan skelne mellem de patienter, der gentager sig og dø, og de patienter, der vil forblive sygdomsfri fordi prognosen for tyktarmskræft patienter er ikke kun bestemt af de særlige kendetegn ved selve tumorcellen men også af kræft status for den tilstødende mucosa [1], aktivering af immunceller og tilstedeværelsen af ​​andre tumor stroma komponenter [2,3]. , Identifikation og evaluering af nye prognostiske biomarkører er således afgørende for at identificere højrisikopatienter og sikre, at disse patienter får den nødvendige behandling.

proto-onkogen provirus integration site for Moloney leukæmi virus ( PIM1) koder en serin /threoninproteinkinase, som regulerer celleoverlevelse, proliferation, differentiering, apoptose og tumorigenese [4]. Den Pim familien har tre medlemmer: PIM-1, pim-2 og PIM-3. Af dem alle, er pim-1 anses for at være den mest nyttige biomarkør for kræft diagnose og prognose [5,9]. Den Pim-1 genet koder 2 isoformer med molekylvægte på 33 og 44 kDa [6]. Den 44 kDa PIM-1 lokaliseres hovedsageligt til membranen, hvorimod 33 kDa pim-1 lokaliseres til cytosolen og kernen, hvilket indikerer, at disse to isoformer regulere distinkte signalveje i cancerceller [7,8]. Nylige undersøgelser af pim-1 har fokuseret på sine onkogene aktiviteter, og eventuel brug af Pim kinaser hæmning som et mål for terapeutisk intervention [9]. Overekspression af Pim-1 kinaser blev observeret i humane tumorer i hæmatopoietiske og epitelial oprindelse. Desuden korreleret med dårlig prognose i flere hæmatopoietiske maligniteter [10,11], gastrisk cancer [12] og pladecellecarcinom i hoved og hals [13]. Alligevel, i modsætning til disse resultater, Pim-1 overekspression korreleret med god prognose i prostatacancer, pancreascancer duktalt carcinom og ikke-småcellet lungecancer [14-17].

under fosterudviklingen, PIM-1 er meget udtrykt i lever, milt, knoglemarv, mens dens ekspression er fraværende i voksent væv [18]. Andre undersøgelser af de fysiologiske aktiviteter af Pim-1 kinaser afslørede, at pim1-deficiente mus har undladt at støtte væksten af ​​præ-B-celler [19]. Moreso, Pim1-mangelfulde bloddannende stamceller kunne ikke re-befolke bestrålede værter [20]. Desuden kan andre undersøgelser viste, at CD40, et TNFR familiemedlem, der spiller en central rolle i T-celle-afhængig aktivering af B-celler, opregulerer ekspressionen af ​​pim-1 at opretholde B celleoverlevelse og proliferation [21]. Organismer, der mangler CD40 eller CD40L er i stand til at generere sekundære humorale immunresponser på T-celle-afhængige antigener [22]. Således kan pim-1-ekspression i tumorstroma være en vigtig biomarkør afspejler evnen af ​​T- eller B-celler til at producere et immunrespons mod tumoren.

De kendte funktioner af pim-1 tyder på, at det kan eventuelt tjene som en god markør for at evaluere tumor egenskaber, immunaktivering af tumor interstitielle leukocytter, og kræft status af tumoren-tilstødende slimhinder. I denne undersøgelse anvendte vi et væv microarray (TMA) database for at definere kombinationer af tumor, tumor stroma og tumor-tilstødende mucosa forbundet med DFS og OS i coloncancer. I forbindelse med den nuværende kliniske iscenesættelse system oplysningerne fra databasen forbedret vores evne til at identificere patienter med høj risiko for tilbagefald efter radikal excision.

Metoder

prøve

Kliniske data og tyktarmskræft samling

Denne undersøgelse blev godkendt af den etiske komité for Southwest Hospital og Fuzhou General Hospital. Patienter forudsat skriftligt informeret samtykke i henhold til GCP, at deres prøver vil blive brugt som en del af den igangværende undersøgelse om molekylær genetik på tyktarmskræft. I denne undersøgelse blev der kliniske prøver taget fra patienter med tyktarmskræft, der undergik radikale kolektomi, mellem 2004 og 2010 på Fuzhou General Hospital. Kolektomi prøver fra 343 patienter blev anvendt til at konstruere TMAs. Alle tilfælde havde tilstrækkelig kræftvæv rådighed på kolektomi for repræsentativt kræft væv, der skal høstes til TMA byggeri efter standard kliniske histopatologiske diagnose. Kliniske post-kolektomi opfølgende data, herunder regelmæssig patient vurdering klinikken besøg, telefon, mail kontakt eller samfundstjeneste station, blev brugt til at fastslå den samlede kræft-specifikke og sygdomsfri overlevelse. Omdrejningspunktet gentagelse blev bestemt ved koloskopi og fjernmetastaser blev bestemt ved CT-scanning. Alle patienter blev ordentligt rådes til at gennemgå nødvendige terapi og helbredsundersøgelse ifølge National Comprehensive Cancer Network (NCCN) retningslinjer. I denne undersøgelse, fristen for opfølgning var december blev 2011.

TMA byggeri

High-density væv microarrays konstrueret som beskrevet af Perrone et al. [23] TMA’er blev samlet med TM-1 væv arrayer (Beijing boyikang Laboratory Instrument Co., Ltd., Kina). Normale datoer paraffinblokke anvendt i klinisk diagnose blev anvendt til modtageropstillingen blokke. Alle kliniske hæmatoxylin og eosin (H 60 y18.7941.8239.3927.8846.6725.45 (31/165) (69/165) (65/165) (46/165) (77/165) (42 /165) ≥60 y16.2946.6330.0830.3451.6917.98(29/178)(83/178)(66/178)(54/178)(92/178)(32/178)Gender0.63000.1464Male16.3346.4337.2433.1647.4519.39(32/196)(91/196)(73/196)(65/196)(93/196)(38/196)Female19.0541.5039.4623.8151.7024.49(28/147)(61/147)(58/147)(35/147)(76/147)(36/147)WHO grade0.70670.2357G120.4136.7342.8628.5748.9822.45(10/49)(18/49)(21/49)(14/49)(24/49)(11/49)G217.6244.8337.5530.6549.8119.54(46/261)(117/261)(98/261)(80/261)(130/261)(51/261)G312.1251.5136.3618.1845.4536.36(4/33)(17/33)(12/33)(6/33)(15/33)(12/33)T status0.59790.3901T 0/116.6716.6766.6750.0016,6733.33(1/6)(1/6)(4/6)(3/6)(1/6)(2/6)T218.8737.7443.4022.6456.6020.75(10/53)(20/53)(23/53)(12/53)(30/53)(11/53)T317.9245.0037.0831.6747.5020.83(43/240)(108/240)(89/240)(76/240)(114/240)(50/240)T413.6452.2734.0920.4554.5525.00(6/44)(23/44)(15/44)(9/44)(24/44)(11/44)N status0.75810.0330N016.8844.7338.4032.4949.7917.72(40/237)(106/237)(91/237)(77/237)(118/237)(42/237)N122.5843.5533.8729.0346.7724.19(14/62)(27/62)(21/62)(18/62)(29/62)(15/62)N217.3934.7847.838.7052.1739.13(4/23)(8/23)(11/23)(2/23)(12/23)(9/23)N39.5252.3838.1014.2947.6238.10(2/21)(11/21)(8/21)(3/21)(10/21)(8/21)TNM stages0.73290.0510Stage i19.2336.5444.2326.9255.7717.31 (10/52) (19/52) (23/52) (14/52) (29/52) (9/52) Stage ii16.2247.0336.7634.0548.1117.84 ( 30/185) (87/185) (68/185) (63/185) (89/185) (33/185) Stage iii18.8743.4037.7421.7048.1130.19 (20/106) (46/106) (40 /106) (23/106) (51/106) (32/106) tabel 2. Clinicopathologic korrelation af pim-1-ekspression i tyktarmskræft.

※ Chi-square test. Forkortelse: T, tumor; N, node. CSV download CSV

Forholdet mellem Pim-1-ekspression og DFS eller OS

Pim-1 er normalt lokaliseret på membranen, cytosol og nucleus af tumorceller, tumor stromaceller samt tumor-tilstødende slimhinder celler, som tidligere rapporteret [8]. De forskellige snesevis af pim-1-ekspression er vist i figur 1 og figur S1. Vi må konstatere, at placeringen af ​​pim-1 i klynger i kerner af tumor-tilstødende mucosa-celler blev scoret som temmelig stærk (figur 1E). Lav, medium og høj Pim-1-ekspression blev observeret i 17,49% (60 af 343), 44,31% (152 af 343) og 38.19% (131 af 343) af patientens tumorer, henholdsvis (tabel 2). Når tumor stroma blev undersøgt 34.99% (120 af 343), 44.61% (153 af 343) og 20.41% (70 af 343) af patienterne udviste lav, medium og høj ekspression af Pim-1 (tabel S1), hhv. I tumor-tilstødende slimhinde, 63,56% (218 af 343), 29,15% (100 af 343) og 7,29% (25 af 343) af patienterne udviste lav, medium og høj Pim-1-ekspression (tabel S1), hhv.

(A) højt Pim-1-ekspression i tumor stroma (rød pil), score 3, lavt niveau af pim-1-ekspression i tumor (pink pil), score 1. (B) høj grad af pim -1 udtryk i tumor stroma (rød pil), score 3, højt niveau af Pim-1-ekspression i tumor (pink pil), score 3. (C) høj niveau Pim-1-ekspression i tumor (rød pil), score 3. (D) højt Pim-1-ekspression i tumor-tilstødende slimhinder (rød pil), score 3. (E) pim-1 i klynger i kerner af tumor-tilstødende mucosa bedømte celler som temmelig stærk (rød pil), score 3. (F) Lavt niveau af Pim-1-ekspression i tumor stroma (rød pil), score 1, median niveau udtryk for pim-1 i tumor (pink pil), score 2.

i en multivariabel Cox proportional hazards model, tumor status (P = 0,015), TNM stadie (P = 0,000), pim-1 ekspression i tumor stroma (P = 0,000) og pim-1-ekspression i tumor-tilstødende slimhinder (P = 0,000) var hver uafhængigt og signifikant associeret med DFS (tabel 3). Desuden pim-1-ekspression i tumor stroma signifikant associeret med DFS.

DFS (n = 343)

95,0% CI for Exp (B)

P

værdi

T status1.558 (1.090,2.228) 0.015TNM Stages1.910 (1.449,2.516) 0.000Pim-1 i Tumor stroma0.387 (0.286,0.525) 0.000Tumor tilstødende mucosa4.463 (3.261,6.107) 0,000 tabel 3. Multivariat Cox regressionsanalyse for DFS i 343 patienter med tyktarmskræft.

CSV Hent CSV

Disse kombinerede karakteristika af pim-1-ekspression i tumorer, tumor stroma og tumor-tilstødende slimhinde tyder på, at pim-1-ekspression måske tjene som en nyttig prognostisk markør for tyktarmskræft. For at teste denne hypotese anvendte vi analytiske hierarki proces (AHP) for at bestemme den vægtede koefficient fordeling af pim-1 bidrager til DFS og OS i tumorer, tumor stroma og tumor-tilstødende slimhinde, som var 0,1132686, 0,3791288 og 0,5076026 (tabel 1 ). Dernæst blev PTS beregnet på grundlag af den patologiske score, ved hjælp af formlen PTS = 0.1132686p1 + 0.5076026p2 + (-) 0.3791288p3, hvor p1, p2 og p3 svarede til den patologiske score i pim-1-ekspression i tumor, tumor- tilstødende slimhinde og tumor stroma hhv. PTS blev yderligere klassificeret i lav (PTS≤0), moderat (0 PTS≤0.5) og høj (PTS 0,5) kvaliteter ved Delphi metode. Ved anvendelse af Kaplan-Meier-metoden med log-rank test blev DFS kurver (figur 2.A.4) og OS kurver (fig 2.B.4) sammenlignet. Disse analyser har endvidere vist, at PTS evaluering kombineret med klinisk fase er mere præcis end evaluering af klinisk fase alene (figur 2.A, B).

(A) DFS kurver af forskellige PTS (pim-1 i alt score) i forskellige grupper af patienter: 1, fase ⅰ; 2, fase Ⅱ; 3, trin Ⅲ; 4, alle patienter. (B) OS kurver i forskellige PTS (PIM-1 total score) i forskellige grupper af patienter: 1, fase Ⅰ; 2, fase Ⅱ; 3, trin Ⅲ; 4, alle patienter.

Forholdet mellem Pim-1-ekspression og DFS eller OS i forskellige tumor stadier

Patient overlevelse blev analyseret af Kaplan-Meier, log-rank test ( Figur S2.D.1, figur S3.D.1), som var DFS og OS baseret på klinisk fase (Figur S2.D.2, figur S3.D.2, tabel 4, S2-S4). Resultaterne af disse analyser viser, at pim-1-ekspression i tumor-tilstødende slimhinde og tumor stroma, samt PTS signifikant var associeret med DFS (P 0,0001, P = 0,0041, P 0,0001, henholdsvis) og OS (P 0,0001, P = 0,0066, P 0,0001 henholdsvis) (tabel 4, figur 2.A.4 og B.4, Tal S2.B.4 og C.4, Tal S3.B.4 og C.4).

Variabler

p-tilfælde

DFS

OS

5 års overlevelse,%

p

※

fem år overlevelse, %

p

※

Pim-1 (tumorer) 3430.90960.9126low6052.9665.69moderate15263.8865.69high13162.6068.93pim-1 (tumor-tilstødende slimhinde) 343 0,0001 0.0001low21880.5984.49 moderate10036.2840.27high2500pim-1 (tumor stroma)3430.00410.0066low12030.2334.32moderate15370.6978.02high7068.8569.34PTS343 0.0001 0.0001low10095.7598.36moderate16959.2962.57high7414.9230.03TNM stages343 0,0001 0.0001Stage Ⅰ5275.6581.09Stage Ⅱ18572.5475.81Stage Ⅲ10622.3146.30Table 4. Predictive variabler for DFS og OS af 343 patienter med tyktarmskræft ved univariat overlevelsesanalyse

※ log-rank test CSV Hent CSV..

Desuden har vi undersøgt DFS og OS i hver tumor fase baseret på pim-1-ekspression i tumorer (Figur S2 A.1,2,3,4;.. Figur S3 A.1,2,3,4 ), tumor-tilstødende slimhinder (figur S2 B. 1,2,3,4;.. Figur S3 B.1,2,3,4), tumor stroma (fig S2 Cs 1, 2, 3, 4..; Figur S3. Cs. 1, 2, 3, 4), samt PTS (figur 2. A. 1,2,3,4 og B. 1,2,3,4). Vi fandt, at PTS ikke blot kan forudsige DFS, men også OS af patienter tyktarmskræft (tabel S2-S4, figur 2.A.1,2,3 og B. 1,2,3).

for at teste hypotesen om, at kræft status for den tilstødende mucosa og aktiveringen af ​​immunceller i tumorstroma var vigtigere prognostisk faktor i sygdomsfri periode, mens tumor tegn er vigtigere prognostisk faktor i sygdomstilbagefald /metastase periode har vi undersøgt forholdet mellem progression -fri overlevelse (PFS) og pim-1-ekspression i tumor, tumor-tilstødende mucosa og tumor stroma. Halvtreds to patienter, som fik første linje kemoterapi med 5-FU plus oxaliplatin blev rekrutteret til dette formål, efter gentagelse. Resultaterne af disse analyser viser, at PFS signifikant var forbundet med pim-1 ekspression i tumor (p = 0,0141), mens der ikke var nogen statistisk signifikant sammenhæng mellem PFS og pim-1-ekspression i tumor-tilstødende slimhinder (p = 0,6194) eller tumor stroma (p = 0,3438) (data ikke vist). Disse resultater viser, at PTS kan afspejle cancer status af den tilstødende mucosa og aktiveringen af ​​immunceller i tumor stroma samt tumor egenskaber. Kort sagt, kan PTS score forbedre forudsigelse ud over klinisk stadie end nogen anden væsentlig prædiktor for DFS.

Diskussion

Forekomsten af ​​tyktarmskræft er stadig stigende, især i de udviklede lande [24]. Kirurgisk resektion af den primære tumor er den primære behandling for tarmkræft med undtagelse af scenen Ⅰ og dels stadie II tyktarmskræft, som administrationen af ​​adjuverende kemoterapi anbefales af NCCN RETNINGSLINJE (https://www.nccn.org/index Asp).

brugen af ​​adjuverende kemoterapi til behandling af fase II tyktarmskræft er stadig under sagen, og selv i fase III-patienter tilslutning til NCCN retningslinjer er 71% [25]. American Society of Clinical Oncology rapporterer, at indsamlet fra de randomiserede kontrollerede forsøg beviser ikke understøtter brugen af ​​adjuverende kemoterapi som den rutinemæssige behandling for patienter med stadie II tyktarmskræft, men de patienter med høj risiko fase II-sygdom kan have gavn af denne slags behandling [26]. Desuden patienter de højrisiko ikke er veldefinerede. Resultaterne af MOSAIC forsøget viste, at tilføje Oxaliplatin til en fluoruracil og leucovorin regime forbedrer adjuverende behandling for tyktarmskræft (trin II og Ⅲ) [27]. Men fordelen ved adjuverende behandling ofte kommer på bekostning af mange patienters modtagelse overdreven behandling selv i fase Ⅲ af sygdommen.

I dag, tumor fase er stadig den vigtigste prognostiske indikator, der anvendes i klinikken til forudsige overlevelse af patienter med tidlige fase tyktarmskræft. Ikke desto mindre er det præcis forudsigelse af tilbagefald af tyktarmskræft er stadig ikke nået, og der er en vedvarende behov for bedre markører for at løse dette problem. Nylige undersøgelser med henblik på at identificere andre prognostiske faktorer har hovedsageligt været fokuseret på undersøgelse af tumorceller, som det var tilfældet i studier undersøge betydningen af ​​at MIR-365 [28], intestinal stamcelle signatur [29], thymidylatsyntase [30], og andre mulige kandidatlande biomarkører. Hver af disse undersøgelser er begrænset til teoriprøver, som er vanskelige at sætte i klinisk praksis. I denne undersøgelse har vi udviklet en metode kombineret med kliniske stadier, der kan forudsige en gentagelse af tyktarmskræft hos patienter med radikal kolektomi.

Selv om der ikke var nogen direkte beviser for, at de skal modtage adjuverende kemoterapi i trin Ⅱ sygdom, var der stadig 42% af patienterne i vores studie, der har modtaget 5-FU adjuvans kemoterapi, 12%, som har modtaget capecitabin og 15% af patienterne, som fik 5-FU plus Oxaliplatin adjuvans kemoterapi mens de resterende 31% af patienterne ikke modtog adjuvans kemoterapi. Hovedårsagen til, at de modtog adjuverende kemoterapi var læge-patient psykologi bekvemmeligheder.

Desuden vores undersøgelse omfattede 42% af patienterne, der fik 5-FU plus oxaliplatin adjuverende kemoterapi, 39% af de patienter, der fik 5-FU alene eller capecitabin alene adjuverende kemoterapi, og 19% af patienterne, der nægtede at modtage kemoterapi i fase III-sygdom. Der var ingen signifikant forskel (p 0,05) i DFS eller OS mellem stadie II patienter, uanset om de har modtaget adjuverende kemoterapi eller ej. Desuden var der ingen signifikant forskel (p 0,05) mellem forskellige undergrupper af trin III patienter igen uanset om de har fået adjuvans kemoterapi eller ej. Endvidere for at undgå effekten af ​​efterfølgende behandling efter tilbagefald, i denne undersøgelse, tog vi DFS som det primære effektmål, og OS som det sekundære effektmål.

Intestinale stamceller kan være celler oprindelsesbetegnelser for kolorektal cancer [31]. Da den onkogene aktivering af intracellulære signalveje er blevet forbundet med tumorigenese i colon cancerceller [32], onkogen aktivering af tumor-tilgrænsende slimhinde eventuelt kunne anvendes i forudsigelse af tumor tilbagefald efter radikal kolektomi. Vore data viser, at pim-1 onkogen aktivering af tumor-tilgrænsende slimhinde er signifikant associeret med DFS og at højere pim-1-ekspression konto for lavere DFS. Derfor bør tages onkogen aktivering i tumoren-tilstødende slimhinde i betragtning ved forsøg udføres for at identificere prognostiske faktorer i tyktarmskræft. Men disse resultater er i modstrid med de kliniske fund, at en gentagelse af sygdommen efter kolektomi skyldes primært den fjerne metastaser og ikke omdrejningspunktet gentagelse og derfor yderligere undersøgelser er berettiget.

I det sidste årti, cancer-associeret stroma har blive en større bekymring end ø masser [33-35]. Cancerassocierede fibroblaster er den vigtigste komponent i cancerassocieret stroma. Betydningen af ​​forskellige undertyper af cancerassocierede fibroblaster i tumor patogenese er ikke klart. I vores undersøgelse blev fibroblaster fundet i forskellige forhold i coloncancere, ofte udgør det primære population af celler i tumoren stroma. Interessant nok i nogle tilfælde cancerassocierede fibroblaster var positive for pim-1 ekspression, mens de i andre tilfælde var pim-1 negativ. Dette fænomen fanget vores interesse, og vi har fundet, at højere niveauer af pim-1-ekspression i cancer-associerede stroma var forbundet med højere DFS og OS. Vores data indikerer endvidere, at pim-1-positive cancer-associerede tumor stroma celler beskyttende til værten, men den nøjagtige mekanisme af deres indsats stadig mangler at blive belyst.

Inflammation har en veletableret rolle i at fremme tumorprogression [36]. Den inflammatoriske mikromiljø er en vigtig bestanddel af alle tumorer. Således immune inflammatoriske celler er en yderligere komponent af cancerassocieret stroma. De fleste undersøgelser har fokuseret på evnen af ​​inflammatoriske celler til fremme af tumorigenese, udvikling, invasion og metastase [2,37]. Desuden er en nylig undersøgelse viste, at øget infiltration af tumorer med cytotoksiske CD8-positive T-celler er blevet korreleret med forlænget overlevelse [38].

I vores undersøgelse af tyktarmskræft, fandt vi, at i modsætning til pim- 1-negative immune inflammatoriske celler, blev pim-1-positive immune inflammatoriske celler, der ledsager cancerassocierede fibroblaster forbundet med øget DFS og OS, måske virker som tumor-drab underklasser af immunceller. Dette resultat indikerer, pim-1 kan virke som en potentiel markør til at skelne mellem tumor-fremmende og tumor-drab immune inflammatoriske celler, som er i overensstemmelse med tidligere undersøgelser [39].

Som konklusion vores undersøgelse tyder på, at prognostiske parametre for tyktarmskræft er ikke kun bestemt af tumorceller, men også af cancerassocieret stroma og tumor-tilstødende mucosa især når det kommer til DFS. Derfor aktiveringen af ​​protoonkogen pim-1 i forskellige dele af tumor (tumorceller, cancerassocieret stroma og tumor-tilstødende slimhinder) kan være meget vigtigt for vurderingen af ​​patientens prognose. Ikke desto mindre yderligere undersøgelser med henblik på at belyse den nøjagtige mekanisme af pim-1-funktion i tumorer og tumor associeret slimhinde, stadig berettiget.

Støtte Information

Figur S1.

profil Pim-1-ekspression. (A) Median niveau ekspression af Pim-1 i tumor stroma (rød pil), scorer 2, højniveau-ekspression af Pim-1 i tumor (lyserød pil), scores 3. (B) Negativ ekspression af Pim-1 i tumor stroma (rød pil), scorer 1. (C) Negativ ekspression af Pim-1 i tumor (rød pil), scorer 1. (D) Median ekspressionsniveau af Pim-1 i tumor-tilstødende slimhinder (rød pil), scorer 2.

doi: 10,1371 /journal.pone.0076693.s001

(TIF)

Figur S2.

DFS kurver genereret af Kaplan-Meier-analyser. (A) DFS kurver af forskellig pim-1-ekspression niveau i tumor i forskellige gruppe patienter: 1, fase Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, trin Ⅲ; 4, total patienter. (B) DFS kurver med forskellig pim-1 ekspressionsniveau i tumor stroma af forskellige gruppestørrelser patienter: 1, fase Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, trin Ⅲ; 4, total patienter. (C) DFS kurver med forskellig pim-1 ekspressionsniveau i tumor-tilstødende slimhinde forskellige gruppestørrelser patienter: 1, fase Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, trin Ⅲ; 4, total patienter. (D) DFS kurver af de samlede patienter (1) og patienter med stadie Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ sygdomme (2)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0076693.s002

(TIF)

Figur S3 . Salg OS kurver genereret af Kaplan-Meier-analyser. (A) OS kurver af forskellig pim-1-ekspression niveau i tumor i forskellige gruppe patienter: 1, fase Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, trin Ⅲ; 4, total patienter. (B) OS kurver med forskellig pim-1 ekspressionsniveau i tumor stroma af forskellige gruppestørrelser patienter: 1, fase Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, trin Ⅲ; 4, total patienter. (C) OS kurver med forskellig pim-1 ekspressionsniveau i tumor-tilstødende slimhinde forskellige gruppestørrelser patienter: 1, fase Ⅰ; 2, stageⅡ; 3, trin Ⅲ; 4, total patienter. (D) OS kurver af de samlede patienter (1) og patienter med stadie Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ sygdomme (2)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0076693.s003

(TIF)

tabel S1 .

klinisk-patologisk korrelation af pim-1-ekspression i tyktarmskræft.

doi: 10,1371 /journal.pone.0076693.s004

(DOC)

tabel S2.

Predictive variabler for DFS og OS for patienter med stadie i sygdommen ved univariate overlevelse analyse. (※ log-rank test.).

doi: 10,1371 /journal.pone.0076693.s005

(DOC)

tabel S3.

Predictive variabler for DFS og OS af patienter med stadie ii sygdom ved univariate overlevelse analyse.

doi: 10,1371 /journal.pone.0076693.s006

(DOC)

Tabel S4.

Predictive variabler for DFS og OS for patienter med stadium III sygdom ved univariate overlevelse analyse.

doi: 10,1371 /journal.pone.0076693.s007

(DOC)

tabel S5.

Pim-1-ekspression i tumorer, tumor-tilstødende mucosa og tumor stroma.

doi:. 10,1371 /journal.pone.0076693.s008

(DOC)

Tak

Vi takker Medjaden Bioscience Limited for at bistå ved udarbejdelsen af ​​dette manuskript