PLoS ONE: Glutathione S-transferase T1, O1 og O2 polymorfier er forbundet med overlevelse i Muscle Invasive Blære Cancer Patients

Abstrakt

Målsætning

For at undersøge sammenslutning af seks glutathion transferase (GST ) gen-polymorfier (GSTT1, GSTP1 /rs1695, GSTO1 /rs4925, GSTO2 /rs156697, GSTM1, GSTA1 /rs3957357) med overlevelsen af ​​patienter med muskel invasiv blærecancer og genotypen modificerende effekt på kemoterapi.

patienter og Metoder

i alt 105 patienter med muskel invasiv blærekræft blev inkluderet i undersøgelsen. Opfølgningen varede 5 år. Effekten af ​​

GST’er

polymorfier på at forudsige dødelighed blev analyseret af Cox proportional hazard modeller, mens Kaplan-Meier analyse blev udført for at vurdere forskelle i overlevelse.

Resultater

GSTT1 aktiv

,

GSTO1 Asp140Asp

eller

GSTO2 Asp142Asp

genotyper var uafhængige prædiktorer for en højere risiko for død blandt patienter blærekræft (HR = 2,5,

P

= 0,028; HR = 2,9,

P

= 0,022; HR = 3,9,

P

= 0,001, henholdsvis) og væsentligt påvirket den samlede overlevelse. Der var ingen sammenhæng mellem

GSTP1

,

GSTM1

GSTA1

gen varianter med samlede dødelighed. Kun

GSTO2

polymorfi viste en signifikant effekt på overlevelsen i undergruppen af ​​patienter, som fik kemoterapi (

P

= 0,006).

Konklusion

GSTT1 aktiv

genotype og

GSTO1 Asp140Asp

GSTO2 Asp142Asp

genotyper kan have en prognostisk /farmakogenomisk rolle hos patienter med muskel invasiv blærekræft

Henvisning.: Djukic TI, Savic-Radojevic AR, Pekmezovic TD, Matic MG, Pljesa-Ercegovac MS, Coric VM, et al. (2013) Glutathione S-transferase T1, O1 og O2 polymorfier er forbundet med overlevelse i Muscle Invasive Blære kræftpatienter. PLoS ONE 8 (9): e74724. doi: 10,1371 /journal.pone.0074724

Redaktør: Dong Zhang, Nanjing Medical University, Kina

Modtaget: Juni 4, 2013; Accepteret: August 2, 2013; Udgivet: 11 september, 2013 |

Copyright: © 2013 Djukic et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af det serbiske ministerium for uddannelse, videnskab og teknologisk udvikling [tilskud 175.052]. Den bidragyder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

glutathion transferaser (GST) er afgiftning enzymer, der spiller en rolle i konjugeringen af ​​endogene eller exogene xenobiotiske toksiner til glutathion (GSH), dog flere GST’er funktion som GSH peroxidaser [1]. Familien af ​​cytosoliske GST’er har forskellige klasser, herunder Alpha (GSTA), Mu (GSTM), Pi (GSTP), Omega (GSTO) og Theta (GSTT) klasse [1]. Polymorf ekspression af GSTA1, GSTM1 og GSTO1 påvirker risikoen for overgangs- cellecarcinom (TCC) af urinblæren [2], [3]. Opreguleret GST aktivitet er kendetegnende for en ondartet fænotype af TCC og anses for vigtigt at opretholde en prooxidant-antioxidant balance i retning af en mere reduceret tilstand i løbet af progression af disse tumorer [4]. Enzymatisk aktivitet af GST-proteiner kunne påvirke kapaciteten af ​​flere stoffer, der anvendes i behandlingen af ​​TCC patienter, til at fremkalde tumorcelledød. Derfor er det rimeligt at antage, at fælles GST polymorfier kan have en prognostisk og /eller farmakogenomisk rolle i TCC patienter, især i tilfælde af muskel invasive tumorer.

Både MVAC (methotrexat, vinblastin, doxorubicin og cisplatin) og GC /Cis (gemcitabin og cisplatin) protokoller, der bruges i behandlingen af ​​TCC patienter med muskel invasive tumorer indeholder lægemidler (cisplatin og doxorubicin) vist sig at være substrater for GSTP [5]. Den polymorfi af

GSTP1

, hvilket resulterer i en aminosyre substitution af Isoleucin ved Valin (Ile105Val), påvirker signifikant enzymaktivitet og er knyttet til klinisk udfald af patienter, der fik platinbaseret kemoterapi [6]. På trods af at biotransformationen af ​​cisplatin og doxorubicin resulterer i dannelsen af ​​glutathion-konjugater, som er effektivt ekstruderes fra cellen ved specifikke eksport- pumper data om den rolle, GSTP1 begrænse effektiviteten af ​​terapien og påvirker overlevelsen [7 ] af patienter med muskel invasiv TCC mangler. Foruden GSTP1,

aktiv GSTT1

genotype kunne påvirke kapaciteten af ​​doxorubicin og cyclophosphamid til at producere oxidativ DNA-beskadigelse på grund af sin peroxidaseaktivitet [8]. Fælles sletning polymorfier af

GSTT1

afskaffe enzymaktivitet. For nylig er det blevet foreslået, at polymorfier i gener, der koder omega eleverne GSTO1-1 og GSTO2-2 måske også indflydelse på størrelsen af ​​oxidativt stress, selv om mekanismerne i differentiel proteinfunktion af forskellige protein-isoformer er mindre godt forstået. Specifikt GSTO1 og GSTO2 udviser dehydroascorbate (DHA) reduktaseaktivitet udover hidtil ukendte thioltransferase, og monomethylarsenate reduktaseaktivitet [9]. GSTO2-2 har 70-100 gange højere DHA-reduktase (Dhar) aktivitet end GSTO1-1 og anses for at være den mest aktive Dhar i pattedyrceller [9]. Denne Dhar aktivitet GSTO2 kan være kritisk i vedligeholdelse af ascorbinsyre (AA) niveauer ikke kun i normale, men også i tumorcellerne. For ganske nylig er det blevet vist, at begge omega SNPs havde meget signifikante virkninger på genekspression niveauer af GSTO2, men ikke af GSTO1 i hjerneceller [10]. Vi antager, at GST omega polymorfier også kan resultere i interindividuelle forskelle i reaktion på kemoterapeutiske protokoller i TCC.

I dette studie undersøgte vi sammenslutning af seks glutathion transferase (GST) gen polymorfier (GSTT1, GSTP1 /rs1695, GSTO1 /rs4925, GSTO2 /rs156697, GSTM1 og GSTA1 /rs3957357) med 5-års overlevelse i 105 patienter med muskel invasiv blærekræft, samt genotypen modificerende effekt på kemoterapi.

patienter og metoder

Vi indskrevet 200 patienter nydiagnosticerede med TCC fra Klinik for urologi, Klinisk centrum af Serbien, Beograd. Patologisk verifikation af TCC blev udført som en del af rutinemæssig urologisk praksis, herunder endoskopisk biopsi eller kirurgisk resektion, efterfulgt af den histopatologiske undersøgelse ved bord-certificeret patologer. Patienter med muskler invasive tumor (105 patienter) blev anset fra den oprindelige studiegruppen for denne særlige forskning. Alle deltagere gav skriftligt informeret samtykke. Undersøgelsen protokol Den blev godkendt af Etisk Komité medicinske fakultet, University of Beograd, og den forskning, blev gennemført i overensstemmelse med Helsinki-deklarationen.

For 5-års overlevelsen analyse, død endepunkter blev indsamlet fra den serbiske Centrale Personregister. Opfølgningen startede med kræftdiagnose og endte med død eller på en

st november 2012 alt efter hvad kom først.

Vores patienter modtog neoadjuverende MVAC terapi (methotrexat, vinblastin, doxorubicin, cisplatin) eller (GC /Cis) kombinationen gemcitabin og cisplatin. Den MVAC regimen blev givet som følger: methotrexat og vinblastin på dag 1, 8 og 15, doxorubicin og cisplatin på dag 2. cyklusser blev gentaget hver 2. uge. Den /Cis kombination GC blev administreret som følger: gemcitabin på dag 1, 8 og 15, cisplatin på dag 1. cyklusser blev gentaget hver 2. uge. Klinisk, hæmatologiske og biokemiske vurderinger blev udført før hver cyklus. De udelukkelseskriterier for kemoterapi blev nedsat nyrefunktion, hæmoglobin under 100 mg /l, leukocytter under 3000 celler /ml og blodplader under 100000 celle /ml.

GST Genotypning

Genomisk DNA blev isoleret fra helblodet anvendelse af Qiagen Qiamp (Qiagen Inc., Valencia, CA, USA).

GSTA1 C-69T

polymorfi blev bestemt ved polymerasekædereaktion-restriktionsfragmentlængde-polymorfisme (PCR -RFLP) [11]. Brugt primere var

GSTA1 C-69T

frem: 5′-TGTTGATTGTTTGCCTGAAATT-3 ‘og

GSTA1 C-69T

omvendt, 5′-GTTAAACGCTGTCACCCGTCCT-3′. Tilstedeværelse af restriktionssted resulterer i to fragmenter (481bp og 385bp) angivet mutant allel (

GSTA1 * B /B

), og hvis

GSTA1 * A /B

polymorfi afholdt det resulterede i en mere fragment af 96bp.

GSTM1

genotypebestemmelse blev udført ved multiplex-PCR [11]. Brugt primere var

GSTM1

frem: 5′-GAACTCCCTGAAAAGCTAAAGC-3 ‘og

GSTM1

omvendt: 5′-GTTGGGCTCAAATATACGGTGG-3′. Exon 7 af

CYP1A1

genet blev co-forstærket og anvendt som en intern kontrol ved hjælp af følgende primere:

CYP1A1

frem: 5′-GAACTGCCACTTCAGCTGTCT-3 ‘og

CYP1A1

omvendt : 5′-CAGCTGCATTTGGAAGTGCTC-3 ‘. Tilstedeværelsen af ​​

GSTM1-

aktiv genotype blev registreret af bandet på 215bp, da analysen ikke skelner heterozygote eller homozygote vildtype genotype.

GSTP1 Ile105Val

polymorfi blev analyseret ved anvendelse af PCR-RFLP-metoden [11]. Brugt primere var:

GSTP1 Ile105Val

frem: 5′-ACCCCAGGGCTCTATGGGAA-3 ‘og

GSTP1 Ile105Val

omvendt: 5′-TGAGGGCACAAGAAGCCCCT-3′. Tilstedeværelse af restriktionssted resulterer i to fragmenter (91bp og 85bp) angivet mutant allel (Val /Val) mens hvis Ile /Val polymorfi afholdt det resulterede i endnu en fragment af 176bp.

GSTT1

genotypebestemmelse blev udført ved multipleks-PCR [11]. Brugt primere var

GSTT1

-forward: 5′-TTCCTTACTGGTCCTCACATCTC-3 ‘og

GSTT1

-Omvendt: 5′-TCACGGGATCATGGCCAGCA-3′. Analysen skelner ikke mellem heterozygote eller homozygote vildtype genotype, derfor tilstedeværelsen af ​​480bp bands var vejledende for

GSTT1-

aktiv genotype.

GSTO1 Ala140Asp

polymorfi blev bestemt ved PCR-RFLP metode Marahatta

et al.

[12]. De anvendte primere var

GSTO1 Ala140Asp

frem: 5′-GAA CTT GAT GCA CCC TTG GT-3 ‘og

GSTO1 Ala140Asp

omvendt: 5′-TGA TAG CTA GGA GAA ATA ATT AC- 3 ‘. Tilstedeværelsen af ​​restriktionssted resulterer i to fragmenter (186 og 68 bp) angivet

AlaAla

vildtype homozygot, og hvis

AlaAsp

heterozygot afholdt, det resulterede i endnu en fragment af 254 bp.

GSTO2 Asn142Asp

polymorfi blev bestemt ved PCR-RFLP metode Marahatta

et al.

[12]. De anvendte primere var

GSTO2 Asn142Asp

frem: 5′-AGG CAG AAC AGG AAC TGG AA-3 ‘og

GSTO2 Asn142Asp

omvendt: 5′-GAG GGA CCC CTT TTT GTA CC-3 ‘. Tilstedeværelsen af ​​restriktionssted resulterer i to fragmenter (122 og 63 bp) angivet

AspAsp

homozygot af polymorf sekvens, mens hvis

AsnAsp

heterozygot afholdt, det resulterede i endnu en fragment af 185 bp.

Statistisk analyse

Statistisk analyse blev udført ved hjælp af statistiske pakke for Social Sciences (SPSS version 15.0, SPSS Inc, Chicago, Illinois, USA). Overlevelse analyse blev udført separat i den samlede kohorte og i undergruppen af ​​patienter, som fik kemoterapi. Kaplan-Meier-metoden blev anvendt til at estimere den kumulative overlevelse sandsynlighed. Den lange-rank test blev udført til vurdering af forskelle i overlevelse efter de forskellige kategorier af variable.

Den prædiktive værdi af forskellige GST genotyper i den samlede dødelighed blev vurderet af Cox proportional hazard regressionsmodeller, justeret med de forstyrrende faktorer i to modeller. I model 1 blev foretaget justeringer for alder og køn. Model 2 omfattede kovariater i model 1 plus en yderligere justering for kvalitet. Foreningerne præsenteres som hazard ratio (HR) med deres tilsvarende 95% konfidensintervaller (95% CI).

Resultater

Patienternes egenskaber er vist i tabel 1. Den gennemsnitlige føl- op var 38,2 ± 23,1 måneder (fra 1 til 66 måneder). Genotypebestemmelse blev forsøgt i 105 patienter og 101 patienter genotypning var en succes for alle testede genotyper. Af 101 patienter, 62 døde (61,4%) fra urinblære kræft og 12 patienter (11,9%) blev tabt under opfølgningen.

genotype fordeling af

GSTT1, GSTP1, GSTO1 , GSTO2, GSTM1

GSTA1

er vist i tabel 2. frekvensen af ​​

GSTT1, GSTP1, GSTM1

GSTA1

genotyper i TCC patienter svarer til allerede rapporteret i TCC patient kohorte (Matic M, accepteret til publikation i Urologic Oncology). Hyppigheden af ​​GST omega klasse genvarianter er i overensstemmelse med data fra Lesseur et al [13].

Tabel 3 opsummerer sammenslutning af seks GST’er polymorfier og den samlede dødelighed i TCC kohorte. Tilstedeværelsen af ​​

GSTT1 aktiv

genotype var en uafhængig prædiktor for en højere risiko for den samlede dødelighed blandt TCC patienter (HR = 2,5, 95% CI: 1,1-5,5;

P

= 0,028; tabel 3). Kaplan-Meier overlevelsesanalyse i hele gruppen af ​​TCC patienter viste kortere gennemsnitlig samlet overlevelse efter diagnosen TCC hos patienter med

GSTT1 aktive

alleler i sammenligning med bærere af dobbelt slettede

GSTT1

alleler (36,9 ± 2,8 vs. 46,4 ± 5,4 måneder, henholdsvis;

P

= 0,063; figur 1A). Patient overlevelse i forhold til

GSTT1

blev ikke påvirket af kemoterapi behandling (figur 1b).

Med hensyn

GSTP1

polymorfi,

GSTP1 Ile

allel bærere var på et højere risiko for total dødelighed og havde en multivariable justeres (model 2) HR på 2,1 (95% CI: 0,7-5,9;

P

= 0,175; tabel 3) i sammenligning med GSTP1

Val

homozygote. Kaplan-Meier overlevelsesanalyse i hele gruppen af ​​patienter viste kortere gennemsnitlig samlet overlevelse i patienternes bærere af mindst en

GSTP1 Ile

allel sammenlignet med

GSTP1 Val

homozygoter (36,9 ± 2,7 vs. 49,5 ± 6,8 måneder, henholdsvis;

P

= 0,157;. figur 2a). Patient overlevelse i forhold til

GSTP1 Ile105Val

ikke var påvirket af kemoterapi behandling (figur 2b).

Med hensyn

GSTO1

polymorfi, tilstedeværelsen af ​​både mutant alleler (

Asp140Asp)

blev fundet i 8 patienter og var en uafhængig prædiktor for en højere risiko for den samlede dødelighed (HR = 2,9, 95% CI: 1,2-7,4; p = 0,022; tabel 3). Selv

GSTO1 Asp140Asp

genotype har en mindre frekvens, det har en stor funktionel betydning, da 6 af 8 patienter med denne genotype døde under 5 år af follow-up. Kaplan-Meier overlevelsesanalyse i hele gruppen med TCC har vist kortere samlet overlevelse efter TCC diagnose hos patienter bærere af GSTO1

Asp140Asp

sammenlignet med bærere af mindst en

GSTO1 Ala

allel ( 27,3 ± 7,6 vs. 40,1 ± 2,6 måneder, henholdsvis;

P

= 0,068, figur 3a). Patient overlevelse i forhold til

GSTO1

blev ikke påvirket af kemoterapi behandling (figur 3b).

På samme måde som

GSTO1

, tilstedeværelsen af ​​både mutant

GSTO2

alleler (

Asp142Asp)

var en uafhængig prædiktor for en højere risiko for den samlede dødelighed blandt TCC patienter. Denne genotype havde den mest udtalte effekt i form af risiko dødelighed, da en multivariable justeret (model 2) HR på 3,9 (95% CI: 1,8-8,9;

P

= 0,001; tabel 3) blev observeret. Ni af 10 patienter med GSTO2

Asp142Asp

genotype døde inden for 5 år af follow-up. Kaplan-Meier overlevelsesanalyse i hele gruppen med muskel invasiv TCC vist, at

GSTO2 Asp142Asp

homozygote havde to gange kortere betyde overlevelse sammenlignet med patienter med mindst én

Asn

allel (23,8 ± 4,2 vs. 40,8 ± 2,7 måneder, henholdsvis;

P

= 0,008, figur 4a). Overlevelse analyse i en undergruppe af patienter, som fik kemoterapi har vist statistisk signifikant kortere overlevelse hos patienter bærere af både mutant alleler i forhold til bærere af mindst en

GSTO2 Asn

allel (19,4 ± 3,4 måneder vs. 40,3 ± 3,7 måneder henholdsvis;.

P

= 0,006, fig 4b)

Der var ingen robuste statistiske sammenhænge mellem GSTM1 og GSTA1 genvarianter med samlede dødelighed i henhold til Cox (tabel 3), og Kaplan-Meier-analyser (data ikke vist).

diskussion

i den foreliggende undersøgelse, vi har vist, at

GSTT1 aktiv

genotype eller homozygot mutant

GSTO1 Asp140Asp

og

GSTO2 Asp142Asp

genotyper er forbundet med dårligere prognose og kortere overlevelse i muskel invasive patienter blærekræft. Desuden

GSTP1 Ile

luftfartsselskaber udviste forøget, men ubetydelig, samlede dødelighed risiko.

Homozygot sletning i

GSTM1

gen er blevet associeret med kortere overlevelse efter diagnosen i 95 blærekræft patienter som vist ved Nørskov et al [14]. I nærværende undersøgelse fandt vi ikke sammenhængen mellem

GSTM1 null

genotype og overlevelse i muskel invasive TCC patienter. På den anden side,

GSTT1 aktiv

genotype har været forbundet med en lavere recurrence- og progressionsfri overlevelse hos patienter med non muskel-invasiv TCC [15]. Lignende prognostisk betydning af

GSTT1

er også blevet vist hos patienter med muskel-invasiv TCC i denne undersøgelse. Risikoen tillagt ved

GSTT1 aktiv

allel på dødeligheden kan muligvis forklares med hensyn til både antioxidant aktivitet af GSTT1 protein og dets potentielle rolle i inaktivering af frie radikaler produceret af lægemidler mod cancer. Under væksten af ​​TCC, opstår vigtige ændringer i celle redox homeostase, som kan påvirke apoptotiske signalveje [16]. Den oxidant-antioxidant balance i TCC sandsynligvis favoriserer den reducerede tilstand som de øgede niveauer af reduceret glutathion blev rapporteret i disse tumorer. Derudover er også blevet observeret up-regulerede aktiviteter antioxidant enzymer, herunder GSTT1 i TCC [16], [17]. Det kan spekuleret på, at GSTT1 opregulering ikke forekommer i TCC patienter med

GSTT1 null

genotype. Derfor kan bedre resultat af disse patienter forklares ved den fraværende antioxidant GSTT1 aktivitet, som favoriserer flere biprodukter af oxidativt stress i tumorceller og langsommere tumorprogression. Tilsvarende prognostisk rolle

GSTT1 aktiv

genotype er også blevet fundet i osteosarkom [18]. Spørgsmålet er, om nogen af ​​de lægemidler, der anvendes ved terapi af TCC patienter repræsenterer en GSTT1 substrat. Diedrich et al. [19] viste, at GSTT1 kan betragtes som en relevant faktor for kemoterapi af glioblastomer. Selv om der er ingen data om rolle GSTT1 i inaktivering af narkotika i MVAC og GC /Cis protokoller, mindst to af dem (doxorubicin og cisplatin) udøve deres virkningsmekanisme gennem reaktiv generation ilt arter samt apoptosecyklus aktivering [20]. I vores undersøgelse yderligere lagdeling af patienter efter behandling med kemoterapi viste ikke signifikant effekt af

GSTT1

polymorfi på overlevelsesraten. Derfor kan det konkluderes, at

GSTT1

genotype har mere indflydelse på tumor progression ved at ændre sin redox balance derefter påvirke metabolismen af ​​frie radikaler produceret af lægemidler mod cancer.

rolle

GSTP1

polymorfi i kemoterapi modstand er entydigt dokumenteret i langt størstedelen af ​​både in vivo og in vitro-undersøgelser [6], [21]. Cisplatin og doxorubicin er bevist substrater for GSTP1, med

GSTP1 Ile

som en variant med mere affinitet [5]. I denne undersøgelse har vi ikke finde den signifikant sammenhæng mellem

GSTP1

polymorfi og kemoterapi respons, selv om patienter med

Val /Val

genotype demonstrerede længere overlevelse end bærere af mindst én

Ile

allel. Denne gavnlige effekt af

GSTP1 Val /Val

genotype på overlevelse er også blevet fundet i hele gruppen af ​​TCC patienter, herunder dem, der ikke fik kemoterapi. Selv apoptose hæmning medieret af GSTP1: JNK interaktion er en vigtig mekanisme i udviklingen af ​​TCC [22], er der ingen data vedrørende forskellen antiapoptotisk aktiviteten af ​​forskellige GSTP1 proteiner (Ile eller Val) vedrørende JNK binding og apoptose hæmning. de seneste data viser dog, at den polymorfe udtryk for GSTP1-1 i MCF-7 celler differentieret mægle aktivering af GSTP-associeret Prdx6 peroxidaseaktivitet, hvilket giver en platform til at antyde, at betinget deres

GSTP

genotype, enkeltpersoner vil have de betydelige forskelle i montering af en antioxidant respons [23]. Hvis disse resultater er oversat til TCC indstilling, kan det spekuleret på, at

GSTP1 Ile /Ile

ville indebære en højere antioxidant potentiale give gunstige vilkår for tumor progression og dårligere prognose.

Den funktionelle rolle for polymorfier i både GSTO1 og O2 er begyndt at dukke op sent som Allen et al. [10] har vist, at

GSTO1 AspAsp

GSTO2 AspAsp

havde stærkt signifikant effekt på lavere hjernen genekspression niveauer af GSTO2, men ikke af GSTO1. Hvis en sådan form for regulering af GSTO2 udtryk findes også i TCC celler,

GSTO1

eller

GSTO2

polymorfier vil formentlig resultere i mangelfuld Dhar aktivitet og lavere ascorbinsyre niveau (AA) i tumor. Da størstedelen af ​​TCC patienter med

GSTO1

eller

GSTO2

polymorfier døde, ville det betyde anti-tumor rolle AA i TCC progression. I betragtning af den traditionelle rolle AA som en antioxidant, disse resultater ville kontrast det postulat, som reducerede miljø favoriserer væksten af ​​TCC. Men det lader til, at antitumorvirkningen af ​​AA har en biologisk plausibel forklaring, da AA fungerer også som en pro-oxidant og kan fremme apoptose i tumorceller såsom koloncarcinomcellelinie [24]. Fremtidige undersøgelser om sammenhængen mellem

GSTO

genotype og fænotype (GSTO2 proteinniveauet og Dhar aktivitet) samt AA målinger i TCC ville være nødvendigt at give forklaring på, at TCC patienter med mutant

GSTO2 Asp142Asp

genotype havde en 3,9 gange øget risiko for død sammenlignet med bærere af mindst en

GSTO2 Asn

allel, mens dem med

GSTO1 Asp140Asp

genotype udstillet 2.9- fold øget risiko for død end patienter med mindst én

Ala

allel. Det er vigtigt at bemærke, at

GSTO2

polymorfi var den eneste, der viste en signifikant effekt på overlevelse i undergruppen af ​​TCC patienter, som fik kemoterapi. Nemlig, TCC patienter med både

GSTO2 Asp

mutant alleler havde to gange kortere overlevelse sammenlignet med bærere af mindst en

Asn

allel. Det styrker yderligere vores hypotese om anti-tumor rolle AA i TCC. Denne antagelse er i reference med resultaterne af Catani et al [24], som viste, at AA øger anti-neoplastisk aktivitet af cisplatin og derved øge apoptose af tumorceller. Flere oplysninger om den potentielle anvendelse af ascorbinsyre til terapeutiske formål i forskellige tumorer er blevet beskrevet i gennemgangen af ​​Li og Schellhorn [25].

Visse begrænsninger kan overvejes i vores undersøgelse. Relativt lille antal undersøgelsens deltagere og GST polymorfier studeret kunne være kilderne til potentielle bias som kan have indflydelse undersøgelsens resultater. Men vi testede effekten af ​​seks GST polymorfier på resultatet i TCC patienter, og derfor faldt betydeligt en chance til offentliggørelse bias. Nemlig, positive resultater af genetiske undersøgelser analysere et lille antal polymorfier (n = 1-3) bør evalueres forsigtigt og behandlet på et lavere niveau af beviser [26]. Desuden blev vores patienter behandlet med polychemotherapy og af denne grund er det vanskeligt at fastslå virkningen af ​​GST’er polymorfier på behandlingsresultatet for hver bestemt lægemiddel. Ikke desto mindre kan denne undersøgelse tilbyde nogle væsentlige oplysninger, der kunne være basis for fremtidig langsgående forskning, især med hensyn til de GST klasse omega polymorfier.

Samlet set vores data tyder på, at

GSTT1 aktiv

genotype eller homozygot mutant

GSTO1 Asp140Asp

GSTO2 Asp142Asp

genotyper er forbundet med dårligere prognose og kortere overlevelse i muskel invasiv blære kræftpatienter. GSTT1, GSTO1 og GSTO2 som genetiske markører kan have en prognostisk eller farmakogenomisk rolle hos patienter med muskel invasiv blærekræft.

Tak

Vi vil gerne takke Mr. Dragoslav Radosavljevic for hans tekniske support i manuskriptet forberedelse.