Uforståelige hemmeligheder Hvilke Måske endda den såkaldte syk kinase inhibitor Professionals var ikke klar Of

Portion karakterisering blev oprettet ved hjælp af regelmæssige fytokemiske vurderinger. Inde i overordnede ethanol får tilstedeværelsen af ​​alkaloider eller kvælstofforbindelser blev ikke bestemmes ved hjælp af Dragenddorff, Valser, Reineckate og Mayers reagenser. Hydrogenperoxid vist den klare tilstedeværelse af naphthoquinoner og /eller anthraquinoner. Nuværende nærvær af steroider blev vist under anvendelse af Liebermann Burchard reagens. Lave niveauer af steroide saponiner og /eller triterpenoids blev påvist under anvendelse hæmolyse og skum vurderinger. For at kunne vurdere tilstedeværelsen af ​​anthraquinon glycosider, blev Borntragers respons brugt. Tilstedeværelsen af ​​tanniner blev verificeret under anvendelse ferrichloridopløsning, gelatine og blyacetat. P2Et, S2Et og vandige fraktioner viste den aktuelle tilstedeværelse af leucoanthocyanidiner, fraværet af quinoner og en vigtig tannin, især i P2Et del. Kromatografisk undersøgelse blev udført på TLC aluminium tæpper silicagel 60 F 254. Tre programmer opløsningsmidler var kloroform ethylacetat eddikesyre; anvendes: petroleumsether ethylacetat myresyre; og toluen acetonitril myresyre. Efter væsentlig hydrolyse blev S2Et og P2Et fragmenter opløst i methanol og detekteret ved anvendelse af UV, FeCl3 og vanillinsulfuric syre /110 H. Gallussyre blev anvendt som kontrol. HPLC-analyse blev udført i en Alliance 2795 med en PDA detektor. Massespektret analyse blev gennemført under anvendelse af en LCT massespektrometer ved at have en ESI kilde. Den procentvise relative forekomst blev bestemt ved anvendelse quercetin som en intern standard. Kørsler blev udført tredobbelt. De dyrkningsbetingelser under, at dine cellelinjer blev opretholdt er blevet fuldstændig bemærket. In vitro cytotoksicitetsassays De cytotoksiske virkninger af fragmenterne og gammeldags kemoterapeutiske lægemidler blev vurderet under anvendelse af normale celler og tumorceller ved hjælp af methylthiazol tetrazolium analyse og trypanblåt, som tidligere bemærket. Den del blev opløst i ethanol, og det tilsvarende køretøj blev anvendt som en negativ kontrol. Den mitochondriemembranpotential blev beregnet under anvendelse JC 1 farvestof, som tidligere forklaret. Phosphatidylserin eksternalisering blev undersøgt ved flowcytometri udnytte Annexin V FITC /PI. K562 og MCF7-celler blev behandlet med doxorubicin, ethanol eller P2Et fraktionen i 48 timer. Efter behandling blev cellerne suspenderet i buffer og inkuberet med Annexin V FITC i 8 minutter ved stuetemperatur. Derefter blev cellerne inkuberet med PI for blot to minutter ved 4 C, erhvervet over en FACSAria I og undersøgt med FlowJo software. Resultater udtrykkes som middelværdien _ SE af tre uafhængige eksperimenter. Caspase 3-aktivitet blev beregnet ved anvendelse af caspase 3 kolorimetrisk analyse udstyr, som finder kemisk aktivitet på grundlag af spaltningen af ​​Asp Glu Val Asp pNA. Kort fortalt blev celler dyrket under anvendelse doxorubicin eller ethanol i 48 timer og forskellige niveauer af fraktionen. Følgende blev cellerne sne lyseret i 10 min enzymet handling var foranstaltning på 96 brønd fladbundede mikroplader med 50 ul supernatant.