PLoS ONE: Net Platelet angiogenetiske aktivitet (NPAA) korrelerer med Progression og Prognose for ikke-småcellet lungekræft

Abstrakte

Cirkulerende blodplader er rigelige kilder angiogenese molekyler til tumorvaskulaturen påvirker tumorvækst og metastase. Forholdet mellem ikke-småcellet lungekræft (NSCLC) og intra-trombocyttal niveauer af VEGF, TSP-1 og netto trombocyt angiogene aktivitet (NPAA) er uklar. Formålet med denne undersøgelse var at bedre forstå den rolle disse faktorer i udviklingen af ​​NSCLC kræft og at vurdere dens kliniske betydning. Trombocyt VEGF og TSP-1 og NPAA blev målt præoperativt i 68 patienter med NSCLC ved ELISA eller Kapillarrør dannelse assay. VEGF blev TSP-1 og NPAA distributioner i kræftpatienter og raske frivillige sammenlignet anvendelse af Mann-Whitney

U

test. Kaplan-Meier-metoden, univariate og multivariate regressionsanalyse blev brugt til at analysere sammenhængen mellem disse faktorer og klinisk-patologiske træk, samlet overlevelse og sygdomsfri overlevelse. Mean intra-blodplade TSP-1-niveau var lidt højere hos patienter end hos raske forsøgspersoner (p = 0,092). Intra-blodplade TSP-1-niveauer var signifikant højere hos patienter med involvering større end T2 eller stadium III, sammenlignet med andre patienter. Mean intra-blodplade VEGF-niveau var 40,8 pg /10

6 i patienter sammenlignet med 21,9 ng /10

6 hos raske forsøgspersoner (p = 0,041). Median værdi NPAA patienter var signifikant højere end hos raske kontroller (p 0,001). Patienter med høj POFR er mere tilbøjelige til at udvise aggressive kliniske patologiske træk. POFR større end medianen er forbundet med dårlig prognose. Det forhøjede NPAA har bedre korrelation med tumor mikrokar densitet (MVD) end blodpladeafledt VEGF. Arealerne under receiver koerselskurve (AUROC) af NPAA var højere end for blodpladeafledt VEGF i forskellige grupper. En multivariat analyse viste, at NPAA er uafhængige prognostiske faktorer. Disse resultater viste, at NPAA kan være en klinisk anvendelig indikator for diagnostisk og prognostisk evaluering i NSCLC patienter

Henvisning:. Yao L, Dong H, Luo Y, Du J, Hu W (2014) Net Platelet angiogenetiske aktivitet ( NPAA) korrelerer med Progression og Prognose for ikke-småcellet lungekræft. PLoS ONE 9 (4): e96206. doi: 10,1371 /journal.pone.0096206

Redaktør: Rossella Rota, Ospedale Pediatrico Bambino Gesu ‘, Italien

Modtaget: Januar 20, 2014 Accepteret: April 3, 2014; Udgivet: 30 April, 2014

Copyright: © 2014 Yao et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af Educational Kommissionen Anhui-provinsen i Kina (Grant KJ2011A163), Natural Science Foundation of Anhui-provinsen i Kina (Grant 11040606M208), og Natural Science Foundation of China (Grant 30.672.437). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Lungekræft er en af ​​de mest almindelige maligne sygdomme på verdensplan, med en konstant stigende frekvens, især i Kina. Det rangerer som den første hyppigste årsag til kræft dødsfald blandt mænd i Kina [1], [2]. Trods fremskridt i kemoterapi, prognosen for patienter med lungecancer er fortsat dårlig, med 5-års relativ overlevelse mindre end 14% blandt mænd og mindre end 18% blandt kvinder i de fleste lande [3]. Således ville evnen til at forudsige individuel prognose være kritisk at guide kirurgisk og kemoterapeutisk behandling. Angiogenese eller newblood fartøj dannelse, et væsentligt skridt i tumorvækst og metastase, er reguleret af en balance mellem pro-angiogene faktorer såsom VEGF og bFGF, og anti-angiogene faktorer såsom endostatin og TSP-1. Blodplader har længe været kendt for at være primære mediatorer af trombose og hæmostase. For nylig har de vist sig at have mange angiogenese promotorer og angiogeneseinhibitorer, er en af ​​de største indre kilder til angiogene faktorer in vivo [4]. VEGF-ekspression har vist sig at være høj i forskellige ondartede tumorer, og serum VEGF-niveauer korrelerer med sygdom fase og prognose ved brystcancer, kolorektal cancer og prostatacancer [5], [6]. Det er blevet rapporteret, at høje VEGF immunoreaktivitet i tumorvæv er forbundet med prognosen hos NSCLC-patienter [7], [8]. Thrombospondin-1 (TSP-1) var den første endogene inhibitor af angiogenese, der skal identificeres [9], [10]. Dette 450 kDa glycoprotein produceres og secerneres af flere typer af tumorceller og celler, der er bosiddende i tumorstroma. Ekspressionen af ​​TSP-1 i humane tumorer moduleres af onkogener og microenvironmental faktorer, og i flere slags humane tumorer TSP-1 er til stede i både stroma og tumorceller [11]. Desuden har forhøjede cirkulerende niveauer af TSP-1 blevet forbundet med sygdommens progression og avancerede kliniske stadier af sygdommen [12], [13]. Selv serum VEGF og TSP-1 er de mest undersøgte pro- og antiangiogene faktorer, henholdsvis og stærkt forhøjede i angiogenese-relaterede sygdomme, undersøgelser vedrørende blodpladeafledt VEGF og TSP-1 er knappe i patienter med lungecancer. Nylige undersøgelser viste, at ud over at frigive allerede eksisterende forbindelser, kan blodplader syntetisere nye ved stimulering på grund af en stor mængde af messenger RNA [14]. Dette faktum indikerer, at blodplader kan spille en hidtil ukendt rolle i reguleringen af ​​vaskulære reaktioner. Heri, har vi undersøgt VEGF og TSP-1, men også netto blodplade angiogen aktivitet (NPAA) i blodpladerne af lungecancerpatienter sammenlignet med raske kontroller. For at evaluere NPAA, testede vi in ​​vitro effekten af ​​blodplade lysater fra patienter med lungecancer på dannelsen af ​​humane navlestrengen endotelceller (HUVEC’er) kapillære-lignende strukturer.

Materialer og metoder

Cell isolation og kultur

Humane navlestrengen endotelceller (HUVEC’er) blev opnået fra navlestrenge, som den lokale afdeling for Obstetrik. Skriftligt informeret samtykke blev opnået fra donorer, og undersøgelsen blev godkendt af Etisk Komité Anhui Medical University. Isolering og dyrkning blev udført som tidligere [15] beskrevne. Celler blev dyrket i RPMI medium suppleret med FBS (10%), L-glutamin (2 mM), streptomycin (100 ug /ml) og penicillin (100 U /ml) ved 37 ° C i en fugtig 5% CO

2 inkubator.

Kapillarrør dannelse assay

røret dannelse assay blev udført i overensstemmelse med producentens anvisninger (Chemicon International, Hampshire, UK) med små modifikationer. Endotelceller (1 × 10

4) blev podet i vækstfaktor-reducerede Matrigel coatede plader (Becton Dickinson Biosciences, Bedford, MA, USA) og udsat for blodplade lysater i 18 timer. Tubulusdannelse blev undersøgt under et omvendt lysmikroskop og antallet af forgreningspunkter i fire ikke-overlappende felter blev målt. Fotografier af alle brønde blev taget under anvendelse af et inverteret lysmikroskop. Eksperimenter blev udført tre gange, og variationen var mindre end 10%. For at evaluere prøvernes reproducerbarhed, kapillarrør formation (CTF) af HUVEC blev gentaget 3 gange i nærvær af 9 udvalgte patientgrupper blodplader (3 med stimulerende aktivitet, 3 med stimulerende aktivitet i området fra raske donorer blodplader og 3 med inhiberende aktivitet) . I alle de gentagelser, de valgte blodplader opretholdt deres oprindelige aktivitet. At inhibere aktiviteten af ​​udvalgte blodplader, blev de preimcubated med 5 ug /ml VEGF monoklonalt antistof (Sigma) eller 200 ug /ml TSP-antistof (Sigma).

Patienter og prøver

Sixty-otte patienter med histologisk eller cytologisk bekræftet NSCLC på vores hospital fra september 2006 til juli 2007 blev inkluderet i undersøgelsen. De 68 patienter bestod af 46 mænd og 22 kvinder (alder 61 ± 12,8 år [middel ± SD]). Kontrolgruppen bestod af 68 raske donorer indskrevet fra Blood Transfusion Enhed for det samme hospital i samme periode. Både raske donorer og patienter ikke har en tidligere historie af malign sygdom. Klinisk-patologiske karakteristika patienter blev rapporteret. Histologisk klassifikation af tumorerne var baseret på World Health Organization kriterier [16]. Histologisk 37 tumorer var adenocarcinom, var 28 pladecellekarcinom, og tre var storcellet carcinom. Metastase til lymfeknuderne var n0 + N1 i 49 patienter, N2 + N3 i 19. Postoperativ sygdom etape var stadie I + fase II i 38 patienter, stadie III + stadie IV i 30. Paraffin-embedded, formalinfikserede kirurgiske prøver blev indsamlet til immunhistokemisk farvning for intratumorale mikrokar endotelceller. Histopatologien stede i de arkiverede frosne væv blev bekræftet af en patolog til at svare til den i paraffinindlejrede væv. Overlevelsestiden af ​​patienter blev beregnet fra datoen for operationen til dødsdagen. Den opfølgningsperioden varede op til 60 måneder. Perifere blodprøver fra patienter med NSCLC blev trukket inden for 1 uge før kirurgi eller kemoterapi. Alle blodprøver fra patienter og kontroller blev taget tidligt om morgenen, efter en nats faste og en hvileperiode på mindst 30 min. Prøverne blev forarbejdet i overensstemmelse med standardmetoder. Skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle deltagere, og undersøgelsen protokoller er godkendt af etiske komité i Anhui Medical University.

Udarbejdelse af humane blodplader

Standard “blå top” antikoagulation prøver blev indsamlet fra enkelte, og forarbejdet i henhold til standardmetoder til blodplader samling inden 1-2 timer for indsamlingen. Kort fortalt blev en blodprøve (ca. 4 ml) trækkes af venepunktur i et vakuumrør indeholdende 105 mM citrat (pH 5) antikoagulant i et forhold på 01:09 (vol /vol) buffer til blod. Rørene blev forsigtigt blandet og blev ved en langsom rocker ved omgivelsestemperatur (20 til 28 ° C), mens de afventer behandling. Blodpladerigt plasma opnås fra citreret plasma ved centrifugering (1000 rpm, 10 minutter) inden for 1 time efter prøvetagning, mængden registreres og en celletælling udført. Den blodpladerigt plasma centrifugeres derefter i nærværelse af PGI2 (75 nM) ved 2000 rpm i 20 minutter til opnåelse af en blodpladepellet, som derefter vasket to gange i phosphatbufret saltvand (PBS) og resuspenderes forsigtigt i PBS til opnåelse af en koncentration på 2 × 10

8 blodplader /ml. én ml af denne blodpladesuspension blandes med 1 ml 0,1% Triton X-100 (Sigma) ved 37 ° C i 20 minutter. Dette lyserer effektivt alle blodpladerne. Denne blodpladelysat opbevares derefter ved -80 ° C før analyse ved ELISA.

Målinger af VEGF og TSP-1

Alle prøverne blev testet i samme laboratorium, inden for samme tidsramme (2 uger). Kræften og kontrol gruppe prøver blev randomiseret inden prøvningen for at undgå test bias. Trombocyttransfusioner blev bestemt ved hjælp af kvantitative ELISA kits (Quantikine Immunoassays; R 5% og inter-assay CV af 10%. De lavere detektionsgrænser for den enkelte analyse er 10 pg (VEGF) og 5 ng (TSP-1). Alle test blev udført ifølge producentens anvisninger. Alle forsøg blev udført i mindst to eksemplarer på passende fortyndede prøver.

mikrokar Density (MVD)

mikrokar blev farvet ved hjælp af musen polyklonale anti-CD34-antistof (1:20 fortynding) (Novocastra, Newcastle, UK) som det primære antistof, med binding visualiseret gennem avidin- biotin-peroxidase-kompleks metode. Alle røde farvning endotelcelle klynge, der klart blev skilt fra tilstødende mikrokar, tumorceller og andre bindevæv elementer blev betragtet som en enkelt, tællelig mikrokar. Karlumener ikke var nødvendige for en struktur, der skal defineres som en mikrokar. Vi valgte tre vaskulære hotspots både intratumoralt og peritumoralt til tælling CD34 mikrokar.

Statistisk analyse

Statistiske analyser blev udført med SPSS 11.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL) software. Dataene blev testet for normalitet og viste sig at være ikke-normalfordelt. VEGF blev TSP-1 og NPAA distributioner i kræftpatienter og raske frivillige sammenlignet anvendelse af Mann-Whitney

U

test. Korrelationer blev vurderet med Spearman rank-sum test. Følsomheden og specificiteten af ​​NPAA blev bestemt ved Receiver Operating karakteristiske (ROC) kurver, og de områder under kurven blev beregnet [17]. Overlevelseskurver blev opnået ved Kaplan-Meier-metoden og Cox proportional hazards model blev anvendt til at identificere faktorer, der blev uafhængigt forbundet med overlevelse. Resultaterne præsenteres som medianværdier med interkvartile intervaller. Signifikans blev formodet på p-værdier på mindre end 0,05.

Resultater

NPAA, blodpladeafledt VEGF og TSP-1-niveauer i patienter med lungecancer og raske kontrolpersoner

NPAA , blodpladeafledt VEGF og TSP-1-niveauer var påviselige i alle raske kontroller. Deres medianværdier af NPAA, blodpladeafledt VEGF og TSP-1-niveauer var 65,4 no. af filialer point /10

6, 21,9 pg /10

6 og 8,5 ng /10

6, hhv. Median værdi NPAA og VEGF i lungekræftpatienter var 156,2 nej. af filialer point /10

6 (interval, 66,4 til 250,2) og 40,8 pg /10

6 (interval, fra 15,85 til 85,9), og betydeligt højere end raske kontrolpersoner (P 0,001 og P = 0,041, henholdsvis tabel 1). Der var ingen signifikant forskel i blodpladeafledte TSP-1 niveauer mellem patienter med lungecancer og raske kontroller (P = 0,092; tabel 1).

Forholdet mellem NPAA, blodpladeafledt VEGF eller TSP- 1-niveauer og kliniske patologiske profiler

for at vurdere sammenslutning af NPAA, blodpladeafledt VEGF eller TSP-1 med tumor biologi blev sammenligninger af de kliniske patologiske funktioner med NPAA, blodpladeafledt VEGF eller TSP-1 lavet . Som forventet, patienter med højt NPAA var mere tilbøjelige til at udvise aggressiv kliniske patologiske funktioner: høj NPAA var signifikant korreleret med dårlig tumor differentiering (P = 0,004), patologisk stadie (P 0,001), patologisk T-faktor (P 0,001) og patologisk N-faktor (P 0,001), hvorimod høj blodpladeafledt VEGF var signifikant korreleret med dårlig tumor differentiering (P 0,001) og patologisk stadium (P 0,001) (tabel 2). Niveauerne af blodpladeafledt TSP var højere hos patienter i patologisk stadium III + IV og patologiske T-faktor T2-4 end hos patienter i patologisk stadium I + II (P = 0,002) og patologisk T-faktor T1 (P = 0,008) (tabel 2). I denne undersøgelse fandt vi, at den mediane værdier NPAA og VEGF i patienter med lungecancer er signifikant højere end hos raske kontroller. I modsætning hertil TSP-1 var ikke forhøjet i kræftpatienter sammenlignet med kontrolprøverne. Patienter med højt NPAA var mere tilbøjelige til at udvise aggressiv kliniske patologiske funktioner.

Receiver-drift kurve (ROC) analyse af VEGF og NPAA i påvisning af lungekræft

Figur 1 viste området under modtager-drift kurve (AUROC) af NPAA for at differentiere lungekræft fra sundhedskontrol var 0,892 (95% CI, 0,874-0,961), hvilket var højere end 0,823 (95% CI, 0,786-0,941) af VEGF. (P 0,0001).

(A, B) ROC-analyse af patienter med lungecancer og raske kontroller og raske kontrolpersoner som en negativ gruppe, og patienter med lungecancer som en positiv gruppe. NPAA havde den bedste forudsigende diagnostiske nøjagtighed (AUC = 0,893, P 0,0001). AUROC:. Areal under modtager-drift kurve

Korrelationer mellem NPAA, blodpladeafledt VEGF eller TSP-1-niveauer og patient samlet overlevelse eller sygdomsfri overlevelse

univariate Cox regressionsanalyse viste regional lymfeknude, patologisk stadium, NPAA, og blodpladeafledte VEGF niveauer for at være væsentlige faktorer, som påvirker den samlede overlevelse (tabel 3). Log-rank-analyse viste, at forhøjet POFR større end medianen blev forbundet med dårlig sygdomsfri overlevelse og dårlig total overlevelse (P = 0,012, P = 0,002;. Figur 2), mens blodpladeafledt VEGF og TSP-1 viste ikke denne association. I tilfælde af flerdimensional analyse til histologisk differentiering, T faktor, regional lymfeknude, patologisk stadium NPAA, blodpladeafledt VEGF og TSP-1, der kun regional lymfeknude, patologisk stadium og NPAA stadig relateret til den samlede overlevelse i nogen grad ( tabel 3). I modsætning hertil regional lymfeknude, patologisk stadium, NPAA var væsentlige faktorer, der påvirker sygdomsfri overlevelse (tabel 4).

sygdomsfri overlevelse (A) og samlet overlevelse (B) for lav NPAA og høje NPAA patienter . P-værdier blev bestemt ved log-rank test. Vejviser

Forholdet mellem NPAA eller blodpladeafledt VEGF og Tumor MVD hos patienter

Der var en signifikant sammenhæng mellem POFR eller blodpladeafledt VEGF og tumor MVD i cancerpatienter (r = 0,78, P 0,001, r = 0,521; p 0,01;. figur 3A, B). NPAA har bedre korrelation med tumor MVD end blodpladeafledt VEGF. Disse resultater antyder, at POFR eller blodpladeafledt VEGF kan fremme tumorangiogenese. MVD i NSCLC væv og normale væv blev bestemt ved CD34 immunhistokemisk farvning

(A) God korrelation mellem MVD og NPAA i 68 NSCLC patienter (r = 0,78; P 0,001) (figur 3C, D.).. (B) Den signifikant sammenhæng mellem tumor MVD og blodpladeafledte VEGF niveauer (r = 0,521; P 0,01). (C) MVD i NSCLC væv og (D) normale væv blev bestemt ved CD34 immunhistokemisk farvning. Pil, positiv plet af MVD.

Stimulering af dannelse kapillarrør (CTF) ved blodpladeafledte cytokiner

For at vurdere netto trombocyt angiogene aktivitet (NPAA), testede vi in ​​vitro effekt af blodplader lysater fra patienter med lungekræft og raske kontrolpersoner på CTF af HUVEC’er. NPAA var signifikant højere hos patienter end raske kontroller. (P 0,001;. Tabel 1, figur 4A, B)

Repræsentative fotografier af rørdannelse assayet efter 18-inkubering med blodplade-frigivet cytokiner er vist i panel A (patienternes blodplade-frigivet cytokiner tilsat) og B (raske kontroller blodplade-frigivet cytokiner tilsat). Inkubation af blodplade lysater med IgG-kontrol (C) og antiTSP-1-antistof (D). Den statistiske analyse (E). Søjler er gennemsnit ± standardafvigelse fra 4 eksperimenter. *

P.

0,05 kontrol versus behandling

rolle VEGF eller TSP-1 i blodplade Lysater fra Patienter med NSCLC i NPAA

inkubation af high-VEGF blodplade lysater med antistoffer mod VEGF resulterede i et markant fald ( 48%) i CTF af HUVEC, mens kun en mindre inhibering ( 16%) eller ingen hæmning af CTF af HUVEC blev observeret, når stimulerende blodplade lysater med lave VEGF-niveauer blev præinkuberet med anti-VEGF-antistoffer. Præinkubation af disse inhibitoriske blodplade lysater fra kræftpatienter afslørede forhøjede niveauer af TSP-1 i begge tilfælde med antistoffer mod TSP-l (200 ug /ml) resulterede i en stigning i CTF af HUVEC sammenlignet med disse inhibitoriske blodplade lysater præinkuberet med IgG-kontrol (5 ug /ml) (

P

0,05, n = 3) (Figur 4. C, D, E). Disse resultater viser, at intraplatelet TSP-l bidrager til den samlede antiangiogene virkning udløst af blodplade lysater.

Discussion

tumorangiogenese undersøgelser har også vist, at cirkulerende blodplader er rigelige kilder til pro-angiogene molekyler til tumorvaskulaturen, og at tumorceller inducerer blodplade aktivering og aggregation ved frigivelsen af ​​blodplade-aktiverende faktorer, hvilket resulterer i frigivelse af a-granulater og deres indhold, hvilket igen påvirker direkte tumorvækst og metastase [18] – [ ,,,0],21]. Forhøjede trombocyttal er forbundet med dårlig prognose i lungekræft og mavekræft, hvilket tyder på, at en prokoagulant tilstand og trombocytaktivering kan bidrage til udvikling tidlig kræft [22], [23]. Det er blevet rapporteret, at VEGF i blodplade er forhøjede og er uafhængige prædiktorer for colorectalt carcinom [24]. Fordi angiogenese reguleres af balancen mellem inhibitorer og aktivatorer, et af formålene med vores undersøgelse var at evaluere TSP-1 (inhibitor) /VEGF (aktivator) balance i blodplader. Imidlertid bør det erindres, at tumoral angiogenese reguleres ikke kun af VEGF og TSP-1-niveauer, men også ved en række identificerede og uidentificerede aktivatorer og inhibitorer, der kan påvirke netto angiogene balance [25], så et andet formål med vores undersøgelse var at evaluere NPAA.

i denne undersøgelse undersøgte vi niveauet for blodplade VEGF og NPAA i blodplade lysater af 68 patienter med NSCLC. Vi fandt, at medianværdier for NPAA og VEGF i patienter med lungecancer er signifikant højere end hos raske kontroller. Vores undersøgelse viste desuden, at patienter med højt NPAA er mere tilbøjelige til at udvise aggressive kliniske patologiske træk og at POFR større end medianen er forbundet med dårlig prognose. Det forhøjede NPAA har bedre korrelation med tumor MVD end blodpladeafledt VEGF. Mens forhøjet blodpladetal er blevet observeret i nogle kræftformer, vi ikke observere nogen signifikante forskelle i trombocyttal mellem raske kontrolpersoner og patienter i vores befolkning (data ikke vist).

Vi målte TSP-1 niveauer af blodplader lysater i NSCLC og fundet en ikke-signifikant forhøjelse i TSP-1-niveauer. Men niveauet af blodpladeafledt TSP-1 var højere hos patienter i patologisk stadium III + IV og patologiske T-faktor T2-4 end hos patienter i patologisk stadium I + II og patologiske T-faktor T1. Der er to mulige forklaringer på dette fund. For det første kan aggressive tumorer generere mere TSP-1 end ikke-aggressive tumorer. For det andet kan TSP-1-niveauer være direkte korreleret med bruttovolumen af ​​sygdom, og patienterne i denne undersøgelse med aggressive tumorer generelt havde en højere tumorbyrde. Vi evaluerede blodplader lysater fra kræftpatienter og raske donorer for deres evne til at øge eller mindske CTF af HUVEC som en enkel og reproducerbar

in vitro

tilgang, at få oplysninger om det nationale program. Faktisk er det ikke alle blodplade prøver med høje niveauer af VEGF-induceret CTF, sandsynligvis på grund af tilstedeværelsen af ​​antiangiogeniske molekyler. Omvendt er det ikke alle de stimulerende blodplader udviste høje niveauer af VEGF, hvilket indikerer, at andre faktorer end VEGF er involveret. Ud fra følgende betragtninger tests for at identificere positive og negative regulatorer af angiogemesis er besværlige, at vores in vitro assay måler det nationale program for kræft patient på HUVEC CTF giver en enkel vej til funktionel information på nettet balance mellem angiogene og antiangiogene faktorer. Sådanne oplysninger kan være af værdi i prognosen for kræft og i overvågningen af ​​tumor respons på kræftbehandling.

For yderligere at vurdere den kliniske værdi af NPAA, vi bestemt og sammenlignet den diagnostiske anvendelighed af NPAA og blodpladeafledt VEGF i kræft og sunde kontrolgrupper. NPAA niveauer skelnes lungekræftpatienter fra normale individer meget pålideligt. NPAA var en signifikant bedre indikator for lungecancer end blodpladeafledt VEGF i dette undersøgte population. Overlevelse analyse af kræftpatienter lunge blev evalueret i denne undersøgelse baseret på niveauet af NPAA. I vores undersøgelse, overlevelsesraten for patienter med højt NPAA var væsentligt lavere end de patienter med lav NPAA. Notatet havde præoperative niveauer af blodpladeafledt VEGF hos disse patienter ikke korrelerer med en dårligt resultat (data ikke vist) .Til vores viden, dette er den første rapport om NPAA i NSCLC.

Der er flere mekanismer, hvor de forskellige angiogenese regulatoriske proteiner kunne blive forøget i blodpladerne af kræftpatienter. Først kunne blodplader direkte erhverve en faktor fra tumoren via endocytose. For det andet kunne tumoren stimulere megakaryocyt at opregulere syntesen af ​​en angiogenese regulatorisk protein. Tredje fordi blodplader indeholder mRNA’er og translationelle maskineri, blodplader kunne også stimuleres til at syntetisere en angiogenese regulatorisk protein [24].

Som konklusion resultaterne af denne undersøgelse viste, at mens NPAA, blodpladeafledt VEGF og TSP- 1-niveauer var højere i NSCLC patienter før operation end hos raske kontroller, kun både nationale program og blodplader afledt VEGF niveauer viste en statistisk signifikant forskel mellem de to grupper. Den viste også, POFR større end medianen var forbundet dårlig prognose. Selvom blodpladeafledte TSP-1-niveau synes ikke at være en markør for NSCLC, kan NPAA være mere værdi end blodpladeafledt VEGF i den diagnostiske og prognose af ikke-småcellet lungekræft.