PLoS ONE: Meta-analyse af mismatch repair Polymorfier i Cogent Consortium for tarmkræft Susceptibility

Abstrakt

I de sidste fire år, Genom-Wide Association Studies (GWAS) har identificeret seksten lav penetrans polymorfier på fjorten forskellige loci forbundet med colorektal cancer (CRC). På grund af de lave risici knyttet til kendte almindelige varianter, de fleste af de 35% bred-sense arvelighed estimeret ved to undersøgelser forbliver uforklaret. For nylig vores gruppe foretaget en case-kontrol undersøgelse i otte enkelt-nukleotid (SNP’er) i 4 CRC gener. Denne undersøgelse er en opfølgning af denne undersøgelse. Vi har genotype seks SNPs, der viste en positiv sammenhæng og gennemførte en meta-analyse baseret på otte yderligere undersøgelser består i alt mere end 8000 tilfælde og 6000 kontroller. Den estimerede recessiv odds ratio for en af ​​SNP’er, rs3219489 (MUTYH Q338H), faldt fra 1,52 i den oprindelige svensk undersøgelse til 1,18 i den svenske replikation, og til 1,08 i den indledende meta-analyse. Da den tilsvarende oversigt sandsynlighed værdi var 0,06, besluttede vi at hente yderligere oplysninger til denne polymorfi. Indarbejdelsen af ​​yderligere seks undersøgelser resulterede i omkring 13000 tilfælde og 13000 kontroller. Den nyligt opdaterede ELLER var 1,03. Resultaterne fra den nuværende store, multicenter undersøgelse illustrerer muligheden for faldende effekt størrelser med stigende prøver størrelser. Fænotypisk heterogenitet, differentieret miljøeksponeringer, og specifik sammenkædning befolkning uligevægtsaspekter mønstre kan forklare den observerede forskel på genetiske virkninger mellem Sverige og de øvrige undersøgte kohorter

Henvisning:. Picelli S, Lorenzo Bermejo J, Chang-Claude J, Hoffmeister M, Fernández-Rozadilla C, Carracedo A, et al. (2013) metaanalyse af mismatch repair Polymorfier i Cogent Consortium for tarmkræft følsomhed. PLoS ONE 8 (9): e72091. doi: 10,1371 /journal.pone.0072091

Redaktør: Nathan A. Ellis, University of Illinois i Chicago, USA

Modtaget: 10. januar, 2013; Accepteret: 6 Juli 2013; Udgivet: 6. september, 2013 |

Copyright: © 2013 Picelli et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Forfatterne er taknemmelige for: den spanske nationale Genotypning center (CEGEN-ISCIII) -usc og UPF knuder, samt institutionelle Tumor Bank of Fondazione IRCCS Istituto Nazionale dei Tumori, Milano, Italien. Arbejdet blev udført (delvis) på Esther Koplowitz Center, Barcelona. Denne undersøgelse blev støttet af Instituto de Salud Carlos III, spanske sundhedsministerium, (tilskud FIS PI08-1635 og PS09-1037, VM); Cancer Research UK Programme Grant (C348 /A12076) og et center Grant fra CORE Charity (MD); CZ: Georgien CR: GAP304 /10/1286 og CZ: GA CR: GA310 /07/1430 (PV); Hunter Medical Research Institute forskningsbevilling og prioritet Forskningscenter for Information Based Medicine (RS); German Research Council, tyske ministerium for forskning og uddannelse (HB, HV); Baden-Württemberg staten Ministeriet for Forskning, Videnskab og Kunst (HB); Fondo de Investigación Sanitaria /EFRU (08/0024, 08/1276, PS09 /02368, 11/00219, 11/00681); Instituto de Salud Carlos III (Acción Tværgående de kræft), Xunta de Galicia (RHI07 /04 og 08CSA005208PR); Ministerio de Ciencia e Innovación (SAF2010-19273); Asociación Española contra el cancer (Fundación Científica y Junta de Barcelona); Fundació Olga Torres (CRP), og FP7 CHIBCHA Consortium (AC og SCB); Fondo de Investigación Sanitaria (CP 03-0070 til SCB og PS09 /02368 til CFR). CIBERehd og CIBERER finansieres af Instituto de Salud Carlos III. JLB er delvist støttet af en bevilling fra Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG, SFB /TRR77, projekt Z2). LL er støttet af en bevilling fra National Cancer Institute R01 CA136726. SB, JH, WVS og CS blev støttet af det tyske ministerium for Uddannelse og Forskning gennem det tyske nationale Genome Research Network (NGFNplus) Colon Cancer Network (CCN). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

i de senere år med lav risiko fælles alleler har tiltrukket stigende opmærksomhed i søgningen efter den “manglende arvelighed” i kolorektal cancer (CRC). Det vedrører den del af arvelighed, der ikke kan forklares ved mutationer i allerede kendte højrisiko-gener, men skulle ifølge twin undersøgelser, tegner sig for ca. 35% [1]. Kendte høj penetrans germline mutationer i CRC gener bidrager til mindre end 6% af de observerede tilfælde [2]. Derfor meget af den resterende arvelig variation i genetisk modtagelighed skyldes sandsynligvis flere lav penetrans varianter, både almindelige og sjældne.

Til dato seksten almindelige varianter er blevet identificeret gennem store multi-center genom-dækkende associationsstudier (GWAS) [3]. Tilsammen de dog kun forklare en lille del af familiære CRC tilfælde. Selv om risikoen forbundet med hver af disse varianter er beskeden, at de bidrager til sygdomsbyrden grund af deres høje frekvens i befolkningen og muligheden for handler i forståelse med hinanden, hvilket kan øge den enkeltes risiko for at udvikle CRC [4].

på denne baggrund et par år siden forsøgte vi at vurdere, hvilken rolle otte SNPs i fire allerede kendte CRC gener (

APC

,

MLH1

,

MSH6

MUTYH

) gennem en case-kontrol forening studie i den svenske befolkning [5]. Disse 8 SNP’er var tidligere blevet undersøgt, men deres patogenicitet var ukendt, og de blev antaget at udgøre polymorfismer. I vores første studie blev påvist flere positive associationer, men på grund af begrænset stikprøvestørrelse (1785 tilfælde og 1722 kontroller) [5], at de resultater, der er nødvendige for valideres i en opfølgende undersøgelse.

Den foreliggende undersøgelse var et initiativ fra COGENT konsortium [4], [6], hvor forskellige grupper tilbød at udvide genotype til andre ikke-svenske kohorter for SNPs viser statistisk signifikante associationer i mindst en analyse af den oprindelige undersøgelse. Dette begrænsede analysen til seks ud af de oprindelige otte SNPs.

Materialer og metoder

Etik erklæring

Indsamling af blodprøver og kliniske oplysninger fra patienter og kontroller blev opnået med informeret samtykke i overensstemmelse med principperne i erklæringen fra Helsinki. Alle deltagere gav skriftligt informeret samtykke til at deltage i undersøgelsen. Undersøgelsen blev gennemført i overensstemmelse med den svenske lovgivning etisk tilladelse (2003: 460) og godkendt af Stockholm Regional Research Komité (DNR 2002: 489).

Mutation screening

Seks SNPs i fire forskellige CRC gener blev inkluderet i analysen: rs459552: T A (

APC

D1822V), rs1799977: A G (

MLH1

I219V), rs1800932: A G (

MSH6

P92P), rs1800935: T C (

MSH6

D180D), rs3219484: G A (

MUTYH

V22M) og rs3219489: G C (

MUTYH

Q338H).

MUTYH

Q338H svarer til Q324H i vores første undersøgelse [5]. Den SNP nomenklatur blev ændret for at imødekomme det menneskelige genom Variation Samfundets (lastbiler) retningslinjer, der anbefaler brug af en reference sekvens repræsenterer det største teoretisk kendte udskrift. For

MUTYH

dette svarer til NM_001128425.1 og NP_001121897.1 for mRNA og protein, henholdsvis [7], [8], [9].

Emner

Detaljer hensyn til antallet af tilfælde og kontrol i alle fjorten studier er opsummeret i tabel S1. En SNP, rs459552 (

APC

D1822V), blev genotype i syv undersøgelser, for i alt 8654 tilfælde og 7731 kontroller. Fire SNP’er, rs1799977 (

MLH1

I219V), rs1800932 (

MSH6

P92P), rs1800935 (

MSH6

D180D) og rs3219484 (

MUTYH

V22M) blev genotypebestemt i 8 undersøgelser for i alt 8308 tilfælde og 7434 kontroller. Den SNP med rs nummer 3219489 (

MUTYH

Q338H) blev genotype i 13 kohorter for i alt 12902 tilfælde og 14602 kontroller.

For alle de emner genomisk DNA blev ekstraheret fra perifert blod ved standard procedurer. Yderligere oplysninger om lokalisering af tumoren, alder ved diagnose, køn og etnicitet blev hentet når det er muligt. Ud af 5770 kontrol med etnicitet information, 5647 var af kaukasisk oprindelse, resten er hovedsagelig African American.

Genotypning

I undersøgelser 1, 5, 6, 7, 8, 9 og 10 SNPs blev genotypebestemt ved anvendelse af TaqMan SNP genotypebestemmelsesassay (Applied Biosystem, Foster City, CA). Genotypebestemmelse i studie 2 og 12 (kontroller kun) blev udført ved hjælp af Kaspar kemien i K-Bioscience (Hoddesdon, Herts, UK) (https://www.kbioscience.co.uk/reagents/KASP_manual.pdf), der er en kompetitiv allel-specifik PCR SNP genotyping system, der bruger FRET quencher kassette oligoer. Undersøgelse 3 genotypet med MassARRAY (Sequenom Inc., San Diego, USA) teknologi. Undersøgelse 4 genotypet ved hjælp af fluorescerende hybridiseringsprobe smeltekurver ved hjælp af Light Cycler-instrumentet (Roche). Undersøgelse 11 genotypebestemmes hjælp Illumina HumanHap 550 Bead Arrays. Undersøgelse 12 blev genotype af Sanger sekventering (tilfælde kun). Undersøgelser 13 og 14 blev genotype hjælp Illumina HumanHap300 og Illumina HumanHap240S.

Statistisk analyse

Afvigelser af observerede genotypefrekvenser i kontrol fra de forventede under Hardy-Weinberg ligevægt blev vurderet ved χ

2 tests. Risiko for CRC forbundet med genotyper blev sammenlignet med odds ratio (OR) med tilsvarende konfidensintervaller (CIS) baseret på logistisk regression. Undersøgelse heterogenitet blev sammenfattet ved hjælp af en Mantel-Haenszel test, men vi antog, at undersøgelserne var stikprøver fra en almindelige befolkning og brugte en tilfældig effekt model til at sammenfatte eller skøn under dominante, recessive og additive penetrans modeller i metaanalyser. Resultaterne var repræsenteret ved skov plots som følger: konfidensintervaller for hver enkelt undersøgelse blev angivet med vandrette linjer, enlige yderste periferi af torve og summariske estimater med diamanter med vandrette grænser på konfidensgrænser og bredde omvendt proportional med den standard fejl. Meta-analyser blev udført ved hjælp af pakken

rmeta

i gratis software miljø for statistisk databehandling R.

Resultater

Fordelingen af ​​genotyper i kontrollerne ikke afvige fra Hardy -Weinberg ligevægt i enhver undersøgelse. Mantel-Haenszel tests identificeret undersøgelse heterogenitet for rs1800932 (

MSH6

P92P) under recessive og additiv penetrans, med p-værdier lig med 0,04 og 0,03 (tabel S2). Dette udgør ikke et stort problem, da dette SNP viste ingen forskelle mellem genotype fordelinger af sager og kontroller enten i enkelte studier eller i den globale analyse. Undersøgelse heterogenitet blev ikke fundet til noget andet SNP. Genotypebestemmelse resultater for de 6 SNPs baseret på studier 1-8 er vist i tabel S2.

Den eneste SNP, der var marginalt signifikant i meta-analysen var rs3219489 (

MUTYH

Q338H), begge under en recessiv model (resumé OR = 1,08, 95% CI 1,00-1,17; p = 0,05) og under forudsætning af additive allele effekter (resumé OR = 1,07, 95% CI 1,00-1,14; p = 0,06). Vi tilskriver det kombinerede resultat primært til den svenske undersøgelse, med individuelle yderste periferi på 1,18 (95% CI = 1,01-1,38, recessive model) og 1,19 (95% CI = 1,05-1,35, additive model) (tabel S2). Den goodness of fit var lidt bedre for recessive end for tilsætningsstoffet model og de recessive og additive modeller klart overgik den dominerende model.

I et forsøg på at validere resultaterne under recessiv arv, vi oprettet samarbejder med yderligere grupper og bedt om at genotype rs3219489 i deres kohorter. I sidste ende, yderligere 4234 tilfælde og 6800 kontroller blev inkluderet, tilføje op til i alt 12232 tilfælde og 13380 kontroller (tabel S3).

Vi har opdateret metaanalysen endnu engang overvejer alle prøver uanset tumor lokalisering samt stratificere dem for colon og rektal tumorer. Som vist i tabel S4, var tilgængelige data for 4573 tyktarmen og 1774 rektal kræfttilfælde. Resultater fra de opdaterede metaanalyser er præsenteret i figur 1. Den nye oversigt ELLER for tarmkræft var 1,03 (95% CI 0,97-1,10, sandsynlighed værdi 0,25) (Figur 1A). Resuméet ELLER var næsten identisk efter justering for alder og køn OR = 1,03 (95% CI 0,93-1,13). Undersøgelse heterogenitet blev ikke bemærket (P = 0,29, data ikke vist). Den kombinerede OR for tyktarmskræft var 1,07 (95% CI 0,99-1,16, sandsynlighed værdier 0,09 (OR = 1) og 0,37 (studie homogenitet) (figur 1B) og for endetarmskræft var 1,06 (95% CI 0,94 til 1,19, sandsynligheden værdier 0,37 (OR = 1) og 0,31 (studie homogenitet)) (figur 1C).

diskussion

i den aktuelle undersøgelse, vi udført en case-kontrol forening undersøgelse for seks ud af otte tidligere undersøgt SNPs [5]. for fem af dem, rs459552 (

APC

D1822V), rs1799977 (

MLH1

I219V), rs1800932 (

MSH6

P92P), rs1800935 (

MSH6

D180D) og rs3219484 (

MUTYH

V22M) prøver blev hentet fra otte yderligere undersøgelser på i alt 8308 tilfælde og 7434 kontroller. for sjette SNP, rs3219489 (

MUTYH

Q338H), som blev udvalgt på baggrund af lovende resultater fra to prøver af svensk oprindelse (undersøgelse 8 i nærværende manuskript og reference [5]), vi oprettet en endnu større replikation datasæt bestående 14 forskellige undersøgelser med i alt 12232 tilfælde og 13380 kontroller.

for alle SNPs inkluderet i analysen, vi var ude af stand til at bekræfte foreninger med CRC risiko findes i den svenske befolkning. Især recessive yderste periferi af CRC for rs3219489 faldet fra 1,52 i den oprindelige svenske undersøgelse til 1,18 i den svenske replikation kohorte, til 1,08 (95% CI 1,00-1,17) i det første meta-analyse og til 1,03 (95% CI 0,97 til 1.10) i den opdaterede meta-analyse (tabel S2). De sammenfattende yderste periferi i de udvidede metaanalyser var 1,07 (95% CI 0,99-1,16) for tyktarmskræft og 1,06 (95% CI 0,94-1,19) for endetarmskræft, i modsætning til resultater baseret på svenske prøver. Den opdaterede meta-analyse havde statistisk styrke på 99% at påvise en recessiv OR på 1,52 og en effekt på 89% til at påvise en recessiv OR på 1,18 (type I fejl på 5% og forekomsten af ​​CC genotyper blandt kontroller 5,6%). Biologisk plausibilitet var også eksisterende. MUTYH Q338H er interessant, fordi det repræsenterer en missense ændring i MUTYH protein, som er involveret i bunden excision reparation (BER) vej. En fælles produkt af oxidativ skade på 2′-deoxyguanosin er 7,8-dihydro-8-oxo-2′-deoxyguanosin (OG) [10], [11]. I pattedyrceller OG har vist sig at være yderst mutagene og fører til en forøget G → T transversioner, på grund af dets fejlkodning egenskaber, der forårsager en mispairing med en adenin under DNA-replikation at danne en stabil OG: En mismatch [11], [12]. Gruppefritagelsesforordningen vej spiller en vigtig rolle i at reparere denne type DNA-skader gennem virkningen af ​​mutY homolog

MUTYH

, i forening med

OGG1

MTH1

[11] , [13]. Det er velkendt, at biallele mutationer i

MUTYH

gen introducerer G: C til T: A-transversioner også i adenomatøs polypose coli (APC) genet, hvilket fører til genomisk ustabilitet og unormal og dis-reguleret celleproliferation i tyktarmsepitelet [14], [15]. Patienter med to mutationer i

MUTYH

gen udvikle

MUTYH

associeret polypose (MAP) syndrom [13].

Til dato, 85 forskellige MAP-associerede mutationer har vist sig [16], spredt over hele længden af ​​proteinet, men kun 3 (herunder Q338H) kort inden putative protein-interaktion domæner som afsløret ved den nyligt løste krystalstruktur hMUTYH [17]. Det er fristende at spekulere, at Q338H kan påvirke denne protein-protein interaktion, men yderligere eksperimentel støtte er berettiget.

De kontrasterende resultater på rs3219489 og dens samarbejde med CRC risiko i den svenske versus andre populationer kunne antyde, at effekten af denne variant er specifik for den svenske befolkning eller ikke stort nok i andre populationer, der skal detekteres med den foreliggende prøvestørrelse. For eksempel er den statistiske styrke af den opdaterede meta-analyse var kun 43% at detektere en recessiv OR på 1,10 (type I fejl på 5% og forekomsten af ​​CC genotyper blandt kontroller 5,6%). Et nærmere kig på de data, viser faktisk, at en af ​​de tyske kohorter (ESTHER) gav resultater i overensstemmelse med vores svenske kohorter, med OR = 1,36 (95% CI 1,00-1,86) for tarmkræft (figur 1A) og OR = 1,61 ( 95% CI 1,08-2,40) til rektal cancer (figur 1C). Dette er sandsynligvis en falsk resultat på grund af den lille størrelse af denne kohorte (318 tilfælde og 365 kontroller).

På den anden side, efter aftale med de svenske resultater er rs3219489 også vist sig at være forbundet med CRC risiko i tre uafhængige undersøgelser i den japanske befolkning [18], [19], [20] og blandt afrikansk-amerikanere (Yuan et al., 2. INSIGHT møde, Yokohama, Japan, upubliceret), selv om alle disse undersøgelser har en begrænset stikprøvestørrelse og resultaterne har brug for yderligere validering.

det er også muligt, at rs3219489 udgør en risiko-associeret variant i den svenske befolkning i kombination med miljøfaktorer i bred forstand. For eksempel kunne screeningsprogrammer for CRC i Sverige resultere i en diagnose tidligere i livet, således oppustning disse regioner anslået i Sverige. Et andet alternativ er, at polymorfi er i koblingsuligevægt med andre uidentificerede kausale varianter. Markøren og den kausale variant kunne være placeret på den samme risiko haplotypen i den svenske befolkning og på forskellige haplotyper i andre populationer.

Uafhængigt af ukendt årsag til replikation fiasko, resultaterne fra denne undersøgelse klart illustrerer muligheden for faldende effektstørrelser med stigende samlinger af individer, et fænomen kendt inden for området genetisk epidemiologi betegnet vinderens forbandelse [21]. Det skal erindres, at dette resultat snarere forventes i associationsstudier, især dem der beskæftiger sig med regionalt heterogene komplekse sygdomme.

Støtte oplysninger

tabel S1. .

Antal tilfælde og kontroller genotypede i de fjorten studier

doi: 10,1371 /journal.pone.0072091.s001

(DOC)

tabel S2.

Genotype tæller og allelfrekvenserne til rs459552 (APC D1822V), rs1799977 (MLH I219V), rs1800932 (MSH6 P92P), rs1800935 (MSH6 D180D), rs3219484 (MUTYH V22M) og rs3219489 (MUTYH Q338H). De estimerede odds ratio med intervaller for de enkelte undersøgelser 95% sikkerhedsgrænser vises også, sammen med kombineret yderste periferi, 95% SNG og sandsynligheden værdier for OR = 1 baseret på tilfældige effekter model og sandsynligheden værdier for undersøgelse homogenitet under dominerende, additiv og recessive penetrans.

doi: 10,1371 /journal.pone.0072091.s002

(DOC)

tabel S3.

Genotype tæller og allelfrekvenserne til rs3219489 (MUTYH Q338H)

doi:. 10,1371 /journal.pone.0072091.s003

(DOC)

Tabel S4.

Genotype tæller for kolon og rektal kræfttilfælde i studier med tilgængelige oplysninger om tumor placering

Doi:. 10.1371 /journal.pone.0072091.s004

(DOC)

Tak

Vi takker alle de patienter, der deltog i denne undersøgelse. Medlemmer af EPICOLON Consortium (Gastrointestinal Oncology Group for den spanske Gastroenterologisk Association):

Hospital 12 de Octubre, Madrid: Juan Diego Morillas (lokal koordinator), Raquel Muñoz, Marisa Manzano, Francisco Colina, Jose Díaz, Carolina Ibarrola, Guadalupe López, Alberto Ibáñez; Hospital Clinic, Barcelona: Antoni Castells (lokal koordinator), Virginia Piñol, Sergi Castellvi-Bel, Francesc Balaguer, Victoria Gonzalo, Teresa Ocaña, María Dolores Giraldez, Maria Pellisé, Anna Serradesanferm, Leticia Moreira, Miriam Cuatrecasas, Josep M. Piqué; Hospital Clínico Universitario, Zaragoza: Ángel Lanas (lokal koordinator), Javier Alcedo, Javier Ortego; Hospital Cristal-Pinor, Complexo Hospitalario de Ourense: Joaquin Cubiella (lokal koordinator), M

en Soledad Díez, Mercedes Salgado, Eloy Sánchez, Mariano Vega; Parc de Salut Mar, Barcelona: Montserrat Andreu (lokal koordinator), Anna Abuli, Xavier Bessa, Mar Iglesias, Agustín Seoane, Felipe Bory, Gemma Navarro, Beatriz Bellosillo; Josep M

en Dedeu, Cristina Álvarez, Marc Puigvehí; Hospital San Eloy, Baracaldo og Hospital Donostia, CIBERehd, University of Baskerlandet, San Sebastián: Luis Bujanda (lokal koordinator) Ángel Cosme, Inés Gil, Mikel Larzabal, Carlos Placer, María del Mar Ramírez, Elisabeth Hijona, Jose M. Enríquez- Navascués, Jose L. Elosegui; Hospital General Universitario de Alicante: Artemio Payá (EPICOLON I lokale koordinator), Rodrigo Jover (EPICOLON II lokale koordinator), Cristina Alenda, Laura Sempere, Nuria Acame, Estefanía Rojas, Lucía Pérez-Carbonell; Hospital General de Granollers: Joaquim Rigau (lokal koordinator), Ángel Serrano, Anna Giménez; Hospital General de Vic: Joan Saló (lokal koordinator), Eduard Batiste-Alentorn, Josefina Autonell, Ramon Barniol; Hospital General Universitario de Guadalajara og Fundación para la Formación e Investigación Sanitarias Murcia: Ana María García (lokal koordinator), Fernando Carballo, Antonio Bienvenido, Eduardo Sanz, Fernando González, Jaime Sánchez, Akiko Ono; Hospital General Universitario de Valencia: Mercedes Latorre (lokal koordinator), Enrique Medina, Jaime Cuquerella, Pilar Canelles, Miguel Martorell, José Ángel García, Francisco Quiles, Elisa Orti; CHUVI-Hospital Meixoeiro, Vigo: EPICOLON I: Juan Clofent (lokal koordinator), Jaime Seoane, Antoni tardio, Eugenia Sanchez. EPICOLON II M

en Luisa de Castro (lokal koordinator), Antoni tardio, Juan Clofent, Vicent Hernández; Hospital universitari tyskere Trias i Pujol, Badalona og afsnit af Digestive Diseases og Ernæring, University of Illinois i Chicago, IL, USA: Xavier Llor (lokal koordinator), Rosa M. Xicola, Marta Piñol, Mercè Rosinach, Anna Roca, Elisenda Pons, José M. Hernández, Miquel A. Gassull; Hospital Universitari Mutua de Terrassa: Fernando Fernández-Bañares (lokal koordinator), Josep M. Viver, Antonio Salas, Jorge Espinos, Montserrat Forné, Maria Esteve; Hospital Universitari Arnau de Vilanova, Lleida: Josep M. Renè (lokal koordinator), Carmen Piñol, Juan Buenestado, Joan Viñas; Hospital Universitario de Canarias: Enrique Quintero (lokal koordinator), David Nicolás, Adolfo Parra, Antonio Martín; Hospital Universitario La Fe, Valencia: Lidia Argüello (lokal koordinator), Vicente Pons, Virginia Pertejo, Teresa Sala; Hospital Sant Pau, Barcelona: Dolors Gonzalez (lokal koordinator) Eva Roman, Teresa Ramon, Maria Poca, M

en Mar Concepción, Marta Martin, Lourdes Pétriz; Hospital Xeral Cies, Vigo: Daniel Martinez (lokal koordinator); Fundacion Publica Galega de Medicina Xenomica (FPGMX), CIBERER, Genomisk Medicin Group-Universitetet i Santiago de Compostela, Santiago de Compostela, Galicia, Spanien: Ángel Carracedo (lokal koordinator), Clara Ruiz-Ponte, Ceres Fernández-Rozadilla, M

et Magdalena Castro; Hospital Universitario Central de Asturias: Sabino Riestra (lokal koordinator), Luis Rodrigo; Hospital de Galdácano, Vizcaya: Javier Fernández (lokal koordinator), Jose Luis Cabriada; Fundación Hospital de Calahorra (La Rioja) La Rioja: Luis Carreño (lokal koordinator), Susana Oquiñena, Federico Bolado; Hospital Royo Villanova, Zaragoza: Elena Peña (lokal koordinator), José Manuel Blas, Gloria Cena, Juan José Sebastián; Hospital Universitario Reina Sofía, Córdoba: Antonio Naranjo (lokal koordinator)

.