PLoS ONE: Differential Virkninger af lovastatin på Cisplatin Responses i normalt humant mesotelceller versus Cancer Cells: Betydning for Therapy

Abstrakt

kræft dræbende effekt af standard kemoterapeutiske midler såsom cisplatin (CDDP) er begrænset af deres bivirkninger til normale væv. Derfor forskningsindsats optimere sikkerheden og effekten af ​​disse agenter er klinisk relevant. Vi gjorde skærm til agenter, der specifikt beskytter normale humane mesotelceller mod CDDP uden at reducere kræft celledræbende effekt. Lovastatin blev identificeret fra skærmen. Lovastatin ved en farmakologisk relevant koncentration stærkt anholdt spredning af normale celler, mens kræftceller var mindre påvirket. CDDP-induceret DNA-skade respons blev ikke aktiveret og normale celler viste øget tolerance over for CDDP når normale celler blev behandlet med kombinationen af ​​CDDP og lovastatin. Vi viser, at forstyrre protein geranylgeranylering er involveret i lovastatin-medieret CDDP beskyttende virkning i normale celler. I modsætning til normale celler, i cancerceller lovastatin ændrede ikke CDDP-induceret respons, og cancerceller blev ikke beskyttet af lovastatin. Endvidere lovastatin ved den farmakologiske relevante koncentration

per se

induceret DNA-skader, oxidativt stress og autofagi i cancerceller men ikke i normale mesotelceller. Derfor er vores data tyder på, at lovastatin har et potentiale til at forbedre det terapeutiske indeks af cisplatin-baseret behandling

Henvisning:. Shi Y, Felley-Bosco E, Marti TM, Stahel RA (2012) Differential Effekter af lovastatin på cisplatin Responses i normalt humant mesotelceller versus Cancer Cells: Betydning for terapi. PLoS ONE 7 (9): e45354. doi: 10,1371 /journal.pone.0045354

Redaktør: Abdelilah Aboussekhra, King Faisal Specialist Hospital Research Center, Saudi-Arabien

Modtaget: Maj 14, 2012; Accepteret: August 20, 2012; Udgivet: September 17, 2012 |

Copyright: © Shi et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af Stiftung für Angewande Krebs Forschung (3.41718.14), Winkelwiese 6, 8001 Zürich. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Cisplatin (CDDP) er et standard kemoterapeutisk middel til behandling af forskellige faste tumorer. Imidlertid bivirkninger til normale væv resulterer i begrænset tolerance hos patienter [1]. Således ville terapeutiske strategier omgår de toksiske bivirkninger af CDDP være velkommen og kan forbedre det terapeutiske resultat.

Tab eller svækkede cellecykluskontrolpunkter er blandt de mest universelle ændringer i kræftceller, hvilket resulterer i nedsat følsomhed over for spredningsfølsomme hæmmende signalering, der normalt indlede en række reaktioner, herunder proliferationsstandsning, aktivering af mekanismer selv-beskyttelsesforanstaltninger mod spændinger, differentiering, eller celledød [2]. Under visse spredningsfølsomme begrænsende betingelser, normale celler standse deres replikation og derved kan være beskyttet fra toksicitet spredning-afhængige midler, f.eks DNA-skadelige midler. Men kræftceller, på grund af deres reducerede følsomhed over for spredning-hæmmende signalering, kan ikke rigtigt arrestere deres cellecyklus og derfor selektivt dræbt under disse betingelser [3] -. [6]

Vores mål var at finde agenter som kunne beskytte normale celler mod cisplatin cytotoksicitet og samtidig tillade dræbe cancerceller. Derfor har vi nedsat en to-trins-skærm: først, vi screenede en række forbindelser til forskellige virkninger på udbredelsen af ​​normal mesothelial

versus

lungehindekræft celler; sekund, blev kombineret handlinger CDDP med disse differentierende midler afprøvet i normale celler at identificere midler, som gør normale celler tolerante over for CDDP cytotoksicitet samtidig med at cancerceller drab.

Lovastatin blev identificeret fra vores skærm. Som et kolesterolsænkende lægemiddel, lovastatin virker ved at inhibere HMG-CoA-reduktase, det hastighedsbegrænsende enzym i cholesterolbiosyntese pathway [7]. Blokering af kolesterol syntesevejen også resulterer i udtømning af isoprenoid-dele derved interfererer med protein isoprenylering, som er en afgørende regulerende trin i mange biologiske procedurer [7]. Derfor, ud over den kolesterolsænkende funktion, lovastatin også udfører pleiotrope biologiske roller i reguleringen af ​​celleproliferation, apoptose, overlevelse, differentiering, migration og cellulær vesikeltrafik [7] – [9]. Vores data viser, at lovastatin har et potentiale til at øge den terapeutiske indeks CDDP.

Den eksperimentelle protokol for undersøgelse af agenter beskytter normale celler mod CDDP cytotoksicitet er vist i (A). Cellecyklus profiler af normal SDM104 (B) og (C), og ZL55 cancerceller (D) og (E) af kontrol uden behandling (B) og (D) eller 24 timers behandling med 2 pM lovastatin (C) og ( E) er vist (n = 3). Celler blev udsat for 10 uM BrdU i en time før høst for FACS-analyse.

Materialer og metoder

cellekulturer og reagenser

Normale humane mesoteliale primære celler og cancerceller blev dyrket i M199 (Invitrogen) /MCDB105 (Sigma) (01:01) blandet medium suppleret med 15% FCS, 10 ng /ml EGF, og 0,4 ug /ml hydrocortison som beskrevet [10]. Den humane mesotheliom cellelinie ZL55 [11] og den primære normale cellekultur SDM104 [12] blev dannet i vores laboratorium. Brystkræft cellelinien MCF-7 [13] og human lunge-adenocarcinom-cellelinje A549 [14] blev indkøbt fra American Type Culture Corporation (Manassas, VA). Den primære normale cellekultur LP9 [15] var fra Dr. James Rheinwald laboratorium. Den primære normale cellekultur SDM85 blev etableret fra en normal pleural væv modtaget fra en patient, der undergår cancer relateret thoraxkirurgi. Undersøgelsen blev godkendt af Zürich Universitetshospital etik udvalg og et skriftligt informeret samtykke blev opnået fra patienten. Alle cellelinier anvendt i dette studie blev autentificeret af fingeraftryk (Microsynth, Balgach, Schweiz). Lovastatin (Alexis Biochemicals) blev omdannet til den aktive syreform som beskrevet [16] og anvendt i en koncentration på 2 uM i de fleste eksperimenter. Cisplatin (0,5 mg /ml saltvandsopløsning) blev indkøbt fra Ebewe Pharma; mevalonat, GGPP og FTI-277 fra Sigma; GGTI-298 fra Calbiochem. Anti-ATM-Ser1981 (Epitomics), anti-ATM (2C1) (Gene Tex), anti-γ-H2AX (Ser139) (Millipore), anti-LC3B (Abcam), anti-phospho-p53 (Ser15) (Cell Signaling Technology), anti-p53, anti-β-actin anti-Hæm oxygenase 1 (HO 1), anti-p21, anti-H-Ras, anti-Rap1a og anti-vinculin (Santa Cruz) blev anvendt ifølge produktet instruktioner. Til Western blot-detektion af ATM, blev proteinekstrakter kørt i 5% SDS-polyacrylamidgel mens anvendtes resten 13,5% SDS-polyacrylamidgel.

Resultater af MTT-assays med primært dyrkede normale celler ( SDM104, SDM85 og LP9) og cancerceller (ZL55, A549 og MCF-7) efter behandlinger med CDDP alene, lovastatin (2 uM) alene eller begge sammen er vist i (A) (n = 6; * P 3,0 × 10

-5). I (B), blev MTT-assays udført efter SDM104 celler blev behandlet med forskellige koncentrationer af lovastatin alene eller lovastatin sammen med 20 pM CDDP (n = 6; * P 0,002; ** P 3,0 × 10

-5); L0.5, L1, L2 og L4 står for 0,5 uM, 1 uM, 2 uM og 4 um lovastatin, henholdsvis; og C for CDDP. I (C), blev MTT-assays udført efter SDM104 celler blev behandlet med 2 pM lovastatin alene, CDDP af forskellige koncentrationer alene, eller begge sammen (n = 6; * for P 0,02; ** P 1,0 x 10

-5); C5, C10, og C20 stå i 5 uM, 10 uM og 20 uM CDDP henholdsvis.

En ordning for kolesterol biosyntesevejen er vist i (A). I (B) og (C), blev 20 uM CDDP tilsættes efter 8 timer præinkubering med 2 pM lovastatin i nærvær eller fravær af 200 uM mevalonat (B) eller 100 uM Q10 (C), derefter celler blev dyrket i en anden 16 timer i nærvær af CDDP og andre midler sammen (n = 6; * P 7,0 × 10

-7). MTT-assays blev udført efter behandlingerne sluttede og cellerne blev dyrket igen i frisk medium i 24 timer. I (B) og (C), “L” står for lovastatin, “M” for mevalonat.

Cell Proliferation og Cell Cycle Analysis

MTT proliferation assay blev udført som beskrevet [17]. For forbindelsen skærmen, blev analysen af ​​fordelingen cellecyklus udført som følger: celler blev høstet efter 24 timers behandling med forskellige midler, vasket med PBS og fikseret i 70% ethanol natten over ved 4 ° C. Efter propidiumiodid (PI) (Sigma) farvning, flowcytometri (FACS) -analyse blev udført med FACSCalibur (FACScan, BD Biosciences) og data blev analyseret med ModFit LT 3.2.1 software. For detaljerede FACS-analyse af lovastatin-behandlede celler blev celler eksponeret for 10 uM BrdU i en time før høst. Celler blev høstet efter 24 timer lovastatin-behandling og fikseret i 70% ethanol. Efter anti-BrdU-antistof (BD Biosciences) /Sekundær Alexa488-konjugeret gede-anti-muse (Invitrogen) og PI-farvning, blev FACS-analyse udført med FACSCalibur og data blev analyseret med Summit v4.3 software. Den statistiske signifikans blev udført med to-halet t-test.

Resultater af Western blot med anti-H-Ras-antistof (A) og anti-Rap1a antistof (C) er vist. Proteinekstrakter blev foretaget lige efter normal SDM104 celler blev behandlet med forskellige forbindelser i 16 timer. p-actin anvendt som ladningskontrol for Western. I (B), blev 20 uM CDDP tilsættes efter 8 timer præinkubering med 10 pM GGTI-298 (GGTI) eller 10 pM FTI-277 (FTI), og derefter blev cellerne dyrket i yderligere 16 timer i nærvær af CDDP og hæmmerne sammen (n = 6; * for P 3,0 × 10

-4; ** P 2,0 × 10

-6). I (D), blev 20 uM CDDP tilsættes efter 8 timer præinkubering med 2 pM lovastatin i nærvær eller fravær af 10 uM GGPP, og derefter blev cellerne dyrket i yderligere 16 timer i nærvær af CDDP og forbindelserne sammen (n = 6; ** P 2,0 × 10

-6). I (B) og (D), blev MTT-assays udført efter behandlingerne sluttede og cellerne blev dyrket igen i frisk medium i 24 timer. “L” står for lovastatin.

Western blot-analyse af komponenter i DNA-skade responset i SDM104 normale celler (A) og cancerceller (B) efter behandling med CDDP i nærvær eller fravær af lovastatin er vist. Vinculin og β-actin blev anvendt som indlæsning kontrol. For CDDP behandling blev celler dyrket i nærværelse af 8 uM CDDP i 16 timer; for lovastatin blev celler dyrket i nærvær af 2 uM lovastatin i 24 timer; for kombinationen af ​​CDDP og lovastatin, 8 pM CDDP blev tilsat 8 timer efter 2 uM lovastatin præinkubation, så celler dyrket i yderligere 16 timer i nærvær af CDDP og lovastatin sammen.

Resultater

Lovastatin differentielt påvirket Cell Proliferation af Normal

versus

cancerceller og specifikt Beskyttede normale celler fra CDDP Cytotoksicitet

in vitro

skærmen for midler, som kunne beskytte normale celler mod cisplatin-induceret cytotoksicitet blev udført i to trin. I det første trin, vi studerede litteratur og udvalgte kandidat agenter fra som vi fandt tegn på, at de forskelligt kan påvirke spredning af normale

versus

kræftceller. Cellecyklus profiler af normale humane mesothelial SDM104 og humane mesotheliom ZL55 celler blev analyseret 24 timer efter udsættelse for kommercielt tilgængelige midler, der vides at interferere med celleproliferation. Nogle af de midler, der viser forskellige virkninger på cellecyklusfordeling i normal

versus

cancerceller er anført (tabel 1). I det andet trin, testede vi, hvilke af de udvalgte agenter beskyttet normale celler fra CDDP (figur 1A). Lovastatin, en FDA-godkendt cholesterolsænkende lægemiddel, blev identificeret i det andet trin.

Western blot-analyse af autophagy markør LC3B-II og oxidativ stress markør HO-1 i normale (SDM104) celler (A) og cancer (ZL55) celler (B) efter behandling med CDDP i nærvær eller fravær af lovastatin er vist. p-actin blev anvendt som indlæsning kontrol. For CDDP behandling blev celler dyrket i nærværelse af 8 uM CDDP i 16 timer; for lovastatin blev celler dyrket i nærvær af 2 uM lovastatin i 24 timer; for kombinationen af ​​CDDP og lovastatin, 8 pM CDDP blev tilsat 8 timer efter 2 uM lovastatin præinkubation, så celler dyrket i yderligere 16 timer i nærvær af CDDP og lovastatin sammen.

Lovastatin ved den farmakologiske relevante koncentration [18] af 2 uM i normale celler reduceres mere end 98% af S-fase celler i og omkring 14% af G2 /M-celler, mens der var ca. 47,8% stigninger i G0 /G1 celler (Figur 1C ), i sammenligning med ubehandlede kontrol (figur 1B). I modsætning hertil i cancerceller var der stadig omkring 20% ​​af S-fase celler resterende og begge G0 /G1 celler og G2 /M-celler blev forøget 58% og 77,7%, henholdsvis (figur 1E) efter lovastatin-behandling, sammenlignet med ubehandlet kontrol (figur 1D). Således viste lovastatin forskellige effekter på spredning af normale celler

versus

kræftceller. I overensstemmelse med ændringer observeret i cellecyklus, behandling med lovastatin alene, undertrykte signifikant spredning af normale (P 1,0 × 10

-6), og kræft ZL55 (P 0,001) og MCF-7 (P 0,001) celler sammenlignet med ubehandlede kontroller (figur 2A).

antallet af normale SDM104 celler efter den kombinerede behandling af CDDP og lovastatin var 3,8 gange højere i forhold til celleantallet observeret efter behandling med CDDP alene. Denne beskyttende virkning mod CDDP toksicitet blev også observeret i yderligere to normale primære kulturer SDM85 og LP9 (figur 2A). Den lovastatin-medieret beskyttende virkning syntes specifikt for normale celler, idet ingen af ​​de testede cancercellelinier, human mesotheliom ZL55, human brystcancer MCF-7 og human lunge adenocarcinom A549, blev beskyttet (figur 2A).

En lovastatin dosisrespons for beskyttende virkning mod CDDP cytotoksicitet blev udført med SDM104 celler. Lovastatin dosisafhængigt reduceret cellevækst imidlertid den maksimale beskyttende virkning blev observeret allerede ved 2 uM (figur 2B). Således blev 2 pM lovastatin anvendte koncentration i de fleste af vores eksperimenter. Fordi lovastatin-medieret beskyttelse af normale celler var knyttet til celle cyklus arrest, CDDP-beskyttende virkninger var kun synlige ved høj CDDP koncentration (10-20 uM) hvor reduktion i celle nummer på grund af cytotoksicitet var højere end lovastatin-induceret celle nummer reduktion på grund til proliferationsstandsning (Figur 2C).

Blokering af kolesterol biosyntesevejen men ikke Ubiquinon Synthesis er påkrævet for lovastatin-medierede Beskyttelse af normale celler fra cisplatin toksicitet

Som et lipidsænkende middel, lovastatin virker til at inhibere HMG-CoA-reduktase, det hastighedsbegrænsende enzym af cholesterol biosyntesevejen [7] (figur 3A). Vi undersøgte, om at blokere kolesterol biosyntesevejen er nødvendig for lovastatin-medierede beskyttelse af normale celler mod CDDP ved at teste virkningerne af mevalonat, som er det umiddelbare produkt af HMG-CoA-reduktase-katalyseret reaktion i cholesterol-biosyntesevejen [7] ( Figur 3A). Tilsætning af mevalonat helt vendt de hæmmende virkninger af lovastatin på celleproliferation. Lovastatin ikke beskyttede normale celler mod CDDP i nærvær af mevalonat (figur 3B), hvilket indikerer, at lovastatin beskytter normale celler ved at blokere cholesterol biosyntetiske pathway. Tilsætningen af ​​ubiquinon (coenzym Q10) i normale celler ikke ændrede enten den inhibitoriske virkning af lovastatin på celleproliferation eller beskyttelse fra CDDP (figur 3C), som angiver interferens med ubiquinon syntese er ikke involveret i den observerede beskyttelse af normale celler.

Beskyttelse af normale celler fra cisplatin toksicitet medieres gennem lovastatin-induceret Interferens af protein geranylgeranylering

Lovastatin interfererer med protein isoprenylering (herunder farnesylering og geranylgeranylering) gennem nedbryder isoprenoid donorer farnesylpyrophosphat (FPP) og geranylgeranylpyrophosphat (GGPP) [7] (figur 3A og 4A og 4C). Farnesyltransferase-inhibitor (FTI-277), som specifikt inhiberer farnesylering af små G-proteiner, fx farnesylering af H-Ras (figur 4A), men ikke protein geranylgeranylering, fx geranylgeranylering af Rap1a i normale SDM104 celler (figur 4C). FTI-277 viste meget svagere proliferation inhibitorisk virkning på normale celler (figur 4B) end lovastatin (figur 3B), og dets CDDP-beskyttende virkning på normale celler (figur 4B) var også svagere end lovastatin (figur 3B). Den specifikke hæmning af geranylgeranylering af en geranylgeranyltransferase-I-inhibitor (GGTI-298) (figur 4C), der ikke påvirkede farnesylering (figur 4A), inhiberede kraftigt proliferationen af ​​normale celler og beskyttede dem mod cisplatin toksicitet (figur 4B) ligner lovastatin (figur 3B). I overensstemmelse med disse iagttagelser, celleproliferationen-inhiberende virkninger og CDDP beskyttende virkning af lovastatin for normale celler blev dramatisk undertrykt ved tilsætning af GGPP (figur 4D), der vendt lovastatin-medieret hæmning af geranylgeranylering (figur 4C), men ikke farnesylering (figur 4A). Således vores data viser, at lovastatin-medieret beskyttelse af normale celler fra CDDP toksicitet er primært på grund af GGPP udtømning-induceret hæmning af geranylgeranylering.

Lovastatin Forhindrer Aktivering af CDDP-induceret DNA-skader Responses i normale celler, men inducerer DNA-skader Responses i kræftceller

for yderligere at udforske den mekanisme af lovastatin-medieret forskellige virkninger på normal

versus

kræftceller, svarene fra normal

versus

kræftceller var undersøgt i flere detaljer. Som forventet CDDP aktiveret DNA beskadigelse respons [19] – [22] i normale celler: phosphoryleringen af ​​ATM, den deraf følgende akkumulering af DNA-skade markør phospho histon H2AX på serin 139 (γ-H2AX), phosphorylering og akkumulering af p53, og akkumuleringen cellecyklussen inhibitor p21 (figur 5A). Men bortset fra p21 opregulering, DNA beskadigelse respons blev ikke påvist, når celler blev behandlet med lovastatin 8 timer før og under CDDP-behandling (figur 5A), hvilket indikerer, at lovastatin, ved standsning af cellevækst, undertrykt DNA beskadigelse respons og beskyttede normale celler fra CDDP-induceret cytotoksicitet. Lovastatin-induceret opregulering af p21 blev sandsynligvis gennem en p53-uafhængig vej siden blev observeret nogen påviselig aktivering af p53 i normale celler behandlet med lovastatin alene (figur 5A).

I kræftceller, i modsætning til normal celler, blev den CDDP-induceret DNA-skade responset herunder aktivering af ATM, akkumulering af γ-H2AX og p53 ikke ændret i den kombinerede behandling med lovastatin (figur 5B). Vigtigere er det, mens lovastatin alene ikke inducerede yderligere reaktion undtagen p21 opregulering i normale celler (figur 5A), det resulterede i øgede niveauer af P-ATM, p53 og γ-H2AX i cancerceller (figur 5B), hvilket indikerer, at lovastatin på den farmakologiske relevante koncentration af 2 uM

per se

inducerer DNA-skader i kræftceller.

Lovastatin inducerer autophagy og oxidativt stress i Cancer, men ikke normale celler

i overensstemmelse med andre undersøgelser rapporterer lovastatin- induceret autophagy [23] – [25], observerede vi, at lovastatin udløste opregulering af autofagi markør LC3B-II [26] i cancerceller (figur 6B). Imidlertid LC3B-II var ikke opreguleret i lovastatin-behandlede normale celler (figur 6A). Lovastatin også induceret oxidativt stress angivet ved ekspression af hæm oxygenase-1 (HO-1) [27] i cancerceller (figur 6b), som ikke blev detekteret i normale SDM104 celler enten (figur 6A). Derfor lovastatin inducerer autophagy og oxidativt stress i kræft, men ikke normale celler.

Diskussion

Bivirkninger af lægemidler mod cancer forringer patienternes livskvalitet og påvirke terapeutiske virkning [28]. Vi identificerede lovastatin fra en screening for midler, som reducerede cisplatin-induceret toksicitet i normale celler, mens tillader cancercellerne, der skal dræbes. Lovastatin ikke kun formidlede den CDDP beskyttende virkning for normale celler, men også induceret DNA-skader, oxidativt stress og autofagi specifikt i kræftceller.

Beskyttelsen af ​​normale celler mod CDDP er i overensstemmelse med de tidligere observationer, lovastatin beskyttede humane endotelceller (HUVEC) fra de toksiske virkninger af lægemidler mod cancer doxorubicin og etoposid og drab på ioniserende stråling

in vitro

[29], [30]. Lovastatin også reduceret ioniserende stråling-induceret normal vævsskade og beskyttet mod antracyklin-induceret kardiotoksicitet

in vivo

[31], [32].

Vi viste, at lovastatin medieret CDDP beskyttende virkning i normal celler ved en koncentration på 2 uM, hvilket er i området fra den farmakologisk opnåelige serumkoncentration af lovastatin (2,3 ± 1,27 uM) [18], hvilket betyder øjeblikkelig gennemførlighed af klinisk gennemførelse af lovastatin behandling af cancerpatienter, der får dette lægemiddel. Lignende koncentration var blevet anvendt til beskyttelse af muse CHO-celler fra doxorubicin, og inhiberingen af ​​geranylgeranylering blev foreslået at være involveret i den beskyttende virkning [33]. Vi viste her, at en lignende mekanisme fungerer også i lovastatin-medierede beskyttelse af normale humane celler fra CDDP. Vi bekræftede yderligere, at den beskyttende virkning af lovastatin skyldes hovedsagelig en geranylgeranylering-afhængig mekanisme, eftersom GGTI men ikke FTI viste en lignende virkning som lovastatin i at beskytte normale humane celler fra CDDP-toksicitet.

geranylgeranylerede proteiner er involveret i kontrol af celleproliferation [9]. Reduktionen af ​​denne post-translationel modifikation kan være ansvarlig for cellen proliferationsstandsning observeret i normale celler efter behandling med lovastatin. Det er kendt, at behandlingen af ​​CDDP-DNA-addukter i replikerende celler fører til DNA-beskadigelse [19], [34]. Derfor replikationsdefekte hvilende eller -inhibited celler bliver resistente over for CDDP. Dette kan også forklare, hvorfor lovastatin ikke beskytter kræftceller, hvor spredning-inhiberende virkninger af lovastatin kan antagoniseres af onkogene mutationer [35].

Nylige undersøgelser har fornyet det terapeutisk interesse for inhibitorer af cholesterol biosyntetiske i brystkræft med p53 mutationer, da de bliver meget afhængige af denne vej [36]. I to af de testede cancercellelinier (ZL55 og MCF-7) vi observeret et signifikant fald af celleproliferation efter behandling med lovastatin, hvilket indikerer, at selv p53-dygtige tumorer kan være følsomme over for en vis grad væksthæmmende effekter af lovastatin-terapi. I modsætning til normale celler, hvor virkningen på proliferation resulterede fra inhibering af DNA-replikation kan lovastatin-medieret fald i celleproliferation i cancerceller tilskrives DNA beskadigelse-afhængige G

0 /G

1 arrest . På grund af den mindre fald i S-fase celler, blev cancerceller ikke er beskyttet af lovastatin fra den cytotoksiske virkning af CDDP.

Det er kendt, at lovastatin undertrykker proliferation og induceret oxidativ stress, autofagi og apoptose i cancerceller

in vitro

[24], [37] – [45]. I overensstemmelse med disse observationer, lovastatin hæmmede tumorvækst [25] og forstærkede antitumoraktivitet af doxorubicin og CDDP

in vivo

[46], [47] og lang tids brug af statin er forbundet med lavere risiko for mange kræftformer [48], [49]. Her viser vi endvidere, at disse lovastatin-induceret skadevirkninger ske specifikt i kræft, men ikke normale celler.

Derfor er vores data viser, at lovastatin har et potentiale for at beskytte normale celler fra CDDP toksicitet uden at reducere følsomheden af ​​kræft celler til CDDP-baseret behandling og derved forbedre det terapeutiske indeks.

tak

Vores særlige tak går til alle medlemmer i Laboratoriet for Molekylær Oncology USZ for deres venlige hjælper og stimulerende diskussioner. Vi er taknemmelige for Dr. James Rheinwald (Harvard Medical School) for venligt give os LP9 celler.