PLoS ONE: nedregulering af GEP100 Årsager Stigning i E-cadherin Niveauer og Hæmmer kræft i bugspytkirtlen Cell Invasion

Abstrakt

Mål

Invasion og metastase er store årsager til kræft i bugspytkirtlen død og identificere signalmolekyler, der specifikt anvendes i tumor invasion er af stor betydning. Formålet med denne undersøgelse var at belyse den rolle, GEP100 i bugspytkirtelkræft celle invasion og metastase og den tilsvarende molekylære mekanisme.

Metoder

Stabile cellelinjer med GEP100 bankede-down blev fastlagt ved transfektion GEP100 shRNA vektor i PaTu8988 celler og udvalgt af puromycin. QRT-PCR og Western blot blev udført for at detektere genekspression. Matrigel-invasion assay blev anvendt til at detektere cancercelleinvasion

in vitro

. Levermetastaser

in vivo

blev bestemt ved milt injektion af angivne cellelinjer efterfulgt af milt resektion. Immunofluorescens undersøgelse blev anvendt til at påvise den intracellulære lokalisering af E-cadherin.

Resultater Salg

Vi fandt, at ekspressionsniveauet af GEP100 protein blev nært beslægtet med det invasive evne et panel af 6 forskellige humane kræft i bugspytkirtlen cellelinjer. Nedregulering af GEP100 i PaTu8988 celler faldt betydeligt invasiv aktivitet af Matrigel invasion assay, uden at påvirke migration, invasion og levedygtighed. Den inhiberede invasiv aktivitet blev reddet ved overekspression af GEP100 cDNA.

In vivo

undersøgelse viste, at levermetastaser blev signifikant reduceret i PaTu8988 celler med GEP100 stabilt bankede ned. Endvidere en epitel-lignende morfologisk ændring, efterligner en mesenchymal epitel- overgang (MET) blev induceret ved GEP100 nedregulering. Ekspressionen af ​​E-cadherin protein blev forøget 2-3 folder ledsaget af sin omfordeling til de celle-celle kontakter, mens der sås ingen åbenlyse ændringer til E-cadherin mRNA. Uventet blev mRNA Slug steget med GEP100 knock-down.

Konklusion

Disse resultater forudsat vigtigt bevis for, at GEP100 spiller en væsentlig rolle i bugspytkirtlen invasion kræft gennem regulering af ekspressionen af ​​E-cadherin og processen med behandling, hvilket indikerer muligheden for at det bliver en potentiel terapeutisk mål mod kræft i bugspytkirtlen

Henvisning:. Xie Cg, Wei Sm, Chen Jm, Xu Xf, Cai Jt, Chen Qy, et al. (2012) nedregulering af GEP100 Årsager Stigning i E-cadherin Niveauer og Hæmmer kræft i bugspytkirtlen Cell Invasion. PLoS ONE 7 (5): e37854. doi: 10,1371 /journal.pone.0037854

Redaktør: Aamir Ahmad, Wayne State University School of Medicine, USA

Modtaget: Januar 23, 2012; Accepteret: April 30, 2012; Udgivet: 25. maj 2012