PLoS ONE: Fordeling af Bone-marvafledte Endotel og immunceller i en murine Colitis-Associated Kolorektal Cancer Model

Abstrakt

Inflammatorisk tarmsygdom (IBD) kan føre til en øget risiko for at udvikle kolorektal cancer ( CRC). Formålet med denne undersøgelse var at etablere en model for kombineret knoglemarvstransplantation (BMT) og colitis-associerede kolorektal cancer (CAC) og definere bidrag BM-afledte celler under inflammation forbundet med carcinogenese. Vi har etableret en model for BMT bruge grønne fluorescerende protein (GFP) transgene mus, efterfulgt af AOM /DSS-induceret CAC, og udførte konfokal mikroskopi analyse på

in vivo

levende væv og frosne tumor sektioner. Vores imaging analyser viste, at GFP-positive celler ekstensivt infiltreret tumoren stroma og at nogle WGA og GFP eller CD31 og GFP dobbelt-positive celler blev observeret i foring af tumorkar. Flowcytometrianalyse af tumorinfiltrerende celler viste, at GFP-positive CD11c + DC’er celler var en tredjedel af GFP + /CD11C- celler, og at halvdelen af ​​disse DC’er (0,96% versus 1,02%) blev GFP-positive BM-afledte celler. Størstedelen af ​​CD4

+ T-celler var GFP-negative (12,02% versus 1,9%), og vi opdagede en hidtil ukendt CD4

+ CD11 c

+ DC delmængde (0,34% versus 1,64%). Afslutningsvis definerede vi distributionen af ​​BM-afledte endotelceller, CD11c

+ DC’er og CD4

+ T-celler i tumorer. Denne model kan være nyttigt til belysning af forskellige BM-afledte celletyper og funktioner under progressionen af ​​colitis-associerede kolorektal cancer

Henvisning:. Xiao CX, Wang HH, Shi Y, Li P, Liu YP, Ren JL, et al. (2013) Fordeling af Bone-marvafledte Endotel og immunceller i en murine Colitis-Associated Colorectal Cancer Model. PLoS ONE 8 (9): e73666. doi: 10,1371 /journal.pone.0073666

Redaktør: Shi Yu Yang, University College London, England

Modtaget: 12. maj 2013; Accepteret: 19 Jul 2013; Udgivet 10. september, 2013 |

Copyright: © 2013 Xiao et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (nr 81.072.013 og 91.229.201), grundforskning fondene til de centrale universiteter i Kina (nr 2010111082) og Foundations of Health Bureau of Xiamen i Kina (nr 3502Z200940010). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Kolorektal cancer (CRC) er en af ​​de førende årsager til kræft-relaterede dødsfald i den vestlige halvkugle. Dens udvikling forekommer sporadisk eller kan være en langsigtet komplikation ved kronisk inflammation, som ses i inflammatorisk tarmsygdom (IBD) [1]. Den kumulative risiko for at erhverve CRC kan stige til ca. 20% hos patienter med IBD, der bor i 30 år med sygdommen [2,3]. Colitis-associerede coloncancere udvikle kronisk betændt slimhinde og menes at udvikle sig på en trinvis måde, med den betændte slimhinde giver anledning til dysplasi og i sidste ende til kræft. Kronisk inflammation menes at fremme carcinogenese. Kliniske undersøgelser har vist, at patienter med colitis har en 2- til 8-fold relative risiko for udvikling af colorektalcancer forhold til den almindelige befolkning [4].

Mus givet DSS at inducere inflammation (AOM /DSS) viser en øget forekomst og omfanget af colon tumordannelse sammenlignet med vildtypemus [5]. Individuelle komponenter af de medfødte og adaptive immunrespons har også været impliceret i carcinogenese [4]. Proinflammatoriske faktorer fra de medfødte og adaptive immunforsvar bidrager til udvikling og vækst af kolon neoplasi. Knoglemarvafledte progenitorceller, der bidrager til det inflammatoriske respons og tumor neovaskularisation, er blevet foreslået at have forskellige roller i tumorudvikling. Men lidt er kendt om den rolle, knoglemarv-afledte celler i colitis-associerede tyktarmskræft (CAC) [6].

Bone marv-afledte celler er overraskende plast [7], undertiden under forudsætning funktioner uden for hæmatopoietiske system. Ved knoglemarvstransplantation (BMT) modtagere, har forskere fundet donor-afledte celler i forskellige ikke-hæmatopoietiske væv, såsom skeletmuskel, hjertemuskel, vaskulært endotel, neuronale celler og epitelceller [8]. Knoglemarvafledte celler er også blevet vist at spille flere roller i tumorudvikling. Knoglemarvs-afledte endotelceller progenitorceller (EPC’er) bidrager til tumor-neovaskularisering, hvorimod celler af umodne myeloide linje, der har forskellige roller i tumorudvikling som cancer-initierende celler virker som tumorassocierede fibroblaster, der orkestrere desmoplastiske reaktion [9].

overbevisende beviser støtter den opfattelse, at knoglemarvafledte celler spiller en vigtig rolle i reguleringen af ​​tumor angiogenese og progression [10-12] og kan bidrage til tumorangiogenese ved at udskille pro-angiogene faktorer eller ved direkte inkorporering i tumoren vaskulatur [13,14]. Cirkulerende EPC’er mobiliseret fra knoglemarven er blevet påvist i det perifere blod hos adskillige arter og har vist sig at være involveret i neoangiogenese i tumorer samt i dannelsen af ​​nye fartøjer efter traumer, brænde skade, og myokardieinfarkt [15-17 ]. Desuden har vi tidligere dokumenteret, at murine knoglemarvafledte CXCR4-positive progenitorceller bidrager til tumorvækst ved at fremme tumorangiogenese [18].

Men akkumulere beviser indikerer, at knoglemarv progenitorceller har forskellige roller i inflammatoriske responser under tumorprogression. Knoglemarv-afledte inflammatoriske celler i tumoren mikromiljø fremme tumorangiogenese, tumor proliferation, overlevelse og invasion og undertrykker specifikke anti-tumor immunrespons af CD4 og CD8-lymfocytter [19]. Således er det vigtigt at bestemme forholdet mellem knoglemarvafledte celler og specifikke immunceller, cytokiner og chemokiner under carcinogenese. Alle lymfocytter stammer i knoglemarven fra en fælles lymfoid progenitor før differentiere til deres forskellige lymfocyt typer. B-celler modnes til B-lymfocytter i knoglemarven, mens T-celler migrere til og modne i thymus. Efter modning, lymfocytterne indtaste cirkulation og perifere lymfoide organer, hvor de søger efter invaderende patogener og tumorceller [20]. Andre typer af celler, herunder dendritiske celler (DC), neutrofiler og eosinofiler, er også blevet rapporteret at fremme tumorangiogenese [13,21]. DC’er anses for at spille en vigtig rolle i tumor immuno-overvågning ved at fremkalde tumor-specifikke T-cellereaktioner. Nyere vidnesbyrd indikerer, at DC’er også kan bidrage til tumorangiogenese ved at frigive proangiogene faktorer, såsom VEGF og IL-8, som respons på hypoxi [22].

Disse resultater, sammen med den iboende plasticitet af knogle marrow- afledte celler og inflammatoriske celler som respons på microenvironmental stikord og den fortsatte eksistens af polariserende signaler i tumormikromiljøet, antyder, at knoglemarvafledte celler i tumormikromiljøet sidste ende kan frembringe pro-angiogeniske og pro-invasive faktorer, som fremmer tumorprogression [19] .

i denne undersøgelse har vi etableret kombineret BM transplantation og en colitis-associeret kolorektal cancer model til at definere fordelingen af ​​BM-afledte endotelceller, CD11c

+ DC og CD4

+ T-celler i tumorer. Denne model giver et kraftfuldt værktøj til at studere bidrag forskelligartede BM-afledte celler under colitis-associeret kolorektal cancer progression og kan afsløre nye BM-afledte celletyper og funktioner, der kunne være gældende i fremtidige terapeutiske strategier.

Materialer og metoder

dyr og celler

C57BL /6, BALB /c og GFP mus blev købt fra forsøgsdyr centrum, Shanghai, Kina. Alle procedurer, der involverer forsøgsdyr blev udført i overensstemmelse med protokoller, der er godkendt af Udvalget for Animal Research ved University of Xiamen og efterkommet Guide for pleje og anvendelse af forsøgsdyr (NIH publikation nr 86-23, revideret 1985). Mus blev holdt i en SPF-(herunder

Helicobacter

-fri og parvovirus-fri) miljø og blev generelt brugt mellem 6 og 8 uger. CT26-WT og CMT93 celler blev afledt fra BALB /c og C57BL /6-mus, henholdsvis. CT26-WT og CMT93 celler (kommercielt indkøbt fra ATCC, USA) blev dyrket i DMEM suppleret med 10% føtalt bovint serum, 100 U /ml penicillin, 100 mg /ml streptomycin, 2 mM glutamin, 1 mM natriumpyruvat og 0,1 mM ikke-essentielle aminosyrer ved 37 ° C og 5% CO2.

knoglemarvstransplantation

knoglemarv hos letalt bestrålede C57BL /6-mus blev rekonstitueret ved transplantation med knoglemarvsceller fra GFP kimære mus (GFP-BMT-mus). Kort fortalt blev vildtype C57BL /6-mus letalt bestrålet med en dosis på 950 rad, hvorefter 2×10

6 knoglemarvsceller fra GFP-mus blev injiceret i halevener de bestrålede recipientmus. Knoglemarvscellerne fra GFP-BMT-mus blev vurderet ved 4 uger efter knoglemarvstransplantation, og graden af ​​kimærisme blev målt ved flowcytometri. Mere end 90% af cellerne i de cirkulerende mononukleære celler blev erstattet af GFP-positive celler under disse forsøgsbetingelser.

Colitis-associeret kolorektal cancer (CAC) og tumorimplantation model

GFP -BMT mus blev injiceret ip med 10 mg /kg af AOM i 0,2 ml saltvand. En uge efter AOM administration blev 3% DSS administreres i drikkevandet i 7 dage og derefter om normal drikkevand i 14 dage. Denne procedure blev gentaget i 3 cyklusser, efterfulgt af et skift til normalt vand. Tumorer blev induceret ved s.c. injektion af 2×10

6 CT26-WT og CMT93 celler i flanken 4 uger efter knoglemarvstransplantation. Store tumorer blev typisk observeret af 4 uger efter tumor implantering, og tumorvæv blev høstet til histologisk analyse.

Konfokal mikroskopi

I GFP-BMT CAC mus, blev blodkar farvet med 50 pg Alexa Fluor® 647 WGA (Molecular Probes, Invitrogen), som blev injiceret retrorbitally. Syv minutter efter Alexa Fluor® 647 WGA administration blev mus aflivet ved CO2 kvælning. Alle procedurer blev udført under bedøvelse (0,5 ml Avertin, i.p.). Væv blev straks fjernet, åbnet af længdesnit og skyllet med PBS. Living tumor vævsprøver blev afbildet med en Bio-Rad Radiance 2000 konfokalt mikroskop (Bio-Rad, Hercules, CA). Billede købet blev udført med Laser Sharp Scanning Software (Bio-Rad), og 3D rekonstruktioner blev afsluttet med Volocity software (Waltham, MA).

Flowcytometrianalyse

Tumor væv blev isoleret fra GFP-BMT CAC mus og skåret i stykker i 1 mg /ml collagenase ⅳ. Collagenasefordøjelse blev udført i collagenase opløsning i 45 minutter ved 37 ° C. Eluerede celler blev derefter ført gennem en 70-pi cellesigte. Cellerne blev spundet ned i 10 minutter ved 1400 rpm ved stuetemperatur og opsamlet. Cellerne blev derefter inkuberet i 10% donkey serum og Fc blokeret (BD Pharmingen, San Jose, CA) i 20 minutter ved 4 ° C, hvorefter de blev farvet med fluorescerende konjugerede antistoffer. APC-konjugeret anti-muse CD11c (HL-3) og PE-konjugeret anti-muse CD4 (OX-38) blev indkøbt fra BD Pharmingen (San Diego, CA) og anvendt til FACS-analyse. Cellerne blev analyseret på en FACSCaliber cytometer (BD Bioscience, San Diego, CA) og derefter analyseret ved anvendelse FlowJo software (Tree Star, Ashland, OR). Salg

immunfluorescensfarvning

C57BL /6-mus blev aflivet ved CO

2 kvælning, og colonvæv blev straks fjernet, fikseret i 4 til 5 timer ved stuetemperatur i GFP fiksering buffer, indlejret i Tissue-Tek OCT-forbindelse (Miles Inc., Elkhart, IN), og hurtigt nedfrosset og opbevaret ved -80 ° C, hvorefter 5-10 um snit blev skåret på en kryostat og overført til mikroskopobjektglas for-belagt med poly-lysin (Sigma-Aldrich). Snit blev derefter fikseret med kold acetone i 20 minutter ved stuetemperatur. Faste snit blev vasket tre gange med PBS og inkuberet med 5% normalt æsel serum og 0,02% BSA-PBS i én time ved stuetemperatur. De primære antistoffer blev anvendt, var specifikke for CD31 (startkoncentration, 0,5 mg /ml; fortynding, 1/500, eBioscience), CD4 (fortynding 1/200, BD), CD11 (fortynding 1/1000, BD), og Ly6C (fortynding, 1/100, BD). DAPI (Vector Laboratories, Burlingame, CA) blev anvendt til nuklear farvning.

Statistisk analyse

Dataene er udtrykt som middelværdi ± SD. Sammenligninger mellem grupper blev analyseret ved hjælp af Students

t

-test.

P

0,05 blev betragtet som statistisk signifikant.

Resultater

Etablering af en kombination af knoglemarvstransplantation og colitis-associeret kolorektal cancer model

Wild-type C57BL /6 mus var dødeligt bestrålet med en total dosis på 950 rad, hvorefter 2×10

6 knoglemarvsceller fra GFP-mus blev injiceret i halevener de bestrålede recipientmus. Fire uger efter knoglemarvstransplantation, blev colon væv isoleret fra GFP-BMT-mus til konfokal mikroskopi analyse, og graden af ​​kimærisme blev målt ved flowcytometri. Vi fandt, at tarmen blev fyldt med grøn fluorescens, og mere end 90% af de cirkulerende mononukleære celler i recipientmusene var GFP-positive (figur 1C, D).

(A) Makroskopisk visning viser et antal af colon tumorer i de distale koloner i musemodel. (B) H denne vekslen blev gentaget i 3 cyklusser. Vi observerede intestinale tumorer i størstedelen af ​​musene, og de tumortyper blev bekræftet ved histologisk analyse (figur 1A, B).

Knoglemarv-afledte endotelceller bidraget til angiogenese under colitis-associerede kolorektal cancer

for at undersøge om BM-afledte endotelceller bidrog til tumorangiogenese i denne model, analyserede vi ekspressionen af ​​GFP i endotelet i tumorer i GFP-BMT mus efter induktion af colitis-associerede tyktarmskræft. Konfokal mikroskopi analyse på levende vævsprøver viste, at GFP-positive celler ekstensivt infiltreret til tumoren stroma, og nogle af cellerne blev sømmet med en WGA-positiv margen på tumorendotelet. WGA og GFP dobbelt-positive celler blev observeret foring fartøjer (figur 2A). Frosne tumor snit blev farvet med anti-CD31 antistof (n = 5), og som vist i figur 2B, infiltreret GFP-positive celler tumorendotelet. Tilsammen vores data viste, at BM-afledte endotelceller bidraget til colitis-associerede tyktarmskræft angiogenese.

(A) Blodkar blev farvet med 647 WGA (blå), som blev injiceret retrorbitally. Konfokal mikroskopi-analyse af levende vævsprøver viste, at BM-afledte celler (grøn) infiltreret stroma, og en del af cellerne blev sømmede af en WGA-647-positiv (blå) margin mod tumoren endotel. Dobbelt-positive celler blev observeret foring skibene. (B) De frosne tumorer snit blev farvet med et anti-CD31-antistof til påvisning af BM-afledte endotelceller (grøn). GFP-positive celler (grøn) med CD31-positive margener blev set i tumoren endotel. C (CMT93) og D (CT26) xenograft tumorvæv isoleret fra BM transplantation mus blev farvet med anti-CD31 (rød) antistoffer. GFP-positive celler blev observeret omkring tumor fartøjer, og nogle foret endotel.

Derudover overensstemmelse med vores tidligere rapport (22), vi har registreret GFP-positive endotel i CMT93 og CT26 xenotransplantattumorer i GFP-BMT-mus (figur 2C, D).

Fordeling af knoglemarv-afledte CD11c

+ dendritiske celler og CD4

+ T-celler i colitis-associerede kolorektal cancer

for at bestemme fordelingen af ​​BM-afledte inflammatoriske celler i tumoren mikromiljø, analyserede vi de mus, der undergik knoglemarvstransplantation efterfulgt af induktion af colitis-associerede kolorektal cancer ved konfokal mikroskopi. Som vist på Figur 3A, B og C, blev tumorvæv udstrakt infiltreret af CD11c

+, Ly-6C og CD4

+ immunceller, hvoraf de fleste udtrykte GFP. Desuden har vi opdaget GFP-positive CD11c + DC’er og CD4 + T-celler i tumoren af ​​CMT93 og CT26 xenotransplantattumorer i GFP-BMT mus (figur 3D, E, F og G).

(A- C) immunfluorescensfarvning af den kombinerede BMT og colitis-associerede colorectal cancer prøver med anti-CD11c, Ly-6C og CD4-specifikke antistoffer (rød). (D-E) CMT93 tumorvæv isoleret fra BM transplantation mus blev farvet med anti-CD11 c og CD4-specifikt antistof (rød). (F-G) CT26 tumorvæv isoleret fra BM-transplanterede mus blev farvet med anti-CD11 c og CD4-specifikt antistof (rød).

kvantitativt definere fordelingen af ​​BM-afledte CD11c + DC og CD4 + T-celler i vores colitis-associerede kolorektal cancer model, vi isolerede tumor-infiltrerende celler fra muse tumorvæv og udført FACS-analyse. Vores isolation protocol data viste, at blandt tumorinfiltrerende celler, 4,16 ± 0,12% blev GFP-positive celler, 14,2 ± 0,34% var CD4 + -celler, og 2,05 ± 0,23% var CD11c + DC’er (figur 4A). Overraskende, GFP-positive CD11c + DC’er celler var en tredjedel af GFP + /CD11C- celler, og halvdelen af ​​DC’er (0,96% versus 1,02%) var GFP-positive knoglemarvsceller oprindelige celler. Størstedelen af ​​CD4 + -T-celler var GFP-negative (12,02% versus 1,9%). Interessant nok fandt vi en ny CD4 + CD11 c + DC delmængde (0,34% versus 1,64%) i denne model (figur 4B, C).

(A) Isolering af celler fra tumorvæv efterfulgt af FACS-analyse viste andelen af knoglemarven-afledte celler, CD4

+ -celler og CD11c

+ DC’er i colontumorvæv. (B-C) Sammensætning af CD11c

+ og CD4

+ T-celler afledt af knoglemarv. (C) Bjælkerne repræsenterer middelværdien ± SD; prøve analyser blev udført tredobbelt.

Discussion

Inflammatorisk tarmsygdom (IBD) kan føre til en øget risiko for udvikling af colorektalcancer (CRC). Den molekylære patogenese af IBD-associeret kolorektal cancer er forskellig fra sporadisk CRC [23]. Inflammation er en vigtig bidragyder til carcinogenese, og kroniske inflammatoriske sygdomme såsom IBD indlede komplekse veje til neoplasi [24]. I denne undersøgelse anvendte vi et potent kræftfremkaldende stof, AOM, der inducerer DNA-addukter via alkylerende arter. Disse addukter dannes kovalente bindinger mellem den reaktive carcinogen, og det genomiske DNA, hvilket resulterer i mutationer under DNA reparation og fremme tumorudvikling. Sådanne mutationer indbefatter murine genetiske mutationer i tumorigenese pathways (APC, p53, MSH2) [25]. Langsigtede administration eller gentagne cyklusser af DSS, et kemikalie, der forårsager epitelial skade, kan fremkalde kronisk colitis og efterfølgende dysplasi hos gnavere [26].

Gennem det seneste årti er der gjort bemærkelsesværdige fremskridt i forståelsen af stamcelle biologi og den rolle af stamceller i sygdomme som CRC [27]. Især opdagelser relateret til kontrol af stamceller spredning og hvordan dysregulering af spredning fører til onkogenese har været på forkant. Således har vi etableret en kombineret knoglemarvstransplantation, og colitis-associeret kolorektal cancer model til at definere fordelingen og funktionen af ​​BM-afledte celler i tyktarmskræft.

For nylig er der påvist cirkulerende EPC’er mobiliseret fra BM i perifert blod af flere arter og har vist sig at være involveret i neoangiogenese i tumorer samt i dannelsen af ​​nye fartøjer efter traumer, brænde skade, og myokardieinfarkt [28,29]. De fleste faste tumorer kræver en vaskulær forsyning til at tilføre ilt og næringsstoffer, der kan forbedre tumorudvikling og invasion. Tumoren kan enten udnytte eksisterende fartøjer, eller rekruttere og mobilisere BM-Afledt celle for at inducere neovaskularisering [30]. EPC’er stammer fra BM-afledte celle og besidder evnen til at differentiere til modne endotelceller, der bidrager til den komplekse proces tumor neovaskularisering. Der er beviser for, at tumor angiogenese kan stimuleres af tumorceller udskilles CXC chemokin ligander CXCL5 og CXCL8, via deres fælles receptor CXCR2 [31]. Audollent et al viser, at Knoglemarv-afledte endotel og hæmatopoietiske forstadier celler øge metastase af coloncancer i et ortotopisk nøgne mus model [32]. Vores tidligere rapport viste, at BM-afledte endotelceller blev påvist i xenotransplantattumorer hjælp Colon38 og Panco2 celler [18]. I denne undersøgelse viste vi via konfokal mikroskopi-analyse, at BM-afledte endotelceller deltog i colitis-associerede coloncancer angiogenese. Desuden opdaget vi udtryk for GFP i endotel af CMT93 og CT26 tumorxenoplantater i GFP-BMT-mus, i overensstemmelse med vores tidligere rapport [18].

I lighed med andre faste maligniteter, colorectal og colitis-associerede tumorer er infiltreret af forskellige typer af immunceller [33]. Celler i det medfødte immunsystem, såsom neutrofiler, mastceller, naturlige dræberceller (NK) -celler, dendritiske celler og tumorassocierede makrofager, kan let påvises i disse tumorer. Desuden avancerede tumorer rekruttere specifikke myeloide delmængder, der repræsenterer en fænotypisk heterogen men funktionelt tilsvarende population af CD11b

+ Gr1

+ -celler, betegnet myeloide afledte suppressorceller [34,35]. Disse celler deler nogle karakteristika med monocytter, makrofager, neutrofiler, og DCS og hjælpe med at undertrykke antitumor immunresponser og tumorangiogenese. Tidligere undersøgelser har fastslået, at BM-afledte APC’erne er primært ansvarlige for induktion af tumor-induceret T-celle-tolerance [36]. BM-afledte DC, klassisk markør for CD11c, kan fange og præsentere perifere vævsspecifikke antigener til naiv CD8

+ T-celler, hvilket fører til deres sletning [37]. Der er et lignende krav til forarbejdning af parenchymale autoantigenet af vært DC i induktionen af ​​CD4

+ T-celle-tolerance i tumor. BM-afledte DC’er fra BALB /c-mus er i stand til at fremme udvidelse af CD4

+ CD25

+ Foxp3

+ T-celler

in vitro

og at dette sker uafhængigt af modningen tilstand udviklingslandenes som modne og umodne celler er i stand til at udvide Foxp3

+ cellepopulation [38,39]. Denne immune uvidenhed og immun tolerance mekanismer bidrager til tumor udvikling. Vi viste fordelingen af ​​BM-afledte inflammatoriske celler (CD11c

+, Ly-6C og CD4

+ T-celler) i tumormikromiljøet. Overraskende, GFP-positive CD11c + DC’er celler var en tredjedel af GFP + /CD11C- celler, og halvdelen af ​​alle DC’er var GFP-positive BM oprindelige celler. Vi opdagede også en ny CD4

+ CD11c

+ DC delmængde (0,34 vs. 1,64) i vores colitis-associeret kolorektal cancer model. Celler af det adaptive immunsystem er rekrutteret i kolorektale og colitis-associerede tumorer, hvor de spiller enten pro- eller antitumorigenic roller [40]. T-celler, for eksempel, er ikke kun brug for inflammation, cancerudvikling, og tumorprogression men også for anticancer immunitet [41].

Vi succes etableret en kombineret BM transplantation og colitis-associerede kolorektal cancer model. Denne model giver et effektivt værktøj til at studere de bidrag forskelligartede BM-afledte celler under progressionen af ​​colitis-associerede kolorektal cancer og kan afsløre hidtil ukendte BM-afledte celletyper og funktioner, som kunne finde anvendelse i fremtidige terapeutiske strategier.