PLoS ONE: MicroRNA-1280 Hæmmer invasion og metastase ved Målretning rock1 i blærekræft

Abstrakt

MikroRNA’er (miRNA) er ikke-protein-kodende sekvenser, der kan fungere som onkogener eller tumorsuppressorgener. Denne undersøgelse dokumenterer tumor suppressor rolle miR-1280 i blærekræft. Kvantitativ realtids-PCR og

in situ

hybridiseringsanalyser viste, at MIR-1280 er betydeligt nedreguleret i blæren cancercellelinier og tumorer sammenlignet med en ikke-malign cellelinie eller normale vævsprøver. For at dechifrere den funktionelle betydning af miR-1280 i blærekræft, vi ektopisk over-udtrykte miR-1280 i blære kræft cellelinjer. Over-ekspression af MIR-1280 havde antiproliferative effekter og forringet kolonidannelse af blære cancercellelinier. FACS (fluorescensaktiveret cellesortering) analyse afslørede, at re-ekspression af MIR-1280 i blære cancerceller inducerede G2-M cellecyklusstop og apoptose. Vores resultater viser, at MIR-1280 inhiberede migration og invasion af blæren cancercellelinier. miR-1280 svækkede også rock1 og RhoC proteinekspression. Luciferasereporteren analyser viste, at onkogen rock1 er et direkte mål for miR-1280 i blærekræft. Denne undersøgelse viser også, at miR-1280 kan have diagnostisk og prognostisk betydning i blærekræft. For eksempel viste ROC-analyse, at MIR-1280 ekspression kan skelne mellem maligne og normale tilfælde blærecancer og Kaplan-Meier-analyse viste, at patienter med MIR-1280 høj ekspression havde højere samlet overlevelse sammenlignet med dem med lav MIR-1280 ekspression. Sammenfattende er dette den første undersøgelse for at dokumentere, at MIR-1280 fungerer som en tumorsuppressor ved at målrette onkogen rock1 for invasion /migration og metastase. Forskellige forbindelser er i øjeblikket bliver brugt som rock1 inhibitorer; derfor restaurering af tumor suppressor MIR-1280 kan være terapeutisk nyttig, enten alene eller i kombination med disse forbindelser ved behandlingen af ​​blærekræft

Henvisning:. Majid S, Dar AA, Saini S, Shahryari V, Arora S, Zaman MS, et al. (2012) MicroRNA-1280 Hæmmer invasion og metastase ved Målretning rock1 i blærekræft. PLoS ONE 7 (10): e46743. doi: 10,1371 /journal.pone.0046743

Redaktør: Natasha Kyprianou, University of Kentucky College of Medicine, USA

Modtaget: Juli 24, 2012; Accepteret: August 30, 2012; Udgivet: 4 oktober 2012

Copyright: © Majid et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne forskning blev støttet af National center for Research Resources af National Institutes of Health gennem Grant Number RO1CA138642, RO1CA130860, RO1CA160079 og VA Merit Review og VA Program Project. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:. Rajvir Dahiya er en PLoS ONE Editorial Board medlem. Dette ændrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikker om datadeling og materialer

Introduktion

MikroRNA’er (miRNA) er ikke-protein-kodende sekvenser menes at regulere . 90 % af humane gener [1]. Deregulering af miRNA ekspression er blevet identificeret i en række cancere [2], [3], og akkumulere beviser indikerer, at nogle miRNA kan fungere som onkogener eller tumorsuppressorgener. miRNA er udtrykt i en vævsspecifik måde og kan spille vigtige roller i celleproliferation, apoptose, og differentiering [4], [5]. Inaktivering af onkogene miRNA [6], [7] eller restaurering af tumor-suppressor miRNA [8], [9], [10], kan have stort potentiale for kræftbehandling.

A) Kvantitativ RT-PCR-analyse af mIR-1280 i cellelinier. B)

Fluorescens In-situ

hybridisering (FISH) i cellelinier. C) Kvantitativ real time PCR-analyse af mir-23b udtryk i matchede Laser-Captured Mikrodissekterede vævsprøver. (T /N tumorvæv /normalt).

Ændringer i cellulære funktioner såsom celleproliferation, adhæsion og motilitet er baseret på de morfologiske ændringer, som resulterer fra actin cytoskeleton reorganisation. Rho familie proteiner interagerer med actincytoskelettet regulerer dannelsen af ​​stress fibre og fokale adhæsioner i cellerne. Rho-associeret serin-threonin-proteinkinase, ROCK [11], [12], en af ​​de bedst karakteriserede nedstrømseffektorer af Rho, aktiveres, når det selektivt binder til den aktive GTP-bundne form af rho. Aktiveret ROCK interagerer med actincytoskelettet at fremme dannelse stress-fiber og samling af fokale kontakter [13]. Omlejringer af actincytoskelettet er involveret i cancer cellemigration som er central for processen med metastase. Tang et al [14] undersøgte virkningerne af rock1 hæmning på aktiviteten af ​​opstrøms RhoA og Rac1. Rock1 indirekte mindsker aktiviteten af ​​opstrøms RhoA ved at stimulere Tiam1-induceret Rac1 aktivitet. Rock1 giver en feedback-mekanisme, mægle opstrøms Rac1 og RhoA aktivitet, hvilket afspejler de forskellige virkninger af rock1 på den funktionelle balance af små GTPaser [14]. Omarrangere actin cytoskeletproteiner som reaktion på Rho er vigtig for evnen af ​​tumorceller til at metastasere [15]. Den Rho /ROCK pathway spiller rolle i udviklingen af ​​kræft ved at regulere aktincytoskelettet reorganisering og en specifik ROCK inhibitor blev fundet at undertrykke tumorvækst og metastase [16], [17]. I prostata carcinom PC-3-celler, RhoA er en kritisk endogene promotor af celleinvasion og migration [18]. Inhibering af RhoA eller dens største nedstrømseffektor, rock1, formindsker motilitet af prostatacarcinomceller [18]. I blærekræft blev Rho /ROCK vej rapporteret at være involveret i forekomst og progression af blærekræft [19]. Disse observationer tyder på, at Rho /ROCK pathway kan være en molekylært mål for forebyggelse af kræft invasion og metastase. Her for første gang, vi rapportere om tumor suppressor aktivitet af microRNA-1280 (miR-1280) i blærecancer og vise, at det blærekræft migration og invasion ved direkte rettet mod rock1.

A) klinisk-patologisk kendetegn for patienten kohorte. B) ROC kurve analyse viser udførelsen af ​​miR-1280 udtryk til at skelne mellem maligne og ikke-maligne vævsprøver. C) Kaplan-Meier analyse for samlet overlevelse baseret på miR-1280 udtryk.

Materialer og metoder

cellelinjer og Cell Culture

SV-HUC-1 blev T24 og J82-celler indkøbt fra American Type Culture Collection (ATCC) og dyrkes efter ATCC protokoller. SV-HUC-1-celler blev dyrket i F-12K medium (ATCC) med 10% FBS. T24-celler blev dyrket i McCoys 5A-medium suppleret med 10% FBS og J82-celler blev dyrket i Minimum Essential Media (MEM) suppleret med 10% FBS.

A) Forbigående transfektion af MIR-1280 precursor signifikant forøget ekspression af miR-1280 i blære cancerceller. B) spredning af J82 og T24 celler efter miR-1280 transfektion blev væsentligt reduceret i forhold til cont-miR. C) miR-1280 overekspression signifikant hæmmer kolonidannende evne blære cancerceller.

Plasmider, prækursorer og transfektion

TaqMan prober og forstadier til HSA-miR-1280 og negativ kontrol præ-miR blev indkøbt fra Applied Biosystems (Foster City, CA). pmir-GLO Dual-Luciferase miRNA Target Expression Vector blev købt fra Promega. Lipofectamine 2000 (Invitrogen) blev anvendt til alle transfektioner.

RNA Extraction

miRNA og totalt RNA blev ekstraheret fra cellelinjer under anvendelse af en miRNeasy Mini Kit og et RNeasy Mini Kit (Qiagen). miRNA fra kliniske prøver blev udvundet ved hjælp af laser capture mikrodissektions teknikker med en miRNeasy FFPE (Qiagen).

AB) FACS-analyse viser miR-1280 overekspression inducerer G2-M cellecyklusstop i J82 og T24 celler med et tilsvarende fald i S-fase celler. Værdier er vist fra tredobbelte eksperimenter ± SD.

A-B) MIR-1280 overekspression inducerer apoptose i J82 og T24-celler med et samtidigt fald i levedygtige antal celler. De viste værdier er fra tredobbeltforsøg ± SD.

Humane kliniske prøver

Kliniske prøver blev indhentet fra de San Francisco Veterans Affairs (VA) Medical Center. Skriftligt informeret samtykke blev opnået fra alle patienter, og undersøgelsen blev godkendt af UCSF Udvalget om menneskelige Forskning (Godkendelsesnr: H9058-35751-01).

kvantitativ real-time PCR

Modne miRNA blev analyseret under anvendelse af TaqMan miRNA tests i overensstemmelse med producentens instruktioner (Applied Biosystems). Alle RT reaktioner, herunder ikke-skabelon kontroller og RT minus kontrol, blev kørt i en 7500 Fast Real Time PCR System (Applied Biosystems). RNA-koncentrationer blev bestemt med en NanoDrop (Thermo Scientific, Rockford, IL). Prøver blev normaliseret til RNU48 (Applied Biosystems). Gene udtryk niveauer blev kvantificeret ved hjælp af 7500 Fast Real Time Sequence detection system Software (Applied Biosystems). Sammenlignende realtids-PCR blev udført tredobbelt, herunder uden template kontrol. Relativ udtryk blev beregnet ved hjælp af den sammenlignende Ct.

In Situ

hybridisering

In situ

hybridisering blev udført som tidligere [20] beskrevet. Kort fortalt cellelinier blev farvet under anvendelse af DIG-mærket låst nukleinsyre (LNA) -baserede prober specifikke for mir-1280 ved at følge fabrikantens protokol (Exiqon, Inc. Woburn, MA) og detekteret ved anvendelse af anti-DIG-fluorescein, Fab-fragmenter (Roche Applied Science , Indianapolis, IN).

A) Migration assays af J82 og T24-celler transficeret med mIR-1280. B) Repræsentative billeder af migration assay.

A) Invasion assay viser et signifikant fald i antallet af invaderende J82 og T24-celler transficeret med MIR-1280. B) Repræsentative billeder af invasion analysen.

Cell Levedygtighed og Clonability Assay

Cell levedygtighed blev bestemt ved 24, 48 og 72 timer ved hjælp af CellTiter 96 vandige One Solution Cell Proliferation Assay kit (Promega, Madison, WI) ifølge producentens protokol. Absorbans blev målt ved 490 nm under anvendelse SpectraMAX 190 (Molecular Devices). Data er præsenteret som middelværdien for tredobbeltforsøg forhold til den negative kontrol. For kolonidannelse assayet blev celler podet ved lav densitet (1000 celler /plade) og lodes vokse untill synlige kolonier fremkom. Derefter blev cellerne farvet med Giemsa og kolonier blev talt.

Migration og Invasion Analyser

Cytoselect 24-brønd celle migration og invasion assay kits (Cell Biolabs, Inc) blev anvendt til migration og invasion assays ifølge producentens protokol. Kort fortalt blev T24 og J82-celler transficeret med Pre-miR miRNA precursor eller negativ kontrol høstet 72 timer efter transfektion og resuspenderet i serumfrit Opti-MEM. Celler (10 × 10

4 per 300 pi medier uden serum) blev tilsat til det øvre kammer, og det nedre kammer blev fyldt med 500 pi medium indeholdende 10% FBS. Celler blev inkuberet i 16 timer ved 37 ° C i en 5% CO2 vævskulturinkubator. Efter 16 timer blev ikke-migrerede /ikke-invaderende celler fjernet fra oversiden af ​​transwel membran filterindsatse bruger vatpind. Migrerede /invaderede celler på den nedre side blev farvet og absorbansen blev aflæst ved 560 nm ifølge producentens protokol.

A) gratis MIR-1280 bindende sekvenser i rock1 3’UTR. B) Western blot-analyse viser, at MIR-1280 undertrykker oversættelse af onkogener rock1 og RhoC. C) Luciferase undersøgelser, som viser nedsat reporter aktivitet efter cotransfektion af enten vildtype eller mutant Src-3’UTR med MIR-1280 i J82 og T24-celler. Mut Mutated 3’UTRROCK1 sekvens. D) Skematisk fremstilling af rolle miR-1280 i blærekræft.

Immunoblotting

Protein blev isoleret fra 70-80% konfluerende plader af dyrkede celler ved hjælp af M-PER pattedyrprotein ekstraktionsreagens (Pierce Biotechnology, Rockfield, IL) ifølge producentens anvisninger. Proteinkoncentrationer blev bestemt ved Bradford-metoden. Lige store mængder protein blev opløst på 4-20% natriumdodecylsulfat (SDS) polyacrylamidgeler og overført til en nitrocellulosemembran ved spænding gradient overførsel. De resulterende blots blev blokeret med 5% fedtfri tørmælk og probet med specifikke antistoffer. Blots blev derefter inkuberet med passende peroxidase-konjugeret sekundære antistoffer og visualiseret under anvendelse af forøget kemiluminescens (Pierce Biotechnology, Rockford, IL).

Luciferase Reporter Assay

A pmirGLO Dual-Luciferase miRNA target ekspressionsvektor blev anvendes til 3′-UTR luciferaseassays (Promega, Madison, WI). Målet onkogen af ​​miRNA-1280 blev valgt på baggrund af online microRNA måldatabase https://www.microrna.org/microrna/home.do. Primersekvenserne for vildtype 3’UTR var: Fremad 5’CGCGGCCGCTAGTCTGTGGAATCGTGTGGGAT 3 ‘og Reverse 5’ctagatcccacacgattccacagactagcggccgcgagct 3’. For mutanten 3’UTR, primersekvenserne var: Fremad 5’CGCGGCCGCTAGTCTGTGGAATCGTTCATACT 3 ‘og revers 5’ctagagtatgaacgattccacagactagcggccgcgagct 3’. For lucifease assay blev T24 og J82-celler cotransficeret med HSA-MIR-1280 og pmirGLO Dual-Luciferase miRNA target ekspressionsvektorer med vildtype eller mutant målsekvens under anvendelse af lipofectamin 2000. ildflueluciferase aktiviteter blev målt ved anvendelse af Dual Luciferase Assay (Promega, Madison, WI) 18 timer efter transfektion, og resultaterne blev normaliseret med Renilla luciferase. Hver reporterplasmid blev transficeret mindst tre gange (på forskellige dage), og hver prøve blev analyseret tredobbelt.

Statistical Analysis Salg

Statistiske analyser blev udført med GraphPad Prism 5 og MedCalc versionen 10.3.2 . Alle kvantificerede data repræsenterer gennemsnittet af mindst tredobbelte prøver eller som angivet. Fejl- søjler repræsenterer standardafvigelse af middelværdien. Alle tests blev udført to halet og

p-

værdier 0,05 blev betragtet som statistisk signifikant. Receiver Operating kurver (ROC) blev beregnet til at bestemme den potentielle af MIR-1280 til at skelne mellem maligne og ikke-maligne prøver. For sygdomsprogression, Kaplan-Meier (log-rank test) analyse blev udført.

Resultater

Angivelse af miR-1280 i blæretumorer og cancercellelinjer

Angivelse af mIR-1280 blev undersøgt ved real-time PCR i blæren cancercellelinier J82, T24 og sammenlignet med ikke-malign cellelinie SV-HUC1. Resultaterne viste, at MIR-1280 blev nedreguleret i cancercellelinier (figur 1A).

In-situ

hybridisering bekræftede også tilstedeværelsen af ​​miR-1280 udtryk (grønt signal) i SV-HUC1 celler i forhold til kræft cellelinier (Figur 1B). For at undersøge den biologiske betydning af MIR-1280 blev dets ekspression analyseret i laser fanget mikrodissekeres (LCM) human blære tumorvæv og sammenlignet med normal matchet kontrol væv. Ekspressionen af ​​MIR-1280 viste sig at være signifikant nedreguleret i alle tumorprøverne forhold til deres matchede normale prøver (figur 1C). Disse resultater indikerer en formodet tumor suppressor rolle for MIR-1280 i blærekræft.

Diagnostic og prognostiske Betydningen af ​​MIR-1280 i blærekræft

Kliniske demografi af patientens kohorten er opsummeret i figur 2A . Modtager drift kurve (ROC) analyser blev udført for at vurdere evnen af ​​miR-1280 udtryk til at skelne mellem normale og tumor sager ved hjælp af vævsprøver. Et område under ROC-kurven (AUC) af 0,886 (P 0,0001; 95% CI = 0,775 til 0,998) (figur 2B) blev opnået antyder, at MIR-1280 ekspression kan skelne mellem maligne og ikke-maligne prøver og kan derfor anvendes som en diagnostisk markør for blærekræft selvom yderligere prøver kan styrke disse resultater. For at bestemme om miR-1280 har enhver prognostisk betydning, vi delte sager i lav miR-1280 (udtryk T /N 0,8 gange) og høj miR-1280 (udtryk T /N 0,8 gange) grupper og udførte Kaplan-Meier overlevelsesanalyse . I Kaplan-Meier analyse, den høje miR-1280 gruppe havde signifikant højere samlet overlevelse sandsynlighed i forhold til den lave miR-1280 gruppe (Logrank Test p 0,02) (Figur 2C). Disse resultater tyder på, at miR-1280 har potentialet til at være en diagnostisk og prognostisk markør for blærekræft.

MicroRNA-1280 Overekspression blænder blærekræft Cell Proliferation og Colony Formation

Til bestemmes funktionelle betydning af miR-1280 overekspression i blærekræft, vi transficeret blærekræft cellelinjer J82 og T24 med miR-1280 forstadier. MIR-1280 signifikant overudtrykt i J82 og T24 cellelinier efter transient transfektion med MIR-1280 precursor sammenlignet med cont-miR precursor (figur 3A). Ektopisk ekspression af MIR-1280 faldt betydeligt celleproliferation sammenlignet med celler, der udtrykker cont-miR (figur 3B). MIR-1280 transficerede celler havde også lav kolonidannelse evne som antallet af foci i MIR-1280 udtrykkende celler blev reduceret ved sammenligning med cont-miR transficerede celler (figur 3C). Disse resultater indikerer anti-proliferative effekt af MIR-1280 i blærekræft.

MIR-1280 Triggers cellecyklusstandsning og inducerer apoptose i blære cancerceller

FACS (fluorescensaktiveret cellesortering) analyse afslørede at re-ekspression af mIR-1280 førte til en betydelig stigning i antallet af celler i G2-M-fasen af ​​cellens cyklus (17% til 35%), mens S-fase population faldt fra 15% til 8% i J82 celler (figur 4A). Lignende resultater blev observeret i T24-celler med en stigning i G2-M population af celler (6% til 19%) og et fald i S-fase population (12% til 6%), hvilket antyder, at MIR-1280 udløser en G2-M anholdelse i miR-1280 transficerede celler i forhold til cont-miR. FACS-analyse for apoptose blev udført under anvendelse Annexin-V-FITC-7-AAD farvestof. Procentdelen af ​​totale apoptotiske celler (tidligt apoptotisk + apoptotiske) var signifikant forøget (4% til 12%) som svar på MIR-1280 overekspression sammenlignet med cont-miR med en tilsvarende 10% fald i levedygtige cellepopulation i J82-celler (figur 5A). I T24-celler, blev en stigning (2% til 12%) i apoptotiske celler observeret med MIR-1280 overekspression sammenlignet med cont-miR (figur 5B). Disse resultater indikerer en tumor suppressor rolle for miR-1280 i blærekræft.

Anti-migrering /Invasion Virkninger af miR-1280 i Blære Cancer

Overekspression af miR-1280 havde anti-vandrende og anti-invasive virkninger på blæren cancercellelinier. Mindre absorbans blev observeret ved 560 nm med MIR-1280 transficerede celler sammenlignet med cont-miR i migration assay (figur 6) og MIR-1280 overekspression også signifikant reduceret invasivitet af blære cancerceller (figur 7).

mIR-1280 Direkte Mål Oncogene rock1

rock1 er blevet rapporteret til at være en vigtig molekyle, der driver blærekræft migration og invasion. Ved hjælp af en online microRNA måldatabase fandt vi onkogen rock1 som den formodede mål for miR-1280 med supplerende 3’UTR steder for frø sekvens af miR-1280 (figur 8A). Vi udførte Western analyse for rock1 ekspression i MIR-1280 transficerede celler og fundet, at MIR-1280 svækkede proteinet ekspression af rock1 sammenlignet med cont-miR (figur 8B). Vi fandt også et fald i proteinniveauer i RohC, andet onkogen protein, som er opstrøms for rock1. For at kontrollere, om en direkte interaktion er involveret mellem miR-1280 og dens mål onkogen rock1, vi udførte luciferase reporter assays. Vi fandt, at co-transfektion af MIR-1280 sammen med vildtype 3’UTR af onkogen rock1 forårsagede et signifikant fald i luciferaseenheder sammenlignet med kontroller (figur 8C). Disse resultater tyder på, at miR-1280 mål onkogen rock1 direkte.

Diskussion

Selvom lidt om microRNA-1280, en undersøgelse har vist, at miR-1280 udtrykkes i tyktarm og pancreascancer baseret om udtryk analyse af 19 kolorektal og 17 bugspytkirtlen menneskelige kræft prøver [21]. Her har vi for første gang rapport, at miR-1280 spiller en tumor suppressor og har diagnostisk og prognostisk potentiale i blærekræft. Vi udførte også funktionsanalyser at bekræfte antitumorvirkninger af MIR-1280 og viser, at MIR-1280 direkte målrettet onkogen rock1, et vigtigt molekyle i blærekræft cellemigrering og invasion.

Vi observerede også, at miR- 1280 er betydeligt nedreguleret i blæren cancercellelinier og tumorvæv sammenlignet med ikke-malign cellelinie eller normale væv indikerer, at mIR-1280 kan være et tumor-suppressor i blærekræft. Tidligere undersøgelser har vist, at microRNA er yderst vævsspecifik og de kan fungere som tumor suppressor eller onkogener [5], [6]. MikroRNA’er har flere funktioner, der gør dem attraktive kandidater som nye prognostiske biomarkører og kraftfulde værktøjer til tidlig diagnosticering af kræft [22]. I denne undersøgelse fandt vi, at miR-1280 var prædiktiv for samlet overlevelse sådan, at patienter med højere miR-1280 udtryk havde længere samlet overlevelse sammenlignet med patienter med lav miR-1280 udtryk. MicroRNA-1280 udtryk også kendetegnet maligne fra normale væv indikerer den diagnostiske betydning af miR-1280 i blærekræft selv om dette skal bekræftes i en større kohorte af vævsprøver. Vores funktionelle assays viste, at MIR-1280 har anti-proliferative virkninger, der inducerer cellecyklusstop og apoptose i blærekræft. Den viste også anti-vandrende og anti-invasiv virkning på blæren kræftceller.

Da rock1 er et vigtigt molekyle, der er involveret i migration blærekræft og invasion [19], vi undersøgt, om rock1 er et mål for miR -1280 i blærekræft. Overekspression af rock1 er blevet rapporteret at forekomme i forskellige cancerformer [14], [19] og Rho /er fundet ROCK pathway at være forbundet med progression af blærecancer [19]. ROCK medierer reaktioner i vejen indledt af Rho, og regulerer reorganisering af cytosleletal proteiner såsom dannelsen af ​​stress fibre og fokale sammenvoksninger [23]. Omarrangere cytoskeletproteiner er vigtig for evnen af ​​tumorceller til at metastasere [15] og vores undersøgelse viste, at MIR-1280 svækket ekspression af onkogen rock1. Luciferaseassays afslørede også direkte interaktion af miR-1280 og rock1. Derfor indikerer disse resultater, at MIR-1280 inhiberer migration /invasion og dermed metastase af blærekræft, der medieres gennem nedregulering af onkogen rock1 (figur 8D). Vi har også fundet nedsat ekspression af onkogen RhoC der er opstrøms for rock1. En tidligere undersøgelse har rapporteret, at rock1 formindsker aktiviteten af ​​sine upstream RhoA familiemedlemmer indirekte [14]. Ved samme hovedstol, kan hæmning af rock1 af miR-1280 har en indirekte hæmmende virkning på RhoC onkogen.

Som konklusion, vores undersøgelse er den første rapport at dokumentere tumor suppressor rolle miR-1280 i blæren kræft. miR-1280 direkte henvender onkogen rock1, hæmme migration /invasion, som er centrale for processen med metastaser. Forskellige forbindelser, såsom Y-27632, har vist sig at inhibere rock1. Vores resultater viser, at restaurering af tumor suppressor MIR-1280 kan være nyttigt terapeutisk enten alene eller i kombination med disse forbindelser ved behandlingen af ​​blærekræft.

Tak

Vi takker Dr. Roger Erickson for hans støtte og bistand med udarbejdelse af manuskriptet.