PLoS ONE: Evaluering af MycAssay ™ Aspergillus for Diagnose af Invasiv pulmonal aspergillose hos patienter uden Hæmatologisk Cancer

Abstrakt

Metoder baseret på real-time polymerasekædereaktion (PCR) kan fremskynde diagnosticering af invasiv aspergillose, men er begrænset af en manglende standardisering. Vi evaluerede det kommercielt tilgængelige MycAssay ™ Aspergillus test til diagnose af invasiv aspergillose hos patienter uden hæmatologisk cancer. Vi prospektivt indsamlet 322 prøver nedre luftveje (november 2009 januar 2011) fra 175 patienter med nedre luftvejsinfektion og følgende prædisponerende betingelser: solid kræft (16,8%), skrumpelever (16,8%), kortikosteroidbehandling (71,7%), HIV infektion (15,6%), kronisk obstruktiv lungesygdom (COPD, 52,6%), organtransplantation (nyre [1,2%], hjerte [3%], lever [4,6%]), eller ingen (3,5%). Prøver blev opnået, når det er klinisk indiceret og analyseret i mikrobiologiske laboratorium.

Aspergillus

DNA blev ekstraheret og forstærkes ved hjælp af MycXtra® og MycAssay ™ Aspergillus.

Aspergillus

spp. blev isoleret fra 65 prøver (31 patienter). Ifølge Den Europæiske Organisation for forskning og behandling af kræft og Bulpa kriterier (for patienter med KOL), 15 havde sandsynlig invasiv aspergillose. MycAssay ™ Aspergillus resultater var negative (n = 254), positive (n = 54), eller ubestemt (n = 14). Følsomheden, specificitet, positiv prædiktiv værdi, negativ prædiktiv værdi, og diagnostiske odds ratio for MycAssay ™ (første prøve /enhver prøve) var 86,7 /93, 87,6 /82,4, 34,1 /34,1, 92,2 /100, og 48 /68.75. Forskellene mellem andelen af ​​prøver med positive PCR bestemmelser (63%) og andelen af ​​prøver med

Aspergillus

spp. isolering (75%) nåede ikke statistisk signifikans (

P

= 0,112). Den mediane tid fra prøve kultur til visualisering af svampevækst var 3 dage, sammenlignet med -4 timer for MycAssay ™ Aspergillus PCR. MycAssay ™ Aspergillus viste høj følsomhed til diagnosticering af invasiv aspergillose hos patienter uden hæmatologisk cancer. Følsomhed øges, når flere prøver blev anvendt. Sammenlignet med svampe kultur, PCR væsentligt reduceret tid til diagnose

Henvisning:. Guinea J, Padilla C, Escribano P, Muñoz P, Padilla B, Gijón P, et al. (2013) Evaluering af MycAssay ™ Aspergillus for Diagnose af Invasiv pulmonal aspergillose hos patienter uden Hæmatologisk Cancer. PLoS ONE 8 (4): e61545. doi: 10,1371 /journal.pone.0061545

Redaktør: David R. Andes, University of Wisconsin Medical School, USA

Modtaget: December 21, 2012; Accepteret: 11. marts 2013; Udgivet: 19 april, 2013 |

Copyright: © 2013 Guinea et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Denne undersøgelse blev delvist finansieret af tilskud fra Fondo de Investigación Sanitaria (FIS) KP09 /00055 og PI09 /1257 (Instituto de Salud Carlos III) og af tilskud fra Myconostica. Jesús Guinea (MS09 /00055) og Pilar Escribano (CD09 /00230) understøttes af FIS. De MycXtra® og MycAssayTM Aspergillus kits bruges til at udføre undersøgelsen, blev venligt støttet af Izasa (Barcelona, ​​Spanien). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:. Forfatterne erklærer, at MycXtra® og MycAssayTM Aspergillus kits venligt blev leveret fra Izasa ( Barcelona, ​​Spanien). Dette ændrer ikke forfatternes tilslutning til alle PLoS ONE politikker om datadeling og materialer.

Introduktion

Invasiv aspergillose er en opportunistisk infektion påvirker patienter med forskellige grader af immunosuppression. Patienter med dyb og langvarig neutropeni har traditionelt haft den største risiko for invasiv aspergillose [1], [2], [3], [4], [5]. Andre risikogrupper omfatter organtransplanterede modtagere, patienter med kronisk obstruktiv lungesygdom (KOL), patienter, som får kortikosteroider eller andre immunosuppressive midler, og patienter med levercirrose [6], [7].

Antallet af patienter uden blodkræftsygdomme der er berørt af invasiv aspergillose er stigende. Dødeligheden i denne gruppe er høj, sandsynligvis på grund af den lave indeks mistanke om infektion og den deraf følgende forsinkelse af diagnosen [8], [9], [10], [11]. Som et positivt resultat afhænger af hurtig og korrekt antimykotisk behandling, hurtig diagnose er stadig vigtigere

Påvisning af galactomannan i serum har vist sig nyttig til diagnosticering af invasiv aspergillose hos patienter med neutropeni.; desværre, dens følsomhed er under 50% hos patienter uden neutropeni [12], [13], [14], [15], [16]. Påvisning af galactomannan i bronchoalveolær lavage (BAL) prøver er mere følsom end detektering i serumprøver, selvom BAL-prøver er ikke altid tilgængelige [15]. Isoleringen af ​​

Aspergillus

i lavere prøver luftveje fra ikke-neutropeniske patienter er ofte det første mikrobiologisk bevis for invasiv pulmonal aspergillose. Men som kultur er langsom, påvisning af

Aspergillus

i kliniske prøver er forsinket.

Metoder baseret på real-time polymerasekædereaktion (PCR) kan fremskynde diagnosticering af invasiv aspergillose, men er begrænset af en manglende standardisering [17], [18]. MycAssay ™ Aspergillus er et nyligt markedsført real-time PCR teknik til påvisning af

Aspergillus

DNA i prøver fra de nedre luftveje. Denne analyse er blevet undersøgt for det meste i BAL-prøver fra patienter med hæmatologiske maligniteter eller dem indlagt på intensivafdelinger [19].

I den foreliggende undersøgelse, vi evaluerede MycAssay ™ Aspergillus test i respiratoriske prøver, herunder BAL, spontan opspyt, og bronkial aspirat, til diagnosticering af invasiv aspergillose hos patienter uden hæmatologisk cancer.

Materialer og metoder

patienter og kliniske prøver

fra november 2009 til januar 2011 vi rekrutterede 175 patienter med en eller flere lavere respiratoriske prøver indsendt til mikrobiologiske laboratorium. De fleste af de patienter (96,5%) havde klinisk mistanke om nedre luftvejsinfektioner og mindst en invasiv pulmonal aspergillose host faktor, eksklusive hæmatologisk cancer. I alt 322 prøver blev indsamlet. Prøver med ubestemte resultater blev testet igen, og det andet resultat blev valgt. Prøver viser en bekræftende ubestemt PCR resultat blev udelukket fra analysen (n = 14; 4,3%). Antallet af prøver undersøgt /opsamlet var som følger: spontan sputum (n = 142/145), bronkial aspirat (n = 104/111), BAL (n = 61/65), og beskyttet børste kateter (n = 1/1 ).

To patienter havde en enkelt prøve, hver med en ubestemt resultat, og blev udelukket fra analysen. De resterende 173 patienter blev klassificeret som havende eller ikke har invasiv pulmonal aspergillose eller anden mug infektion i henhold til de reviderede kriterier i den europæiske organisation for forskning og behandling af kræft (EORTC) [20], [21] eller Bulpa kriterier (udelukkende til patienter med KOL) [20], [21]. Kolonisering blev defineret som isoleringen af ​​

Aspergillus

spp. i lavere respiratoriske prøver i patienter, der ikke opfylder EORTC eller Bulpa kriterier. Skrumpelever blev inkluderet som en vært faktor, da invasiv aspergillose er blevet fundet i kritisk syge patienter med cirrose og ingen andre disponerende tilstande [8]. De prædisponerende betingelser for invasiv aspergillose var aktive solid cancer (16,8%), cirrhose (16,8%), corticosteroid forbrug (71,7%), HIV-infektion (15,6%), COPD (52,6%), organtransplantation (nyre [1,2%] , hjerte [3%], lever [4,6%]), neutropeni, (4,6%) eller ingen (3,5%). En stor del af patienterne (90%) var forbrugende antibiotika, når prøven er udtaget.

Alle prøver blev opnået, når klinisk indiceret, og ingen yderligere prøver blev anmodet om undersøgelsen. Prøverne blev prospektivt indsamlet og patienternes diagrammer blev retrospektivt revideret. Klinikere blev blindet til PCR-resultat, som ikke blev medtaget som en mikrobiologisk diagnostisk kriterium.

Sample behandling, genomisk

Aspergillus

dna-ekstraktion, og forstærkning ved hjælp MycAssay ™ Aspergillus

prøver blev opdelt for fungal kultur og DNA-ekstraktion. Alle prøver blev behandlet for

Aspergillus

DNA-detektion, og de fleste (n = 298/308, 97%) blev dyrket på både bakterier og svampe-medier. BAL-prøver (1 ml) blev centrifugeret ved 3.000

g

i 10 minutter. De koncentrerede opnåede pellets blev bearbejdet for fungal kultur og udstrøget på dyrkningsmedier plader. Sputum og bronchial aspirat blev omdannet til væske ved tilsætning af acetylcystein (Pharmazam, Spanien) og tilsat til agarpladerne under anvendelse af en steril løkke (10 pi). De fungale kulturmedier var Sabouraud-dextrose agar med chloramphenicol og hjerne-hjerte infusion agar med antibakterielle midler. De bakterielle dyrkningsmedier var fåreblodsagar og chokoladeagar. Filamentøse fungale isolater blev identificeret ifølge standard morfologiske procedurer.

Prøver til DNA-ekstraktion blev opbevaret nedfrosset ved -20 ° C indtil batch analyse. Tykke mukøse prøver, såsom sputum og bronchial aspirat, blev omdannet til væske ved tilsætning af BBL ™ MycoPrep ™ Reagent (Becton Dickinson, Shannon, Irland). Disse prøver og BAL-prøver (1 ml) blev derefter centrifugeret ved 3.000

g

i 20 minutter. De opnåede pellets blev behandlet for

Aspergillus

DNA-ekstraktion ved hjælp af den manuelle MycXtra® svampe DNA-ekstraktion kit (Myconostica, nu et Lab21 selskab, Cambridge, UK), som omfatter en mekanisk afbrydelse trin. BAL supernatanter blev opbevaret i galactomannan beslutsomhed.

Renset udvundet genomisk

Aspergillus

DNA blev yderligere forstærket ved hjælp MycAssay ™ Aspergillus sættet (Myconostica, nu et Lab21 selskab, Cambridge, UK) i Cepheid SmartCycler ® platform (Cepheid, Sunnyvale, Californien, USA). MycAssay ™ Aspergillus er designet til detektion af genomisk DNA fra 18 forskellige

Aspergillus

arter (herunder

A. Fumigatus

,

A. Flavus

,

A. Terreus

, og

A. niger

) ved hjælp af molekylære beacons. Assayet er rettet mod 18S rRNA-genet og indeholder en intern kontrol af planteoprindelse at undgå falsk-negative resultater på grund af tilstedeværelsen af ​​PCR-inhibitorer.

Kort fortalt 10 pi af det ekstraherede DNA blev blandet med de amplifikationsreagenser i et endeligt reaktionsvolumen på 25 pi. PCR-resultater for hver prøve blev rapporteret som negative (prøver uden

Aspergillus

DNA-amplifikation med positiv forstærkning af den interne kontrol), positive (prøver med

Aspergillus

DNA-amplifikation) eller ubestemt (prøver med negativ

Aspergillus

DNA-amplifikation og svigt af forstærkning af den interne kontrol). Den MycXtra® DNA-ekstraktion kit og MycAssay ™ Aspergillus blev anvendt i overensstemmelse med producentens anvisninger [22]. Det overgangssted (Cp) var den cyklus nummer, hvor real-time PCR-test blev positiv

Dataanalyse

Ingen af ​​patienterne havde vist invasiv pulmonal aspergillose.; kun sandsynligt invasiv aspergillose blev anset for at være en sand infektion. Vi beregnede følsomhed, specificitet, positiv prædiktiv værdi (PPV), negativ prædiktiv værdi (NPV), sandsynligheden ratio for et positivt resultat (LR +), sandsynligheden ratio for et negativt resultat (LR), og diagnostiske odds ratio (DOR) af PCR til diagnose af invasiv pulmonal aspergillose. Som flere respiratoriske prøver blev undersøgt i adskillige patienter blev de diagnostiske værdier af PCR beregnes ud fra både resultaterne af den første prøve forelagt mikrobiologiske laboratorium og om resultaterne af enhver prøve fra den samme patient. PCR og svampe kultur blev beskrevet og sammenlignet ved hjælp af chi-square test og en standard binomial metode til beregning af 95% konfidensintervaller.

Etik erklæring

Denne undersøgelse blev godkendt af de lokale etiske komité (Comité Ético de Investigación Clínica (CEIC-A1)). Deltagerne forudsat at deres skriftligt informeret samtykke til at deltage i undersøgelsen. Alle patientdata blev anonymiseret efter opsamling.

Resultater

De 173 patienter undersøgt var for det meste mænd (76,3%) og havde en gennemsnitsalder på 60,8 ± 19,5 (2-96) år. Patienterne blev klassificeret som havende sandsynlig invasiv aspergillose (n = 15; 8,7%), mulig invasiv aspergillose (n = 3; 1,7%),

Aspergillus

kolonisering (klinisk ikke-signifikant

Aspergillus

isolation [n = 21; 12,2%], pulmonal scedosporiosis [n = 1; 0,6%]), eller ikke-invasiv støber infektion. De 15 patienter med sandsynlig invasiv aspergillose er opsummeret i tabel 1. På tidspunktet for prøvetagning, alle patienter havde feber, der ikke reagerede på bredspektrede antibiotika, og 80%, der kræves adgang til intensivafdelingen. En stor del (40%) havde KOL som den underliggende prædisponerende tilstand. I 14 ud af de 15 tilfælde, lungen var den eneste organ inficeret. Serum galactomannan beslutsomhed var eneste positive i 5 (35,7%) ud af de 14 patienter, hvor det blev anvendt.

Aspergillus

spp. blev isoleret i 63/308 (22%) prøver fra 31 patienter. Fordelingen arter var som følger:

A. fumigatus

(n = 45),

A. niger

(n = 10),

A. terreus

(n = 7),

A. flavus

(n = 5), og andre (n = 3) spp.

Aspergillus

spp. blev isoleret i en eller flere kliniske prøver fra 15 patienter med sandsynlig invasiv aspergillose.

MycAssay ™ Aspergillus var positiv i 54/254 (17,5%) prøver, og i mindst én prøve fra 14 af de 15 patienter med invasiv aspergillose. Cp værdier af positive PCR bestemmelser var lavere i prøver fra patienter med sandsynlig aspergillose end i prøver fra patienter med klinisk ikke-signifikant

Aspergillus

(30,18 ± 3,3 vs. 33 ± 2,66;

P

= 0,001). Dette fund indikerede en højere belastning af

Aspergillus

spp. hos patienter med invasiv aspergillose end i dem uden.

Som forventet, at andelen af ​​prøver med

Aspergillus

isolation eller med positive PCR-resultater var højere hos patienter med invasiv aspergillose (tabel 2). Overensstemmelse mellem svampe kultur og PCR var høj i alle prøver og prøver fra patienter med eller uden invasiv aspergillose (83,9%, 86,5%, og 83,5%, henholdsvis). Uoverensstemmelser meste fundet i prøver giver

Aspergillus

uden DNA-amplifikation (ca. 10% af prøverne). Interessant, var de fleste afvigelser fundet i prøver fra patienter uden invasiv aspergillose (PCR-negative /kultur-positive resultater, 86%; PCR-positive /kultur-negative resultater, 94,4%). Prøverne med PCR-positive /kultur-negative resultater viste højere Cp-værdier end de prøver, hvor dyrkning og PCR var overensstemmende. Analysen af ​​prøver fra patienter med invasiv aspergillose viste, at andelen af ​​prøver, hvor PCR resultatet var positivt (63%) ikke adskilte sig fra den andel af prøver, hvor

Aspergillus

spp. blev isoleret (75%) (

P

= 0,615). Resultaterne af sammenligningen af ​​PCR og fungal kultur med BAL, spyt, og bronchiale aspiratprøver prøver er vist i tabel 3. Ydeevnen for PCR og fungal kultur afveg ikke med den type af prøven undersøgt (

P

havde imidlertid analyse af multiple prøver ikke påvirke specificitet på nogen måde. For at undersøge, hvordan den diagnostiske værdi af PCR kunne påvirkes i forskellige situationer, blev patienterne opdelt i følgende grupper: patienter med KOL (n = 91), patienter med infektion ikke bedre med antibiotika (n = 28), og patienter i den intensive afdeling med lungebetændelse (n = 35). Følsomhed og specificitet forblev upåvirket af denne lagdeling. MycAssay ™ Aspergillus resultater forelå ca. 4 timer efter prøven modtagelse. I modsætning hertil antal dage til visualisering af svampevækst i de mikrobiologiske dyrkningsplader var som følger: gennemsnit, n = 4,3 ± 4,1; median, n = 3; og tilstand, n = 2.

I 14 ud af de 15 patienter med sandsynlig invasiv pulmonal aspergillose blev prøverne taget før indledningen af ​​svampedræbende behandling, og ingen yderligere prøver blev undersøgt i løbet af antimykotisk behandling. Serielle prøver fra de resterende patient (. Nr 15, tabel 1) blev undersøgt; af de fem prøver taget under svampedræbende behandling, tre var positive for MycAssay og to var negative. Interessant, efter prøverne blev negativ for MycAssay, patientens kliniske tilstand forbedret. Af de tre patienter med mulig invasiv aspergillose, en modtog voriconazol og forbedret, og to modtog ikke antimykotisk behandling og døde. Resultatet af MycAssay ™ Aspergillus var negativ for prøverne fra de tre patienter med mulig invasiv aspergillose.

Diskussion

Spektret af patienter med risiko for invasiv pulmonal aspergillose er vokset i de senere år på grund af en stigning i antallet af patienter med andre end hæmatologiske lidelser prædisponerende tilstande. Denne udvidelse er blevet illustreret i undersøgelser udført på store tertiære hospitaler, hvor sagen samling ikke var begrænset til hæmatologi menigheden og intensiv pleje enheder, og hvor et stort antal obduktioner udføres [6], [8], [23].

Invasiv aspergillose hos patienter med ikke-hæmatologiske maligniteter er kendetegnet ved høj dødelighed (60-100%) [6], [10], [11], hvilket formentlig afspejler begrænsningerne i de nuværende diagnostiske værktøjer baseret på radiologi eller mikrobiologi og den lave indeks klinisk mistanke.

Diagnose af invasiv aspergillose er baseret på en kombination af kompatible kliniske resultater hos patienter med risikofaktorer, sammen med histopatologiske tegn på invasion, radiologiske fund, isolering af

Aspergillus

spp i lavere prøver luftveje eller påvisning af cirkulerende biomarkører i fluider. Histopatologi er nødvendig for at opnå en endelig diagnose, selvom lungebiopsier sjældent opnås [24]. Sammenlignet med kultur og molekylær diagnostisk test, nøjagtighed histomorfologisk diagnose er i bedste fald 80% [25]. De radiologiske fund, der er almindelig hos patienter med neutropeni og invasiv aspergillose er sjældne i ikke-neutropene patienter [8], [26]. Kultur af lavere prøver luftveje fra patienter med klinisk mistanke stadig udbredt, selv om den er langsom og begrænset af lav følsomhed og specificitet [27]. Endvidere påvisning af cirkulerende galactomannan i serumprøver fra ikke-neutropene patienter har en lav følsomhed for diagnosen invasiv aspergillose [6], [14], [16].

I dette scenario udvikling af hurtige, følsomme, og specifikke diagnostiske procedurer til at opdage

Aspergillus

i respiratoriske prøver tract fra patienter uden hæmatologiske maligniteter er attraktiv. En af de mest opmuntrende nye procedurer er DNA

Aspergillus

påvisning af real-time PCR-analyser. I vores undersøgelse, PCR-resultater var til rådighed så hurtigt som 4 timer efter prøvetagning, som er et must hurtigere ekspeditionstid end de 3 dage skal overholde væksten af ​​

Aspergillus

i kultur. Imidlertid kunne tiden fra prøven kultur og detektion af svampevækst reduceres ved at inspicere plader hver dag, også i weekenden. Desuden vil samtidig forstærkning af DNA på respiratoriske prøver og svampe kultur tillade os at identificere isolater til artsniveau og udfører svampedræbende resistensbestemmelse på isolater.

Påvisning af

Aspergillus

DNA i BAL-prøver er opmuntrende og bekræfter diagnosen invasiv aspergillose hos flere patienter end konventionelle procedurer [28]. Det er blevet undersøgt mest i patienter med hæmatologiske lidelser [29], [30], [31]. En nylig meta-analyse viste en sensitivitet og specificitet på 0,91 og 0,92, henholdsvis, men fremhævede manglende standardisering [32]. Ikke desto mindre kræver yderligere evaluering rolle PCR i prøver luftveje fra ikke-hæmatologiske patienter. BAL-prøver blev opsamlet i 4 ud af de 15 patienter med sandsynlig invasiv aspergillose. I alle tilfælde de BAL galactomannan koncentrationer over 0,5 ng /ml.

Den manglende standardisering af

Aspergillus

PCR til dato har hæmmet dens indførelse i de definerer kriterier for sandsynlig aspergillose [20 ]. MycAssay ™ Aspergillus er en kommercielt tilgængelig realtids-PCR til påvisning af de mest klinisk relevante

Aspergillus

arter [22]. Som et fuldt standardiseret CE-mærket test med fuld produktion kvalitetskontrol, MycAssay ™ Aspergillus opfylder kravene til standardisering af

Aspergillus

PCR nødvendigt at bekræfte en diagnose af invasiv aspergillose. MycAssay ™ Aspergillus er tidligere analyseret på BAL-prøver [19], spytprøver [33], [34], og vævsprøver [35]. MycAssay kan udføres i det kliniske mikrobiologiske laboratorium af personale uddannet i molekylær biologi teknologi; de anslåede omkostninger af testen per beslutsomhed i Spanien er € 25-30.

Vi evaluerede MycAssay ™ Aspergillus på prøver nedre luftveje (herunder BAL, spontan spyt, og bronkial aspirat) fra patienter med andre prædisponerende betingelser end hæmatologisk malignitet og klinisk mistanke om invasiv aspergillose. Vi fandt, at de tre typer af prøver nedre luftveje undersøgte var egnede til påvisning af

Aspergillus

spp. DNA. Vores guldstandarden var klinisk i at vi klassificerede patienter, der anvender de af EORTC [20], [21] eller af Bulpa [20], [21] kriterier. Følsomheden af ​​PCR var høj og øges, når flere prøver per patient blev undersøgt; specificitet blev ikke påvirket af herunder flere prøver pr patient. Følsomhed var også høj hos patienter med KOL, en prædisponerende tilstand hos en stor del af de undersøgte patienter. MycAssay ™ Aspergillus viste en høj NPV, hvilket antyder, at et PCR-negative resultat i enhver nedre luftveje prøve fra en patient uden hæmatologisk cancer kunne bruges i forbindelse udelukke invasiv aspergillose. I modsætning hertil PPV af assayet var lav. En forklaring på dette fund er, at MycAssay ™ Aspergillus er i stand til at opdage

Aspergillus

DNA i prøver fra koloniserede patienter eller fra patienter med andre former for aspergillose, herunder kronisk og allergisk pulmonal aspergillose [36], [37] ( tabel 5). En anden forklaring kan være den lave forekomst af invasiv pulmonal aspergillose fundet i studiepopulationen.

Den vigtigste begrænsning af vores undersøgelse er, at vi ikke var i stand til at inkludere histologisk påvist tilfælde, fordi der ikke lunge biopsier blev indsamlet eller post mortem undersøgelser udført. Dette er en almindelig begrænsning i studier, der evaluerer rolle af nye diagnostiske værktøjer til diagnosticering af invasiv aspergillose. Derfor blev patienterne diagnosticeret med invasiv aspergillose baseret på mikrobiologiske eller radiologiske data. Det faktum, at

Aspergillus

blev isoleret fra nedre prøver luftveje i alle patienter kunne forklare den høje korrelation fundet mellem svampe kultur og PCR. I vores patienter, har MycAssay ™ Aspergillus ikke tillade os at diagnosticere nye tilfælde, der kunne blive savnet med svampe kultur. En anden begrænsning er, at vi klassificeret vores patienter ved hjælp EORTC kriterier, der specifikt er udviklet til patienter med cancer. EORTC kriterier blev valgt i mangel af specifikke kriterier for ikke-kræftpatienter.

Vi konkluderer, at MycAssay ™ Aspergillus udført på nedre prøver luftveje viste høj følsomhed til diagnosticering af invasiv aspergillose hos patienter uden hæmatologisk cancer. Følsomhed øges, når flere prøver blev analyseret. Følsomhed var høj for patienter med KOL, som er en ny risiko befolkning i nogle hospitaler. MycAssay ™ Aspergillus vist sig at være særligt nyttige til at udelukke diagnosen invasiv aspergillose og væsentligt reduceret tid til diagnose sammenlignet med konventionelt fungal kultur. MycAssay ™ Aspergillus bør anvendes samtidig med svampe kultur af lavere prøver luftveje for at give supplerende oplysninger om svampedræbende modtagelighed og sikre nøjagtig identifikation af isolater.

Tak

Vi vil gerne takke Thomas O’Boyle til redigering og korrekturlæsning artiklen. Vi sætter pris på de værdifulde forslag af David W. Denning efter sin kritiske gennemgang af manuskriptet. Denne undersøgelse blev præsenteret i en del på det 21. europæiske kongres om Klinisk Mikrobiologi og Infektionssygdomme (ECCMID) og 27. internationale kongres om kemoterapi (ICC), Milano, Italien, 2011 (P-2095).