PLoS ONE: galectin-1, -3 og -9 Expression og Klinisk signifikans i Pladecellekræft Livmoderhalskræft Cancer

Abstrakt

Galectins er proteiner, der binder β-galactosid sukker og give en ny type af potentielle biomarkører og terapeutiske mål i kræft. Galectin-1, -3 og -9 er blevet genstand for forskellige forskergrupper, men deres udtryk og funktion i livmoderhalskræft er stadig uklart. Formålet med denne undersøgelse var at bestemme fænotypen af ​​galectin-1, -3 og -9 udtrykkende celler og tilknytningen til klinisk-patologiske parametre i livmoderhalskræft. Galectin ekspression blev scoret i tumorceller, tumor epitel infiltrerende immunceller og stromaceller i skællede livmoderhalskræft (n = 160). Korrelationer med klinisk-patologiske parametre og overlevelse blev undersøgt i henhold til bemærkningen anbefalinger. Vi har desuden undersøgt, om de galectins blev udtrykt af tumorceller, fibroblaster, makrofager og T-celler. Galectin-1 og -9 blev begge udtrykt af tumorceller i 11% af prøverne, mens 84% ​​udtrykte galectin-3. Stærk galectin-1-ekspression ved tumorceller var en uafhængig prædiktor for dårlig overlevelse (hazard ratio: 8,02, p = 0,001) og korreleret med øget tumor invasion (p = 0,032) og modtager postoperativ strålebehandling (p = 0,020). Svag og positiv tumorcelle galectin-3-ekspression blev korreleret med øget og reduceret tumorinvasion (p = 0,012). Tumor celle ekspression af galectin-9 viste en tendens mod forbedret overlevelse (p = 0,087). Den fremherskende immun celletype udtrykker galectin-1, -3 og -9 var CD163

+ makrofager. Galectin-1 og -3 blev udtrykt ved en mindre population af T-celler. Galectin-1 blev hovedsageligt udtrykt af fibroblaster i tumorstroma. Afslutningsvis mens tumorcelle ekspression af galectin-9 syntes at repræsentere en gavnlig respons, kan galectin-1-ekspression anvendes som en markør for en mere aggressiv anti-cancer behandling

Henvisning:. Punt S, Thijssen VL , Vrolijk J, de Kroon CD, Gorter A, Jordanova ES (2015) galectin-1, -3 og -9 Expression og Klinisk signifikans i Pladecellekræft livmoderhalskræft. PLoS ONE 10 (6): e0129119. doi: 10,1371 /journal.pone.0129119

Academic Redaktør: Pierre Busson, Gustave Roussy, FRANCE

Modtaget: Februar 6, 2015; Accepteret: Maj 4, 2015; Udgivet: Juni 12, 2015

Copyright: © 2015 Punt et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed: Alle relevante data er inden for papir og dens støtte Information filer

Finansiering:. det hollandske Cancer Society (https://www.kwf.nl) støttet økonomisk SP (give UL2010-4801) og VLT (tilskud VU2009-4358) . De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Livmoderhalskræft forårsages af højrisiko human papillomavirus (HPV) -infektion [1]. Dødeligheden er faldet med 80% i 20

århundrede, hovedsageligt ved at indføre screening for forebyggelse og tidlig påvisning af livmoderhalskræft [2]. Trods disse fremskridt livmoderhalskræft er stadig den næststørste årsag til døden ved kræft hos unge kvinder i hele verden. Yderligere forskning er således forpligtet til at vælge prognostiske biomarkører og terapeutiske mål. Potentielle nye mål er galectins, proteiner, der binder p-galactosid-holdige glycaner gennem en eller flere carbohydratgenkendelsesdomæne (CRD) [3]. I de senere år er det blevet klart, at galectins spiller en vigtig rolle i tumor progression ved at regulere immun celle homeostase [4], tumormetastaser [5], og tumor angiogenese [6].

De mest undersøgte galectin typer så langt er galectin-1, -3 og -9. Galectin-1 består af en homodimeriserende CRD som homodimerizes og udtrykkes i de fleste organer og af makrofager, T- og B-celler [4]. Galectin-1 øger cellulær vækst og motilitet og binder celler til den ekstracellulære matrix (ECM), samt til andre celler [7]. I tumormikromiljøet, galectin-1 inducerer angiogenese [4,8] og kan lette metastase ved binding tumorceller til endotelceller. Fungerer som en svag T-cellereceptor-ligand, er apoptose induceret i aktiverede T-celler [4,7]. Galectin-3 er et kimært galectin indeholdende et CRD og en N-terminal ikke-CRD-domænet. Galectin-3 udtrykkes af makrofager, fibroblaster, aktiverede T-celler, eosinofiler, epitel- og tumorceller, inducere anti-apoptotisk signalering [4]. Ekspression er associeret med en differentieret fænotype og ECM vedhæftning regulering [9]. Ligesom galectin-1, har galectin-3 også været forbundet med forøget angiogenese [10] og metastase [11]. Ekstracellulær galectin-3 kan binde T-celler, neutrofiler og makrofager [9]. I T-celler, har galectin-3-ekspression vist sig at fremme overlevelse, når udtrykkes intracellulært, men at inducere apoptose, når til stede ekstracellulært [12]. Galectin-9 indeholder to CRDer forbundet af et linkerpeptid med variabel længde. Galectin-9 kan udtrykkes ved epitelceller samt immunceller, herunder T-celler og neutrofiler [13]. Virker proteinet som en eosinofil kemoattraktant mens intracellulær ekspression er blevet rapporteret at inducere apoptose i aktiverede T-celler, potentielt via T-celle immunoglobulin mucin-3 (TIM-3), hvilket fører til inhibering af T-hjælper 1 (Th1) og Th17 celler og stimulering af regulatoriske T-celler (tregs) [14,15]. Galectin-9 udtryk er også blevet rapporteret i endotelceller men synes rollen af ​​dette protein i angiogenese at være begrænset [16].

Inddragelsen af ​​galectins i forskellige processer i tumorprogression understøttes af rapporter, der ændrede galectin udtryk har diagnostisk eller prognostisk værdi i forskellige typer kræft, herunder æggestokkene, prostata, bryst, hoved og hals og ikke-småcellet lungecancer [17-26]. I squamous cervikale cancerpatienter, der fik strålebehandling, en nylig undersøgelse rapporteret, at ekspression af galectin-1 af tumoren var en uafhængig prædiktor for lokalt recidiv og ringe overlevelse [27]. Ekspression af galectin-1 i stroma af livmoderhalskræft er også blevet korreleret med højere histopatologisk bedømmelse [28] og lymfeknudemetastaser [29]. Information om galectin-3 og galectin-9 udtryk i livmoderhalskræft er begrænset. Lee et al beskrev en omvendt sammenhæng mellem galectin-3 [30] og tumor klasse, mens galectin-9 udtryk har vist sig at være positivt korreleret med tumor differentiering klasse i skællede livmoderhalskræft [31].

For at få bedre indsigt i rollen som galectins i livmoderhalskræft, er formålet med denne undersøgelse var at bestemme, om ekspressionen af ​​galectin-1, -3 og -9 er forbundet med overlevelse i et skællede livmoderhalskræft kohorte (n = 160). Ekspression af de forskellige typer af galectins efter tumorceller og efter tumor epitel og stroma infiltrerende celler blev scoret. Vi undersøgte også som kræft-associerede stromale (CAS) celler (fibroblaster, makrofager og T-celler) udtrykte disse galectins.

Materialer og metoder

Patient materiale

formalin-fikseret , paraffinindlejrede (FFPE) planocellulære livmoderhalskræft prøver opnået fra alle patienter, som gennemgik primær kirurgisk behandling for livmoderhalskræft mellem 1985 og 2005 med tilstrækkeligt materiale til rådighed for analyse som beskrevet før [32], blev hentet fra arkiverne i Patologisk Institut , Leiden University Medical center (n = 160). Ingen af ​​patienterne havde modtaget præoperativ anticancerterapi. Sygdom-fri og sygdomsspecifikke overlevelsestid blev defineret som den tidsperiode i måneder fra datoen for kirurgi til datoen for tilbagefald og død fra livmoderhalskræft, hhv. Patienter, der døde af andre årsager blev censureret i overlevelse analyser. Patient og tumor egenskaber er anført i S1 tabel. Patient prøver blev håndteret i overensstemmelse med de medicinske etiske retningslinier, der er beskrevet i adfærdskodeksen for korrekt sekundær anvendelse af humant væv af den hollandske sammenslutning af Biomedical videnskabelige selskaber. Patienterne modtager oplysninger om den sekundære anvendelse af vævet udtaget til diagnostisk brug og kan aktivt gøre indsigelse mod sekundær brug. I henhold til retningslinjerne, har al menneskelig materiale, der anvendes i denne undersøgelse blevet anonymiseret. På grund af den anonymisering, er retrospektiv forskning ikke kræver etisk godkendelse fra Institutional Review Board og individuel samtykke er ikke påkrævet.

Immunofluorescerende farvninger

Triple immunfluorescensfarvning blev udført på 4 um tykke FFPE dele af alle prøver. Efter antigen-genvinding under anvendelse Tris-EDTA-buffer (10 mM TRIS, 1 mM EDTA pH 9,0), polyklonale kanin-anti-galectin-1 (1: 1000, ab25138, RRID: AB 2.136.615, parti GR127498-2, Abcam, Cambridge, UK) , monoklonalt rotte anti-galectin-3 (1:50, klon M3 /38, RRID: AB 1.134.237, meget B160878, BioLegend, London, UK) og polyklonale gede anti-galectin-9 (1: 200, AF2045, RRID: AB 2137232, parti KNI0112011, R 5%, 5-50%, 50% eller næsten alle celler positive i mindst fire områder pr dias ved hjælp af en LSM700 konfokal laser scanning mikroskop udstyret med en LCI Plan-Neofluar 25x /0.8 Imm Korr DIC M27 objektiv (Zeiss, Göttingen, Tyskland). Billeder blev erhvervet ved anvendelse af en C-Apochromat 40x /1.20 W Korr mål (Zeiss).

Statistisk analyse

Statistiske analyser blev udført under anvendelse af SPSS-version 20.0 (IBM Corp., Armonk, USA). Korrelationer (R) mellem galectin udtryk scoringer fra både Ruiter og Stacks analyser blev testet ved hjælp af Spearman rang korrelation rho test. Baseret på scatterplots, korrelationer med R 0,45 blev betragtet som positive og korrelationer med R 0,67 stærk. Korrelationer mellem galectin udtryk og klinisk-patologiske variable blev undersøgt ved hjælp af Pearson Chi-Square og Fishers eksakte test. Overlevelse korrelationer blev testet ved hjælp af Kaplan-Meier og Cox proportionel risiko modeller, hvor p-værdier under 0,05 blev anset for statistisk signifikant.

Resultater

Angivelse af galectin typer 1, 3 og 9 i skællede livmoderhalskræft

galectin-1, -3 og -9 blev udtrykt i cytoplasmaet i forskellige celletyper (figur 1). Ekspressionen af ​​de forskellige galectin typer af tumor epitelceller blev kvantificeret ved den Ruiter score. Tumor epitelceller i de fleste prøver ikke udtrykke galectin-1 (89% af prøverne) eller galectin-9 (89% af prøverne), se fig 2A. For at vurdere alle galectin udtrykker celler, blev galectin udtryk vurderet i både tumor epitel og stroma rum ved hjælp af in-house billedanalyse software program Stacks. Galectin-1 var generelt til stede i et stort antal stromale celler (Fig 2B). Variabel ekspression af galectin-3 blev observeret både i tumorceller og stromaceller. Ekspression af galectin-3 blev fundet i 84% af prøverne. Stærk tumorceller galectin-3-ekspression var ofte til stede enten på den invasive grænse eller midten af ​​tumor felter. I tumorceller, galectin-3-ekspression ofte optrådte gensidigt udelukkende med ekspression af galectin-1 eller -9, eftersom dets ekspression blev reduceret, når ekspression af en anden type galectin var til stede. Hvis dette var tilfældet, blev galectin-3 primært til udtryk i midten af ​​tumor felter, mens galectin-1 og -9 blev udtrykt ved den invasive grænse. Celler, der udtrykker galectin-9 var generelt ikke rigelige i enten tumoren epitel eller stromacellerne. Når galectin-9 blev udtrykt af tumor epitelceller, var det primært placeret på den invasive grænser.

Repræsentant tredobbelt farvning billede i et skællede livmoderhalskræft prøve FFPE indeholder tumor epitelceller udtrykker galectin-1 (A, blå) , galectin-3 (B, grøn) og galectin-9 (C, rød) ved en 200x forstørrelse. Tumor epitel felter er markeret med stiplede linier. Typisk galectin-1 blev udtrykt i et stort antal stromaceller og kunne svagt udtrykkes af tumorceller epitelceller. Galectin-3 blev udtrykt i stromaceller og ofte enten i epiteliale field centre (som vist her) eller i små grupper af epitelceller ved den invasive grænse. Galectin-9 kunne også udtrykkes ved både stromale og epitelceller. Når galectin-1 eller -9 blev udtrykt af epitelceller blev denne typisk observeres ved grænserne af tumor marker, mens galectin-3 blev udtrykt i midten, som vist i denne figur. Tumor infiltrerer CAS celler udtrykker galectin-1, -3 og -9 blev også hyppigt observeret inden tumor epitel felter

brøkdel af prøver, hvor tumorceller udtrykte galectin-1, -3 eller. – 9 eller en kombination er vist i A. fraktionen af ​​prøver positive for én eller ingen af ​​de galectin typer undersøgt, er vist i den første procentdele kolonnen, mens fraktioner af prøver, der udtrykker to eller flere galectin typer er vist i den anden kolonne. Samlet galectin-1, -3 og -9 enkelt-, dobbelt og tredobbelt positive pixels i tumoren stroma og tumor epitel er repræsenteret i B. Mean og standardafvigelse af middelværdien vises.

Sammenhæng mellem galectin-1, -3 og -9 udtryk

Alle galectin udtrykke enkelt-, dobbelt og tredobbelt positive celler i tumoren stroma var signifikant korreleret med de samme celler i tumoren epitel (0,57 R 0,72, p 0,0001, S1 Fig). Enkelt positiv galectin-1, -3 og -9 blev ikke signifikant korreleret med hinanden. Stærke korrelationer blev fundet mellem galectin-9 enkelt positive celler og galectin-3/9 dobbelt positive celler i både epitel og i det stromale tumor rum (R = 0,706, p 0,0001; R = 0,680, p 0,0001, henholdsvis). Galectin-3 enkelt positive celler var stærkt korreleret med galectin-1/3 dobbelt positive celler i tumor stroma (R = 0,693, p 0,0001). Triple positive celler var stærkt korreleret med galectin-1/9 dobbelt positive celler i tumor epitel (R = 0,682, p 0,0001). Triple positive celler i stroma blev korreleret med galectin-3/9 dobbelt positive celler (R = 0,704, p 0,0001).

Fænotype af galectin udtrykkende celler

For at undersøge, om makrofager og T celler udtrykte galectin-1, -3 og -9, udførte vi dobbelt farvninger med type 2 makrofag markør CD163 eller T-celle markør CD3 (figur 3). Galectin-1-udtrykkende celler var ikke rigelige i tumoren epitel, men når det forekommer størstedelen var CD163

+. Et mindretal af galectin-1-udtrykkende celler var CD3

+. Mest stromal galectin-1-udtrykkende celler blev ikke udtrykker CD163 eller CD3 og blev betegnet fibroblaster baseret på cellemorfologi.

Repræsentative billeder fra dobbelte farvninger af galectin-1 og CD163 (A) eller CD3 (B), galectin- 3 og CD163 (C) eller CD3 (D) og galectin-9 og CD163 (E) eller CD3 (F) er vist. Billeder, der indeholder både farvninger og DAPI er vist i den højre kolonne. Pile angiver eksempler på dobbelt positive celler.

Næsten alle ikke-epitelceller udtrykker galectin-3 var CD163

+ makrofager. Det omvendte var ikke sandt, som vi også observeret et stort antal CD163

+ celler, som ikke udtrykker galectin-3. En mindre bestand af galectin-3 udtrykkende celler var CD3

+.

De fleste galectin-9 udtrykkende celler var CD163

+ og næsten alle CD163

+ makrofager var galectin-9

+. Vi har ikke observere CD3

+ galectin-9 celler, der udtrykker.

Selvom sammenhænge mellem galectins og angiogenese er blevet beskrevet, har vi ikke observere en klar beholder farvning eller lignende morfologi sammenlignet med en farvning for CD105 (S2 fig). Da vi også ikke fandt en korrelation med antallet af CD105

+ fartøjer (data ikke vist), galectin-1, -3 og -9 var ikke rigeligt udtrykt af endotelceller i denne undersøgelse kohorte.

Sammenhæng mellem galectin udtryk og klinisk-patologiske parametre

Pladecellekræft livmoderhalskræft patienter med TNM stadie I (n = 110), II (n = 44), III (n = 4) og IV (n = 2) blev inkluderet i denne undersøgelse. Den mediane alder var 45 år (spændvidde 22-87) og tyve patienter døde af sygdommen inden for tre år. Stærk udtryk for galectin-1 ved tumorceller var signifikant korreleret med dårlig sygdomsfri (p = 0,0004) og sygdomsspecifikke overlevelse (p 0,0001, figur 4A). Den hazard ratio for sygdomsspecifikke overlevelse i tilfælde af kraftig galectin-1 tumor udtryk var 8,9 (95% CI: 2,961 til 26,717, tabel 1). Tumorcelle galectin-1-ekspression blev også korreleret med øget tumorinvasion dybde (p = 0,032, tabel 2). Sandsynligvis relateret til dette, patienter med tumorer udtrykker galectin-1 oftere modtaget postoperativ strålebehandling (p = 0,020). Strålebehandling blev administreret til 16 ud af 18 patienter med ethvert udtryk for galectin-1 og til alle seks patienter med stærke udtryk for galectin-1.

Kaplan-Meier overlevelse kurve for stærk i forhold til fraværende til svag udtryk for galectin -1 ved tumorceller er vist i A. En overlevelsesanalyse sammenligne patienter med nuværende versus fraværende tumor udtryk for galectin-9 er vist i B. Vejviser

tumor udtryk for galectin- 9 viste en tendens mod forbedret overlevelse (p = 0,087, fig 4B). Interessant, at selv svage tumor galectin-3-ekspression blev korreleret med øget invasion dybde, blev positivt udtryk korreleret med aftagende tumorinvasion (p = 0,012, tabel 2). Både galectin-3 og galectin-9-ekspression var signifikant korreleret med tilstedeværelsen af ​​HPV type 16 eller 18. Tumorstørrelse og tilstedeværelsen af ​​vaskulære invasion eller lymfeknudemetastase ikke var signifikant forskellige mellem prøver med og uden ekspression af galectin-1, -3 eller -9 enten i tumoren epitel eller stroma.

Multivariate analyse af sygdomsspecifikke overlevelse blev udført for tumor galectin-1 intensitet ved at korrigere for FIGO stadie, lymfeknude metastaser og vaskulære invasion (tabel 1 ). FIGO stadie blev anvendt, fordi dette overdækket tumorstørrelse og infiltration dybde og var kendt for et større antal patienter end de separate variable. Lymfeknudemetastase og vaskulær invasion er to andre parametre vides at påvirke livmoderhalskræft patient prognose. Galectin-1 tumor intensitet uafhængigt korreleret med dårlig overlevelse, med en hazard ratio på 8,0. Når FIGO stadie og lymfeknude metastaser status blev erstattet af TNM stadie, korrelationen forblev statistisk signifikant (hazard ratio: 6,84, 95% CI: 2,013 til 23,256, p = 0,002). Tumor galectin-1 intensiteten var også en selvstændig indikator for dårlig sygdomsfri overlevelse (hazard ratio: 3,41, 95% CI: 1,296-8,972, p = 0,013). Data var tilgængelige for 155 patienter, herunder 41 tilbagefald og 30 dødsfald.

Diskussion

Den foreliggende undersøgelse undersøgte sammenhænge mellem udtryk for galectin-1, -3 og -9 og overlevelse i en skællede livmoderhalskræft kohorte (n = 160) efter bemærkningen anbefalinger til prognostiske tumor markør undersøgelser [35]. Galectin udtryk ved tumorceller og tumor epitel og stroma infiltrerende celler blev scoret med to komplementære pointsystemer. Vi undersøgte også som cancerassocierede stromale (CAS) (fibroblaster, makrofager og T-celler) udtrykte disse galectins.

Eftersom tumorcelle ekspression af galectin-1 og -9 var generelt lav eller fraværende, galectin-1 og -9 i tumor epitel felter blev overvejende udtrykt af tumor epitel infiltrerende immunceller. Dette forklarer også manglen på en stærk sammenhæng mellem total udtryk og Ruiter score for galectin-1 og -9, mens epitel galectin-3 enkelt positivitet var stærkt korreleret med Ruiter score for galectin-3. De korrelationer viser også, at de to scoring metoder var ikke kun supplerende, men også valideres hinanden.

galectin-1, -3 og -9 forventedes at blive udtrykt af makrofager, T-celler, epitelceller og fibroblaster [4,13]. Mest galectin-1-udtrykkende celler infiltrerer i tumoren epitel var makrofager, overvejende CD163

+ type 2 makrofager. En mindre population bestod af galectin-1-udtrykkende T-celler, selv om flere galectin-1 negative T-celler var i tæt kontakt med de galectin-1-positive celler. Dette svarer til den foreslåede funktion af galectin-1 til at inducere T-celle apoptose resulterer i immunsuppression [4,7]. Mængden af ​​galectin-3-ekspression af CAS celler var meget varierende mellem patienter, men dette galectin typen var praktisk taget altid udtrykt af CD163

+ type 2 makrofager. Dette svarer til en

in vitro

undersøgelse, der viser, at galectin-3 er mere ofte udtrykt i type 2 end type 1 makrofager og også i højere grad end galectin-1 [36]. Galectin-3 blev således overvejende udtrykt af type 2 makrofager, hvilket antyder, at tumorinfiltrerende celler, der udtrykker galectin-3 kan være forbundet med en tumorfremmende mikromiljø. Dette svarer med sine indberettede funktioner i fremme celleoverlevelse [4] og angiogenese [10]. Da galectin-1 blev praktisk taget altid udtrykt af tumorinfiltrerende immunceller og galectin-3 blandt ikke-tumorceller ved CD163

+ makrofager, er galectin-1/3 dobbelt positive celler forventes at være tumor epitel infiltrerende CD163

+ makrofager. Kontakt mellem galectin-3 udtrykkende celler og T-celler var mere tydeligt end for galectin-1, hvilket igen kan inducere T-celle apoptose [12]. En undersøgelse foretaget af HIRASHIMA et al. har beskrevet, at galectin-9 udtrykkes af T-celler og neutrofiler [13]. I modsætning hertil har vi vist, at denne galectin overvejende udtrykkes af makrofager i livmoderhalskræft. Derudover næsten alle CD163

+ makrofager var galectin-9

+ og vi ikke observere galectin-9 udtrykker T-celler. Funktionen af ​​galectin-9 i tumorassocierede makrofager kræver yderligere undersøgelser.

galectin-1 er blevet beskrevet at være sjældent udtrykt af tumorceller [19,27,28], som blev bekræftet af den aktuelle undersøgelse. Patienter med stærk tumorceller galectin-1-ekspression havde øget tumor invasion og modtaget postoperativ strålebehandling behandling oftere. Tumor galectin-1-ekspression var en uafhængig forudsiger af dårlig sygdomsspecifikke overlevelse. Dette antyder, at galectin-1-ekspression er forbundet med en mere aggressiv tumorvækst. Dette svarer til en undersøgelse af Huang et al., Som rapporterede om en sammenhæng mellem tumor udtryk for galectin-1 og dårlig overlevelse i livmoderhalskræft kræftpatienter behandlet med helbredende-hensigt strålebehandling [27]. Faktisk øges galectin-1-ekspression generelt forbundet med dårlig prognose i forskellige tumortyper [17,18,26,27]. Galectin-1 kan øge tumorprogression og invasivitet [37]. Den foreliggende undersøgelse, udført i en konsekutiv kohorte af squamous cervikale kræftpatienter, viser, at tumor galectin-1 er en markør for ringe overlevelse.

uoverensstemmende resultater er blevet beskrevet til galectin-3, som er blevet forbundet med god prognose [17,38] samt dårlig prognose i forskellige tumortyper [24,39]. I cervikal neoplasi galectin-3 er blevet vist, at være omvendt korreleret med progression [30]. Vores resultater antyder, at stærke galectin-3-ekspression er korreleret med mindre tumorvækst, mens svage galectin-3 kan korreleres med øget vækst tumoren. Tumor galectin-3 ekspression kan være nødvendigt for en differentieret fænotype og ECM adhæsion [9]. Funktionen af ​​galectin-3 til at fremme celleoverlevelse [4] og potentielt inducere kemo-resistens [40] og T-celle apoptose [12] kan forklare korrelationen mellem ekspression og dårlig prognose. Fordi de funktioner og korrelationer med klinisk-patologiske parametre og overlevelse galectin-3 er så forskellige, vil det være en udfordring at bruge denne galectin type som en prognostisk eller diagnostisk markør i livmoderhalskræft.

udtryk for galectin- 9 af tumorceller er generelt blevet korreleret med gode prognostiske markører i forskellige tumortyper [17,22,23,26,41]. synes den rolle, de forskellige typer af galectins at være tumortype afhængig selvom [41], og galectin-9 er blevet korreleret med ringe overlevelse i klar-celle renalcellecarcinom [42]. I livmoderhalskræft, har en sammenhæng med høj differentiering kvalitet blevet beskrevet for galectin-9 udtryk [31], efter aftale med tendens til forbedret prognose beskrevet i vores studie. Tumor galectin-9-ekspression kan være relateret til HPV-infektion, som forskellige vira, herunder humant cytomegalovirus, har HIV og influenza-virus blevet vist at inducere galectin-9-ekspression [43-45]. Vi fandt, at galectin-3 og galectin-9 udtryk blev begge signifikant korreleret med HPV 16 eller HPV 18 udtryk, støtter denne hypotese.

For at konkludere, tumor galectin-1-ekspression kan anvendes som markør for en mere aggressiv anti -cancer behandling. Galectin-1 og -3 var sandsynligvis co-udtrykt af tumor epitel infiltrerende type 2 makrofager. Tumor galectin-3 kan have dobbeltfunktioner, som svag udtryk var korreleret med øget tumorinvasion, mens positivt udtryk var korreleret med nedsat invasion. Tumor ekspression af galectin-9 udviste en tendens til forbedret overlevelse, hvilket kan være relateret til virus induceret ekspression. Som blokering galectin-1-ekspression er allerede blevet vist at inhibere tumor angiogenese [8] og inducerer T-celle-afhængig tumor afstødning hos mus [46], vores data støtter yderligere undersøgelser af det terapeutiske potentiale af målretning galectin-1 i positive tumorer.

Støtte Information

S1 fig. Epiteliale Stakke versus Ruiter scoringer

doi:. 10,1371 /journal.pone.0129119.s001

(DOCX)

S2 Fig. Galectin og fartøj farvning

doi:. 10,1371 /journal.pone.0129119.s002

(DOCX)

S1 Table. Patient og tumor egenskaber

doi:. 10,1371 /journal.pone.0129119.s003

(DOCX)

S2 Table. Korrelationer mellem galectin udtryk

doi:. 10,1371 /journal.pone.0129119.s004

(DOCX)