PLoS ONE: Udvikling af en High-Throughput Tre-Dimensional Invasion Assay for Anti-Cancer Drug Discovery

Abstrakt

Manglen på tre-dimensionelle (3-D) high-throughput (HT) screening-assays designet til at identificere anti-cancer invasion stoffer er en stor forhindring i at reducere kræft dødelighed, med central udfordring bliver assay standardisering. Præsenteret er udviklingen af ​​en hidtil ukendt 3-D invasion assay med HT potentiale, som involverer omgivende celle-collagen sfærer inden collagen for at skabe en 3D-miljø, hvorigennem celler kan invadere. Standardisering blev opnået ved at udforme en tooled plade med 96 brønde for at skabe et nøjagtigt angivet sted for celle- collagen sfærer og ved at anvende dialdehyd dextran at inhibere kollagen kontraktion, opretholdelse ensartet størrelse og form. Dette tillader automatiseret udlæsning til bestemmelse af virkningen af ​​inhiberende forbindelser på cancercelleinvasion. Følsomhed blev påvist ved evnen til at skelne forskellige grader af invasivitet cancercellelinier, og robusthed blev bestemt ved at beregne Z-faktor. En Z-faktor på 0,65, blev opnået ved at sammenligne virkningerne af DMSO og anti-β1-integrin antistof, en inhiberende reagens, om invasionen af ​​DU145 cancerceller, hvilket antyder dette hidtil ukendte assay er egnet til masseproduktion lægemiddelforskning. Som bevis på princippet blev NCI Diversity Compound Bibliotek screenet mod humane invasive kræftceller. Ni forbindelser, der udviser høj styrke og lav toksicitet blev identificeret, herunder DX-52-1, en forbindelse, der tidligere rapporteret at inhibere cellemigrering, en kritisk determinant af cancer invasion. Resultaterne indikerer, at denne innovative HT platform er en enkel, præcis og let at replikere 3-D invasion assay for anti-cancer drug discovery

Henvisning:. Evensen NA, Li J, Yang J, Yu X, Sampson NS, Zucker S, et al. (2013) Udvikling af en High-Throughput Tre-Dimensional Invasion Assay for Anti-Cancer Drug Discovery. PLoS ONE 8 (12): e82811. doi: 10,1371 /journal.pone.0082811

Redaktør: Ming Tan, University of South Alabama, USA

Modtaget: 12. september 2013; Accepteret: November 6, 2013; Udgivet: 11. december 2013