Tat undergår phosphorylering in vivo på serin-derivater

Phosphorylering er blevet rapporteret for stort set alle HIV-1 accessoriske proteiner, herunder Vpu, Vpr, Vif, Nef, og rev omskriver af HIV-1 virusgener stimuleres ved hjælp af en viral transaktivator-proteiner. Service-sitet af Tat interagerer med værtscelleproteiner elementer, selv om den positivt ladede RNA-bindingssted interagerer med HIV-1 transaktivering resultat RNA.In cellulær-free transskription assays Tat udløser helt forlængelse af transkription. In vivo, tatovering derudover inducerer initiering af transskription i den medfølgende HIV-1 supporter. Tatovering stimulerer skabelsen af ​​transskribere kompleks indeholdende TATA-box-bindende protein, selv om ikke TBP-associerede aspekter, derfor indebærer, at Tat kan berige initiering af transskription, åbenbart i forlig med alle de tidligere erklæring om, at Tat binder direkte til TBP-holdige basal transskription faktor TFIID. Imatinib Glivec

de P-TEFb forårsager HIV-1 transskription fra neo-inkluderet HIV-1 skabelon, histon acetyl transferaser tillader induktion af integrerede HIV-1 provirus. Yderligere CTD kinaser, herunder CDK7 og CDK2 blev ligeledes hævdet at fremme målrettet CTD phosphorylation.Tat sig selv er faktisk et emne vedrørende kovalente modifikationer af vært cellulære proteiner og at være udløst af Tat. Tatovering er lige acetyleret på lysin otteogtyve, inde i serviceområdet, og lysin 50, inde i TAR RNA-bindende domæne. Tatovering kan ubiquitineres på lysin 71and sin ubiquitinering opfordrer de transkriptionelle egenskaber af tatovering. Sidst, Tatovering blev vist sig at methyleres af arginin PRMT6, methyltransferase og thearginine methylering af tatovering negativt lykkedes sin transkriptionsaktivitet. Overraskende, på trods af diskussionen af ​​tatovering med P-TEFb og sandsynligvis yderligere kinaser og sin egen engagement i adskillige proteiner Phosphoryleringsreaktionerne phosphoryleringen af ​​HIV-1 Tat er blot blevet dokumenteret in vitro, men ikke in vivo.

HIV-2 Tat blev bemærket at blive phosphoryleret in vivo formodentlig ved CDK9, men denne phosphorylering var ikke essentiel for Tat-2 fungerer som en transskriptionel aktivator. Vi tidligere beskrevet, at Tat dynamisk interagerer med CDK2 også phosphoryleres med CDK2 og ORcyclin AGE ORcyclinE in vitro. Denne energiske forhold betydeligt vakt spillet af CDK2PERcyclin AGE mod fosforylering af CTD in vitro. I den foreliggende undersøgelse undersøgte vi, om denne phosphorylering indbefatter en regulerende formål i Tat aktiverede HIV-1 transskription og hvorvidt Tattoo phosphoryleres in vivo. De seneste undersøgelser kunne ikke begrænse kun for diskussionen med CDK9 /valsens T1 og afslører, at Tatis position i HIV-1 transskription er meget sofistikeret. Vi har tidligere hævdet, at Tat interagerer direkte eller indirekte ved hjælp af værtscelle proteinphosphatase 1 og proteinphosphatase 2A. Tatovering bindes til protein fosfatase-1, og denne sammenføjning er afgørende for induktion af HIV-1 transskription af tatovering.

Tat interaktion med PP1 er spændende som CDK9 phosphorylationin vivo er reguleret af PP1. Vi har for nylig vist, at Tat binder sig til LIS1 protein, noget af lissence phaly gen, som mutationer skaber en alvorlig hjerne misdannelse. LIS1 ligner interagerer ved hjælp af katalytiske underenhed af PP2A og den N-underenheden af ​​PP2A; og LIS1 sigt inducerer HIV-1 transkription. Tat kan således også være i stand til at forbinde til PP2A, mens der ikke lige har sit katalytiske subunit. Den eksisterende forskning giver yderligere vanskelighed mod tatovering udføre viser, at tatovering kan foretage phosphorylering med CDK2PERcyclin E.We hypotese under, at HIV-1 transskription ved phosphorylering Tat påvirkes af CDK2 og at Tat phosphorylering kunne være vigtig for HIV-1 transskription. ATP-konkurrence ALK-hæmmer

Vi viser under det Tat undergår fosforylering in vivo på serin-derivater, som CDK2 er forbundet med denne phosphorylation.Our oplysninger viser også, at phosphorylering af Tatovering er afgørende for HIV-1 transskription samt den indledende indbyggede HIV-1 provirus. Inde i vores tidligere arbejde vi bekræftet, at CDK2PER cyklin AGE phosphorylerer Cterminal domæne RNA-polymerase II in vitro;., At CDK2 var nødvendig for tatovering-centreret transcriptionin vitro, og at CDK2 phosphorylerer HIV-1 Tat in vitro