PLoS ONE: Svækket NER udtryk for XPF og XPC forbundet med rygning er involveret i Gentagelse af blærekræft

Abstrakte

Den varierede NER gener og rygning er to vigtige risikofaktorer for blærekræft, men mekanismen i NER protein og rygning i kræft progression, dog fortsat uklart. I denne rapport, vi sammenlignede udtryk for NER gener i 79 blærekræft væv med eller uden en gentagelse af real-time PCR og derefter analyseret de varierede NER gener ved immunkemi i 219 blærekræft vævsprøver. Baseret på de kliniske data, analyserede vi den kliniske værdi af varierede NER gener og rygning i 219 blære kræft ved Kaplan-Meier-metoden og Cox proportional hazards regression. Vi fandt udtryk for NER gen XPF og XPC var betydeligt lavere i blærekræft væv med en gentagelse sammenlignet med dem uden et tilbagefald på mRNA-niveau. Også patienter med XPF og XPC defekt havde en statistisk signifikant lavere median gentagelse-overlevelsestid end dem uden den XPF og XPC defekt, og rygning kan gøre denne forskel mere bemærkelsesværdig. Vores resultater antyder, at XPF og XPC ekspression kan være en potentiel prædiktiv faktor for blærecancer, og rygning kan ikke kun påvirke fornyet blærecancer som en enkelt faktor, men også forværre resultaterne af XPF defekten og XPC defekt.

Henvisning: Qiu J, Wang X, Meng X, Zheng Y, Li G, Ma J, et al. (2014) Svækkede NER Udtryk for XPF og XPC forbundet med rygning er involveret i Gentagelse af blærekræft. PLoS ONE 9 (12): e115224. doi: 10,1371 /journal.pone.0115224

Redaktør: Xinbin Chen, University of California i Davis, USA

Modtaget: April 23, 2014 Accepteret: 20. november 2014 Udgivet: 23 December, 2014

Copyright: © 2014 Qiu et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Data Tilgængelighed:. Det forfattere bekræfter, at alle data, der ligger til grund resultaterne er fuldt tilgængelige uden restriktioner. Alle relevante data er inden papiret

Finansiering:. Undersøgelsen blev støttet af National Science Teknologi Pillar Program Kina (nr 2011A322). De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:.. Forfatterne har erklæret, at der ikke findes konkurrerende interesser

Introduktion

Tumorer i blæren er den anden mest almindelige kræftformer i urologiske område. Blærekræft er den fjerde mest almindelige kræftform hos mænd og niende mest almindelig hos kvinder [1]. Af patienterne, vil cirka 50% opleve en gentagelse inden for 2 år efter en indledende diagnose, og 16-25% vil have tilbagefald efter endoskopisk resektion [2]. Derfor er den hyppige gentagelse af blærekræft er et stort medicinsk problem.

Tobaksrygning, som en dominerende risikofaktor for blærekræft, er ansvarlig for ca. halvdelen af ​​tilfældene hos mænd og en tredje i kvinder [3], [4]. Som tobaksrelaterede kræftfremkaldende stoffer danner ofte voluminøse DNA-addukter, bunden skader, enkeltstrengede pauser og dobbelt-strenget pauser [5]. På grund af arten af ​​blæren som en vigtig tomrum organ, de urothelial celler kontinuerligt udsættes for mange DNA-beskadigende reagenser indeholdt i urinen. , DNA-reparation spiller således en vigtig rolle i forebyggelsen af ​​skadelige DNA-skader-inducerede virkninger, såsom mutation ophobning og tumor forekomst [6].

Der er adskillige DNA reparationsmekanismer eksisterende i humane celler og hver pathway fjerner effektivt særlig typer af DNA-beskadigelse [7]. Baseret på den type af DNA-skader, kan de DNA-reparationsveje klassificeres i nukleotid excision reparation (NER), base, excision reparation, mismatch reparation, og rekombinatoriske reparation [8], [9]. NER pathway er den vigtigste DNA-reparationsvej til reparation af voluminøse DNA-skade, der genereres af de fleste miljømæssige faktorer at opretholde genetiske integritet og forhindre udviklingen af ​​mange sygdomme [10], [11].

NER består af ca. 30 proteiner at fjerne helix-forvridende læsioner gennem fire trin: (a) anerkendelse af DNA; (B) åbning af en boble omkring læsionen; (C) indsnit af DNA’et opstrøms og nedstrøms for læsion af endonucleaser; og (d) DNA resyntesen og ligering [12], [13]. XPA til G (xeroderma pigmentosum gruppe A-G), ERCC1 (excision reparation cross komplementation GROUP1), RPA1, RPA2 (replikation protein A1, replikation protein A2) er de vigtigste proteiner i denne vej, og der er to skader anerkendelse arme af NER pathway: global genom reparation (BSI) og transkription-koblet reparation (TCR). BSI omfatter de ikke-kodende dele af genomet, tavse gener og den ikke-transkriberede bevoksning af aktive gener. TCR sikrer, at den transkriberede streng af aktive gener er repareret med højere prioritet end resten af ​​genomet ved anvendelse af RNA-polymerase II som en læsion sensor. Når skaden er anerkendt gennem en af ​​disse processer, den resterende del af reparationen følger en konvergent vej [14], [15].

I denne undersøgelse undersøgte vi mRNA ekspressionen af ​​9 gener (XPB til XPG, ERCC1, RPA1, RPA2) involveret i NER vej i blærekræft væv med /uden tilbagefald, sammenlignet med den normale blærekræft væv. De patienter uden tilbagefald i 2 år blev inkluderet i den ikke-tilbagefald gruppen og patienter med tilbagefald i 2 år tjente som tilbagefald gruppen. Deres tumor prøver resektion i den første operation blev undersøgt. Derefter blev ovennævnte gener med signifikant forskellige udtryk af mRNA analyseret af en immunhistokemisk metode (i 219 patienter med blærekræft) og sammenhængen mellem disse gener og en gentagelse af blærekræft blev bestemt.

I betragtning af tobaksrygning er en fremherskende risikofaktor for blærekræft, vi analyserede den kliniske værdi af varierede NER gener og rygning i 219 blære kræft baseret på de kliniske data fra Kaplan-Meier-metoden og Cox proportionel risiko regressions.

Materialer og metoder

2.1 etik Statement

alle forsøgsprotokollen er godkendt af den etiske bestyrelse Bethune International Peace Hospital og Xinqiao hospital på tredje Military Medical University, og alle deltagere forudsat skriftligt informeret samtykke.

.

2.2 undersøgelse emner

undersøgelsen blev designet med to uafhængige sæt

Det første sæt omfattede 79 patienter, som gennemgik transuretral eller delvis cystektomi (gennemsnitsalder 62,4 ± 12 år, 52 mænd og 27 kvinder) i vores afdeling fra 2007 til 2011. Ingen af ​​de 79 patienter havde fået anticancer narkotika, før den første cystektomi. Blandt disse 79 patienter, fik 37 af dem ikke har et tilbagefald i mindst 24 måneder efter den første cystektomi og var stadig i live nu, 29 af dem havde fået en anden cystektomi og 13 af dem var døde (5 tilfælde modtog sit andet cystektomi og 8 tilfælde ikke). Tumoren eksemplarer af alle kirurgiske patienter blev indsamlet og opbevaret korrekt. De patienter uden tilbagefald i 2 år blev inkluderet i den ikke-tilbagefald gruppen og patienter med tilbagefald i 2 år tjente som tilbagefald gruppen. Deres tumor prøver resektion i den første operation blev undersøgt. Prøverne blev lynfrosset på det tidligst mulige tidspunkt efter resektion.

Det andet sæt omfattede 219 patienter, som ikke var det samme som de 79 patienter over. De paraffin voks-indlejret væv af blære papillær urothelial karcinom blev indsamlet fra patienter, som gennemgik transuretral resektion af blæren tumor i vores afdeling fra 2002 til 2007. Disse væv, i henhold til den nye WHO klassifikation, blev tildelt patologisk til papillære urotelial neoplasma lav maligne (PUNLMP; 58 tilfælde), lav kvalitet papillær urothelial karcinom (93 tilfælde) og high-grade papillær carcinom (68 tilfælde). De patienter uden tilbagefald i 36 måneder blev inkluderet i den ikke-tilbagefald gruppen og patienter med tilbagefald i 36 måneder tjente som tilbagefald group.The ekspressionsniveauer for NER gener i blærekræft væv af disse patienter blev analyseret ved immunhistokemi metode.

2.3 RNA-ekstraktion og cDNA-syntese

Tumor-fragmenter blev homogeniseret i RNA lysepuffer i is med en Ultra-Turrax og RNA blev oprenset ved anvendelse af SV Total RNA Purification Kit. Retro-transkription til cDNA blev udført under anvendelse af høj kapacitet cDNA Archive Kit i overensstemmelse med producentens forslag.

2.4 Real-time PCR

Relativ genekspression blev målt i tre eksemplarer og normaliseret til

β

actin (ACt) under anvendelse TaqMan genekspression assays og 7500 real-time PCR-system til følgende gentranskripter: XPB (Hs0554450_ml), XPC (Hs01104206_m1), XPD (Hs00361161), XPE (Hs00172018_ml), XPF (Hs00193342), XPG (Hs00164482), ERCC1 (Hs01012161), RPA1 (Hs00161419_m1), RPA2 (Hs00358315_m1). For at sikre, â-actin selv ikke skifte mellem forskellige prøver, forholdet OFA-actin til en anden henvisning gen GAPDH [16], blev målt.

2.5 Immunhistokemi

Vævssnit af 5 um blev deparaffineret, rehydreret i graduerede alkoholer og behandles under anvendelse af streptavidin immunperoxidase-metoden. Kort fortalt blev snit forelagt antigen hentning af mikrobølgeovnen behandling i 10 minutter i 0,01 mol /l citratbuffer (pH 6,0). Objektglas blev efterfølgende inkuberet i 10% normalt serum i 30 min, efterfulgt af en inkubation natten over ved 4 ° C med passende fortyndet primært antistof. Musene anti-humant monoklonalt antistof (XPC, XPF) blev anvendt ved en 1:100 fortynding. Efter primært antistof, blev prøver inkuberet med biotinyleret anti-mus eller anti-kanin immunoglobuliner i 15 minutter ved 37 ° C, efterfulgt af streptavidinperoxidase komplekser i 15 minutter ved 37 ° C. 3,3′-diaminobenzidin blev anvendt som chromogen, og hematoxylin blev brugt som en nuklear kontrastfarve.

Immunhistokemisk evaluering blev gennemført af mindst to uafhængige observatører, der scorer den anslåede procentdel af tumorceller viser nuklear farvning, uafhængigt af signalet styrke. Resultater blev scoret i urothelial carcinoma læsioner ved at estimere procentdelen af ​​tumorceller viser karakteristiske nuklear farvning. En defineres arbitrært 10% cutoff blev taget til at klassificere TCC data i kategoriske grupper (positive versus negative).

2.6 Statistisk analyse

Den statistiske analyse blev udført af SPSS 13.0. Relativ genekspression blev beregnet under anvendelse af 2

-ΔCT, og uparrede to-tail t-tests blev anvendt til at identificere en væsentlig ændring udtryk i tilbagevendende cancervæv sammenlignet med ikke-tilbagevendende kræftvæv. En kontingenstabel blevet til med chi-square eller Fisher eksakt sandsynlighed test for immunhistokemiske data. Gentagelse sandsynlighed blev beregnet ved Kaplan-Meier-metoden med statistiske forskelle evalueret ved log rank test. Den relative risiko for tilbagefald fra blærekræft blev estimeret ved en multivariat Cox proportional hazard model. For alle statistiske test, p 0,05 blev betragtet som signifikant

Resultater

3.1 NER gener og en gentagelse af blærekræft

For at tydeliggøre sammenhængen mellem NER mekanisme og blærekræft. tilbagefald, blev ekspressionsniveauerne af NER gener herunder XPB til XPG, ERCC1, RPA1 og RPA2 i kræft væv fra 79 patienter med blærekræft bestemt af real-time PCR. I disse 79 patienter, 37 patienter havde ingen tilbagefald i 24 måneder, og disse blev inkluderet i den ikke-tilbagefald gruppe; 29 patienter havde et tilbagefald i 24 måneder og blev inkluderet i tilbagefald gruppe; og de andre 13 patienter døde og blev inkluderet i døden gruppen. Resultaterne undersøgelse viste ekspressionsniveauerne af XPC og XPF blev væsentligt reduceret i tilbagefald gruppen og død sammenlignet med den ikke-tilbagefald gruppe (fig. 1 og tabel 1). Men XPB, XPD, XPE, XPG, ERCC1, RPA1 og RPA2 ikke ændre sig væsentligt. Sammenlignet med gentagelse gruppe, ekspressionsniveauerne af XPC og XPF var langt lavere i død gruppe; Men det havde ingen statistik signifikans

NER gener afskrift blev opdaget af real-time kvantitativ RT-PCR i blære kræft i tre undergrupper:. Ikke-recidiv Group, patienter, der ikke har en gentagelse i 2 år ; Gentagelse Group, patienter, der havde en gentagelse inden for 2 år; Dead Group, patienter, der var døde efter operationen inden for to år. Den fold ændring var normaliseret mod GAPDH og derefter alle gener sammenlignet med de udtryk for XPC i Gentagelse Group (+ signal). *, P 0,01 sammenlignet med the.Non-recidiv Group

3.2 Ekspressionsniveauerne for XPF og XPC og patologi blærekræft

For at undersøge forholdet. mellem XPF, XPC og udvikling af blærecancer blev sammenhængen mellem ekspressionsniveauerne af XPF og XPC og patologien af ​​blærekræft analyseret. Det blev konstateret, at andelene af XPF (-) og XPC (-) var 54,4% og 50,0% i den høje kvalitet papillær cancervæv, 39,7% og 37,9% i PUNLMP cancervæv og 49,5% og 45,2% i lav kvalitet papillær kræft væv (tabel 2 og fig. 2). Resultaterne af den statistiske analyse af immunhistokemiske data antydede, at andelene af XPF (-) og XPC (-) var signifikant højere i høj kvalitet papillære cancervæv end i PUNLMP cancervæv (P 0,05). Ingen statistisk forskel blev observeret mellem PUNLMP og lav kvalitet tumorer (P 0,05). Desuden andelene af XPF og XPC med samtidigt reduceret ekspression var signifikant højere i høj kvalitet papillær kræft væv end i PUNLMP kræft væv (P 0,05).

(a) udtryk for XPF og XPA i normal blære væv. (B) Positiv XPF udtryk og positiv XPC udtryk. (C) Positive XPF udtryk og negative XPC udtryk. (D) Negativ XPF ekspression og positiv XPC ekspression. (E) Negativ XPF udtryk og negative XPC udtryk.

3.3 Angivelse af NER gener og rygning

Forbindelsen mellem ekspressionsniveauerne af NER gener og rygning i 79 blære cancerpatienter blev analyseret. Rygning Situationen blev opdelt i 4 niveauer: aldrig røget, 20 pack-år, 20-50 pack-år og 50 pack-år. Resultaterne undersøgelse viste, at selv om ingen statistik signifikans eksisterede blandt de 4 rygning grupper, der stadig var en klar tendens. Ekspressionsniveauerne af XPF og XPC var lidt lavere i tumorvæv af storrygere end i de mildt rygning patienter (fig. 3).

udtryk for XPF og XPC i 79 af blærekræft af 4 rygning undergrupper. Den grove solid linje repræsenterer middelværdien CT værdi og fejlen barer repræsenterer standardafvigelsen.

For yderligere at undersøge forbindelsen mellem ekspressionen af ​​NER gener og rygning, ekspressionsniveauerne af XPF og XPC i 219 blære kræftpatienter og deres rygning situationer blev analyseret. Vi fandt ingen forskel i andelene af XPF (-) og XPC (-) blandt 20 pack-års gruppe, 20-50 pack-års gruppe og aldrig røget gruppe. Interessant, andelene af XPF (-) og XPC (-) i . 50 pack-års gruppe var højere end i aldrig røget gruppe og 20 pack-års gruppe (tabel 2 og tabel 3)

3.4 Angivelse af XPF og XPC blærekræft tilbagefald

for yderligere at undersøge forholdet mellem de reducerede ekspressionsniveauer af XPF og XPC og udvikling af blærekræft, forbindelsen mellem ekspressionsniveauerne af XPF og XPC med blærekræft tilbagefald blev analyseret. Fig. 4 viser Kaplan-Meier-kurver for de to gener og rygning status med de justerede P-værdierne. Vi fandt, at patienter med lavt niveau af XPF og XPC havde en højere recidiv end dem med høj grad af XPF og XPC (figur 4a og 4b P. 0,05), i øvrigt, denne forskel var mere indlysende i gruppen XPF (- ) XPC (-.) (fig 4c). Blandt de clinicopathologic variabler, tumorklassificering og fase resulterede som vigtige prognostiske faktorer på univariat analyse (tabel 3). Den multivariate analyse af Cox blev udført, herunder alle de variabler signifikant forbundet med overlevelse på univariate og angivet, at den fase af sygdommen var den eneste uafhængige faktor forudsige patienternes udfald (tabel 4).

Kaplan-Meier kurver bruge log rank test for tilbagefald for blærekræft hos patienter. (A) gentagelse af blærekræft hos patienter med XPF (-) og XPF (+); (B) tilbagefald for blærekræft hos patienter med XPC (-) og XPC (+); (C) gentagelse af blærekræft hos patienter med XPF (-) kombineret med XPC (-) og XPF (+) kombineret med XPC (+), samtidighed; (D) gentagelse af blærekræft hos patienter med aldrig røget og nogensinde røget.

Cum, kumulative

.

3.5 rygning status og blærekræft gentagelse

Det var blevet bekræftet, at rygning er forbundet med blærekræft [30] , og vi fandt, at rygning også var forbundet med en gentagelse af blærekræft. Fig. 4d viser Kaplan-Meier kurver af rygning status med de justerede P-værdier, de patienter, der havde en historie af rygning havde en højere recidiv end de patienter, der ikke havde rygning historie. Endvidere fandt vi, at rygning status ikke var en separat faktor til blærekræft, kan det arbejde med XPF og XPC gener samtidigt, især i patienter med et lavt niveau af XPF (Fig. 5 a og c), og XPC (fig. 5 b og d). Desuden blev mængden af ​​rygning af patienten i forbindelse med fornyet blærecancer, især i gruppen af ​​XPF (Fig. 5) (-) og XPC (-). (. Figur 5 e og f)

Kaplan-Meier kurver ved hjælp af log rank test for tilbagefald for blærekræft hos patienter. (A) gentagelse af blærekræft i XPF (-) gruppe med forskellig status af rygning (aldrig røget, 20 pack-år, 20-50 pack-år og 50 pack-år); (B) tilbagefald for blærekræft i XPC (-) gruppe med forskellig status af rygning; (C) gentagelse af blærekræft i XPF (+) gruppe med forskellig status af rygning; (D) gentagelse af blærekræft i XPC (+) gruppe med forskellig status af rygning; (E) gentagelse af blærekræft hos patienter af XPF (-) med aldrig røget og XPF (-) med røget mere end 50 pakke-år (f) gentagelse af blærekræft hos patienter af XPC (-) med aldrig røget og XPC (-) med røget mere end 50 pakke-år (g) Den tilbagefald for blærekræft hos patienter i XPF (+) med aldrig røget og XPF (+) med røget mere end 50 pakke-år; (H) gentagelse af blærekræft hos patienter af XPC (+) med aldrig røget og XPC (+) med røget mere end 50 pack-år.

Diskussion

Blærekræft tilbagefald er et klinisk almindeligt problem. I denne undersøgelse undersøgte vi sammenhængen mellem blærekræft tilbagefald og NER gener. Undersøgelsens resultater foreslog, at to NER gener, XPF og XPC, var involveret i tilbagefald for blærekræft. Desuden har vi også fundet, at som en ekstern faktor, rygning var ikke kun involveret i tilbagefald af blærekræft uafhængigt, men også kombineret med NER gener at spille en malign rolle.

XPF, også kendt som excision reparation crosscomplementing gruppe 4 (ERCC4), er kritisk involveret i NER vej [17]. XPF hasan vigtig rolle i rekombination reparation, mismatch reparation og eventuelt immunoglobulin klasseskift [18], [19]. XPF indeholder det katalytiske domæne af nukleasen og ERCC1 er påkrævet for DNA-binding og stabilisering af XPF. Den ERCC1-XPF-komplekset kunne fjerne 3 ‘single-standed flapper fra DNA ender og spalter 5’side af en boble i NER at udskære mod læsionen [20]. Vi fandt XPF var signifikant mindre i tumorvæv af recidiverende blærecancer og resultaterne fra patologi sammenligning viste, at muligheden for tilbagefald inden for 3 år var højere for blærecancerpatienter med XPF (-) end for dem med XPF (+). Det anføres klart, at XPF var involveret i tilbagefald for blærekræft, som var i overensstemmelse med resultaterne fra Z Zhang et al [21]. De bemærkede, at polymorfien af ​​XPF-357-sted blev tæt korreleret med ekspressionen af ​​XPF og længere påvirket tilbagefald af blærekræft. Men havde de ikke undersøgt de forskellige ekspressionsniveauer af XPF i tumorvæv af recidiverende og ikke-recidiverende blærecancer og heller ikke havde udledt en klar konklusion. Vi er ikke kun undersøgt de forskellige ekspressionsniveauer af XPF i tumorvæv af recidiverende og ikke-recidiverende blærecancer, men også undersøgt sammenhængen mellem andelen af ​​XPF (-) og blære patologisk sortering. Vi fandt andelen af ​​XPF (-) var signifikant højere i høj kvalitet papillær cancervæv end i PUNLMP cancervæv og lav kvalitet papillary cancervæv, hvilket tyder XPF spillede ikke kun en vigtig rolle i tilbagefald af blærecancer, men også en beskyttende rolle i udviklingen af ​​blærekræft. Den reducerede XPF var involveret i udviklingen af ​​blærekræft.

XPC er en DNA-skader anerkendelse protein, der spiller en vigtig rolle i NER processen. Den XPC protein binder tæt med en HR23B protein til dannelse af en stabil XPC-HR23B kompleks. Undersøgelser viser, at XPC-HR23B komplekset er det første protein komponent, som genkender og binder til de beskadigede steder [22]. Den XPC protein kan også spille en vigtig rolle i andre DNA-skader-inducerede cellulære reaktioner, herunder cellecyklus checkpoint regulering og apoptose [23] – [25]. XPC defekter er blevet fundet i mange typer af cancer, herunder lunge- og hudkræft [26], [27]. XPC knock-out transgene mus undersøgelser viser den høje forekomst af en prædisposition for mange typer af cancer [28]. Selv om flere undersøgelser har vist det tætte forhold mellem XPC og udvikling af blærekræft, er der stadig ingen tegn på, at XPC er involveret i tilbagefald for blærekræft.

Vi fandt XPC blev dæmpet udtrykt i recidiverende blærekræft end ikke-recidiverende blærecancer. Det tyder på, at den reducerede XPC kan være involveret i tilbagefald for blærekræft. For at bekræfte denne hypotese analyserede vi forbindelsen mellem ekspressionsniveauerne af XPC i tumorvæv af 219 blærecancerpatienter og deres prognose og fundet XPC (-) patienter havde en signifikant højere tilbagefald sats. Endvidere er andelen af ​​XPC (-) blev korreleret med patologiske klassificering af blærecancer. Dette er i overensstemmelse med resultaterne fra Chen et al:. XPC nederlag var tæt forbundet med og involveret i udviklingen af ​​blærekræft [29]

Selvom den lave udtryk for XPF og XPC var involveret i tilbagefald af blære kræft, den omfattende analyse fandt, at der ikke var nogen synergistisk ekstraudstyr effekt mellem reduceret ekspression af XPF og XPC. Sagen-kontrollerede analyse viste, at tilbagefald af patienterne med samtidig reduceret ekspression af XPF og XPC ikke var signifikant højere end for patienter med kun reduceret ekspression af XPF eller XPC. Dette antyder, at XPF og XPC begge relateret til tilbagefald for blærekræft og involveret i flere cellulære respons veje. Men som for erstatte af blærecancer, XPF og XPC spiller deres roller i den samme mekanisme, NER mekanisme, men ikke i forskellige mekanismer.

Mange undersøgelser har vist, at rygning spiller en malign rolle i udviklingen af blærecancer [30] – [32]. Vores undersøgelse bekræftede yderligere denne konklusion. Ved omhyggeligt at analysere rygning status, udtryk for NER gener og tilbagefald for blærekræft, har vi udledt den konklusion, at rygning ikke kun er involveret i tilbagefald for blærekræft selvstændigt, men også kombinerer med NER gener som XPF og XPC at spille en ondartet rolle samtidigt, hvilket yderligere forværret de maligne resultater af blærekræft. Tidligere undersøgelser tydede på, at rygning kan påvirke tilbagefald for blærekræft gennem NER mekanisme. Dog viste, vores undersøgelse rygning ikke kun påvirket den beskyttende rolle NER mekanisme blærekræft, men også sandsynligvis påvirket andre beskyttelsesmekanismer under udviklingen af ​​blærekræft.

På trods af vores undersøgelse, der viser, at XPF, XPC og rygning blev tæt forbundet med tilbagefald for blærekræft, årsagen til lav udtryk for XPF og XPC var stadig uklart. Ud over den polymorfi af XPF og XPC promotorer kan påvirke ekspressionen af ​​disse gener, sandsynligvis er der nogle ukendte mekanismer, som påvirker transkription og translation af XPF og XPC gener, selv påvirker deres proteinnedbrydning og protein effektivitet osv For grundigt at belyse biologisk mekanisme for blærekræft tilbagefald, disse felter har brug for yderligere undersøgelse. Den omstændighed, at XPF og XPC er involveret i tilbagefald for blærekræft bringer en ny pålidelig fingerpeg for yderligere undersøgelser på den mekanisme af blærekræft tilbagefald.

Tak

Forfatterne vil gerne tak Xinhong Zhao og Dr. Junlei Zhang (Department of Microbiology) for deres fremragende teknisk bistand og kritisk læsning og værdifulde kommentarer til manuskriptet.