PLoS ONE: Cirkulerende endotel progenitorceller i kastrationsresistent prostatakræft: et randomiseret, kontrolleret, Biomarkør Study

Abstrakt

Baggrund

Endotheliale stamceller (CEPS) og cirkulerende endothelceller (de central- og østeuropæiske) er potentielle biomarkører for reaktion på anti-angiogene behandlingsregimer. I den aktuelle undersøgelse, undersøgte vi effekten af ​​docetaxel og sunitinib på CEP /CEC kinetik og klinisk respons i kastrationsresistent prostatacancer (CRPC) patienter.

Patienter og metoder

tidligere havde modtaget kemoterapi patienter med CRPC blev inkluderet i dette studie til at modtage enten sunitinib (37,5 mg /d), i kombination med docetaxel (75 mg /m

2) eller docetaxel alene. CEP og CEC kinetik blev analyseret for hver cyklus. Det primære formål var at sammenligne CEP /CEC farmakodynamik mellem begge behandlingsarme. Vi undersøgte også, hvis CEC /CEP pigge, fremkaldt af MTD docetaxel, er undertrykt af sunitinib hos patienter behandlet med docetaxel /sunitinib i forhold til docetaxel monoterapi.

Resultater

I alt 27 patienter blev inkluderet . Vi observerede en betydelig forøgelse af CEP /CEC (total /levedygtige) tæller over tid inden for hver cyklus (koefficienter 0,29233, 0.22092 og 0.26089 henholdsvis; p 0,001). Men ingen forskelle mellem behandlingsgrupperne med hensyn til CEP og CEC kinetik, blev påvist. I docetaxel monoterapi armen 4 (30%) patienter reagerede på behandling med en 50% PSA tilbagegang, mens 9 (64%) patienter viste en PSA fald i kombinationsgruppen (N.S.). De median PFS i docetaxel monoterapi gruppen var 3,1 måneder (2,6-3,6 måneder, 95% CI) og 6,2 måneder (4.9-7.4 måneder, 95% CI; p = 0,062) i kombination arm. Sunitinib /docetaxel var rimeligt veltolereret og toksicitet håndterbare.

Konklusion

Sammenfattende blev der ingen signifikante forskelle i CEC og CEP kinetik mellem behandlingsgrupperne arme observeret, selv om en meget betydelig stigning i landemiljøprofiler /CØE inden for hver cyklus med tiden blev detekteret. Disse resultater afspejler den udfordring, vi står over for, når der anvendes antiangiogene strategier i CRPC. er behov for yderligere præklinisk forskning for at belyse de underliggende molekylære mekanismer. Men docetaxel /sunitinib terapi resulterede i et bedre svar i form af PSA tilbagegang og en tendens til, forbedret PFS.

Trial indskrive

clinicaltrialsregister.eu EudraCT 2007-003705-27

Henvisning: Fuereder T, Wacheck V, Strommer S, Horak P, Gerschpacher M, Lamm W, et al. (2014) cirkulerende endotel progenitorceller i kastrationsresistent prostatakræft: et randomiseret, kontrolleret, Biomarkør Study. PLoS ONE 9 (4): e95310. doi: 10,1371 /journal.pone.0095310

Redaktør: Jose Luis Perez-Gracia, Universitetsklinikken i Navarra, Spanien

Modtaget: November 4, 2013; Accepteret: 25 marts 2014; Udgivet: 22 April, 2014

Copyright: © 2014 Fuereder et al. Dette er en åben adgang artiklen distribueres under betingelserne i Creative Commons Attribution License, som tillader ubegrænset brug, distribution og reproduktion i ethvert medie, forudsat den oprindelige forfatter og kilde krediteres

Finansiering:. Dette arbejde blev støttet af en ubegrænset forskningsbevilling på Sanofi og Pfizer Corporation. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet

Konkurrerende interesser:. Pfizer Corpporation og Sanofi, der finansierede denne undersøgelse af en ubegrænset forskningsbevilling, som konkurrerende interesse. De finansieringskilder havde ingen rolle i studie design, indsamling og analyse af data, beslutning om at offentliggøre, eller forberedelse af manuskriptet. Dette ændrer ikke vores tilslutning til PLoS ONE politikker på datadeling og materialer.

Introduktion

Prostatakræft er den mest almindelige kræftform blandt mænd, og tegner sig for den anden mest almindelige årsag til kræft relaterede dødsfald [1]. Baseret på to skelsættende forsøg docetaxel blev betragtet som den standard for pleje i CRPC i mange år [2], [3]. Meget nylig blev tre nye forbindelser, abiraterone, enzalutamide og cabazitaxel, godkendt til CRPC behandling [4], [5]. Sipuleucel-T giver en ekstra behandlingsmulighed [6]. Selv om disse hidtil ukendte terapeutiske midler resulterede i en signifikant stigning i prostatakræft overlevelse, er der stadig et presserende behov for nye behandlingsmuligheder koncepter. Tumorvaskulaturen har vist sig som et klinisk valideret terapeutisk mål siden 1970’erne [7]. Intensiv forskning resulterede i en bedre forståelse af mekanismerne i angiogenese. Landemiljøprofiler, en lille subpopulation af knoglemarvsceller afledte endotelceller, blev identificeret som afgørende bidragsydere til processen med

de novo

vaskulogenese [8]. Derudover blev CØE undersøgt og fundet at være forhøjet i humane maligniteter [8]. Der er omfattende dokumentation for, at både konventionel kemoterapi og anti-angiogenese lægemidler modulere CEP og CEC kinetik afspejler både, at et svar på antiangiogen terapi, og en flugt mekanisme cytotoksisk kemoterapi [8], [9]. Især kan administration af kemoterapi på den maksimalt tolererede dosis føre til CEP rekruttering, som hjemsted for den levedygtige tumor rand, der karakteristisk tilbage efter en sådan behandling [10]. Forstyrrelse af CEP spike af anti-angiogenese lægemidler resulterede i en markant reduktion i tumor fælg størrelse og blodgennemstrømningen

in vivo

[10] .Til dato, adskillige hæmmere af angiogenese er blevet godkendt til behandling af humane maligniteter . Blandt dem sunitinib er grundigt undersøgt i kliniske forsøg, og er godkendt til renalcellecancer, GIST og neuroendokrine kræft i bugspytkirtlen. Men for CRPC, de første lovende resultater af prækliniske antiangiogene tilgange, prøvning både antiangiogene lille molekyle VEGFR hæmmere og antistoffer, kunne ikke blive oversat til klinikken. For eksempel vidste sunitinib monoterapi, som blev evalueret i et stort multicenter fase III studie, ikke opfylder det primære effektmål med langvarig samlet overlevelse, trods en stigning i PFS [11] – [13]. Som følge af komplekse ændringer i tumoren genetiske baggrund, målrettet mod tumorvaskulatur ved antiangiogen monoterapi er ikke tilstrækkelig i de fleste tilfælde. Således det store flertal af antiangiogene forbindelser, der anvendes i klinikken, er implementeret i form af kombination strategier. Konsekvent, der er god prækliniske dokumentation for, at kombination strategier for sunitinib med konventionelle kemoterapeutiske stoffer er gavnlige [14]. Baseret på denne baggrund hypotese vi, at sunitinib terapi af CRPC patienter kan sløve docetaxel induceret CEP pigge, som skulle resultere i en bedre klinisk resultat i forhold til docetaxel monoterapi. Desuden har vi forsøgt at få bedre indsigt i de mekanismer for antiangiogen behandling fiasko, som er blevet observeret i CRPC patienter hidtil. Her rapporterer vi resultaterne af en sonderende biomarkør forsøg undersøger CEP og CEC kinetik i CRPC patienter behandlet med sunitinib /docetaxel versus docetaxel monoterapi.

Patienter og metoder

Protokollen for dette forsøg og støtte CONSORT tjekliste er tilgængelige som underbyggende oplysninger; se Tjekliste S1 og protokol S1.

Study Design og Patient Selection

Det primære formål med denne sonderende, 01:01 randomiseret, kontrolleret, åbent studie var at bestemme, om den forventede CEC /CEP pigge, fremkaldt af docetaxel, er undertrykt af sunitinib i tidligere havde modtaget kemoterapi CRPC patienter behandlet med enten docetaxel /sunitinib eller docetaxel monoterapi. Derudover har vi til formål at sammenligne CEP /CEC kinetikken mellem de to behandlingsgrupper. Sekundære mål var (i) at vurdere, om docetaxel /sunitinib øger svarprocent og længden af ​​helligdage behandling i forhold til docetaxel monoterapi, og (ii) om behandling af sunitinib /docetaxel er sikkert og veltolereret.

udvalgte patienter lidt fra histologisk bekræftet og avanceret CRPC, skulle have en ECOG performance status på 0 til 2, og tilstrækkelig organfunktion (bilirubin ≤1, 5 × UNL (øverste normale niveau), ASAT, ALAT ≤1.5 × UNL, kreatinin ≤1.5 UNL , WBC ≥3.5 × 109 /l, ANC ≥1.5 × 109 /l, Hb ≥10 g /dl, blodplader ≥100 × 109 /l). Derudover LVEF målt ved ekkokardiografi skulle være 50%, og patienter med relevante hjertelidelser blev udelukket. Før ansættelsen, blev målet og arten af ​​retssagen forklarede patienter, som derefter skulle underskrive en informeret samtykkeerklæring.

En person ikke er en del af undersøgelsen holdet genereret randomisering listen ved hjælp af en web-baseret randomisering plan generator (blokstørrelse på fire). Patient fordeling kuverter blev skabt i henhold til randomiseringen listen, og kuverterne blev forseglet, underskrevet og dateret af denne person. Undersøgelsen sygeplejerske derefter tildelt patienter til indgreb i henhold til patientens tildeling kuverter.

Undersøgelsen, som blev gennemført mellem 2008 og 2012, bestod af to på hinanden følgende behandling dele. I del I, alle patienter fik standardbehandling terapi af docetaxel (75 mg /m2 q 21d × 4 cyklusser). Prednisolon (2 × 5 mg per dag) blev administreret begyndende fra cyklus 3. Ud over standard terapi, patienter randomiseret i arm A modtog sunitinib (37,5 mg /d) på en tre-ugers gentagelse tidsplan, med to ugers daglig behandling fulgt af en uges hvile starter dagen efter hver administration af docetaxel. Siden begyndelsen af ​​ændringer i CEC /forventedes CEP tæller, blev docetaxel behandling stoppet efter fire cyklusser. Patienterne blev vurderet af PSA og radiologisk undersøgelse for respons og sunitinib vedligeholdelsesbehandling, som bør holde CEP numre lav, blev indledt for respondenter, som beskrevet nedenfor.

patienter, der responderede på behandlingen i del I, som defineret ved en PSA fald på ≥50% i forhold til baseline, uden nogen objektiv progression ifølge modRECIST, var berettiget til del II forsøget [15]. Alle andre patienter (dvs. ikke responderede) blev ekskluderet fra undersøgelsen. Respondere til docetaxel + sunitinib i del I blev randomiseret til enten at sunitinib vedligeholdelsesbehandling (50 mg /d i 14 dage efterfulgt af en uges pause), eller ingen behandling. Respondere til docetaxel modtaget behandling i løbet af deres kemoterapi helligdage. Behandling med eller uden sunitinib blev forlænget, så længe patienterne havde ingen PSA-progression (målt hver tredje uge) over grundlinjen. Når en patient skred med en PSA over baseline-værdi, eller en ny radiologisk læsion udviklet, blev hans deltagelse til ophør. The End of Study (EOS) besøg blev udført for at følge op på de utilsigtede hændelser, som var stadig i gang i løbet af det sidste besøg. EOS besøg blev gennemført tidligst 30 dage efter den sidste administration af forsøgsmedicinen. Ingen yderligere opfølgende besøg var planlagt

Forsøget blev registreret på EU retssagen register klinisk (EudraCT 2007-003705-27;. Https://www.clinicaltrialsregister.eu/ctr-search/search?query = 2007-003705-27), og ingen patient blev indskrevet i undersøgelsen før registreringen. Derudover blev undersøgelsen registreret på Klinisk Trials.gov (NCT00795171; https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT00795171?term=wacheck rang = 4). Forfatterne bekræfte, at alle igangværende og relaterede forsøg for dette stof /indgreb er registreret.

Etik Statement

Undersøgelsen blev udført i overensstemmelse med Helsinki-deklarationen og retningslinjer for god klinisk praksis, og var godkendt af den lokale etiske komité (den etiske komité i det medicinske universitet i Wien).

CEP /CEC Vurdering og statistiske overvejelser

Kvantificering af CEC /CEP fra perifert blod (5 ml) ved FACS-analyse blev udført i overensstemmelse med en protokol tilvejebragt af Bertolini /Kerbel gruppe i vores institut [8], [16]. Dette bestod af følgende: blod blev opsamlet i EDTA-rør og det første rør blev kasseret for at forhindre falske positive CEC tal skyldes fartøj skade. Efterfølgende FcR blokerende reagens (Milteny Biotec, Tyskland) blev tilsat. Celler blev derefter inkuberet og mærket med de følgende antistoffer: Til CEP tælling blev celler farvet med CD31 FITC, CD146PE (Merck Milipore, USA, kat nummer MAB16985H.), CD45PerCP (Becton Dickinson (Becton Dickinson, USA, kat nummer 555.445.) , USA, kat. nummer 345.809) og CD133APC (Milteny Biotec, Tyskland, kat. nummer 130-090-826). For levedygtig /dead CEC kvantificering blev celler mærket med CD31FITC (Becton Dickinson, USA), CD146PE (Merck Milipore, USA), CD45APC (Becton Dickinson, USA, kat. Nummer 340.910) og 7-AAD (Becton Dickinson, USA, kat . nummer 559.925 (kortvarigt tilsat før måling) For isotypekontroller blev følgende antistoffer anvendes:.. Mouse IgGk FITC (. Becton Dickinson, USA, kat nummer 5.519.954), muse lgG1 APC (Milteny Biotec, Tyskland, kat nummer 130-092 -214) og muse IgG FITC (Chemicon, USA, CBL600P). Efter inkubation, vask og lyse af røde blodlegemer, CEP /CEC kvantificering blev udført straks under anvendelse af en FACSCalibur (Becton Dickinson, USA). mindst 600.000 celler blev erhvervet, og celler farvet for CD133 +;. CD146 + /CD45- og CD31 + blev betragtet som landemiljøprofiler levedygtige /døde CØE var 7AAD positiv /negativ og CD45-;. CD146 +, CD31 + og CD133- Når du har tegnet de respektive porte, en afskåret for CD31 positivitet blev sat ved 4 * 10∧1 og 10∧1 for 7AAD,. CD146 og CD133 indstillinger blev gemt og brugt til hver enkelt måling i studiet for at sikre sammenlignelighed. Absolut CEP eller CEC tal blev beregnet som en procentdel af positive celler på de samlede hændelser * hvide blodlegemer.

Intra-variabilitet blev målt ved at bestemme CEP /CEC tællinger af raske personer for at validere analysen. CEC /CEP kinetik blev bestemt for hver cyklus ved baseline, dag 3 (dvs. ~24 h efter sunitinib administration), dag 8 og dag 15 (dvs. slutningen af ​​sunitinib administration), umiddelbart efter blodprøvetagning på samme dag. Sikkerhed og tolerabilitet blev vurderet ved fysiske undersøgelser og laboratorieundersøgelser af patienter i hvert af deres besøg, og toksicitet blev gradueret i henhold til de fælles terminologi Kriterier for bivirkninger.

I første omgang blev 60 patienter planlagt til at blive inkluderet i denne forsøg. Men på grund af lave rekrutteringshastighed og nye behandlingsmuligheder bliver tilgængelige i løbet af forsøget, blev undersøgelsen afsluttet efter rekruttere 27 patienter baseret på følgende overvejelser:

Ifølge undersøgelsen af ​​Tannock et al. [3], forventede vi omkring 50% af patienterne til at reagere på docetaxel enkelt terapi. Da effekten af ​​sunitinib /docetaxel på CEC /CEP tællinger var ukendt, og tidligere undersøgelser rapporteret, at en væsentlig forskel i CEP /CEC kinetik kunne påvises i en lille stikprøve, denne prøve størrelse ansås for tilstrækkeligt til PD-analyse af vores primære mål. Ingen yderligere fordel for at opfylde vores primære mål var forventet ved at rekruttere yderligere patienter. Desuden var der ingen yderligere statistisk begrundelse for den pågældende stikprøvestørrelse.

Ændringerne i CEP, CEC total og CEC levedygtig, inden for to behandlingsgrupper, gruppe A og gruppe B, blev målt over tid. På grund af en lang række opadgående og nedadgående outliers af de målte værdier, blev en logaritmisk transformation af data anvendes til at opretholde de nødvendige betingelser for meningsfulde hypotesetests. De logaritmiske data blev anvendt til efterfølgende analyser.

For at analysere forskellen i forbedring mellem de to grupper blev lineære mixed modeller beregnet. I den lineære regression, de uafhængige variable var tiden inden for en cyklus, og samspillet mellem tid og gruppen. At overveje korrelationen af ​​observationer fra den samme patient, blev en tilfældig opsnappe sigt indgår i modellen. Beregningerne blev udført ved hjælp af lme4 pakke i R 3.0.2. De regressioner blev gennemført for CEP, CEC total og CEC levedygtig, hver for sig. Betydningen niveau for alle tests er 5%.

For at teste lige efterladte funktioner mellem grupper, log-rank test blev anvendt. Disse statistiske beregninger blev udført ved hjælp af SPSS 18,0 til Windows (SPSS Inc., Chicago, IL, USA).

Resultater

Patient Kendetegn

I alt 27 patienter med CRPC blev indrulleret i studiet mellem 2008 og 2012 (tabel 1). 13 patienter blev randomiseret til docetaxel monoterapi gruppe (arm B) og 14 patienter til docetaxel /sunitinib gruppe (arm A) (figur 1). To patienter i docetaxel-armen og tre patienter i kombination arm ophørte behandling forud for cyklus 4 på grund af klinisk forværring, sygdomsprogression eller grad 3/4 toksicitet. Den mediane alder var 67 år (54-78) år i arm B, og 69 (58-77) år i arm A. Median PSA var 53 ng /dl (13,7 til 636,6) i armen B og 30 ng /dl (12,5 -3350) i armen A. 53% af patienterne i armen B havde en Gleason score højere end 7 sammenlignet med 50% i arm A.

CEC og CEP Kinetics

En lineær mixed-modellen blev anvendt til at teste for signifikans i CEP og CEC kinetik. For landemiljøprofiler og central- og østeuropæiske lande (i alt og levedygtige), en meget betydelig stigning over tid inden for hver cyklus blev påvist (koefficienter 0.29233; 0.22092 og 0.26089 for landemiljøprofiler, central- og østeuropæiske lande i alt og CØE levedygtige henholdsvis; p 0,001). Alle tre celletyper nemlig landemiljøprofiler og levedygtige de central- og østeuropæiske og totale de central- og østeuropæiske blev målt ved de angivne tidspunkter (fig. 2b-d). Tilsætning af sunitinib over tid i hver cyklus resulterede ikke afstumpning eller graduering i CEP eller CEC kinetik.

Et repræsentativt eksempel på flowcytometri dot plots valgt til CEP målinger. Det venstre panel viser CD146-positive endotelceller hvoraf et lille antal var CD133 positive bogføring af CEP’er som angivet ved den røde pil (højre panel) (a). Regressionsanalyse anvendelse af en lineær blandet model af total CEC (b), levedygtig CEC (c) og CEP (d) tæller på en logaritmisk skala af docetaxel (blå) og docetaxel /sunitinib behandlede patienter. Hver prik repræsenterer en enkelt patient. X-aksen repræsenterer cyklusser og tidspunkter; Y-aksen repræsenterer CEP og CEC tal på en logaritmisk skala.

I den reservekravsperiode del II af undersøgelsen, tæller median CEP faldet lidt indtil tidspunktet for progression (fig. S1) i docetaxel monoterapi gruppen og sunitinib vedligeholdelsesgruppen (0,8 fold median fald). Tilbagetrækning af sunitinib resulterede i en ikke-signifikant (N.S.) 1,9 gange forøgelse af CEP numre. Lignende resultater blev observeret for CEC kinetik (data ikke vist). skal bemærkes Et punkt er, at vi observerede en høj inter-patient variation både i alt og levedygtige CEC numre, og i CEP tæller.

PSA respons

PSA respons er afbildet som et vandfald plot i Figur 3 for hver behandling arm. 5 (38%) patienter i armen B og 12 (85%) patienter i armen A havde en reduktion på mindst 30% PSA. En PSA fald på 50% blev anset som en respons på behandlingen. I docetaxel monoterapi arm (arm B) 4 (30%) patienter reagerede på behandlingen, mens 9 (64%) patienter viste en PSA respons i kombinationen gruppen (N.S.). 3 patienter (23%) i armen B og 8 (57%) patienter i kombination arm (arm A) trådte vedligeholdelsesbehandling ifølge undersøgelsen protokollen (tabel 2). Den gennemsnitlige tid for vedligeholdelsesbehandling indtil PSA progression (tabel 3) var 2,6 (1.4-2.9) måneder i docetaxel monoterapi gruppen (ingen terapi), 2,6 (1.4-4.1) måneder i sunitinib vedligeholdelsesgruppen og 2.1 (1.8-3.5) måneder i sunitinib afbrydelse gruppen (ingen terapi).

Waterfall plot af PSA respons på docetaxel (blå) og sunitinib /docetaxel (gul) i CRPC patienter.

knoglescanning Målinger og radiologiske svar

Efter 12 ugers behandling radiologisk respons, via computertomografi (CT), blev vurderet. Derudover knoglescanninger blev også udført (tabel 3). 81% af patienterne var evaluerbare for knoglescanning reevaluering efter 4 cyklusser af behandlingen. Et fald af sporstofoptagelse eller ingen ændring i knoglelæsioner blev observeret hos 8 (57%) patienter i armen A og i 6 (47%) i armen B. 4 (30%) patienter viste en øget sporstofoptagelse i arm B og én patient (7%) i armen A. Kun 5 (14%) patienter i undersøgelsen led af nodal eller leversygdom som påvist ved CT-scanninger. Et partielt respons blev observeret i docetaxel monoterapi gruppen, og blev observeret en stabil sygdom i kombination gruppen. 3 patienter var ikke kan vurderes for CT-scanning.

progressionsfri overlevelse

25 patienter blev evalueret for PFS i slutningen af ​​forsøget (fig. 4). To patienter i arm A ønskede at afbryde og blev tabt for opfølgning. De median PFS i docetaxel monoterapi gruppen var 3,1 måneder (2,6-3,6 måneder, 95% CI), mens den mediane PFS i kombinationen arm var næsten dobbelt (6,2 måneder, 4,9-7,4 95% CI). Men på grund af det lille antal patienter denne forskel ikke nåede statistisk signifikans (p = 0,062).

Kaplan-Meier kurver skildrer progressionsfri overlevelse mellem sunitinib /docetaxel arm (orange) og docetaxel monoterapi arm (blå) . Sorte søjler repræsenterer censurerede patienter.

Toksicitet

Generelt kombinationen af ​​docetaxel og sunitinib blev rimeligt veltolereret (tabel S1). De mest almindelige bivirkninger var svær myelosuppression, som var sammenlignelig mellem grupperne. Alle patienter kom hurtigt fra neutropeni og kunne fortsætte med behandlingen. Toksicitet i arm A var overskuelige og bestod af næseblod, forhøjet blodtryk, kvalme, diarré og to tilfælde af forhøjede leverenzymer (alle Grade 1 bivirkninger). En patient i arm A erfarne episoder af tilbagevendende ventrikulære. De mest alvorlige grad 3 bivirkninger i kombination armen var et tilfælde af akut nyresvigt og to tilfælde af myokardieinfarkt.

Diskussion

På trods af nylige fremskridt i behandlingen af ​​CRPC, er der stadig et udækket behov for nye behandlingsstrategier og rationelle kombinationsbehandlinger. I CRPC patienter, har anti-angiogene strategier ikke resulteret i klinisk fordel hidtil, og flere anti-angiogene forsøg undladt at opfylde deres kliniske effektmål. Sunitinib kombination strategier viste ikke overlegenhed over standard terapi, herunder tyktarmskræft, brystkræft og CRPC i form af overlevelse fordel [17] – [19]. Mens dosering spørgsmål kan have bidraget til disse skuffende resultater, er det indlysende, at forståelsen af ​​angiogenese resistensmekanismer og den optimale ansættelse af receptor tyrosinkinaseinhibitorer stadig er begrænset. Desuden en nylig vellykket fase I /II sunitinib forsøg etableret den anbefalede fase II dosis af sunitinib i kombination med docetaxel. Baseret på disse overvejelser, vi valgte denne biomarkør tilgang til at undersøge CEP og CEC kinetik i CRPC patienter behandlet med sunitinib /docetaxel, for at få et bedre indblik i mekanismerne i CRPC respons på antiangiogene terapier. [19]. Vores undersøgelse viste ingen signifikant modulation af totale og levedygtige central- og østeuropæiske lande og landemiljøprofiler efter sunitinib /docetaxel, selv om betydelige stigninger i deres tællinger blev observeret over tid inden for hver cyklus. Først må vi tage fat på de metodiske overvejelser ved fortolkningen vores resultater. Selvom CEP og CEC tællinger fundet i denne undersøgelse er i overensstemmelse med andre publikationer om kræftpatienter, er der ingen generelt accepteret definition af CEP og CEC overflademarkører [8], [20], [21]. Manglen på en international konsensus for CEP og CEC tælling er en stor udfordring for yderligere udvikling af disse biomarkører. Faktisk er der ingen standard nomenklatur eller klassificering for landemiljøprofiler eller centraleuropæiske lande. Rapporter, der kendetegner en stor del af central- og østeuropæiske lande som umodne blodplader, myeloide celler eller monocytter føje til kompleksiteten af ​​dette spørgsmål, som kan have bidraget til de modstridende resultater, rapporteret både i prækliniske og kliniske CEP /CEC biomarkør forsøg til dato [22 ] – [24].

Desuden observerede vi en betydelig variabilitet mellem patienter i form af CEP og CEC tæller. Selv om denne konstatering er i overensstemmelse med den nuværende litteratur, blev raske forsøgspersoner målt på forskellige dage for at teste inden patient variabilitet og yderligere at validere metoden [25] – [27]. Disse målinger gav tilsvarende og reproducerbare CEC og CEP numre på forskellige dage (data ikke vist). Mens utilstrækkelig effekt og lavt antal patient kan være en årsag til den manglende graduering i CEC /CEP kinetik ved sunitinib i dette forsøg, har vi ikke rekruttere yderligere patienter, da nye behandlingsmuligheder blev tilgængelige for CRPC patienter i løbet af forsøget. I betragtning af de begrænsninger, nævnt ovenfor mener vi, at både den klare tumor biologi CRPC og manglen på veldefinerede CEP /CEC overflademarkører tegnede sig for resultaterne af denne undersøgelse af flere grunde: Tidlige prækliniske rapporter viste, at LMP og CØE spiller en vigtig rolle i prostatakræft tumor biologi og at cytotoksisk eller målrettet terapi modulerer CEP og CEC tal

in vitro

in vivo

[28] – [31]. I kliniske omgivelser, men de er til rådighed på CEP /CEC niveauer i prostatacancerpatienter data er meget begrænsede. Desuden kliniske studier, der evaluerer landemiljøprofiler eller CØE i prostata cancer patienter viser modstridende resultater. Nogle undersøgelser viste en sammenhæng mellem CEP /CEC niveauer og samlet overlevelse i CRPC patienter behandlet med docetaxel, eller med behandling respons på knogle rettet behandlinger [32] – [34]. Disse undersøgelser anvendes enten multi-parametrisk FACS-analyse eller Cell Tracks analysesystemer for CEP /CEC evaluering, og enten indarbejdet CD146, Syto6, CD133, CD105 og CD31-antistoffer, eller ikke give eventuelle metodologiske detaljer. I modsætning hertil flere (delvis stærkt drevet) kliniske studier undersøger både anti-angiogenese lægemidler og cytotoksiske kemoterapi i prostata cancer patienter viste ingen sammenhæng mellem CEC eller CEP niveauer med terapi reaktion på andre kliniske endpoints [22], [35], [36] . Disse undersøgelser ansat CD146, CD308, CD45 og CD34 antistoffer til CEC /CEP kvantificering målt igen ved multi-parametrisk FACS-analyse eller Cell Tracks analysesystemer. En af disse undersøgelser ikke rapportere detaljeret metode til CEC analyse [35].

Generelt er det blevet påvist, at CEC og CEP kinetik afhænger af tumortype, det terapeutiske regime og den specifikke metode til CEC /CEP kvantificering. En stigning, et fald, og selv ingen ændring i de central- og østeuropæiske og CEP kinetik blev påvist efter antiangiogene eller cytotoksiske behandlingsstrategier [8], [18], [37].

Udover de metodiske overvejelser diskuteres, årsagen til en så forskelligartet adfærd CEP /CEC mobilisering, både i prostatakræft og ved andre tumorer og kliniske indstillinger, er fortsat uklart. I betragtning af de negative anti-angiogenese fase III forsøg, herunder sunitinib monoterapi gennemført i CRPC patienter, kan vores resultater i det mindste delvist afspejler en tumorundvigelse mekanisme til en antiangiogen behandling strategi CRPC [13]. Anti-angiogenese lægemidler kan fremkalde CEP mobilisering fra knoglemarven og fremme adaptive mekanismer til at overvinde hypoxiske udfordringer [9]. Endelig tumor uafhængige mekanismer skal tages i betragtning. Selv om der ikke data vedrørende CEC /eksisterer CEP niveauer, tidligere beskrevne prækliniske modeller viser, at sunitinib behandling inducerer tumor uafhængige ændringer i flere cirkulerende pro-angiogene faktorer [38].

En 50% PSA tilbagegang på terapi er meget udbredt i mange kliniske forsøg som et surrogat for svar, mens et fald ≥30% blev demonstreret som en god indikator for kliniske endpoints såsom smerte og samlet overlevelse [39]. Selvom disharmoniske PSA og kliniske respons blev observeret med tyrosinkinasehæmmere i patienter med prostatacancer, et sådant fænomen synes at spille en mindre rolle for sunitinib terapi (men kan ikke udelukkes helt) [12], [19]. Vi observerede en svarprocent på 64% i sunitinib kombination og 57% af patienterne viste en forbedring eller stabilisering af knoglelæsioner. Konsekvent, PFS selvom statistisk ikke signifikant, blev forlænget i kombinationen arm. Den gennemsnitlige tid for vedligeholdelsesbehandling indtil PSA progression var sammenlignelige i de ingen behandlingsrelaterede og sunitinib vedligeholdelse grupper. I betragtning af de begrænsninger, som denne sonderende biomarkør undersøgelse ikke var konstrueret eller drevet til at bevise overlegenhed sunitinib /docetaxel løbet docetaxel monoterapi, må vi konstatere, at disse data er i overensstemmelse med tidligere rapporter. Disse omfatter undersøgelser, der viser sunitinib /docetaxel er gavnligt, og at sunitinib monoterapi måske ikke være tilstrækkelig til at opnå langsigtet sygdomsbekæmpelse eller overlevelse fordel i CRPC patienter, der fik docetaxel [13], [19]. Selv om der er rapporter om, at docetaxel /sunitinib regime forårsager en højere frekvens af bivirkninger (alle grader), opstod ingen nye sikkerhedsspørgsmål i vores forsøg [17]. Den observerede toksicitet profil docetaxel i kombination med sunitinib var den samme som rapporteret i CRPC patienter [19]. To patienter oplevede myokardieinfarkt og måtte udgå af undersøgelsen. Generelt blev kombinationen regime rimeligt veltolereret.

Som konklusion blev CEP /CEC tal steget inden for hver kemoterapi cyklus tidligere tidligere havde modtaget kemoterapi CRPC patienter behandlet med docetaxel /sunitinib eller docetaxel alene. Men der er ingen signifikant forskel i CEP og CEC kinetik mellem docetaxel monoterapi og i kombination med sunitinib. Disse resultater afspejler den udfordring, vi står over for, når der anvendes antiangiogene behandlingsstrategier i CRPC. Selvom de underliggende molekylære mekanismer er fortsat uklare, CRPC patienter reagerede på docetaxel /sunitinib kombination i form af PSA respons og en tendens til forbedret PFS.

Støtte oplysninger

figur S1.

Box plots af median x-gange ændring af CEP tæller i slutningen af ​​del II, i forhold til slutningen af ​​del I.

doi: 10,1371 /journal.pone.0095310.s001

(TIF)

tabel S1. .

Bivirkninger

doi: 10,1371 /journal.pone.0095310.s002

(DOCX)

Tjekliste S1. .

CONSORT 2010 tjekliste

doi: 10,1371 /journal.pone.0095310.s003

(DOC)

protokol S1.

Study protokol som er godkendt af den lokale etiske komité

doi:. 10,1371 /journal.pone.0095310.s004

(PDF)